CC BY
20
УДК 619:616.72-002-022.6-085-371:636.5.053
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ОРГАНАХ
ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ЦЫПЛЯТ ПРИ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ РЕОВИРУСНОГО ТЕНОСИНОВИТА БЕЗ И С ПРИМЕНЕНИЕМ ИММУНОСТИМУЛЯТОРА
Н. О. ЛАЗОВСКАЯ УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Витебская обл., Республика Беларусь, 210026
(Поступила в печать 02.01.2014)
Введение. В настоящее время производство мяса птицы сосредоточено на крупных специализированных предприятиях, мощности которых позволяют осуществить единовременную посадку миллиона и более голов. Это в свою очередь создает определенные трудности в соблюдении принципа «все пусто - все занято», приводит к сокращению санитарных разрывов, увеличению плотности посадки цыплят. На фоне нарушений в кормлении и содержании, несоблюдения ветеринарно-санитарных правил, перенасыщения лечебно-профилактических схем антибактериальными препаратами и неизбежности технологических стрессов происходит угнетение иммунной системы птицы и снижение резистентности ее организма.
Указанные выше факторы приводят к активизации возбудителей инфекционных болезней различной этиологии. К таким болезням относят реовирусную инфекцию птиц, характеризующуюся хромотой, связанной с воспалением сухожилий и суставов конечностей, высокой ранней смертностью, плохим ростом, снижением яйценоскости и выводимости цыплят.
Реовирусы принадлежат к роду ОгЖогеоугт', семейство Кеоутйае [6, 14]. Они широко распространены во всем мире. Реовирусы были выделены от цыплят при различных патологических процессах, которые проявлялись в виде артритов, перикардитов, миокардитов, «синдрома плохого всасывания», «синдрома плохого оперения», иммуно-супрессии, некроза головки бедренной кости и т.д. [6, 10, 11]. Многие из этих симптомов описаны и при болезнях, связанных с возбудителями других вирусных и бактериальных инфекций. Исключением является вирусный артрит или теносиновит, при котором этиологическое и патогенетическое значение вируса доказано полностью [1].
В литературе имеются данные о циркуляции вируса среди молодняка и взрослых кур, полученных как от иммунных, так и от неиммунных родителей в Российской Федерации, а также в Украине [2, 4, 7].
Реовирусы наиболее контагиозны для цыплят в раннем возрасте [3, 11]. Попадая в организм цыпленка, вирус в первую очередь поражает эпителиальные клетки тонкого кишечника и бурсы Фабрициуса, а затем быстро распространяется в другие органы за 24-48 ч. [12].
Основополагающим подходом к предотвращению реовирусных инфекций является специфическая профилактика родительского поголовья, которая защищает молодняк благодаря переносу материнских антител [6, 9, 10], однако сообщения об эффективности вакцинации неоднозначны, поскольку неизвестно, вирус какого серотипа играет наибольшую роль в возникновении болезни и каково значение гетеро-логичного иммунитета в защите, также на снижение результативности вакцинации оказывают влияние множество полевых вариантов вируса [3, 8]. Существуют данные о прорыве иммунитета у вакцинированного против реовирусной инфекции родительского стада, а также наличие антител к вирусу у молодняка, полученного как от иммунного [13], так и от неиммунного поголовья [4].
В соответствии с Государственной программой развития производства ветеринарных препаратов на 2010-2015 годы планируется завершить к 2015 году создание производства отечественных биологических, фармацевтических и диагностических ветеринарных препаратов и обеспечить в них потребности птицеводства до 80 процентов [5]. В связи с этим сотрудниками РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского» (г. Минск) была разработана сухая живая вакцина против реовирусного теносиновита цыплят.
Цель работы - изучить морфологические изменения в органах иммунитета цыплят, иммунизированных отечественной сухой живой вакциной против реовирусного теносиновита.
