CC BY
5
УДК U14.7:615.285.7]-074:543.544
A.A. Красных, М.Ф. Зеленина, В.Ф. Логачев, A.A. Меланьина
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БОТРАНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОЙ ПРОДУКЦИИ
Всероссийский НИИ зашиты растений, пос. Рамонь Воронежской обл.
Ботран (днхлоран, ализан) — 2,6-дихлор-4-нит-роанилин — фунгицид, выпускаемый фирмой «Алд-жон» (США) в форме 75% смачивающегося порошка. Препарат в настоящее время проходит в нашей стране государственные испытания в борьбе с гни-лями на посевах моркови, лука, капусты, подсолнечника и картофеля и в ближайшее время найдет применение в сельском хозяйстве страны.
Ботран среднетоксичен для теплокровных животных. ЬО60 для крыс 500 мг/кг. Трудно растворим в спиртах, хорошо растворяется в ацетоне, хлороформе, этилацетате и других органических растворителях. В отечественной литературе отсутствует описание методик по его определению, которые необходимы для санитарного контроля за содержанием ботрана при его практическом применении. Для определения микроколичеств препарата разработана методика с использованием тонкослойной или газожидкостной хроматографии на хроматографе «Цвет-106» или другой марки с детектором постоянной скорости рекомбинации, который работает по принципу захвата электронов.
При ее разработке экспериментальным путем были подобраны система подвижных растворителей, температурный и газовый режимы, высокочувствительные проявляющие реагенты, а также способ очистки экстракта, который позволяет избавиться от коэкстрактивных веществ, мешающих определению.
Из 200 мл анализируемой воды ботран экстрагируют тремя порциями хлороформа по 40 мл в течение 5 мин. Экстракты объединяют, сушат над безводным сернокислым натрием и концентрируют на ротационном испарителе до объема 0,2—0,3 мл при температуре воды в бане не выше 50 °С. Остаток удаляют в токе воздуха. Из 100 г воздушно-сухой почвы препарат экстрагируют 70 мл ацетона путем встряхивания в течение 1 ч. Экстракт отфильтровывают через бумажный фильтр со слоем безводного сернокислого натрия. Колбу и фильтр промывают тремя порциями того же растворителя по 10 мл.
Экстракт отгоняют на ротационном испарителе до объема 0,2—0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха. Из 25 г измельченной растительной пробы (зеленая масса, капуста, морковь, лук-репка) ботран экстрагируют 50 мл хлороформа или этилаце-тата путем часового встряхивания; 25 г измельченных клубней картофеля заливают до покрытия поверхности хлороформом и оставляют на ночь. Экстракты отфильтровывают, сушат над безводным сернокислым натрием и отгоняют до неболь-
шого (0,2—0,3 мл) объема на ротационном ис- I парителе. Остаток удаляют в токе воздуха.
Сухой остаток из почвы и растительного материала растворяют в 5 мл ацетонитрила, добавляют 50 мл дистиллированной воды и отфильтровывают через плотный бумажный фильтр. Из водно-ацето-нитрильного раствора ботран экстрагируют н-гексаном трижды по 40 мл 3 мин. Экстракт объединяют, сушат над безводным сернокислым натрием и отгоняют на ротационном испарителе до объема 0,2—0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха. При определении препарата тонкослойной хроматографией сухой остаток растворяют в 0,1—0,2 мл хлороформа или ацетона и количественно переносят на пластинку «БПиЫ», стенки колбы смывают несколькими каплями растворителя, который наносят в центр пятна. Справа наносят стандартные растворы ботрана. Хроматографирование проводят в системе подвижных растворителей гексан — ацетон в соотношении 5:1 по объему. После подъема фронта подвижного растворителя на высоту 10 см пластинку вынимают из камеры и сушат на воздухе до удаления паров растворителя. После этого ее в I течение 5 мин выдерживают в камере, насыщенной парами окислов азота, которые получают следующим образом. В стаканчик на дне камеры помещают 2—3 г кристаллического нитрита натрия, к которому осторожно приливают 20 мл 20% соляной кислоты, после чего камеру закрывают крышкой. Пластинку вынимают из камеры и опрыскивают свежеприготовленным 1% раствором а-нафтилами-на в этаноле. При наличии ботрана на белом фоне проявляются ярко-красные пятна с ИГ 0,45—0,47.
Количественное определение проводят путем сравнения размера пятен проб и стандартных растворов. При определении ботрана газохроматогра-фически очищенный сухой остаток растворяют в 5—10 мл ацетона и 2—5 мкл раствора вводят в испаритель хроматографа. Температура колонки 130 °С, испарителя 240 °С, детектора 190 °С. Расход газа-носителя (азота) 60 мл/мин. Шкала электрометра 20 X Ю-12, скорость движения ленты самописца 200 мм/ч, время удерживания 8 мин 25 с. При работе используют стеклянную колонку длиной 1000 мм и внутренним диаметром 3 мм, заполненную 5% БЕ-ЗО на хроматоне Ы-АШ-ЭМСБ (0,20—0,25 мм). Стандартные растворы ботрана с содержанием 1 и 100 мкг препарата в 1 мл ацетона хранят в холодильнике. Нижний предел определения при газожидкостном определении 1—2 нг, при хроматографическом в тонком слое — 1—2 мкг препарата в пробе.
Поступила 19.07.83
М
