CC BY
14
^ УДК 614.777:[628.312:547.918:664.1 ]-074:513.044
Э. Д. Мактаз, Л. Е. Ботвинова, Л. И. Горшкова
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ САПОНИНА В ВОДЕ
Киевский НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзеева
Свекловичный сапонин является компонентом сточных вод сахарных заводов. Он переходит в стоки при обработке сахарной свеклы, в которой содержание его достигает 0,1—0,3 %. С очищенными промышленными токами сапонины могут поступать в природные водоемы. Сапонины весьма токсичны для водных организмов, оказывают отрицательное влияние на органолептические качества воды и кислородный режим водоемов. Присутствие сапонина в воде вызывает ее вспенивание. ПДК сапонина в природной воде 0,2 мг/л [2].
Поскольку большинство сахарных заводов расположено на малых реках или прудах, разбавле-*»цие сточных вод невелико, поэтому концентрация сапонина в воде может превышать гигиенический норматив, что вызывает неблагоприятную санитарную ситуацию и нарушение процессов самоочищения в водоеме.
Описанный в литературе колориметрический метод определения сапонина, основанный на цветной реакции с пятихлористой сурьмой [3], используется очень ограниченно из-за малой чувствительности, плохой воспроизводимости, недостаточной стабильности применяемого реактива.
Хроматографические методы анализа (бумажная и тонкослойная хроматография) применяются для разделения и определения сапонинов в растениях [1, 5]. Опыт определения сапонина в виде его производного с помощью хроматогра-^)ического анализа использован в Болгарии для разработки способа его идентификации в воде на основе тонкослойной хроматографии (ТСХ) [4]. Метод весьма трудоемок из-за продолжительности гидролиза (8 ч), не имеет количественного окончания, ке проверен на образцах сточной и природной воды. На основании проведенных исследований можно предложить метод определения сапонина в воде после его гидролиза в кислой среде и последующего выделения с использованием ТСХ. Разработаны оптимальные условия проведения гидролиза сапонина (рН, время, температура, омыляющий агент, объем пробы воды), подобраны оптимальные условия анализа с помощью ТСХ испытуемого соединения (адсорбент, подвижный растворитель), проявления хроматограммы.
Определение заключается в гидролизе сапонина, содержащегося в пробе воды, в среде 2 н. соляной кислоты при кипячении в течение 1 ч, экстракции хлороформом из гидролизата образовавшегося сапогенина и последующем выделении на пластинках «силуфол» в системе этилацетат-
бензол (1 : 1). Следует отметить, что при таком ходе анализа исключается мешающее влияние сахара, который не извлекается хлороформом.
Чувствительность определения 0,02 мг в пробе, что позволяет определять указанное соединение в воде на уровне гигиенического норматива.
Анализ проб природных вод рекомендуется проводить следующим образом, В колбу для гидролиза помещают 100 мл воды, содержащей сапонин, прибавляют 20 мл концентрированной соляной кислоты и кипятят пробу с обратным холодильником 1 ч. После охлаждения экстрагируют образовавшийся сапогенин хлороформом дважды порциями по ¡5 мл. Хлороформный экстракт упаривают в фарфоровой чашке на водяной бане до объема менее 0,5 мл при 50—60 °С и количественно наносят на пластинку «силу-фол» размером 8X12 см с помощью капилляра или микропипетки. Пластинку с пробой помещают в камеру для хроматографии с подвижным растворителем этнлаиетат—бензол (1:1). По окончании процесса хроматографировання пластинку извлекают из камеры, высушивают до удаления паров растворителя на воздухе и проявляют насыщенным раствором треххлористой сурьмы в хлороформе с последующим экспонированием при 110 °С в течение 10 мин. В присутствии сапонина на пластинках проявляется пятно серо-сиреневого цвета с Иг 0,65—0,70. Количественное определение осуществляют денситометрм-чески или путем сравнения площади и интенсивности окраски пятна со стандартами.
Разработанный способ проверен на образцах природной воды. В каждый образец воды вносили сапонин в концентрации 0,2—0,6 мг/л и проводили 6—8 параллельных опытов. Полученные результаты показали, что относительная погрешность определения сапонина в природных водах 5,8—13,9 %. Это позволяет использовать данный способ для контроля содержания данного соединения в водоемах.
Описанный способ был применен для определения сапонина в производственных сточных водах сахарных заводов.
На анализ отбирали 10 мл сточной воды, помещали в пробирку с притертой пробкой, прибавляли 2 мл концентрированной соляной кислоты и выдерживали на кипящей водяной бане 1 ч. После охлаждения образовавшийся сапогенин экстрагировали хлороформом дзажды по 7— 8 мл. Хлороформный экстракт концентрировали, остаток наносили на пластинку «силуфол» и осуществляли хроматографированне, проявление
и количественное определение в описанных выше
условиях.