Материал и методика исследований. Исследования были проведены на 70 цыплятах 1-45-дневного возраста, которые были подобраны по принципу аналогов. Птица первой группы служила контролем. Цыплят второй группы вакцинировали в возрасте 7 дней отечественной сухой живой вакциной против реовирусного теносиновита без применения натрия тиосульфата. Птицу третьей группы иммунизировали в 7 дней с применением натрия тиосульфата, а поголовье четвертой группы вакцинировали в суточном возрасте. Биопрепарат вводили внутримышечно в верхнюю треть внутренней поверхности бедра. В качестве растворителя для вакцины во второй и четвертой группе при-
меняли натрия хлорид, а в третьей - дистиллированную воду с растворенной в ней новокаином и натрия тиосульфатом (на 100 мл воды добавляли 0,25 г новокаина и 7,0 г натрия тиосульфата). На 7-й, 14-й и 21-й дни после иммунизации проводили убой по 5 цыплят из каждой группы методом декапитации. Кусочки органов (бурса Фабрициуса, селезенка, слепокишечные миндалины, дивертикул Меккеля, железа Гардера) фиксировали в жидкости Карнуа, затем подвергали их уплотнению путем заливки в парафин, после чего готовили гистосрезы с дальнейшей окраской по Браше. В гистопрепаратах подсчитывали количество зрелых форм митозов, лимфо- и плазмобластов, незрелых и зрелых плазмоцитов, определяли общее количество клеточных элементов плазмоцитарного ряда. Цифровой материал обрабатывали статистически с помощью компьютерной программы Microsoft Excel 2003.
Результаты исследований и их обсуждение. При изучении плаз-моцитарной реакции в бурсе Фабрициуса на 7-й день после вакцинации происходило достоверное увеличение общего числа плазматических клеток у вакцинированной птицы по сравнению с интактной. Рост достигался в основном за счет незрелых форм клеток (плазмобластов и проплазмоцитов). Так, количество плазмобластов у цыплят, вакцинированных в 7 дней без иммуностимулятора, было в 1,82 (Р<0,001) раза выше, чем в контроле, а у птиц, иммунизированных в этом же возрасте, но с иммуностимулятором, - в 1,99 (Р<0,001) раза соответственно. Данный показатель у цыплят, вакцинированных в 7 дней с иммуностимулятором, был недостоверно выше, чем у птицы, иммунизированной без иммуностимулятора. При подсчете плазмоцитов наблюдалась аналогичная тенденция. Так, их количество у вакцинированных цыплят было выше, чем у контрольных в 1,42 (Р<0,05) и 1,39 (Р<0,05) раза, соответственно.
Количество митозов в данный период исследования было незначительно выше у иммунного молодняка по сравнению с контрольной группой.
На 14-й день после вакцинации, как и в предыдущий срок исследования, в бурсе Фабрициуса происходило увеличение общего количества плазматических клеток. Однако этот рост обеспечивался в основном за счет проплазмоцитов и плазмоцитов. Так, число проплазмоцитов у цыплят, вакцинированных в суточном возрасте, было в 2,30 (Р<0,001) раза больше, чем у невакцинированной птицы, в 2,22 (Р<0,001) раза выше, чем у птиц, иммунизированных в 7 дней без иммуностимулятора, и в 2,08 (Р<0,001) раза больше, чем у цыплят, вакцинированных в 7 дней с иммуностимулятором.
Количество митозов и плазмобластов у вакцинированного молодняка было также недостоверно выше, чем у интактного.
При изучении плазмоцитарной реакции на 21-й день после иммунизации в бурсе Фабрициуса нами установлено увеличение общего числа плазматических клеток у вакцинированной птицы по сравнению с интактной (контроль - 49,68±1,33; вакцинированные в 7 дней без иммуностимулятора - 84,90±1,87, Р<0,001; с иммуностимулятором -80,95±1,41, Р<0,001 и в суточном возрасте - 77,72±1,01, Р<0,001) и постепенное уменьшение их количества по сравнению с предыдущим сроком исследования. Этот рост происходил в основном за счет про-плазмоцитов и плазмоцитов. Число плазмобластов и митозов у вакцинированного поголовья уменьшалось по сравнению с предыдущим сроком исследования и было недостоверно выше, чем в контроле.
