УДК 636. 4. 087.72
БИОПЛЕКС МЕДЬ В КОРМЛЕНИИ СВИНЕЙ НА ОТКОРМЕ И ВЛИЯНИЕ НА ГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ СТРУКТУРЫ ТОНКОЙ КИШКИ, СЕЛЕЗЕНКИ, ЛЕГКОГО,
ПОЧЕК, ЖЕЛУДКА И ПЕЧЕНИ.
В.П. Надеев, к. с. - х.н., ФГБУ «Поволжская МИС»
М.Г. Чабаев, д. с. - х.н., профессор, Всероссийский НИИ животноводства
Р.В. Некрасов, канд. с. - х.н., доцент Всероссийский НИИ животноводства
М.И. Клементьев, канд. с.-х. н., младший научный сотрудник, Всероссийский НИИ животноводства
В питании сельскохозяйственных животных значение минеральных веществ, чрезвычайно велико, хотя они не имеют энергетической ценности, что объясняется большой ролью, которую они играют во всех процессах обмена веществ, происходящих в организме [1].
Дефицит минерального питания является одним из главных причин, сдерживающих интенсивность выращивания и откорма свиней [4].
Поэтому в исследованиях последних десятилетий решение проблем, связанных с минеральным питанием свиней, вызывает особенно большой научный и практический интерес [5].
В связи с необходимостью более интенсивного использования животных, в условиях промышленного производства продуктов
животноводства требуется дальнейшее изучение и совершенствование норм белкового, жирового, витаминного, но и особенно минерального питания [2]. В последние 10 - 12 лет на рынке кормового сырья появились органические соединения металлов « Биоплекс медь» и др. «Оллтек» (США).
Биоплекс медь - кормовая добавка, в котором действующим веществом является органические (хелатные) соединения меди, и протеинов -протеинаты меди, полученные путем инкубирования соли меди с очищенным
гидролизатом протеинов сои. Содержание меди в пересчете на чистый элемент составляет не менее 10 %, очищенный гидролизат протеинов сои - не менее 90 %.
Нами был проведен научно-хозяйственный опыт по скармливанию органической формы микроэлемента «Биоплекс» медь свиньям на откорме. Данная органическая форма микроэлемента более приближена к протеину -минеральным комплексам, присутствующим в тканях животных.
Целью нашей работы явилось изучение влияния различных источников микроэлементов (сернокислая медь и Биоплекс медь) на прирост живой массы, морфологический состав крови и на гистологическую структуру внутренних органов откармливаемого молодняка свиней.
Научно - хозяйственный опыт был проведен на племзаводе «Гибридный» ЗАО «Свинокомплекс «СВ. Поволжское». Для исследования сформировали четыре группы свиней по 10 голов в каждой группе (табл. 1).
1. Схема опыта
Группа Кол-во голов Характеристика кормления
I - контрольная 10 Полнорационный комбикорм (ПК) с 40 г/т сернокислой меди
II - опытная 10 ПК с 20 г/т сернокислой меди
III - опытная 10 ПК с 50 г/т «Биоплекс медь»
IV - опытная 10 ПК с 100 г/т «Биоплекс медь»
При этом первая контрольная группа получала в пересчете на чистый элемент 9,48 г/т сернокислой меди, что соответствует нормам ВИЖ для этой возрастной категории [3].
Вторая опытная группа в составе комбикорма получала в пересчете на чистый элемент 4,74 г/т сернокислой меди.
Свинкам третьей и четвертой опытных групп скармливали в пересчете на чистый элемент соответственно 10 и 20 г/т меди в виде хелатного соединения в составе препарата Биоплекс Медь.
При проведении научно - хозяйственного опыта откармливаемые свиньи в составе полнорационного комбикорма получали разработанные нами премиксы (таблица 2).