Вариант анализа сапонина в производственных сточных водах также был проверен способом стандартных добавок. С этой целью после измерения содержания сапонина в пробе сточной воды вносили в нее известное количество сапонина и проводили повторное определение. Результаты этих опытов показали удовлетворительную воспроизводимость способа: относительная погрешность определения сапонина в производственных сточных водах составила 3,5—11,8 %.
Таким образом, предложенный хроматографи-ческий метод определения сапонина после гидролиза его в пробе воды в кислой среде и дальнейшем выделении продукта гидролиза на пластинках «силуфол» в системе этилацетат — бензол (1:1) может быть использован для измерения содержания указанного соединения в
производственных сточных водах сахарной npojfc^. мышленности и природных водоемах. Чувствительность способа 0,02 мг в пробе, что обеспечивает определение сапонина на уровне гигиенического норматива. Метод специфичен для сапонина и может применяться для определения его в воде в присутствии сахара.
Литература
1. Вересковский В. В., Чекалинская И. Н. — В кн.: Съезд фармацевтов БССР. 3-й. Материалы. Минск, 1977, с. 168—169.
2. Крайзман П. С. — В кн.: Санитарная охрана водоемов от загрязнения промышленными сточными водами. М„ 1960, вып. 4, с. 254—263.
3. Нагорная В. В., Жижина Р. Г.. Карташов А. К. — Сахарная пром-сть, 1966, с. 39—44, № 8.
4. Гицова С., Монева М. — Хиг. и здравеоп., 1977, т. 20, № 6, с. 559—562.
5. Kohli Q. С. — J. Chromatogr., 1975, v. 105, р 193—194.
Поступила 22.05.84
УДК в 14.777:615.285.7]-074:543.544
Г. Н. Булычева
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФУНГИЦИДА БАЙЛЕТОНА В ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Рязанский медицинский институт им. акад. И. И. Павлова
Фунгицид байлетон (триадимефон) — бесцветный порошок без запаха, эффективен против ржавчины на зерновых и мучнистой росы на различных растениях. Активное вещество байлето-на 1-(4хлор-фенокси)3,Здиметил-1 (1Н,2,4триазо-лил-1)-2бутанон. Молекулярная масса 293,7, температура плавления 82,3 °С, растворимость в воде 0,026 г действующего вещества на 100 г при 20 °С. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей. Препарат стабилен, не разлагается в течение суток в 0,1 н. серной кислоте или едком натре.
Байлетон выпускается в форме 5 % и 25 % смачивающегося порошка. Рекомендуемая ЦДК для воды водоемов 1,2 мг/л.
Методы определения байлетона в воде отсутствуют, в связи с чем разработан и апробирован в ходе исследовательских работ следующий метод. Предложенный способ определения препарата в воде основан на экстрагировании байлетона из воды органическим растворителем с последующим определением с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках Силуфол.
Пробу воды (200—100 мл) помещают в колбу с пришлифованной пробкой, добавляют н-гексан (10—20 мл) и оставляют на ночь или экстрагируют на аппарате для встряхивания в течение 2 ч. Затем пробу переносят в делительную воронку, добавляют еще 10—20 мл гексана, энергично встряхивают, дают отстояться и отделяют гексан от воды. Объединенный экстракт сушат безводным сульфатом натрия (5—10 г) и упари-
вают на водяной бане при 35—40 °С. Выпаренный остаток растворяют в небольшом количестве гексана и проводят хроматографирование. Для этого на пластинку наносят 0,1 мл растворителя так, чтобы размер пятен не превышал 5—6 мм. Слева и справа от пятен наносят 3— 5 мкг стандартного раствора. Пластинку высушивают и опускают в хроматографическую камеру.
Приготавливают одну из подвижных фаз, на^ ливают на дно камеры, насыщают в течение 25—30 мин и опускают пластинку. Готовую пластинку извлекают из камеры и оставляют на воздухе для просушки. Затем опрыскивают проявляющим реактивом, представляющим собой 0,4 % ацетоновый раствор бромфенолового синего с 2 % водным раствором азотнокислого серебра в равных объемах.
Для осветления фона пластинки после опрыскивания проявителем готовят 2 % водный раствор лимонной (можно уксусной) кислоты. Байлетон проявляется, как правило, в виде двух синих пятен на желтом фоне с Иг 0,22 и 0,56 на пластинке Силуфол. Содержание препарата в анализируемой пробе в миллиграммах на 1 л или в миллиграммах на 1 кг рассчитывают по формуле:
Х =
PSi
где X — содержание препарата в анализируемой пробе (в мг/л); А — количество стандартно-
