CC BY
40
ЛИТЕРАТУРА
1. Конопатов, Ю.В. Основы иммунитета и кормление сельскохозяйственной птицы / Ю.В. Конопатов, Е.Е. Макеева. СПб.: Петролазер, 2000. 120 с.
2. Лилли, Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли; под ред. В.В. Португалова; пер. с англ. И.Б. Краснова [и др.]. М.: Мир, 1969. 645 с.
3. Меркулов, Г. А. Курс патологогистологической техники / Г.А. Меркулов. Л.: Медицина, 1969. 432 с.
4. Микроскопическая техника: руководство / Д.С. Саркисов [и др.]; под ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Петрова. М.: Медицина, 1996. 544 с.
5. Муллакаева, Л.А. Патоморфология органов и тканей молодняка кур после применения лития карбоната как антистрессового препарата при их пересадке и транспортировке / Л.А. Муллакаева // Современные проблемы патологической анатомии, патогенеза и диагностики болезней животных : сб. науч. тр. по матер. 16-й Всерос. науч.-метод. конф., Ставрополь, 20-22 сентября 2007 г. /гл. ред. А.В. Жаров. Ставрополь: АГРУС, 2007. С. 199-200.
6. Преображенский, С.Н. Стрессоры - причина снижения продуктивности скота / С.Н. Преображенский, О.Н. Преображенский // Ветеринария. 2001. № 11. С. 53-55.
7. Селезнев, С.Б. Структурная характеристика иммунной системы птиц / С.Б. Селезнев // Актуальные вопросы морфологии и хирургии XXI века: материалы междунар. науч. конф. / ОГАУ; под ред. С.А. Соловьева [и др.]. Оренбург, 2001. Т.2: Морфология. С. 250-253.
8. Селезнев, С.Б. Морфологические параллели в топографии и структурной организации иммунной системы птиц и млекопитающих / С.Б. Селезнев // Вестник Рос. унта дружбы народов. Сер. Агрономия и животноводство. 2003. №10. С. 72-76.
УДК 636.5:611.4:612.071.1:615.37
ВЛИЯНИЕ НАТРИЯ ТИОСУЛЬФАТА НА МОРФОЛОГИЧЕСКУЮ И ЭКОНОМИЧЕСКУЮ ЭФФЕКТИВНОСТЬ АССОЦИИРОВАННОЙ ВАКЦИНАЦИИ ПТИЦ ПРОТИВ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
И.Н. ГРОМОВ
УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. При организации программы специфической профилактики инфекционных болезней на птицефабриках большие трудности создают смешанные инфекции [3, 7]. В результате приходится проводить большое количество вакцинаций. Кроме того, сроки проведения профилактических прививок часто совпадают. В связи с этим усовершенствование специфической профилактики вирусных заболеваний путем разработки методов одновременной (ассоциированной) вакцинации против нескольких инфекционных болезней является актуальной задачей и имеет важное научно-практическое значение. В последние годы при профилактике болезней птиц предпочтение отдают комбинированным вакцинам, так как применение одной дозы препарата против двух или даже нескольких инфекций значительно снижает затраты труда и потери от стрессовых ситуаций у птицы, которые обусловлены вакцинацией.
Иммуностимулирующие препараты различных групп играют важную роль в борьбе с иммунодефицитами у птиц, усиливают иммуно-генность и снижают реактогенность вакцин, способствуя тем самым развитию более напряженного поствакцинального иммунитета. Среди серосодержащих иммуностимулирующих соединений особый интерес представляет натрия тиосульфат. Установлено, что при совместном введении натрия тиосульфата и вакцинных антигенов у животных активизируются микро- и макрофагальная реакции на месте введения вакцин, ускоряются индуктивная, а затем и продуктивная стадии иммунного ответа [2, 4]. Восстановительные свойства натрия тиосульфата обуславливают, кроме того, противовоспалительное и антитоксическое действие данного препарата [7, 8]. В связи с этим введение этого иммуностимулятора совместно с вакцинами снижает их реактогенные свойства [3].
Цель работы - изучить морфологическую, иммунологическую и экономическую эффективность применения натрия тиосульфата при парентеральной иммунизации молодняка кур против инфекционного бронхита (ИБК), болезни Ньюкасла (БН), пневмовирусной инфекции и Синдрома снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76) с использованием ассоциированной вакцины «СЕВАК» (Венгрия).