2. Рецепт 1 % премикса для откармливаемых свиней
Компонент Количество (на 1 тонну корма), г
I - контрольная II - опытная III - опытная IV - опытная
Витаминов: А, тыс. МЕ 500 500 500 500
Б, тыс.МЕ 50 50 50 50
Е, г 500 500 500 500
К г 150 150 150 150
Ві г 50 50 50 50
В2 г 200 200 200 200
Вз г 500 500 500 500
В4 г 15000 15000 15000 15000
г В 1300 1300 1300 1300
В г 50 50 50 50
г г5 и 2,5 2,5 2,5 2,5
Марганец, г 400 400 400 400
Железо, г 2000 2000 2000 2000
Цинк, г 2000 2000 2000 2000
Иод, г 40 40 40 40
Селен, г 20 20 20 20
Кобальт, г 50 50 50 50
Сернокислая медь, г 4000 2000 - -
«Биоплекс медь», г - - 5000 10000
Наполнитель (отруби) До 1000 До 1000 До 1000 До 1000
Наибольшей интенсивностью роста обладали откармливаемый молодняк свиней III опытной группы, получавших в составе комбикорма 50 г/т Биоплекс медь (табл.3). В этой группе животных среднесуточный прирост живой массы составил 836 г, или на 4,5 % выше по сравнению с контрольными животными, получавшими сернокислую медь в количестве 40 г/т комбикорма.
3. Живая масса и затраты корма (в среднем на 1 гол.)
Показатель Группа
I- контрольная II - опытная III - опытная IV -опытная
добавки
ПК * + 40 г/т сернокислой меди ПК + 20 г/т сернокислой меди ПК + 50 г/т Биоплекс медь ПК + 100 г/т Биоплекс медь
Живая масса, кг:
-в начале опыта 30,8±0,2 31,0±0,2 30,8±0,2 30,8±0,2
-в конце опыта 98,8±1,6 97,8±1,5 101,9±1,8 99,1±2,8
Прирос живой массы: -абсолютный, кг -среднесуточный, г 68,0 800±18,1 66,8 786±20,5 71,1 836±20,5 68,3 803±34,4
В % к контрольной группе 100,0 98,3 104,5 100,6
Затрачено комбикорма на 1 кг прироста, кг 3,33 3,39 3,18 3,31
В % к контрольной группе 100,0 101,8 95,5 99,4
• ПК - полнорационный комбикорм;
Увеличение дозы ввода «Биоплекс медь» с 50 г до 100 г на тонну комбикорма привело к уменьшению среднесуточных приростов на 3,9 %, или на 33 г на гол./сутки. Это свидетельствует о том, что уровень 50 г/т Биоплекс медь полностью удовлетворяет потребности откармливаемого молодняка свиней в этом микроэлементе.
Таким образом, оптимальной нормой ввода «Биоплекс медь» в комбикорма для откармливаемого молодняка свиней является 50 г/т.
Характеризуя затраты комбикормов на производство 1 кг живой массы, необходимо отметить, что в III опытной группе животных, получавших 50 г/т «Биоплекс медь», они были наименьшими. Разница по затратам составила 4,7 % по сравнению с контрольными животными.
В конце опыта были определены некоторые биохимические показатели крови свиней контрольной и опытных групп, которые использованы нами в качестве биохимического контроля над полноценностью минерального питания (табл.4). Из большого числа биохимических показателей крови, применяемых для оценки состояния обмена веществ, мы остановились на
определении тех, которые по - нашему мнению, позволяют судить об интенсивности обмена.
Исследования показали, что добавки в комбикорм минеральных добавок не оказали заметного влияния на биохимические показатели крови.
4. Биохимический профиль сыворотки крови подопытных животных
Показатель Группа
I II III IV
Общий белок, г/л 7б,00±3,40 7S,7S±3,2S 7S,S1±2,96 76,11±2,S4
Альбумины, г/л 31,60±2,SS 31,4S±2,26 31,41±2,2S 31,4S±2,41
Глобулины, г/л 44,4S±2,19 44,30±2,3б 44,40±2,4б 44,бЗ±2,20
Глюкоза, моль/л 4,26±1,0S 4,30±0,9б 4,S0±1,26 4,53±l,44
АЛТ, МЕ/л S0,1S±4,64 49,SS±S,02 49,9б±4,9б S0,0±S,01
АСТ, МЕ/л 40,1б±1,9б 39,S9±1,S0 40,S6±1,6S 41,0±1,72
Кальций, ммоль З,19±0,02 3,22±0,0б 3,1б±0,04 3,20±0,04
Фосфор, ммоль 4,0б±0,4б 4,0б±0,3б 4,07±0,42 4,03±0,3S
Можно отметить лишь незначительное увеличение по сравнению с контрольной группой (3,19 ммоль) содержание кальция в IV - опытной группе (3,20 ммоль), хотя общее содержание кальция во всех группах было ниже нормы. Концентрация альбуминов, глобулинов во всех группах было в норме.
