CC BY
19
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro HaqioHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHoi' mcahuuhh Ta 6ioTexHonorm iMeHi C.3. I^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S.Z. Gzhytskyj
doi: 10.15421/nvlvet6614
ISSN 2413-5550 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 619:615.099.036.11:632.954:639.122
Гостра токсичшсть глiфосату для перепелiв
Р.В. Доценко toxi-lab@ukr.net
Нацюнальний науковий центр «1нститут експериментальног1 кл1н1чног ветеринарной медицини»,
вул. Пушюнська, 83, м. Харюв, 61023, Укра'та
У статт1 висвгтленг дат щодо встановлення гострог токсичностг гербщиду глгфосату для перепелгв за перорального введення. Глгфосат - гербщид Iз широким спектром активностг. В експериментах використовували гпгфосат у форм1 препарату калтног сол1 з концентращею 676 г/дм3. Експерименти були проведенI на 91 самиц перепелу породи Техаський середньою масою (200,0 ± 20,0) г, щоутримувались за оптимальнихумов вгваргю. За принципом аналоггв було сформовано 4 дослгднг групи, яким вводили глгфосат у форм1 водног емульсп у дозах - 50, 500, 2000, г 5000 мг/кг маси тта. За клгнгчним станом дослгдног птиц спостерггали упродовж 14 дгб. Вгдзначали появу та розвиток клтчних ознак отруення, строки загибелг або вгдновлення до фгзюлоггчног норми. Одноразове внутргшньошлункове введення водног емульсп глгфосату перепелам I - III дослгдних груп не викликало картини гострого отруення. У птиц IV дослгдног групи протягом перших шести годин дослгду реестрували поступовий розвиток пригшчення. За гострого отруення у перепел1в виявляли пригшчення, слаб-ку реакцж на зовтшш подразники, сидтня на одному мгсцг. Загибель птиц вгдзначали у цш груш протягом першог доби тсля введення глгфосату. На патологоанатомгчному розтиш встановили: вгдсутшсть змгн слизових оболонок ротовог порожнини, трахег глотки та стравоходу; печтка збтьшена, кровонаповнена, темно—вишневого кольору, жовчевий мгхур наповнений жовчю, судини тонкого кишечнику кровонаповнеш, вгдзначали здуття слтих вгдростюв товстого кишечнику; нирки збыьшенг в об'емг поргвнянно з контрольною групою. За результатами загибелг перепелгв вираховували ВЬ50, яка становила 5039,11 ± 222,96мг/кг, що дае тдставу вгднести гпгфосат зггдно з гшетчною класифгкацгею пестицидгв за Л. I. Медведем та ДСП 8.8.1.2.002-98 до речовин мало токсичних (4-й клас небезпеки).
Ключовi слова: глгфосат, перепели, гостре отруення, Ь050, гербщиди
Острая токсичность глифосата для перепелов
Р.В. Доценко toxi-lab@ukr.net
Национальный научный центр «Институт экспериментальной и клинической ветеринарной медицины»,
ул. Пушкинская, 83, г. Харьков, 61023, Украина
В статье освещены данные по установлению острой токсичности гербицида глифосата для перепелов после перорального введения. Глифосат — гербицид с широким спектром активности. В экспериментах использовали глифосат в форме препарата калийной соли с концентрацией 676 г / дм3. Эксперименты были проведены на 91 самке перепелов породы Техасский средней массой (200,0 ± 20,0) г, которые содержались при оптимальных условиях вивария. По принципу аналогов было сформировано 4 подопытных группы, которым вводили глифосат в форме водной эмульсии в дозах - 50, 500, 2000, и 5000 мг/кг массы тела. За клиническим состоянием подопытной птицы наблюдали в течение 14 суток. Отмечали появление и развитие клинических признаков отравления, сроки гибели или восстановления к физиологической норме. Однократное внутрижелудочное введение водной эмульсии глифосата перепелам I — III подопытных групп не вызвало картины острого отравления. В птицы IV опытной группы в течение первых шести часов опыта установили постепенное развитие угнетения. При остром отравлении у перепелов отмечали угнетение, слабую реакцию на внешние раздражители, сидение на одном месте. Гибель птицы отмечали в этой группе в течение первых суток после введения глифосата. На вскрытии установили отсутствие изменений слизистых оболочек ротовой полости, трахеи, глотки и пищевода, печень увеличена,
Citation:
Dotsenko, R.V. (2016). Acute toxicity glyphosate for quails. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj, 18, 2(66), 65-69.