Материал и методика исследований. Исследования были проведены в ОАО «Барановичская птицефабрика». В опыте использовалось 48000 голов молодняка кур 110-дневного возраста, подобранных по принципу аналогов и разделенных на 2 группы по 24000 птиц в каждой. Молодняк кур 1-й (контрольной) группы в 110-дневном возрасте иммунизировали жидкой инактивированной ассоциированной эмульсин-вакциной против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76. Вакцину применяли согласно Наставлению по ее применению, однократно внутримышечно в дозе 0,5 мл в область грудной мышцы. Птице 2-й (опытной) группы вакцину вводили совместно с натрия тиосульфатом (в 7%-ной концентрации в вакцине). Предварительно 12000 мл вакцины (24000 доз) смешивали с 3000 мл свежеприготовленного стерильного 35%-ного водного раствора натрия тиосульфата. Полученную смесь (содержащую 7% натрия тиосульфата) вводили однократно внутримышечно в дозе 0,6 мл в область грудной мышцы.
За день до вакцинации (фон), а также на 30-й день после иммунизации у 20 птиц из каждой группы отбирали кровь для выявления специфических антител к вирусам ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 (в ИФА). На 3, 7, 14, 21 и 28-й дни после вакцинации по 5 птиц из каждой группы убивали. Для морфологических исследований у птиц отбирали кусочки тимуса, бурсы Фабрициуса, селезенки, железы Гардера, дивертикула Меккеля, пищеводной и слепокишечных миндалин. Материал фиксировали в 10%-ном растворе формалина и жидкости Карнуа, а затем подвергали уплотнению путем заливки в парафин [3, 5]. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином и по Браше. В центральных органах иммунитета определяли
108
абсолютные размеры коркового и мозгового вещества долек тимуса и лимфоидных узелков бурсы Фабрициуса, а также площадь элементов стромы и паренхимы. На гистологических срезах селезенки и слепо-кишечных миндалин определяли число и размеры лимфоидных узелков. Для объективной оценки характера изменений в периферических органах иммунной системы птиц определяли содержание Т- и В-лимфоцитов, лимфо- и плазмобластов, незрелых и зрелых плазмоци-тов, подсчитывали общее количество клеточных элементов. Иммуно-морфологические исследования проводили с помощью светового микроскопа «БИОМЕД-6» (Россия). Полученные данные документированы микрофотографированием с использованием цифровой системы считывания и ввода видеоизображения «ДСМ-510», а также программного обеспечения по вводу и предобработке изображения «ScopePhoto».
Критериями, свидетельствующими об эффективности применения вакцины, служили следующие показатели: напряженность и продолжительность поствакцинального иммунитета; показатели яичной продуктивности; количество заболевших и павших кур; производственный брак. Хозяйственные показатели учитывали в течение 3 месяцев (в 140-223-дневном возрасте). Расчет экономической эффективности ветеринарных мероприятий проводили с учетом учебно-методического пособия «Определение экономической эффективности мероприятий в ветеринарной медицине» [1], утвержденного ГУВ МСХ и П РБ 12.05.2009 г. (приказ № 10-1-5/802). Цифровые данные обработаны статистически с использованием программы Microsoft Excel 2003.
Результаты исследований и их обсуждение. На 3-й день после вакцинации размеры коркового вещества долек тимуса у кур 1 -й группы достигали (594,25±75,88) мкм, что было соответственно в 1,3 (Р>0,05) и 1,7 (Р<0,05) раза больше, чем у птиц 2-й и 3-й групп.
При этом соотношение размеров коркового и мозгового вещества у иммунных птиц 1-й группы возрастало до (1,32±0,08) (против (0,84± ±0,09) мкм в контроле; P<0,05). У молодняка кур 2-й группы данный показатель изменялся недостоверно. Удельные объемы структурных элементов паренхимы в тимусе кур 1-й и 2-й групп составляли соответственно (92,75 ± 0,84) (Р<0,05) и (91,00 ± 0,28)% (Р>0,05), а у птиц 3-й группы - (89,00 ± 0,28)%.
На 7-й день эксперимента размеры коркового вещества долек у подопытных птиц 1-й и 2-й групп уменьшались по сравнению с предыдущим сроком исследований, но были достоверно больше, чем в контроле. Размеры мозгового вещества долек тимуса и плотность расположения в нем лимфоцитов, а также соотношение элементов стромы и паренхимы в тимусе иммунизированных животных находились на уровне контрольных показателей. Ассоциированная иммунизация птиц совместно с натрия тиосульфатом способствовала достоверному увеличению по сравнению с контролем плотности расположения ти-моцитов в корковом веществе долек органа. Плотность тимоцитов в корковом и мозговом веществе долек тимуса у подопытных птиц находилась на уровне контрольных показателей (рис. 1, 2).