В селезенке цыплят на 7-й день после вакцинации происходило достоверное увеличение общего числа плазматических клеток по сравнению с интактной птицей. Рост наблюдался в основном за счет незрелых форм клеток (проплазмоциты, лимфобласты, плазмобласты). При этом общее число митозов и плазмоцитов у вакцинированного поголовья значительно не отличалось от контроля.
Количество лимфобластов в селезенке цыплят, иммунизированных в 7 дней без и с иммуностимулятором, было достоверно выше, чем у инактных, на 38,60 (Р<0,01) и 29,99 (Р<0,05) % соответственно.
Число проплазмоцитов было выше, чем в контроле у птицы, вакцинированной без иммуностимулятора, в 2,03 (Р<0,001) раза, с иммуностимулятором - в 1,94 (Р<0,001) раза.
Количество плазмобластов также было выше, чем в контроле у цыплят, иммунизированных без иммуностимулятора, на 43,61(Р<0,05) %, с иммуностимулятором - на 57,77 (Р<0,01) %.
На 14-й день после вакцинации в селезенке сохранились те же тенденции, что и в предыдущий срок исследования, но произошло постепенное увеличение количества зрелых плазматических клеток.
Так, у цыплят, вакцинированных в суточном и 7-дневном возрасте без и с применением иммуностимулятора, наблюдалось достоверное увеличение по сравнении с контролем плазмобластов на 42,28 (Р<0,05), 52,34 (Р<0,01) и 56,57 (Р<0,01) %, проплазмоцитов - в 1,60 (р<0,01), 1,79 (Р<0,001) и 1,76 (Р<0,001) раза, плазмоцитов - в 1,98 (р<0,001), 2,17 (Р<0,001) и 2,11 (Р<0,001) раза соответственно.
На 21-й день после вакцинации в селезенке цыплят происходило дальнейшее увеличение количества зрелых плазматических клеток по сравнению с предыдущим сроком исследования и уменьшение содержания незрелых клеток плазмоцитарного ряда.
На данном этапе исследования наблюдалось также достоверно высокое содержание плазмобластов, проплазмоцитов и плазмоцитов у иммунного молодняка по сравнению с интактным.
В слепокишечных миндалинах на 7-й день после вакцинации статистически достоверно возрастало общее количество плазматических клеток, главным образом за счет незрелых форм.
Так, у птицы, вакцинированной в возрасте 7 дней без и с иммуностимулятором увеличивалось по сравнению с контролем число лим-фобластов - в 2,24 (Р<0,001) раза и 2,27 (Р<0,001) раза, плазмобластов -в 1,49 (Р<0,01) и 1,61 (Р<0,01) раза и проплазмоцитов - в 1,71 (Р<0,05) и 1,70 (Р<0,05) раза соответственно.
Количество плазмоцитов у вакцинированного молодняка также незначительно превышало данный показатель у цыплят контрольной группы.
На 14-й день после иммунизации в слепокишечных миндалинах наблюдалось увеличение общего числа плазматических клеток по сравнению с предыдущим сроком исследования.
Так, у цыплят, вакцинированных в суточном возрасте и в семь дней без и с применением иммуностимулятора, возрастало по сравнению с интактным молодняком количество лимфобластов - в 1,59 (Р<0,01), 1,72 (Р<0,001) и 1,64 (Р<0,001) раза, плазмобластов - в 1,54 (Р<0,001), 1,75 (Р<0,001) и 1,84 (Р<0,001) раза, проплазмоцитов - в 2,70 (Р<0,001), 2,88 (Р<0,001) и 2,86 (Р<0,001) раза и плазмоцитов - в 2,23 (р<0,001), 2,39 (Р<0,001) и 2,45 (Р<0,001) раза соответственно.