наполнена кровью, тёмно—вишнёвого цвета, желчный пузырь наполнен желчью, сосуды тонкого кишечника наполнены кровью, отмечали вздутие слепых отростков толстого кишечника; почки увеличены в объёме по сравнению с контролем.
По результатам гибели перепелов вычисляли DL50, которая составила 5039,11 ± 222,96 мг/кг, что даёт основание отнести глифосат согласно гигиенической классификации пестицидов по Л.И. Медведю и ДСП 8.8.1.2.002-98 к веществам мало токсичным (4 —й класс опасности).
Ключевые слова: глифосат, перепела, острое отравление, LD50, гербициды
Acute toxicity glyphosate for quails
R.V. Dotsenko toxi-lab@ukr.net
National Scientific Center «Institute of Experimental and Clinical Veterinary Medicine», Pushkinska Str., 83, Kharkiv, 61023, Ukraine
The article deals with the data on the establishment of acute toxicity herbicide glyphosate for quail for oral administration. Glyphosate — the herbicide with broad spectrum of activity. In experiments it was used glyphosate in the form ofpotassium salt preparation with the concentration of 676 g/dm3. The experiments were carried out on 91 female of Texas quail breeds the average weight is (200.0 ± 20.0) g, and were kept under optimal conditions of vivarium. According to the principle of analogues were formed 4 experimental groups, which were administered glyphosate in the form of an aqueous emulsion in doses — 50, 500, 2000, and 5000 mg/kg of body weight. For clinical state of the research poultry it was observed for 14 days. It was noted the emergence and the development of clinical signs of poisoning, term loss or recovery period to physiological norm. A single intragastric administration of water glyphosate emulsion to quail of I — III research groups caused no picture of acute poisoning. In the poultry from the experimental group during the first six hours of the experiment it was recorded gradual growth inhibition. For acute poisoning in quail it was showed depression, poor response to external stimuli, sitting in one place. Poultry death was observed in this group during the first day after the introduction of glyphosate. On pathoanatomical autopsy it was established that the absence of the oral cavity mucous membranes changes, pharynx trachea and esophagus; increased liver, filled with blood, dark cherry colour, gallbladder filled with bile, blood supply vessels of the small intestine, it was observed swelling of the blind shoots the colon; kidneys increased in volume compared to the control group swelling of the large bowel; kidneys increased in volume compared to the control group. According to the results of the quail death DL50 was calculated, which was 5039.11 ± 222.96 mg/kg, which gives reason to include glyphosate according hygienic classification ofpesticides for L.I. Medvedj and DSP 8.8.1.2.002—98 to little toxic substances to (4th class of danger).
Key words: glyphosate, a quail, acute toxic exposure, LD50, herbicides
Вступ
^фосат [Ы-(фосфонометил)-глщин] - гербщид iз широким спектром активносп. В Украш щорiчне застосування гербщидних препарапв на основi тфо-сату становить 1-1,5 тис. тонн. Застосування гафоса-ту на зернових, кукурудз^ соняшников^ со! може призводити до його потрапляння в рослини, а звщти у корми для сшьськогосподарських тварин, зокрема птищ (Kuznetsova et а1., 2010).
Визначення гостро! токсичносп пестицидiв приз-начено для одержання первинно! шформацп щодо небезпечносп дослвджувано! речовини. Тому метою нашо! роботи було визначити гостру токсичшсть гль фосату на моделi перепел1в Техаських.
Матерiал i методи дослщжень
В експериментах використовували глiфосат у пре-паративнш формi калшно! солi з концентращею 676 г/дм3. Експерименти були проведет на 91 самищ перепелу породи Техаський середньою масою 200,0 ± 20,0 г, що утримувались за оптимальних умов вiварiю. Птиця мала вшьний доступ до води та корму.
Визначення дiапазону доз для основного експери-менту проводили у попередньому дослщ. За принципом аналопв було сформовано 4 дослвдш групи, яким вводили глiфосат у формi водно! емульси у дозах -50, 500, 2000, i 5000 мг/кг маси тша. В основному
експерименп за принципом аналопв було сформовано 7 дослвдних груп птищ з такими дозами - 3500, 4000, 4500, 5000, 5500, 6000 i 6500 мг/кг маси тша. Також було сформовано двi контрольш групи птищ. У кожнш груш було по 7 перепелiв (n = 7).
Дослвди проводили ввдповвдно до юнуючих нор-мативних документа (Council Directive 86/609/EEC of 24 November 1986 on the approximation of laws, regulations and administrative provisions of the Member States regarding the protection of animals used for experimental and other scientific purposes // Offical Journal of the European Communities L 358, 1-29), що регламентують оргашзацш робгг i3 використанням експериментальних тварин i дотриманням принцитв «Свропейсько! конвенци про захист хребетних тва-рин, що використовуються в експериментальних та шших наукових щлях» (Страсбург, 1986).