Рис. 1. Структура тимуса интактных 133-дневных птиц. Паренхима долек дифференцирована на корковое и мозговое вещество. Гематоксилин-эозин. Микмед-2. Микрофото. Ув.: х 120.
Рис. 2. Расширение коркового вещества долек тимуса молодняка кур 1-й группы на 3-й день после вакцинации с натрия тиосульфатом. Гематоксилин-эозин. Микмед-2. Микрофото. Ув.: х 120.
На 14-й день после иммунизации у подопытных птиц 1 -й и 2-й групп установлено дальнейшее уменьшение размеров коркового вещества долек при одновременном снижении плотности расположения тимоцитов в нем. Соотношение размеров коркового и мозгового вещества долек, а также удельных объемов стромы и паренхимы у контрольных и подопытных птиц в эти сроки исследований было примерно одинаковым. На 21-й и 28-й дни эксперимента у вакцинированных и интактных птиц отмечено уменьшение размеров коркового вещества долек тимуса при снижении удельного объема паренхимы. Размеры же мозгового вещества долек и удельные объемы стромы, наоборот, увеличивались. При этом морфометрические показатели тимуса кур всех групп были примерно одинаковыми.
На 3-й день после вакцинации размеры мозговой зоны лимфоидных узелков бурсы Фабрициуса у животных всех групп были примерно одинаковыми. Размеры корковой зоны узелков у кур 1 -й и 2-й групп были в 1,5-1,7 раза больше (Р<0,05), чем у птиц 3-й группы (рис. 3, 4).
Рис. 3. Дифференциация лимфоидных Рис. 4. Увеличение размеров корковой
узелков бурсы Фабрициуса на корковую зоны лимфоидных узелков в фабрициевой
и мозговую зоны. Контрольная группа. 3-й день эксперимента. Гематоксилин-эозин. Микмед-2. Микрофото. Ув.: х 120.
бурсе животных 1-й группы. 3-й день после иммунизации с натрия тиосульфатом. Гематоксилин-эозин. Микмед-2. Микрофото. Ув.: х 120.
Иммунизация птиц 1-й группы способствовала достоверному увеличению удельного объема лимфоидной ткани по сравнению с контролем. Изучение плазмоцитарной реакции показало, что у животных
1-й группы отмечалось достоверное увеличение по сравнению с контролем числа плазмобластов и проплазмоцитов в 2,6-2,8 раза. У птиц
2-й группы наблюдалась менее выраженная плазмоцитарная реакция.
На 7-й день после иммунизации размеры корковой зоны лимфоид-
ных узелков бурсы у подопытных птиц 1 -й и 2-й групп составили соответственно (218,50±25,54) и (195,75±25,18) мкм (в контроле - (145,50 ± ±18,25) мкм; Р<0,05). Кроме того, в бурсе подопытных кур, как и в предыдущие сроки исследований, отмечалось достоверное увеличение по сравнению с контролем удельного объема паренхимы. Плотность расположения лимфоцитов в лимфоидных узелках бурсы иммунизированных птиц также возрастала по сравнению с контрольными данными (Р<0,05). В то же время наиболее выраженные изменения регистрировались у животных 1 -й группы, вакцинированных совместно с натрия тиосульфатом. Число проплазмоцитов и плазмоцитов в бурсе Фабрициуса птиц 1 -й группы достоверно превышало контрольные значения в 1,9 раза, а у кур 2-й группы - в 1,6 раза. На 14-й день после вакцинации в бурсе Фабрициуса животных 1 -й и 2-й групп размеры лимфоид-ных узелков были незначительно меньше, чем в контроле. При этом плотность лимфоцитов в корковой и мозговой зонах лимфоидных узелков бурсы птиц 1, 2 и 3-й групп была примерно одинаковой. Изучением плазмоцитарной реакции в бурсе вакцинированного молодняка кур 1 -й группы установлено достоверное увеличение количества плаз-моцитов в 1,5 раза по отношению к контролю. На 21-й и 28-й дни эксперимента размеры корковой и мозговой зон лимфоидных узелков в бурсе Фабрициуса интактных и подопытных птиц постепенно снижались по сравнению с исходными данными. Морфологический состав иммунокомпетентных клеток в слизистой оболочке фабрициевой бурсы птиц 1 -й и 2-й групп также не имел существенных отличий по сравнению с контрольными показателями.
