CC BY
13
7. Не ждан о в, А. Г. Послеродовая инволюция половых органов у коров /
A. Г. Нежданов // Ветеринария. - 1963. - № 2. - С. 48-51.
8. П а в л е н к о, О. Б. Профилактика гинекологических болезней функционального характера у коров О. Б. Павленко, Б. А. Калашник // Актуальные проблемы болезней молодняка в современных условиях. - Воронеж, 2002. - С. 471-473.
9. Ш и п и л о в, В. С. Физиологические основы профилактики бесплодия коров /
B. С. Шипилов. - М.: Колос. - 1977. - 335 с.
10. Ч о м а е в, А. Сроки инволюции матки можно сократить / А. Чомаев, М. Вареников, В. Лиэпа // Животноводство России. - N° 6.- 2007. - С. 41-42.
11. Ч о м а е в, А. После отела корова будет здорова / А. Чомаев, А. Ю. Клинский, В. Артюх // Животноводство России. - № 2. - 2007. - С. 53-55.
12. H o l t, L. C. Involution, pathology and histology of the uterus in dairy cattle with retained placenta and uterine discharge following GnRH / L. C. Holt, W. D. Whiltier, F. C. Gwasdauskas // Animal Reproduction Science. - 1989. - V. 21. - P. 11-23.
13. L e s l i e, K. E. The events of Normal and abnormal postpartum reproductive endocrinology and uterine involution in dairy cows: A review / K. E. Leslie // Canadian Veterinary Journal. - 1983. - V. 24. - P.67-71.
14. L i n d e l l, J. O. Postpartum release of prostaglandin F2a and uterine involution in the cow / J. O. Lindell, H. Kindahl, L. Jasson // Theriogenology. - 1982. - V. 17. - P.237-245.
15. M i e t t i e n, P. V. A. Uterine involution in Finnish dairy cows / P. V. A. Miettien // Acta Vet Scand. - 1990. - V.31. - P. 31-35.
УДК 619:616.72-002-022.6:636.5.053:611.018.46
МОРФОЛОГИЯ КОСТНОГО МОЗГА ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ, ВАКЦИНИРОВАННЫХ ПРОТИВ РЕОВИРУСНОГО ТЕНОСИНОВИТА
Н. О. ЛАЗОВСКАЯ, В. С. ПРУДНИКОВ УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины», г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 31.01.2015)
Введение. Промышленное птицеводство Республики Беларусь занимает одно из ведущих мест среди отраслей сельского хозяйства и развивается достаточно динамично. Увеличивать объемы производства птицепродуктов планируется и в будущем. Так, согласно Программе развития птицеводства на 2011-1015 гг. в Республике Беларусь, необходимо произвести за 2015 г. 587,3 тыс. тонн мяса птицы в живом весе, 2743,4 млн. штук куриных яиц. Кроме этого, экспорт яиц увеличится до 0,7 млрд. штук в год, а мяса птицы - до 100 тыс. тонн в год [7, 8].
Костный мозг млекопитающих является одновременно основным органом кроветворения и центральным органом иммунной системы. Он также участвует в костеобразовательных процессах, депонировании крови, обмене белков, жиров, углеводов, витаминов и минеральных веществ в организме [12]. Исследование костного мозга является важным звеном в цепочке комплексного изучения иммунитета и определения иммунного статуса организма животных, в том числе и при иммунизации [11].
Анализ источников. Как известно, в настоящее время производство мяса птицы сосредоточено на крупных специализированных предприятиях, мощности которых позволяют осуществить единовременную посадку миллиона и более голов. Это в свою очередь создает определенные трудности в соблюдении принципа «все пусто - все занято», приводит к сокращению санитарных разрывов, увеличению плотности посадки цыплят. К тому же зачастую стада комплектуются привезенной из-за границы птицей с недостаточной, либо недостоверной информацией о ее происхождении. На фоне нарушений в кормлении и содержании, несоблюдения ветеринарно-санитарных правил, перенасыщения лечебно-профилактических схем антибактериальными препаратами и неизбежности технологических стрессов происходит угнетение иммунной системы птицы и снижение резистентности ее организма. Указанные выше факторы приводят к активизации возбудителей инфекционных болезней различной этиологии. К таким болезням относят реовирусную инфекцию птиц, характеризующуюся хромотой, связанной с воспалением сухожилий и суставов конечностей, высокой ранней смертностью, плохим ростом, снижением яйценоскости и выводимости цыплят [3, 4]. Реовирусы птиц широко распространены во всем мире. Они были выделены от цыплят при различных патологических процессах, которые проявлялись в виде артритов, перикардитов, миокардитов, малабсорбционного синдрома («синдром плохого всасывания»), «карликового синдрома», «синдрома плохого оперения», имму-носупрессии, некроза головки бедренной кости и т. д. Зачастую цыплята выглядели клинически здоровыми [2, 13, 14]. Многие из этих симптомов описаны и при болезнях, связанных с возбудителями других вирусных и бактериальных инфекций. Исключением является вирусный артрит или теносиновит, при котором этиологическое и патогенетическое значение вируса доказаны полностью [1].
