CC BY
7
Этот метод может полноценно заменять собой стандартный бродильный способ Булнра-Эйкмана во всех тех случаях, где по тем или иным причинам имеются затруднения в снабжении лабораторий ингредиентами эйкмановской, гевр. булировской среды (глюкоза, маннит, мясо). Это вытекает из полной доступности и дешевизны молочно-пептонной среды, для приготовления которой требуется только два ингредиента — молоко (может быть использовано и сгущенное) и пептон, который расходуется в количестве, в 10 раз меньшем, чем для среды Булира-Эйкмана.
Кроме того, молочно-коагуляционный тест можно признать даже прямо показанным в условиях наиболее южных республик нашего Союза, как Узбекская, Таджикская и Туркменская, где бродильный тест Булира при 43° мало состоятелен. Он плохо селекционирует кишечную палочку из смеси сапрофитов, имеющих в южных широтах относительно высокий температурный оптимум своего развития, и не диференци-рует на юге соП-флору теплокровных от соИ-флоры холоднокровных (Минкевич). Широкий опыт применения молочно-коагуляционного теста в Таджикистане (Змеев и Войно-Ясенецкая) показал явное его преимущество перед бродильным тестом Булира.
Следует добавить, что сфера применения молочно-коагуляционного теста, повидимому, может быть расширена и за рамки анализа воды, о чем, например, свидетельствует успешное широкое применение этого метода при исследованиях на фекальное загрязнение рук п'ерсонала и предметов обстановки пищевых блоков в практике лабораторий Белорусского военного округа.
Л. Н. ШУСТОВА
Методика выделения патогенных микробов кишечно-тифозной группы из загрязненных
вод
Из Центральной санитарно-гигиенической лаборатории Москвы
Предлагаемая методика построена на двух основных положениях:
1. Посев и обработка только самой микрофлоры воды без посева всего исследуемого объема воды, являющегося лишь балластом в производстве анализа.
2. Использование высоко элективных сред с широким диапазоном ингибиции при условии одновременного применения различных по составу сред.
Первое условие осуществляется путем использования метода мембранных фильтров. Воду в любом объеме (до нескольких литров) фильтруют через несколько мембран порциями по 50—250 мл в зависимости от степени загрязненности воды и быстроты заиливания мембраны. Для посева в жидкую среду образовавшийся на мембране осадок хорошо разрыхляют петлей и погружают мембраны в один или несколько флаконов с жидкой средой, затем помещают в термостат при 37° и через 18—20 часов (желательно и раньше — «ранний высев») высевают несколько петель на обычные среды (Левин, Эндо и т. п.) и на элективные среды (см. ниже). Дальнейшую обработку производят как обычно.
Для посева на твердые среды мембрану снимают пинцетом и, прижимая плотно верхней стороной к поверхности среды, производят 4—5 «отпечатков» на одной чашке, затем мембрану помещают, как обычно, на среду в другую чашку и шпаделем производят рассев по
поверхности всей среды. При очень загрязненной воде тем же шпаде-лем, без фламбирования, засевают еще одну чашку. Дальнейшая обработка ведется, как обычно. При таком способе на «рассеве», а иногда и на «отпечатках» вырастают изолированные колонии, которые распознаются гораздо легче на фоне среды, чем на фоне плотной и обычно окрашенной мембраны.
Вторым условием предлагаемой методики является применение высокоэлективных сред. Рекомендуются комбинированные тетратионат-ные среды, в которых действие тетратионата (основного ингибитора) усиливается действием добавочно вводимых в среду различных ингибиторов, угнетающих развитие видов, устойчивых к тетратионату.
Для приготовления комбинированных твердых сред основной средой служит тетратионатагар Шустовой.
Способ приготовления. К 100 мл расплавленного и остуженного до 43—45° питательного агара с рН = 7,4—7,6 и с 5%> желчи добавляют 5 мл 2% раствора лактозы и сахарозы в равных количествах; приготовляют смесь из 10 мл 50% стерилизованного раствора гииосульфита натрия и 2 мл йодного мюллеровского раствора (20 г иодистого калия + 25 г кристаллического иода на 100 мл дестиллиро-еанной воды). Смесь без малейшего промедления вливают в агар и хорошо перемешивают. Затем добавляют один из добавочных ингибиторов. В качестве таковых испробованы и оказались эффективными следующие: 0,15 мл 0,25% раствора молочной кислоты, 1% розоловой кислоты; 1 мл 0,1% раствора генцианвиолета; 2 мл 0,1% раствора кристалвиолета; 0,05—0,1 мл 0,1% раствора бриллиантовой зелени; 2 мл 0,5% раствора метиленовой синьки +1,5 мл 2% раствора эозина. Тщательно размешивают и разливают по чашкам, подсушивают при 37°. Чашки можно хранить 2—5 дней на холоду. Помутнение среды указывает на непригодность ее вследствие разложения тетратионата {вещества нестойкого и особенно чувствительного к кислотам и к действию температуры) и утраты элективных свойств. Растворы красок должны быть свежеприготовленными, так как эффективность слабых водных растворов быстро ослабевает
Для приготовления жидких комбинированных сред в среду Мюллера вводят те же добавочные ингибиторы в указанных соотношениях. Необходимо производить одновременно засев в жидкие и твердые комбинированные тетратионатные среды с различными ингибиторами, так как в загрязненных естественных водах зачастую имеет место смена сапрофитных видов, обладающих различной устойчивостью, как к тетратионату, так и к добавочным ингибиторам.