В селезенке у птиц 1-й группы на 3-й день после вакцинации число лимфоидных узелков достоверно увеличивалось по сравнению с контролем в 1,9 раза, а у молодняка кур 2-й группы - в 1,7 раза. В то же время размеры лимфоидных узелков изменялись не достоверно. Содержание лимфобластов и плазмобластов в селезенке животных 1 -й группы достоверно превышало контрольные показатели в 1,7-1,8 раза, а у кур 2-й группы - в 1,4-1,8 раза. На 7-й день после иммунизации, как и в предыдущий срок исследований, у подопытных птиц обеих групп наблюдалось достоверное увеличение числа лимфоидных узелков по сравнению с контрольными данными. Кроме того, у кур 1-й группы отмечалась выраженная гиперплазия лимфоидных узелков (рис. 5, 6), что выражалось в достоверном увеличении размеров последних.
i ---V
ife^äWSf A ■ ч V'
V /V "i '• H'- v ^ "»v /
Рис. 5. Наличие лимфоидных узелков
небольших размеров в пульпе селезенки птиц 3-й группы (контроль).
7-й день эксперимента. Метод Генденгайна. Olympus BX-51. Микрофото. Ув.: х 240.
Рис. 6. Гиперплазия лимфоидных узелков в селезенке кур 1-й группы. 7-й день после вакцинации с натрия
тиосульфатом. Метод Генденгайна. Olympus BX-51. Микрофото. Ув.: х 240.
Количество лимфо- и плазмобластов в селезенке вакцинированных птиц нормализовалось по сравнению с контрольными значениями, а содержание плазмоцитов различной степени зрелости, наоборот, увеличивалось в 1,5-1,9 раза (Р<0,01). На 14-й день эксперимента в селезенке птиц 1 -й и 2-й групп выявлена тенденция к постепенному уменьшению числа и размеров лимфоидных узелков по сравнению с контролем. Количество зрелых плазматических клеток в селезенке птиц 1-й группы превышало контрольные значения в 1,5 раза (Р<0,05). У молодняка кур 2-й группы эти изменения были менее выражены.
При изучении микроморфометрических показателей и плазмоци-тарной реакции в селезенке на 21 -й и 28-й дни после вакцинации достоверных различий между группами птиц установлено не было.
На 3 -й и 7-й дни после иммунизации микроморфометрические показатели слепокишечных миндалин молодняка кур всех групп не имели значимых различий по сравнению с исходными данными. В диффузных скоплениях лимфоидной ткани миндалин птиц 1 -й и 2-й групп происходило активное накопление плазматических клеток различной степени зрелости. В последующем (на 14, 21 и 28-й дни после иммунизации) мы наблюдали постепенное затухание плазмоцитарной реакции. Число и размеры лимфоидных узелков у интактного и подопытного молодняка кур в эти сроки исследований изменялись не достоверно.
При изучении плазмоцитарной реакции в пищеводной миндалине, дивертикуле Меккеля и железе Гардера на 3, 7, 14, 21 и 28-й дни после вакцинации количественной динамики иммунокомпетентных клеток в обеих группах птицы не отмечали. Различия в показателях между группами птиц были несущественными и недостоверными.
При исследовании хозяйственных показателей установлено, что у птиц опытной группы за период наблюдения валовой сбор яиц соста-
112
вил 1967000 шт. (яйценоскость 81,95%). В течение эксперимента пала 231 птица, непроизводительное выбытие (зообрак) - 535 гол. В контрольной группе за период эксперимента пало 325 птиц, непроизводительное выбытие (зообрак) составило 665 гол. За период наблюдения валовой сбор яиц составил 1803500 шт. (яйценоскость 75,14%).
Исследование плазмы крови в ИФА (разведение 1:500) показало, что на 30-й день после вакцинации у птиц 1 -й группы титры специфических антител против вирусов ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 составили соответственно (18554,75±130,69), (30284,40± ±177,69), (10818,65 ± 95,45) и (16354,84±171,15) мкм, а у молодняка кур 2-й группы - (17221,25 ± 145,16), (26758,70 ± 225,64), (9918,24 ± 88,87) и (14445,55 ± 165,25) мкм.
При определении экономической эффективности установлено, что иммунизация молодняка кур против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 инактивированной эмульгированной вакциной «СЕВАК» совместно с натрия тиосульфатом (в 7%-ной концентрации в вакцине) обеспечивает по сравнению с применением одной вакцины увеличение экономического эффекта на 58681700 руб., а в расчете на 1000 гол. - на 58681,7 руб. (в ценах 2010 г.). При парентеральной ассоциированной вакцинации птиц против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 с использованием эмульсин-вакцины «СЕВАК» и натрия тиосульфата по сравнению с применением одной вакцины экономический эффект ветеринарных мероприятий составил 1,69 руб. на рубль затрат (в ценах 2010 г.).
