Научная статья на тему 'Упрощенные и ускоренные методы бактериологического исследования питьевых вод'

Упрощенные и ускоренные методы бактериологического исследования питьевых вод Текст научной статьи по специальности «Математика»

CC BY
51
8
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Область наук
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Упрощенные и ускоренные методы бактериологического исследования питьевых вод»

нения на всех вообще крупных предприятиях активное участие принимают санитарно-промышленные инспекторы. Научные институты гигиены труда непосредственно включаются в борьбу за снижение заболеваемости на важнейших предприятиях, прикрепляясь к отдельным заводам по всему СССР. Институт им. Обуха, Институт охраны труда ВЦСПС и Всеукраинский институт гигиены труда и профзаболеваний в кратчайшие сроки разрабатывают вопросы улучшения условий труда при проведении светомаскировки цехов и дают законченные конструктивные решения, обеспечивающие возможность достаточной аэрации рабочих помещений при закрытии световых проемов и недопущении проникания наружу света от светильников и производственных огней. Изучаются возникшие в условиях Великой отечественной войны новые производства, выявляются основные санитарные вопросы в оборонной промышленности, способствующие снижению заболеваемости, устранению угрозы профотравле-ний и повышению производительности труда. Разрабатывается ряд специальных инструкций, носящих комплексный характер, т. е. инструктирующих санитарно-промышленных инспекторов по линии необходимых профилактических мероприятий, а лечащих врачей — по линии медотбо-ра, ранней диагностики, лечения и 'первой помощи пр<и различных профессиональных или особенно часто встречающихся на производстве заболеваний (пфегревы, так называемая «инфекционная- эритема», заболевания, связанные с работой с динитробензолом, тринитротолуолом, фенольноальдегидным« клеями и смолами, свинцовым бензином и др.).

В годы1 войны усилилась и массово-общественная работа, санитарная агитация и пропаганда на предприятиях. Выделены тысячи общественных санитарных инспекторов, обеспечивающих повседневный контроль и наблюдение за чистотой и санитарным порядком в цехах и в общежитиях., за соблюдением рабочими правил личной гигиены, обучение их безвредным и безопасным методам' работы. Широко ставится обучение рабочих первой помощи, самопомощи и взаимопомощи При травмах.

Оглядываясь на пройденный за четверть века путь советского строительства по линии санитарной охраны труда, мы можем гордиться огромными достижениями в области оздоровления условий труда. Труд из зазорного и тяжелого бремени, каким он считался раньше, превратился в СССР в дело чести, в дело славы, дело доблести и геройства. В СССР в результате успехов социалистического строительства под руководством славной коммунистической партии создана такая обстановка работы и быта рабочего класса, «которая дает нам возможность вырастить новое ьоколение рабочих, здоровых и жизнерадостных, способных поднять могущество советской страны на должную высоту и защитить ее грудью от покушений со 'стороны врагов».

Проф. Л. И. МАЦ

Упрощенные и ускоренные методы бактериологического исследования питьевых вод

Из Центрального санитарного института им. Эрисмана (Москва)

Бактериологическое исследование питьевых вод как для их санитарной оценки по стандартным методам, так и для определения в них патогенных микробов по инструкциям' ВГСИ наталкивается на ряд затруднений из-за дефицитности или отсутствия соответствующих питательных сред (агар, углеводы), аппаратуры, фильтров Зейтца, водоструйных наоо-

сов и т. п. Кроме того, продолжительность анализа в 72 часа зачастую совершенно обесценивает полученные данные в оперативном отношении. Это вызвало ряд попыток улучшить такую постановку дела. В бактериологическом отделе Института им. Эрисмана, в других бактериологических лабораториях и в литературе уже накопилось достаточно материала в данной области для обобщения и разработки более упрощенных и ускоренных методов бактериологического анализа питьевых вод.

Предлагаемые Институтом! им. Эрисмана методы хотя и не претендуют на замену существующих стандартных способов, однако являются достаточно точным« и благодаря своей простоте могут найти применение в любых условиях. Кроме того, они дают очень большую экономию в употреблении дефицитных материалов и аппаратуры. Некоторые из предложенных методов, несомненно, войдут в широкую практику бактериологических исследований воды и имеют все данные, чтобы стать стандартными.