С помощью описанной методики производились опыты по выделению палочки паратифа В из очень загрязненной воды (иногда типа сточной) ручья Синичка, добавочно заражаемой небольшими количествами культуры паратифа В. При внесении 100—200 микробов (по оптическому стандарту) на 1 л этой воды, предварительно профильтрованной через бумажный фильтр для освобождения от грубой механической взвеси, выделение удавалось почти всегда; при внесении 25—50 микробов выделение удавалось семь раз на восемь посевов; при внесении 10 микробов на 1 л — один раз на четыре опыта.
Из естественной загрязненной воды (без добавочного заражения) удалось выделить на тетратионатной среде с метиленовсй синькой и эозином палочку паратифа В; на среде с генцианвиолетом шесть раз палочку Бреслау и шесть раз палочку 'Моргана.
1 Подробности о приготовлении рекомендуемых сред и проверке их действия см. в работе Шустовой _и Гамовой-Каюковой в журнале Гнгизна и санитария, № 7—8, 1944 г. На стр. 39 этой работы в 10-й стюке снизу должна быть внесена следующая поправка: вместо слов «в 6 из 24 (25°/о)», должно быть «в 13 из 25 (52'/о)».
37 _-
Полученные результаты позволяют считать предлагаемую методику обнадеживающей в смысле эффективности. Приготовление сред просто, ингредиенты недефицитны и широкий выбор добавочных ингибиторов обеспечивает доступность методики для любой лаборатории.
3. Э. БЕККЕР
Самообеззараживающиеся бактериенепрони-цаемые ткани и область их применения
Антисептические ткани, т. е. ткани, пропитанные антисептиками — веществами, предотвращающими развитие микроорганизмов, преимущественно грибков, известны в технике уже ряд лет. Эти ткани применяются для ряда специальных конструкций в таких условиях, в которых обычные, не пропитанные антисептиками материалы подверглись бы загниванию, т. е. в условиях высокой влажности внутри обтянутой данной тканью детали.
Так как скопляющаяся внутри такой конструкции влага выщелачивает из ткани находящийся в ней антисептик, то микроорганизмы, попадая в отравленную антисептиком влажную среду, не только не могут развиваться далее, но сравнительно быстро погибают. Подробные описания свойств, приготовления и применения такого рода тканей можно найти в более ранних работах автора. Ввиду того что многие применяемые в технике для борьбы с плесневыми грибками антисептики являются одновременно хорошими бактерицидами, автору этой работы пришла мысль использовать такого рода антисептики для изготовления сзмообеззараживающихся тканей. Под этим термином понимаются ткани, изготовленные по принципу импрегнации, подобно индивидуальным пакетам для перевязки ран, но с применением безвредных для людей антисептических средств, препятствующих при достаточной плотности ткани проникновению микроорганизмов через ее толщу и убивающих их в течение короткого срока на ее поверхности.
Понятно, назначение такого рода бактериенепроницаемой ткани должно быть совершенно иным, чем назначение индивидуального пакета. В качестве антисептиков для пропитки таких тканей может быть применено любое бактерицидное вещество, обладающее следующими качествами: 1) 'стойкостью против выветривания и химического изменения, 2) безвредностью для людей и животных и 3) по возможности недефицитностью и дешевизной.
Для первоначальных испытаний с этой целью нами было избрано два антисептика, обладающие всеми перечисленными свойствами. Технический ^ортооксидифенил, подробно изученный нами в 1938—1939 гг.
__в области техники и в 1940 г. в качестве бактерицида. Он практически
I безвреден для людей, очень дешев (стоимость 3—5 рублей за 1 кг), ; является достаточно стойким антисептиком, действующим в течение ; длительных сроков, мало летучим и мало изменяющимся химически. Бактерицидность его очень значительна, так как он имеет фенольный коэфициент 19,0 для Staphylococcus aureus и 20,0 для Escherichia coli • (т. е. является в соответствующее число раз более ядовитым для упомянутых микробов, чем фенол). Вторым веществом, примененным для пропитки ткани, была сернокислая медь, известная уже давно в сель-схом хозяйстве и технике как хороший фунгисид, обладающий значительной стойкостью, нелетучий и относительно мало дефицитный.
В случае, если бактерицидность этих препаратов не снижается или мало снижается при пропитке ими ткани, попадающая на пропитанную
:8 >.__