За клшчним станом дослвдно! птищ спостер^али упродовж 14 дiб. Вiдмiчали появу та розвиток клшч-них ознак отруення, строки загибелi або вадновлення до фiзiологiчноl норми. Шсля загибелi птищ проводили патологоанатомiчний розтин. Для встановлення патологоанатомiчних змш використовували макрос-котчний суб'ективний метод досл1джень (Zharov et al., 2003).
За результатами загибелi вираховували DLi6, DL 50, DL 84, DL 100 та похибку DL50 методом пробiт-аналiзу у модифжацп В. Б. Прозоровського (Prozorovskij, 2007). Отриманi результати обробленi методами варь
ацшно! статистики з використанням пакета програм StatPlus 5.9.8.5. Даш наведет у виглад середнiх зна-чень зi стандартним ввдхиленням за рiвня довiрчо! ймовiрностi 95%.
Результати та ix обговорення
У попередньому дослiдi клiнiчнi спостереження показали, що одноразове внутршньошлункове вве-дення водно! емульси гафосату перепелам I - III дослвдних груп не викликало картини гострого отру-
Динамжа загибелi перепелiв у попередньому дослiдi
ення. Птиця була активною, добре реагувала на зов-шшш подразники, активно споживала корм та воду. У птищ IV дослвдно! групи протягом перших шести годин дослвду реестрували поступовий розвиток при-гнiчення. Загибель птицi ввдзначали у цш групi протягом першо! доби пiсля введения глiфосату (табл. 1).
В основному дослщ пвд час спостереження за перепелами I дослвдно! групи не ввдзначали картини гострого отруення. Птиця була активною, добре реа-гувала на зовшшш подразники, активно споживала корм та воду.
Таблиця 1
Строки загибелi птищ,через Групи птищ i дози пестициду, мг/кг маси тша
I (50,0) II (500,0) III (2000,0) IV (5000,0)
0 - 3 год - - -
3 - 12 год - - 3
12 - 24 год - - - 1
2 доба - - - -
3 доба - - - -
4 -14 дiб - - -
Усього загиблi - - - 4
У птищ II - VII дослвдних груп протягом перших трьох годин дослвду виявляли поступовий розвиток пригшчення. Ввдзначали слабку реакщю на зовшшш подразники, птиця сидша на одному шсщ. Загибель птицi спостерiгали протягом першо! доби тсля вве-дення глiфосату (табл. 2).
У перепелiв, що залишилися живими протягом першо! доби, спостер^али загальне пригнiчення, ввд-сутнiсть апетиту. На 2-у добу виявляли поступову нормалiзацiю загального стану птищ. На третю добу в перепелiв не виявляли ознак отруення, i в наступнi днi !х загальний стан не вiдрiзиявся ввд стану птицi контрольно! групи.
Динамжа загибелi перепелiв в основному дослвд за
Пiсля загибел1 птищ проводили патологоанатомiч-ний розтин. Зовшшнш вигляд трупiв птицi перед розтином: змш видимих слизових оболонок i пiр'яного покриву не вiдзначали. На розтиш встано-вили вiдсутнiсть змш слизових оболонок ротово! порожнини, трахе! глотки та стравоходу; печiнка збвдьшена, кровонаповнена, темно-вишневого кольо-ру, жовчний мiхур наповнений жовчю, судини тонкого кишечнику кровонаповнеш, вiдмiчали здуття сл1-пих ввдростшв товстого кишечника; нирки збiльшенi в об'емi порiвняно з контрольною групою.
Таблиця 2
Строки загибелi птищ, через
0 - 3 год 3 - 12 год 12 - 24 год 2 доба 3 - 14 дiб Усього загинуло
I (3500,0) - - - - - -
II (4000,0) - 1 - - - 1
III (4500,0) - 1 1 - - 2
IV (5000,0) - 2 2 - - 4
V (5500,0) - 4 - - - 4
VI (6000,0) - 3 3 - 6
VII (6500,0) 2 4 1 - - 7
о й
(U Н
К
S s
Я Ö
л
[—1
Наступним етапом вивчення токсикологiчних характеристик глiфосату було визначення середньоле-тально! дози та !! стандартно! похибки (DLi6, DL50, DL84, DLi00). Середньолетальну дозу DL50 розрахову-вали за методом пробiт-аналiзу в модифшаци за Про-зоровським В.Б.