Стандартная оценка исследуемого водоисточника дается на основе сум'марного изучения санитарного и гидрогеологического его состояния, а также физико-химических и бактериологических данных анализа воды. Бактериологические показатели характеризуются определением счета колоний и титра или индекса кишечной палочки (коли-титр и коли-индекс). Обычно анализ на счет колоний занимает 24 часа, а на коли-титр или, коли-индекс 48—72 часа и требует, как уже было указано, много сред из дефицитных материалов (агара, глюкозы и т. п.). Модифицированием приготовления питательных сред можно значительно сократить расход их и сжать сроки анализа до 12—24 часов, а в незначительном! количестве случаев — до 36 часов.

Ускорение роста микробов можно вызвать прибавлением дрожжевых лизатов — субстанции, весьма богатой белками и веществами, стимулирующими такой рост. Применение дрожжевых сред для повышения выхода (урожайности) микробных тел уже широко внедрено в практику приготовления вакцин.

Определение счета м и к робов. При посевах испытуемой воды на дрожжевом 0,5—0,75% агаре можно провести подсчет колоний через 12 часов выращивания оактерий при 37°. Подсчет колоний в испытуемой воде затрудняется также сложностью производства расплавки и разливки агара в походных условиях.

Определение счета колоний в воде, по нашим наблюдениям, можно проводить в таких случаях фильтрованием определенного объема воды через мембранные фильтры, накладываемые на чашки Петри с заранее разлитым в них агаром. Количество выросших на мембранном фильтре колоний соответствует количеству микробов в отфильтрованном! объеме испытуемой воды. Хорошие результаты в смысле определения счета колоний в речных или загрязненных водах дает и метод Мармана, т. е. равномерное распределение определенного объема воды по поверхности агара в чашке Петри.

Применение дрожжевого 0,5—0,75% агара в обоих этих методах позволяет делать подсчет колоний уже через 12 часов роста при 37°.

Посев производится таким образом: 0,5—1 см3 исследуемых сравнительно чистых вод или 0,5—1 см3 соответствующего разведения сравнительно грязных^ вод просасывают через мембранный бактериальный фильтр. Фильтр переносят на чашку Петри с 0,5°/о дрожжевым агаром'. Проращивание производится при 37° в течение 12 часов. Этот способ, по нашим данным, ничем не уступает обычному методу.

При посеве по Марману 0,5 см!3 вносят на поверхность агара в чашке Петри и вращательными движениями во все стороны равномерно распределяют по поверхности среды 0,75% дрожжевого агара в чашке Петри. В зависимости от предполагаемого обилия бактерий для засева берутся

различные количества воды. Сравнительно чистые прооы засеваются непосредственно в количестве 0,5 см3. Более грязные воды засеваются в 0,5 см3 соответствующих )разведений. Инкубация посевов при 37° — 12 часов. Этот метод иЬследования несколько уступает обычному.

Таким образом, анализ колоний на счет может быть произведен в любых условиях и доведен до 12 часов.

Установление коли-титра или коли-индекса. Фекальное загрязнение испытуемой воды, т. е. коли-титр или коли-индекс, устанавливается определением! всех разновидностей кишечной палочки, обладающих следующим минимумом признаков: грамотрицательные неспоро^, носные палочки, образующее газ в жидких средах с углеводами типа/ Эйкмана, Бульира и т. и. при температуре 43—45°, дающие рост характерных колоний на среде Эндо при 37°. Анализ имеет 3 этапа и занимает 72 часа (каждый этап по 24 часа).

Первый этап исследования. Прибавлением дрожжей к среде Эйкмана и в лаборатории Института им. Эрисмана, и в лаборатории Рублевской насосной станции (Москва) первый этап обнаружения кишечной палочки {первая бродильная проба) был сокращен с 24 до 12 часов, причем в этот срок часто получалось газообразование в дрожжевой среде Эйкмана, а муть — еще раньше. Проф. И. Е. Минкевич и С. Д. Гу-ревич уменьшением концентрации пептона до 0,1% и повышением ман-нита до 1% в среде Бульира с нейтральротом добились повышения бродильной чувствительности этой среды до 12—14 часов.