Реовирусы наиболее контагиозны для цыплят в раннем возрасте [13]. Попадая в организм цыпленка, вирус в первую очередь поражает эпителиальные клетки тонкого кишечника и бурсы Фабрициуса, а затем быстро распространяется в другие органы за 24-48 ч. [2].
Основопологающим подходом к предотвращению реовирусных инфекций является специфическая профилактика родительского поголовья, которая защищает молодняк благодаря переносу материнских антител [9]. Однако в литературе имеются данные о циркуляции вируса среди молодняка и взрослых кур, полученного как от иммунных, так и от неиммунных родителей в Российской Федерации, а также в Украине [5, 10].
В настоящее время в нашей республике все птицефабрики выращивающие родительское стадо, иммунизируют птицу против данной болезни по различным схемам дорогостоящими вакцинами зарубежного производства.
В соответствии с Государственной программой развития производства ветеринарных препаратов на 2010-2015 гг. планируется завершить к 2015 г. создание производства отечественных биологических, фармацевтических и диагностических ветеринарных препаратов и обеспечить в них потребности птицеводства до 80 % [2]. В связи с этим сотрудниками РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского» г. Минск была разработана сухая живая вакцина против реовирусного теносиновита цыплят.
Цель работы - изучение морфологических изменений в костном мозге у цыплят при вакцинации их против реовирусного теносиновита отечественной сухой живой вакциной из шт. «КМИЭВ^118».
Материал и методика исследований. Исследования были проведены на 70 цыплятах от 1- до 45-дневного возраста, которые были подобраны по принципу аналогов. Птица первой группы служила контролем. Цыплят второй группы вакцинировали в возрасте 7 дней отечественной сухой живой вакциной против реовирусного теносиновита. Птицу третьей группы иммунизировали данной вакциной в 7 дней с применением натрия тиосульфата. Иммунизацию цыплят четвертой группы проводили в суточном возрасте.
Вакцину вводили внутримышечно в верхнюю треть внутренней поверхности бедра в дозе 0,2 мл/гол.
В качестве растворителя вакцины во второй и четвертой группах применяли натрия хлорид, а в третьей, после стерилизации - дистил-
лированную воду с растворенной в ней новокаином и натрия тиосульфатом (на 100 мл воды добавляли 0,25 г новокаина и 7,0 г натрия тиосульфата).
Исследование иммунологических показателей у цыплят, вакцинированных в 7 дней, проводили на 7-й, 14-й и 21 дни после иммунизации, а у молодняка, вакцинированного в суточном возрасте - на 14-й и 21-й дни.
С целью проведения морфологических исследований костного мозга отбирали кусочки бедренной кости и фиксировали их в 10 %-м растворе формалина, затем проводили их декальцинацию путем погружения в 1 н раствор ледяной уксусной кислоты. Зафиксированный материал подвергали обезвоживанию и инфильтрации парафином в автомате для гистологической обработки ткани типа «Карусель», модель STP-120 (Microm International, Германия).
Для изготовления парафиновых блоков использовали станцию для заливки ткани EC 350 (Microm International, Германия). Гистологические срезы готовили на ротационном микротоме HM 340E (Microm International, Германия).
Полученные гистологические срезы окрашивали по методу Паппен-гейма [6].
Миелограмму выводили на основании подсчета 1000 клеток, придерживаясь унитарной теории кроветворения, предложенной И. Л. Чертковым и А. П. Воробьевым (1981), руководствуясь морфологическим описанием клеток кроветворных органов и крови по И. М. Карпутю [6].
Кроме этого, выводили парциальные формулы различных групп клеток костного мозга [6]: лейкоэритробластический индекс (соотношение костномозговых элементов лейкоцитарного и эритроцитарного ростков); костномозговой индекс созревания псевдоэозинофилов (отношение молодых гранулоцитарных клеток (промиелоциты, миелоци-ты, метамиелоциты) к зрелым нейтрофилам (палочкоядерные, сегмен-тоядерные); костномозговой индекс созревания эозинофилов (соотношение молодых (промиелоциты, миелоциты, метамиелоциты) и зрелых (палочкоядерные, сегментоядерные) клеток эозинофильной группы.