Заключение. Полученные результаты исследований свидетельствуют о том, что:
- при парентеральной ассоциированной иммунизации молодняка кур жидкой инактивированной эмульсин-вакциной «СЕВАК» против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 в органах иммунной системы птиц развиваются выраженные иммуноморфологические изменения, характеризующиеся возрастанием удельного объема лимфо-идной ткани и расширением корковой зоны лимфоидных узелков в фабрициевой бурсе, увеличением числа лимфоидных узелков в селезенке, активизацией бластной и плазмоцитарной реакций в бурсе Фабрициуса, селезенке и слепокишечных миндалинах;
- иммунизация птиц против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 совместно с иммуностимулятором натрия тиосульфатом (в 7%-ной концентрации в вакцине) обеспечивает по сравнению с применением одной вакцины возрастание удельных объемов лимфоидной ткани и расширение коркового вещества долек в тимусе, увеличение размеров лимфоидных узелков в селезенке, а также более интенсивное развитие плазмоцитарной реакции в бурсе Фабрициуса и селезенке;
- применение иммуностимулятора натрия тиосульфата (в 7%-ной концентрации в вакцине) при парентеральной ассоциированной иммунизации молодняка кур против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 инактивированной эмульгированной вакциной «СЕВАК» обеспечивает создание у птиц более напряженного иммунитета против
113
указанных болезней, способствует повышению яйценоскости, снижению падежа и выбраковки птиц;
- иммунизация птиц против ИБК, БН, пневмовирусной инфекции и ССЯ-76 инактивированной эмульгированной вакциной «СЕВАК» совместно с натрия тиосульфатом обеспечивает по сравнению с применением вакцины без иммуностимулятора увеличение экономического эффекта (в расчете на 1000 гол.) на 58681,7 руб., а также экономической эффективности ветеринарных мероприятий на рубль затрат - на 1,69 руб. (в ценах 2010 г.).
ЛИТЕРАТУРА
1. Безбородкин, Н.С. Определение экономической эффективности мероприятий в ветеринарной медицине: учеб.-метод. пособие для студ. ф-та вет. медицины / Н.С. Безбородкин, В.А. Машеро. Витебск, 2009. 40 с.
2. Вакцинация - основа эпизоотического благополучия птицехозяйств / О.Ф. Хох-лачев [и др.] // Био. 2008. №5. С. 23-24.
3. Лях, А.Л. Влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на иммуноморфо-генез при парентеральной вакцинации гусят против пастереллеза: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.02 / А.Л. Лях; УО «ВГАВМ». Витебск, 2003. 21 с.
4. Меркулов, Г. А. Курс патологогистологической техники / Г.А. Меркулов. Л.: Медицина, 1969. 432 с.
5. Микроскопическая техника: руководство / Д.С. Саркисов [и др.]; под ред. Д.С. Саркисова, Ю.Л. Петрова. М.: Медицина, 1996. 544 с.
6. Прибытько, С.П. Влияние иммуностимулятора натрия тиосульфата на им-муноморфогенез у цыплят, вакцинированных против болезни Марека: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.02 / С.П. Прибытько; УО «ВГАВМ». Витебск, 1998. 18 с.
7. Стоквис, Б. Смешанные инфекции кур-несушек / Б. Стоквис // Материалы 6-го междунар. вет. конгресса по птицеводству, Москва, 26-29 апреля 2010 г. / МСХ РФ; Федер. служба по вет. и фитосан. надзору РФ; Росптицесоюз. М., 2010. С. 82-84.
8. Теш, А.И. Влияние иммуностимуляторов на противосальмонеллезный иммунитет у телят / А.И.Теш, В.М. Чекишев // Ветеринария. 1989. .№5. С. 35-37.
УДК 619:616-092-085
ОСОБЕННОСТИ ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ
У ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ С КЛИНИЧЕСКИМИ ПРИЗНАКАМИ ОСТЕОДИСТРОФИИ В РАЗНЫЕ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ПЕРИОДЫ
Е.В. ГОРИДОВЕЦ УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 05.01.2011)
Введение. Метаболизм, или обмен веществ и энергии, - сложный химический процесс в организме с момента поступления питательных веществ в организм до выведения из него конечных продуктов обмена. Состояние метаболизма зависит от условий кормления и содержания животных, функции отдельных органов и систем. Морфофункцио-