Однако как среда Эйкмана, так и среда Бульира требуют довольно много дефицитных углеводов (глюкоза или маннит). При отсутствии углеводов посев воды на кишечную палочку возложен в обычный мясо-пептонный бульон. Этот несколько видоизмененный метод Петрушка-Туш давал хорошие результаты в Московской областной лаборатории им. Мечникова (д-р Каден), а в некоторых других модификациях (бульон Хоттингера) — в Московской городской лаборатории (Д-р Шустова). В лаборатории Института и Mi. Эрисмана хорошие результаты давали посевы в мясо-пептонный бульон и бульон' Хоттингера pH = 7,2—7,4. Прибавление к ним дрожжевых лизатов ускоряло рост микробов до 12 часов. На 1 объем' засеваемой воды мы брали 3 объема бульона.

Второй этап исследования. Выращивание отдельных колоний на твердых^ средах также может быть доведено до 12 часов вместо обычных 24. Работники Рублевской лаборатории (Кибальчич, Осадчий и др.) и .Института им. Эрисмана (Россовская, Суражевская), применяя дрожжевые среды (агар Эндо и др.), получают рост засеваемых микробов уже через 11—12 часов. Так, В. С. Россовская получала на обычном агаре, агаре Эндо, агаре Шандалье (конгорот) рост типичных колоний кишечной палочки уже через 11—12 часов (притом не в меньшем количестве, чем через 24 часа), а мелких колоний — уже через 6—7 часов. Для иллюстрации приводим некоторые цифровые данные.

Место забора проб Ксли-индекс на среде Эндо через: Коли-индекс на среде Шандалье через:

12 часов 24 часа 12 часов 24 часа

Артезианская скважина . . 18 19 20 20

Колодец ......... 32 34 31 34

Река........... 104 109 106 110

Ускорение роста микробов на твердых средах можно также получить экономным прибавлением агара. Дело в том, что агар сам по себе не служит питательным веществом! для огромного большинства микробов,

за исключением В. адапсиэ, чрезвычайно редкого в природе микроба. Агар в данном' случае является только пространством! для роста отдельных изолированных колоний. Однако примененный в больших концентрациях, он затрудняет приток жидких питательных веществ и несколько тормозит рост микроба. Более низкая концентрация агара этот рост ускоряет, так как облегчает диффузию жидких питательных веществ и по-ступление их к растущим колониям. В лаборатории Института им. Эрис-мана рост микробов (счет колоний) интенсивно протекал в 0,5—0,75% агаре три мембранных фильтрах, причем получалась значительная экономия агара.

Еще более разительных результатов в смысле экономии агара добились в лаборатории Института им. Эрисмана Е. В. Дианова и А. А. Ворошилова, применяя твердые среды, где расход агара сведен до 10—15% против обычных норм. В качестве наполнителей Е. В. Дианова и А. А. Ворошилова применяют вату, ткани, марлю, бумагу, опилки, мелко битое стекло и песок, к которым! добавлены жидкие питательные среды (бульон, жидкий Эндо, Шандалье и т. п.),. и только сверху наливают тонкий слой обычного агара, агара Эндо или даже эти среды с 0,5% содержанием агара. На таких средах хорошо выращиваются любые микробы, как посеянные непосредственно на среде, так и внесенные с мембранным фильтром. Эти среды пригодны и для посевов на подсчет микробов, и для получения изолированных колоний. Колонии микробов кишечной группы в данном случае уже через 10—12 часов дают пышные колонии, сохраняющие свои характерные признаки. Среды в модификации Диано-вой и Ворошиловой совмещают в себе всю ценность жидких сред как более благоприятных'для роста микробов с присущими твердым средам свойствами стимулировать рост микробов в виде изолированных колоний. При этом облегчается и обмен веществ в колонии. Приток питательной жидкости и отток тормозящих рост продуктов жизнедеятельности микробной колонии значительно ускорены в средах Диановой и Ворошиловой вследствие легкости осмоса и диффузии их через, тонкий агаровый слой. Это повышает скорость роста микробной колонии. Таким образом, данный способ (особенно при заполнителе песке) не только обеспечивает экономию агара в 90%, но и ускоряет рост микробов.