На 21 день после вакцинации в слепокишечных миндалинах по-прежнему происходило увеличение количества плазмоцитов и проплазмоцитов по отношению к контролю и предыдущему сроку исследования, а число лимфобластов начало снижаться. Количество митозов во все сроки исследования было недостоверно выше у вакцинированного поголовья по сравнению с интактным.
На 7-й день после вакцинации в дивертикуле Меккеля отмечалась активизация плазмоцитарной реакции, проявляющаяся в увеличении общего числа плазматических клеток по сравнению с контролем.
На 14-й день после вакцинации плазмоцитарная реакция в дивертикуле Меккеля еще больше усиливалась. Наблюдалось достоверное увеличение общего числа плазматических клеток у иммунизированного поголовья по сравнению с интактным. Так, у цыплят, вакцинированных в суточном возрасте и в семь дней без и с применением иммуностимулятора, наблюдалось увеличение по сравнению с контролем количества лимфобластов - на 24,91 (Р<0,01), 42,55 (Р<0,01) и 36,99 % (Р<0,01), плазмобластов - в 2,27 (Р<0,001), 2,45 (Р<0,001) и в 2,41
(Р<0,001) раза, проплазмоцитов - в 1,79 (Р<0,05), 1,97 (Р<0,01) и в 2,09 (Р<0,01) раза и плазмоцитов - в 1,92 (Р<0,01), 2,14 (Р<0,01) и в 2,29 (Р<0,01) раза соответственно.
На 21-й день после иммунизации в дивертикуле Меккеля сохранились те же тенденции, связанные с повышением общего числа плазматических клеток, у вакцинированных цыплят по сравнению с контролем. Увеличение их содержания происходило в основном за счет про-плазмоцитов и плазмоцитов.
Плазмоцитарная реакция в железе Гардера на 7-й день после вакцинации характеризовалась увеличением общего числа плазмоцитов по сравнению с контролем. Рост достигался в основном за счет плаз-мобластов и плазмоцитов. Так, количество плазмоцитов у цыплят, вакцинированных без и с применением иммуностимулятора, возрастало по сравнению с интактными цыплятами в 3,23 (Р<0,001) и 3,34 (Р<0,001) раза соответственно.
На 14-й день после вакцинации в железе Гардера плазмоцитарная реакция достигла своего максимума. Так, у молодняка, вакцинированного в суточном и семидневном возрасте без и с применением иммуностимулятора, увеличивалось по сравнению с контролем количество проплазмоцитов - в 1,51 (Р<0,01), 1,63 (Р<0,01) и 1,68 (Р<0,01) раза и плазмоцитов - в 3,07 (Р<0,001), 3,25 (Р<0,001) и 3,34 (Р<0,001) раза соответственно.
На 21-й день после вакцинации в железе Гардера наблюдалась тенденция к постепенному снижению плазмоцитарной реакции.
Заключение. Иммунизация цыплят в суточном и 7-дневном возрасте отечественной сухой живой вакциной против реовирусного те-носиновита как с применением иммуностимулятора, так и без него вызывает активизацию плазмоцитарной реакции в бурсе Фабрициуса, селезенке, слепокишечных миндалинах и дивертикуле Меккеля.
ЛИТЕРАТУРА
1. А л и е в, А. С. Реовирусная инфекция птиц / А. С. Алиев // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2005. - № 12. - С. 28-32.
2. З и н я к о в, Н. Г. Анализ последовательности участка гена 83 изолятов реовиру-са кур, выявленных на птицефабриках Российской Федерации / Н. Г. Зиняков, Д. Б. Анд-рейчук, В. В. Дрыгин // Вопросы вирусологии. - 2010. - Т. 55. - N° 2. - С. 9-13.