Полученные цифровые данные были обрабатаны статистически с помощью программы Microsoft Excel.
Результаты исследований и их обсуждение. Результаты наших исследований свидетельствуют о том, что в миелограмме цыплят на
7-й день после вакцинации отмечается достоверное увеличение по сравнению с контролем общего количества всех клеточных элементов миелобластического ряда при их иммунизации в 7 дней без и с применением натрия тиосульфата в 1,30 (Р<0,001) и 1,41 (Р<0,001) раза.
Рост данного показателя у вакцинированного поголовья был достигнут за счет всех клеточных элементов миелоидного ростка. У цыплят, вакцинированных в 7 дней с применением натрия тиосульфата, общее количество клеток миелоидного ряда было недостоверно выше на 8,72 %, чем у иммунизированных без него.
Одновременно в костном мозгу вакцинированных цыплят всех групп к этому времени происходило уменьшение общего числа клеток эритробластического ряда по сравнению с контрольной группой на 17,09 и 11,40 %, соответственно.
Количество лимфоцитов, плазматических клеток и моноцитов на данном этапе исследований у иммунизированных цыплят также незначительно превышало контрольные показатели.
Лейкоэритробластический индекс у птицы, иммунизированной в 7 дней без и с применением иммуностимулятора по сравнению с контролем был выше в 1,49 (Р>0,05) и 1,55 (Р>0,05) раза соответственно, что является признаком активизации клеток миелоидного ростка у вакцинированного поголовья. Достоверных отличий между иммунными цыплятами всех групп выявлено не было. Костномозговой индекс созревания псевдоэозинофилов у иммунизированного поголовья был выше, чем у интактного в 1,28 (Р>0,05) и 1,31 (Р>0,05) раза, что может указывать на омоложение клеток белой крови.
На 14-й день после вакцинации у птицы, иммунизированной в 7 дней без и с применением натрия тиосульфата, а также в суточном возрасте общее количество клеток миелобластического ряда было выше чем в контроле в 1,35 (Р<0,001), 1,47 (Р<0,001) и 1,25 (Р<0,01) раза, соответственно. Увеличение данного показателя у вакцинированного поголовья достигалось за счет всех клеток миелоидного ростка. У цыплят, иммунизированных в 7 дней с применением натрия тиосульфата, общее количество клеток миелобластического ряда было наибольшим среди вакцинированного поголовья и составляло 42,76±0,94, что на 8,64 и 17,22 % выше, чем у вакцинированных в 7 дней без иммуностимулятора и в суточном возрасте соответственно, однако данные показатели были недостоверными.
Количество лимфоцитов у цыплят иммунизированных в 7 дней без и с применением натрия тиосульфата, а также в суточном возрасте
61
было достоверно выше, чем в контроле в 1,58, 1,66 и 1,59 раза соответственно.
Общее количество клеточных элементов эритробластического ряда у цыплят всех групп достоверно не отличалось между собой. Лейкоэ-ритробластический индекс превышал контрольные показатели у молодняка, вакцинированного в 7 дней без и с применением иммуностимулятора, а также в суточном возрасте на 42,86 (Р>0,05), 50,00 (Р>0,05) и 35,71 (Р>0,05) %, соответственно. Достоверных отличий между иммунизированными группами цыплят выявлено не было.
Костномозговой индекс созревания псевдоэозинофилов у цыплят контрольной группы был ниже, чем у вакцинированных в 7 дней без и с применением иммуностимулятора, а также в суточном возрасте на 15,38, 12,82 и 5,13 % соответственно, а индекс созревания эозинофи-лов был меньше, чем у иммунизированного поголовья соответственно на 12,00, 20,00 и 16,00 %.
На 21-й день проведения исследований нами было установлено снижение общего количества клеток миелоидного ростка по сравнению с предыдущим сроком исследования, особенно это было заметно среди вакцинированного поголовья. Однако данный показатель в контрольной группе был по-прежнему ниже, чем у иммунизированных цыплят.