На среде Диановой и Ворошиловой, состоящей из песка, пропитанного жидкой средой Эндо (без агара), рост микробов„ кишечной палочки на мембранном фильтре наблюдается в виде хорошо оформленных, различаемых невооруженным глазом характерных.колоний уже через 6.—8 часов, а первичные колонии ясно видны в лупу через 3—4 часа. Применяемый Диановой и Ворошиловой агар с песком дает богатый выход микробов. В настоящее время авторы этих сред разрабатывают методику их применения для приготовления вакцин.

Третий этап исследования. Вторую бродильную пробу также можно проводить на дрожжевой среде Эйкмана в течение 12 часов. Ускорение хода анализа на кишечную палочку в некоторых случаях возможно и путем сокращения отдельных этапов исследования. Например, при исследовании открытый водоемов или загрязненных вод третий этап (т. е. вторая бродильная проба на 1% среде Эйкмана) необязателен, так как уточнение газообразующих видов среди лактозоразлагающих микробов кишечной палочки не вносит коренных изменений в исчисление титра или индекса кишечной палочки, анализ же сокращается на 12—24 часа.

Отсутствие некоторой лабораторной аппаратуры фабричного изготовления можно восполнить самодельной. Если нет фильтровального аппарата Зейтца, его можно заменить описанным ниже фильтровальным аппаратом проф. Разумова. Фильтровальные аппараты можно стерилизовать спиртом. Водоструйный насос для отсасывания заменяется прибором Шин-ца или несколько видоизмененным велосипедным насосом. Можно и са-

Гигиеиа и санитария, № 2—3

мому отсосать воду. Термостат легко заменить любым сосудом, приспособленным! для сохранения температуры «в 35—40° в течение 12 часов. Термостатом! может служить и тело самого исследователя; в этом случае чашки и пробирки вкладывают в специальный пояс, надеваемый на тело.

При нехватке бактериальных фильтров один и тот же фильтр можно использовать 6—7 раз, но каждый раз его надо восстанавливать. Рецепт восстановления: отработанных мембранных фильтров, разработанный в лаборатории Института им. Эрисмана тт. Суражевской, Дианозой и Ворошиловой, приведен в конце настоящей статьи.

Ускоренное и упрощенное определение коли-титра или коли-индекс а возможно методом! обогащения с помощью мембранных фильтров или по способу Мармана (для речных и грязных вод).

Метод обогащения подразделяется на 3 этапа!. Первый этап — посев определенных количеств испытуемой воды по стандартному методу на дрожжевой среде Эйкмана или на среде Бульира с 0,1% пептоном, или на обычном или хоттингеровском бульоне как с дрожжами, так и без дрожжей. Инкубация! производится в течение 12 часов при 43—45°. Второй этап исследований наступает при обнаружении в пробах роста (муть, газообразование или только один из этих признаков). Тогда производится пересев на дрожжевую среду Эндо или одну из сред Диановой-Во-рошиловой (предпочтительно с песком') при инкубации в 12 часов и температуре 37°. Третий этап исследований применяется в случае обнаружения роста характерных колоний микробов кишечной палочки и заключается в микроскопировании этих колоний. При нахождении ррам-отрицательных неспороносных палочек производится пересев материала из колоний на 1% дрожжевую среду] Эйкмана для. обнаружения газообразования. Инкубация—12 часов. Таким образом., анализ требует 12—36 часов, а для речных вод, где опускается третий этап (вторая бродильная проба), он производится в 'течение 12—24 часов.

В случае отсутствия, таблиц, приведенных в стандартных методах исследования воды, вычисление коли-титра может быть произведено среднеарифметически, т. е. делением числа, выражающего общий объем исследуемой воды, на число, выражающее количество пробирок, в которых обнаружены кишечные микробы вне зависимости от их ряда. Например, при общем объеме посеянной воды в 300 мл и обнаружении кишечной палочки в одном объеме в 100 мл и в трех объемах по 10 мл коли-титр вычисляется делением 300 : (3 Чг 1) = 300 : 4, т. е. коли-титр равен 75 мл. Если кишечная палочка не обнаружена ни в одной пробирке, коли-титр больше общего объема взятой для посева воды. При обнаружении кишечной палочки во всех пробирках коли-титр меньше минимального объема воды, взятого для посева.