2. Н а с о н о в, И. В. Диагностика и профилактика пневмовирусной и реовирусной инфекций в промышленных стадах птицы: обзор // И. В. Насонов, Н. И. Костюк // Эпизоотология. Иммунобиология. Фармакология. Санитария. - 2008. - № 3. - С. 15-21.
3. Н и к о л а е н к о, Ю. Ю. Распространение и специфическая профилактика реови-русной инфекции в Украине / Ю. Ю. Николаенко, Л. И. Наливайко, И. Ю. Безрукавая // VI Международный ветеринарный конгресс по птицеводству. - Москва, 26-29 апреля 2010. - С. 54-58.
4. Программа развития птицеводства в Республике Беларусь на 2011-2015 гг.
5. П р у г л о, В. В. Реовирусные инфекции птиц / В.В. Пругло // Ветеринария в птицеводстве. - 2006. - № 5-6. - С. 31-35.
6. Т р е ф и л о в, Б. Б. Реовирусная инфекция у птиц и меры борьбы с ней / Б. Б. Трефилов, В. В. Пругло, Д. В. Дмитриев // Ветеринария в птицеводстве. - 2008. -№ 2. - С. 16-22.
7. Differentiating infected from vacctinated animals, and among virulent prototypes of reovirus / D. Goldenberg [et al.] // Journal of Virological Methods. - 2011. - Vol. 177. - №1. - P. 80-86.
8. Effect of maternal antibodies on the pathogenesis of Avian Reovirus infections in broiler chickens using real-time reverse transcriptase polymerase chain / K. Guo [et al.] // Journal of Agricultural Science and Technology. - 2012. - Vol. 2 - № 9А. - Р. 1058-1063.
9. Field experiences with ERS type reovirus infections in diseased broilers reared under Western European field circumstances/ P. De Herdt [et al.] // Vlaams Diergeeeskundig Tijd-schrift. - 2008. - Vol. 77. - № 3. - Р. 171-176.
10. Growth perfomance of broilers in experimental Reovirus infections / P. Sudhakar [et al.] // Veterinary World. - 2012. - Vol. 5. - №11. - P. 685-698.
11. J o n e s, R. C. Avian reovirus infections / R.C. Jones // Revue Scientifique et Technique (International office of Epizootics). - 2000. - Vol. 19. - № 2. - P. 614-625.
12. O w o a d e, A. A. Seroprevalence of avian influeza virus, infectious bronchitis virus, reovirus, avian pneumovirus, infectious laryngotracheitis virus, and avian leukosis virus in Nigerian poultry / A. A. Owoade, M. F. Ducatez, C. P. Muller // Avian Diseases. - 2006. -Vol. 50. - № 2. - P. 222-227.
13. Selenium sources affect protein concentration, thioredoxin reductase activity and selected production parameters in reovirus infected broiler chickens / S. Burgos [et al.] // International Journal of Poultry Science. - 2006. - Vol. 5. - № 9. - Р. 822-829.
14. Seroprevalence survey on reovirus infection on broiler chickens in Tehran province / S. Bokaie [et al.] // Iranian Journal of Veterinary Research. - 2008. - Vol. 9. - № 2. - P. 181-183.
УДК 619:615.33(043.3)
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ В ОРГАНИЗМЕ СОБАК ПОД ВЛИЯНИЕМ ПРОБИОТИЧЕСКОГО ПРЕПАРАТА «БИЛАВЕТ-С»
В. В. МАЛАШКО УО «Гродненский государственный аграрный университет» г. Гродно, Республика Беларусь, 230005 Я. ШЕНГАУТ ЗАО «Jakovoveterinariyoscentras» г. Вильнюс, Литовская Республика, 03147 Д. В. МАЛАШКО УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия» г. Горки, Республика Беларусь, 213410
(Поступила в редакцию 05.02.2014)
Введение. Организм животного, и в первую очередь желудочно-кишечный тракт, постоянно подвергается вредным воздействиям ок-