Лейкоэритробластический индекс снизился по сравнению с предыдущим сроком исследования у всего поголовья, однако он был по-прежнему ниже в контроле, чем у иммунизированных цыплят. Аналогичная тенденция наблюдалась и при выведении индекса созревания псевдоэозинофилов, а костномозговой индекс созревания эозинофилов у всех цыплят был примерно на одном уровне. Указанные выше данные могут свидетельствовать о постепенном снижении процессов пролиферации клеток белого ростка у иммунной птицы.
На 21-й день после вакцинации общее количество клеток эритробластического ряда у интактного поголовья достоверно не отличалось от иммунизированного. Количество лимфоцитов уменьшилось по сравнению с предыдущим сроком исследования, но было выше у вакцинированного поголовья, чем в контроле. Число плазматических клеток и моноцитов у иммунизированных цыплят достоверно не отличалось от невакцинированных.
Заключение. При иммунизации цыплят отечественной сухой живой вакциной против реовирусного теносиновита в костном мозге
происходит морфологическая перестройка, характеризующаяся активизацией миелобластического ростка кроветворения, снижением эрит-ропоэза, увеличением количества лимфоцитов и повышением лейкоэ-ритробластического индекса, что свидетельствует об активной гиперплазии клеток белого ростка. Наиболее выраженными данные изменения были у цыплят, иммунизированных в возрасте 7 дней с применением натрия тиосульфата.
ЛИТЕРАТУРА
1. А л и е в, А. С. Реовирусная инфекция птиц / А. С. Алиев // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2005. - № 12. - С. 28-32.
2. А л и е в, А. С. Роль цитокинов в регуляции иммунитета у птиц / А. С. Алиев, А. К. Алиева // Птица и птицепродукты. - 2010. - N° 1. - С. 42-44.
3. Болезни птиц: учебное пособие для студентов вузов, обучающихся по специальности «Ветеринария» / Б. Ф. Бессарабов [и др.]. - СПб.; М.; Краснодар: Лань, 2007. -448 с.
4. Г у л я к о, А. А. Реовирусная инфекция в современном птицеводстве / А. А. Гуля-ко // Наше сельское хозяйство. - 2013. - № 16 (72). - С. 42-47.
5. З и н я к о в, Н. Г. Анализ последовательности участка гена S3 изолятов реовируса кур, выявленных на птицефабриках Российской Федерации / Н. Г. Зиняков, Д. Б. Анд-рейчук, В. В. Дрыгин // Вопросы вирусологии. - 2010. - Т. 55, № 2. - С. 9-13.
6. К а р п у т ь, И. М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных / И. М. Карпуть. - Минск: Ураджай, 1986. - 183 с.
7. К и с е л е в, А. И. Тенденции развития мирового и отечественного птицеводства / А. И. Киселев // Наше сельское хозяйство. - 2012. - № 05 (38). - С. 45-49.
8. Министерство сельского хозяйства и продовольствия Республики Беларусь [Электронный ресурс] / Программа развития птицеводства в Республике Беларусь в 2011-2015 гг. - Режим доступа: http : //m shp.gov.by/. - Дата доступа: 15.12.2013.
9. Н а с о н о в, И. В. Диагностика и профилактика пневмовирусной и реовирусной инфекций в промышленных стадах птицы : обзор / И. В. Насонов, Н. И. Костюк // Эпизоотология. Иммунобиология. Фармакология. Санитария. - 2008. - № 3. - С. 15-21.
10. Н и к о л а е н к о, Ю. Ю. Распространение и специфическая профилактика рео-вирусной инфекции в Украине / Ю. Ю. Николаенко, Л. И. Наливайко, И. Ю. Безрукавая // VI Международный ветеринарный конгресс по птицеводству. - М., 2010. - С. 54-58.
11. Роль патоморфологических исследований в диагностике инфекционной анемии цыплят при моно- и ассоциативном течении / И. Н. Громов [и др.] // Животноводство и ветеринарная медицина. - 2012. - №2 (5). - С. 46-54.
12. Х р у с т а л е в а, И. В. Иммунокомпетентные структуры млекопитающих и птиц новорожденного периода / И. В. Хрусталева, Б. В. Криштофорова, В. В. Лемещенко // Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2007. - № 5. - С. 49-54.
13. Field experiences with ERS type reovirus infections in diseased broilers reared under Western European field circumstances/ P. De Herdt [et al.] // Vlaams Diergeeskundig Tijdschrift. - 2008. - Vol. 77, № 3. - Р. 171-176.
14. Growth perfomance of broilers in experimental Reovirus infections / P. Sudhakar [et. al.] // Veterinary World. - 2012. - Vol. 5, № 11. - P. 685-698.