Коли-индекс вычисляется делением' 1 000 на число, выражающее полученный коли-титр. Например, при коли-титре в 75 мл коли-индекс будет 1 000 : 75=13,3, т. е. коли-индекс равен 13.

Определение кол и- индекса воды при помощи м> е м-бранных фильтров подразделяется, на два этапа и продолжается 24 часа вместо обычных 48. Первый этап заключается в том!, что через мембранный бактериальный фильтр просасывают от 1 до 500 см'5 сравнительно чистых и 1 см? соответствующего разведения грязных вод. Затем мембранный бактериальный фильтр с осевшими на нем микробами переносят на чашку Петри с 0,5% дрожжевого агара Эндо или на среду Диановой-Ворошиловой с песком. Выращивание производится в термостате при 37° в течение 12'часов. Этим* заканчивается первый этап. Через 12 часов наступает второй этап — изучение результатов роста на мембранном фильтре. В случае обнаружения роста характерных колоний микробов кишечной палочки проводится микроскопирование этих коло-

ний. При обнаружении грамотрицательных неспороносных палочек материал колоний пересевается на 1%> дрожжевую среду Эйкмана для обнаружения газообразования. Инкубация.— 12 часов при 43°.

Число выявленных через 12 часов выращивания на ультрафильтре ко лоний, состоящих из грамотрицательных неспороносных палочек, дающил газообразование в 1% среде Эйкмана, соответствует числу нахождения их в отфильтрованном' объеме испытуе&ой воды. Затем> перечислением количественного содержания кишечных палочек в 1 л испытуемой воды определяется коли-индекс.

Для речных вод достаточен только первый этап анализа, т. е. затрата времени всего в 12 часов. Коли-индекс подсчитывается учетом всех выросших за 12 часов на среде Эндо типичных лактозоразлагающих колоний, состоящих из грамотрицательных неспороносных палочек. Количество этих колоний на мембранном! фильтре соответствует количеству их в отфильтрованном объеме. Пересчетом' на 1 л испытуемой воды устанавливается коли-индекс. При анализе воды, богатой взвешенными веществами, необходима предварительная, фильтрация согласно требованию стандартной методики.

Определение коли-индекса воды по Марману для речных и грязных вод производится в 12 часов. 0,5—1 см3 испытуемой воды наносится на поверхность дрожжевого агара Эндо в чашке Петри. Вращательными движениями во все стороны этот объем равномерно распределяется по поверхности агара. Более грязные воды засеваются в количестве 0,5 см3 соответствующих разведений. Выращивание производится при 37° в течение 12 часов, после чего учитываются все лактозораз-лагающие колонии грамотрицательных палочек. На этом! анализ можно закончить и вычислить индекс кишечной палочки, т. е. количество колоний ее в 1 л исследуемой воды. Например, если посеяно 0,5 см3 в разведении 1 : 10, причем выросло 15 лактозоразлагающих колоний грамотрицательных палочек, то коли-индекс равен 15 : 0,5 X 10 X 1 000 = 300 000.

Ускорение хода анализа воды на присутствие патогенных кишечных микробов (брюшного тифа, паратифа и дизентерии) в нашей лаборатории получено применением мембранного фильтра для концентрации микробов. Обычно отфильтровывается от 500 до 1 000 см3 испытуемой воды по 100—250 см!3 на фильтр, а иногда только 2$—50 см3 в зависимости от фильгруемости и загрязненности воды. * .

При отсутствии среды Вильсон-Блера ее можно заменить средой Шустовой, т. е. тетратионовой средой Мюллера-Шефера с агаром!. В среду Шустовой мы внесли некоторые видоизменения, уменьшающие расход агара и ускоряющие ход анализа. Мы применяли дрожжевой агар в концентрации 0.5—0,75%. Обычную концентрацию по Шустовой мы заменяем буфером (КН2РО4 Ff К2НРО4). Данное предложение внес в практику нашей лаборатории Jl. Н. Скородумов для' жидкой среды Шефера, мы же эту модификацию вносим' и в твердую среду Шустовой. Рост отдельных колоний микробов кишечно-тифозно-дизентерийной группы наблюдается уже через 12—16 часов. Производство серологических реакций с выросшими культурами (реакции агглютинации и отклонения ком*-племента), отсев выросших микробов в узкие маленькие пробирки с предварительно нагретыми до 37° средами Гиса (принцип Козакова) и выращивание их в течение б часов дают возможность диагностики патогенных микробов через 18—24 часа.