Токсикометричнi параметри розраховували за методом найменших квадрапв для пробiт-аналiзу кри-вих летальности Встановлено вiдсоток летальностi, пробiти (Y), ваговi коефiцiенти пробiтiв (Z). Для по-будови графiка, обчислення DL50 та Г! помилки вико-
ристовували формулу (1) прямо! пропорцшно! залеж-ност1:
Y = A + В X (1),
де: X - аргумент (м1сце дози), Y - функщя (пробгт), А - вихвдна точка на оа ввдсотшв проти дози 1, B - коефщент пропорцшносп.
Коефщенти А i В знаходили i3 системи р1внянь другому ступеня: (ЕК) A + (ЕХК) В = (EYK) (ЕХК) A + (ЕХ2К) В = (EXYK).
Для побудови графжа на осi абсцис вщкладали значення доз, а на оа ординат — значення ефекту (%). Графiчне зображення криво!, що вщображае за-лежнiсть «доза-ефект» для перепелiв (самок) представлено на рис. 1.
Проб1т-аналЬ
Стимул (Доза)
- Пряма perpecii (3 глад женин)
■Ж— Експериментальн1 точки
Рис. 1. Крива летальност перепелiв за умов одноразового введення птфосату
Результати обчислення середньолетально! дози глiфосату для перепелiв самок за умов перорального введення наведено у таблиц 3.
За результатами дослщжень встановили, що DL50 глiфосату за одноразового перорального уведення складае 5039,11 ± 222,96 мг/кг, DL 16 - 4106,40 мг/кг,
LD84 - 5971,83 мг/кг, LD100 - 6438,19 мг/кг маси тша вiдповiдно.
Отже, згiдно з ппешчною класифiкацiею пестици-дiв за Л. I. Медведем (Medved et al., 1987) та за Дер-жавними санiтарними правилами 8.8.1.2.002-98 rai-фосат за ступенем токсичностi слш вiднести до речо-вин малотоксичних (4-й клас небезпеки).
Результати обчислення
Таблиця 3
Стимул (Доза) Вщсоток (%) N Пробп- (Y) Ваговий коефщь ент (Z)
3500 0,0357 7 3,1968 1,3937
4000 0,1428 7 3,9324 3,2972
4500 0,2857 7 4,4344 4,3688
5000 0,5714 7 5,1796 4,8203
5500 0,5714 7 5,1796 4,8203
6000 0,8571 7 6,0675 3,2972
6500 0,9643 7 6,8031 1,3937
Регресшна статистика
DL 50 5039,11 DL50 Стандартна похибка 222,96
DL 16 4106,39
DL 84 5971,82
DL 100 6438,18
Висновки
За результатами дослщжень встановили, що LD50 глiфосат за одноразового перорального введення перепелам (самкам) складае 5039,11 ± 222,96 мг/кг маси тша, що дозволяе вшнести його зпдно з ппешчною класифшащею пестицидiв за Л.1. Медведем (1987) та Державними сашгарними правилами 8.8.1.2.002-98 до речовин малотоксичних (4-й клас небезпеки).
Клiнiчнi симптоми гострого отруення глiфосатом перепелiв Техаських проявляються пригнiченням,
слабкою реакцiею на зовшшш подразники, сидiнням на одному шсщ. Патологоанатомiчна картина за умов гострого отруення глiфосатом характеризуеться такими змшами, як темно-вишневим кольором i зб№-шенням печiнки, кровонаповненням судин тонкого кишечнику, здуттям слiпих вщростшв товстого кишечнику; збiльшенням в об'емi нирок порiвнянно з контролем.
Перспективи подальших дослгджень. Визначення параметрiв токсикокшетики та токсикодинамiки rai-фосату для перепелiв.
EiS^iorpa^inm iIOCII. lanim
Kuznetsova, E.M., Chmyl, V.D. (2010). Hlyfosat: povedenye v okruzhaiushchei srede y urovny ostatkov. K.: SPT. 1, (48), 87 - 95 (in Russian).
Zharov, A.V., Ivanov, I.V., Strel'nikov, A.P. (2003). Vskrytie i patomorfologicheskaja diagnostika boleznej zhivotnyh. M.: Kolos (in Russian).
Prozorovskij, V.B. (2007). Statisticheskaja obrabotka rezul'tatov farmakologicheskih issledovanij. Psihofarmakologija i biologicheskaja narkologija. 7(3 - 4), 2090 - 2120 (in Russian). Medved, L.I., Kagan, Yu.S., Spyn, E.I. (1987). Gigienicheskaja klassifikacija pesticidov po osnovnym parametram vrednosti. Veterinarnaja toksikologija. 187 (in Russian).
Cmammn nadiümna do peda^ii 1.09.2016