Для обнаружения, микробов сибирской язвы мы проращивали при 37° мембранный фильтр с осевшими на нем> бактериями после фильтрования определенного объема испытуемой воды (500—1 000 см3, по 100—250 на один мембранный фильтр) на обычном 0,5—0,75% и дрожжевом 0,5—0,75% агаре. Через 12—20 часов проверяется рост микробов. Подозрительные колонии (нежные, серо-белые, более плотные в центре, с

заметным нежнозернистым строением, а также с характерным сплетением извитых нитей в виде локонов завитых волос—так называемая «голова медузы») пересеваются на 15—25% кровяной агар. Микробы сибирской язвы не дают гемолиза. Окончательный диагноз ставится на основании гибели мышей, зараженных материалом из подозрительных колоний, в течение 4 суток.

Питательные среды 'для ускоренного анализа

Дрожжевой лизат. Пекарские дрожжи протирают через сито и послойно пересыпают солью в посуде, в которой должен производиться гидролиз (например, в фарфоровом стакане), «з расчета 3°/о соли по весу дрожжей.

Дрожжи с солью оставляют при комнатной температуре до заметного их разжижения (примерно на 20—30 минут), затем их переносят в горячим аппарат Кока минут на 10 до полного разжижения. Смесь все время надо размешивать. Температура ее <нё должна превышать 60—65°.

Далее прибавляют соляную кислоту (удельный вес 1,19), разведенную в 10 раз до рН жидких дрожжей 4,5—5,0, который устанавливают по индикатору метилрот. На 1 кг дроисжей нужно прибавить приблизительно 60—80 мл разведенной 1 : 10 соляной кислоты. Дрожжи переносят в термостат на 48 часов, где выдерживают при температуре от 40 до 60°. После этого лизат сгущают выпариванием в фарфоровой чашке на водяной бане до густоты крепкой смётаны. Лизаты несгущенные, с большей влажностью могут покрыться плесенью. Хранить готовый лизат следует в стерильных шнрокогор-лых банках без добавления консервантов.

Дрожжевая среда Эйк.мана. К 1 л обычной среды Эйкмана добавляют до стерилизации 50 г дрожжевого ли за та рН = 7,4—7,6.

Дрожжевой мясо-пептонн ы й бульон. К 1 л обычного мясо-пептон -ного бульона добавляют до стерилизации 50 г дрожжевого лизата рН = 7,2—7,4.

Среда Б у л ь и р а (в модификации проф. Мицкевича к Гуревича) приготовляется из 1 г пептона, 10 г маннита, 1 л мясной воды и водного насыщенного раствора нейтральрота до ясного вишневокрасного окрашивания. рН среды должен соответствовать 6,8—7,0. Стерилизация производится в автоклаве. Перед посевом среду надо нагреть в термостате до 37°.

Питательный дрожжевой агар. К 1 л обычного 0,5—1°/о агара добавляется до стерилизации 50 г дрожжевого лизата. рН приготовленного агара должен быть 7,0—7,2.

Дрожжевая среда Эндо. Среда готовится на 0,5—1°/о дрожжевом агаре обычным путем.

Среда Диановой и Ворошиловой описывается ниже авторами в отдельной статье. Эти среды (особенно с песком) с легким слоем агара, агара Эндо и др. применимы для получения изолированных колоний и без мембранного фильтра.

Агаровая среда с тиосульфатом для выделения патогенных микробов (тиф, паратиф, дизентерия). 1-й раствор (основная среда) получают прибавлением к 900 мл обычного 03—0,75°/о мясо-пептонного агара (простого или с 5% дрожжей) 60 г тиосульфата ЫагБгОз!. 5 НгО (старое название—гипосульфит). рН = 7,4. Раствор разливают в колбы по 100 мл. Стерилизация производится в течение 25 минут при 115°.

2-й раствор (буфер) получают прибавленодам к 7,5 г КН2РО4 и 7,5 г КгНРО< 156 мл стерильной-дестиллированной воды. Буфер стерилизуется 15 минут при 115°.

3-й раствор (йодный) состоит из 12 г иода, 10 г йодистого калия и 100 г дестиллированной воды.

• Йодистый калий надо растворить в 30 мл воды, растворить в этом растворе иод и долить воды до объема 100 мл.

Перед употреблением среды к 100 мл. 1-го раствора надо стерильно добавить 4 мл 2-го раствора и 5 мл 3-го. На этой среде (хорошо растут брюшноггифоэные, паратифозные и дизентерийные микробы, а микробы кишечной палочки роста не дают.

Обработка мембранных фильтров для дальнейшего

их употребления (по М. А. Суражевской, Е. В. Диановой и А. А. Ворошиловой)

Использованный мембранный фильтр надо снять с питательной среды с чашки Петри, промыть в нескольких водах, высушить на бумаге, а затем! подвергнуть обработке одним из следующих способов.

1. Погрузить фильтр в широкий бюкс (или банку с пробкой) скрепкой азотной кислотой до его обесцвечивания (3—30 минут).

2. Опустить фильтр в смесь хлорной извести и азотной кислоты в равном процентном отношении. Концентрации их можно вариировать от 0,1 до 1%. Продолжительность раскрашивания зависит от концентрации

растворов и стелени окрашенности фильтра: при 0,1%> концентрации растворов для этого требуется от 40 минут до 5 часов, при 0,5% концентрации— от 7 минут до 3 часов.

3'. Обработать фильтр смесью хлорной 1 извести и кислого сернокислого натрия, тоже в равном процентном их содержании, в течение от 30 минут (1%) до 3—4 часов (0,5—0,1%).

Обработку фильтров не следует удлинять без нужды.

Обесцвеченные фильтры (следы от колоний бактерий коли не исчезают полностью) надо вынуть, промыть в нескольких водах или же под краном в струе воды в течение дня и кипятить 5—10 минут. Сохранять обесцвеченные фильтры можно сухими. Одну и ту же азотную кислоту можно употреблять много раз. Растворы с хлорной известью следует приготовлять перед употреблением. \

При таком способе обработки фильтров после каждого их употребления ими можно пользоваться до 9—10 раз.

Ф и л ьт ра п п ара т проф. Разумюва состоит из 3 частей: 1) «воронки»—любой стеклянной баночки с отрезанным дном; 2) каучуковой пробки с отверстием сбоку, куда вставляется Г-образная трубка для отсасывания воздуха, и с другим отверстием в середине пробки для сетки и1 фильтра; 3) любой баночки, в которую вставляется эта пробка. Воронка удерживается на пробирке при помощи двух крючков; одним концом крючки забрасываются на воронку, а другим закрепляются вокруг горлышка на нижней баночке.

Е. В. ДИАНОВА и А. А. ВОРОШИЛОВА * »

Жидкие и полужидкие среды с наполнителем (замена агар-агара) для бактериологических работ

Из Центрального санитарного института им. Эрисмана (Москва)

Применение агар-агара для изготовления твердых питательных сред при бактериологических работах связано в большинстве случаев не с питательными свойствами его, а обусловлено лишь его способностью образовывать студень и тем- придавать плотность субстрату. В связи с недостатком' в настоящее время агар-агара делаются попытки заменить его. В Академии коммунального хозяйства разработан метод приготовления твердых питательных сред с кремнекислым гелем, но применение этого метода в широком масштабе затруднено, так как изготовление кремнекислого геля требует соляной кислоты.

Для получения твердых питательных сред без агар-агара или с малым его содержанием мы предлагаем употреблять комбинированные среды: жидкую или полужидкую среду (с 0,3—0,7% агар-агара) в сочетании с каким-нибудь наполнителем!. Наполнитель должен быть нейтральным веществом, обладать в достаточной - степени капиллярными свойствами и сообщать среде твердость. Из наиболее легко доступных и не требующих сложной обработки материалов мы исследовали применение кварцевого песка, измельченного стекла, мелкопористой стеклянной пластинки (как в фильтре Гуга), пористого кирпича, оберточной бумаги, дре'весных опилок, марли и асбеста. Наиболее подходящими наполнителями оказались кварцевый песок, измельченное стекло, мелкопористая стеклянная пластинка, марля и бумага.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.