Исследования свидетельствуют, что при скармливании опытным животным III и IV групп органической формы меди, выявлено некоторое увеличение глюкозы на 6,3 % и фермента АСТ на 2,1 % по сравнению с контрольной группой.
Анализ полученных данных показывает, что белковый состав крови мало изменяется от применения в рационе различных минеральных источников.
В конце научно-хозяйственного опыта был проведен забой поросят по три головы с каждой группы.
Гистологические исследования внутренних органов проведены на кафедре общей и клинической патологии Самарского государственного медицинского университета и в ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии.
б
У поросят опытных групп в гистологических препаратах тонкого отдела кишечника хорошо обозначены ворсинки кишки и крипты, дно которых лежит на собственном соединительно - тканом слое. Выстилает кишечную стенку высокий слой призматического эпителия, внутри ряда его клеток видны бокаловидные как бы «пузырьки» - клетки, выделяющие слизь. Либеркюновые железы, принимающие участие в переваривании пищи (рис.1), погруженные в толщу стенки кишки, собранны в основании слизистой оболочки и принимают участие в переваривании пищи. Промеры структур тонкого кишечника опытной свинки показаны в рисунке 1.
1. Гистологический срез тонкого отдела кишечника опытной свинки 396.На внутренней поверхности выходят ворсинки, в толщу кишки углубляются кристы, заканчивающимися Либеркюновыми железами (стрелка) Гематоксилин- эозин. Объектив 10х, ОК. - 7х.
5. Параметры структур тонкого кишечника, ц (ц2)
Размеры п Размер продольный, ц Периметр, Площадь, 2 Ц Размер поперечный, Ц
Ворсинки 25 258,1±12,47 117 ±4,41
Эпителий 30 29,6±1,19
Каёмочный слой поверхностного эпителия 25 10,12±0,48
Крипты 25 103,9 ±9,3 30±1,9
Либеркюновы железы 25 23,94 ±0,63 70,77±1,77 345±17 19,73±0,55
Мускульная оболочка Циркуляр 212,0±5,31
Продольн 220,9±2,7
Из таблицы 5 видно, что толщина, ворсинок составляет 117 мкм и состоит из покровного слоя эпителия и тканевой основы. При этом только толщина эпителиального слоя составляет 29,6 мкм. В криптах он уплощается почти наполовину, так что их диаметр, складывающийся из двух противолежащих слоёв, составляет 30 мкм. Дно крипт, или как их именуют Либеркюновые железы, достаточно миниатюрны, и их размеры составляют 19,7 мкм.
У подсвинков опытных групп, в селезенке довольно часто встречаются мальпигиевы тела, ответственные за выработку лимфоцитов (рис. 2).
2. Гистологический срез селезенки свинки 396.
Стрелкой указано Мальпигиево тельце. Гематоксилин- эозин.
Ув.- Объектив 10х; Ок-7х.
Видны внутренние структуры органа, указывающие на его жизненно важную роль в кроветворной функции, в резервировании необходимых запасов крови, а также в выработке антител и некоторых других биологически важных веществ. Между трабекулами располагается красная пульпа это подвижный компонент состава органа, за счет которого организм
мобилизует свой энергетический потенциал в ответ на те или иные стрессовые ситуации в процессе жизнеобеспечения.
В структуре почек животных опытных групп, обращали на себя внимание основные элементы фильтрующей функции - это клубочковая система в области коркового вещества. При большом увеличении можно было видеть сложную структуру почечного тельца - составленную из нескольких участков внутреннюю пульпу, которая на выходе из клубочка продолжается в следующем слое протоковой системы. На площади
коркового вещества почки равной 1кв мм встречалось ~ 12 почечных телец.
Канальная ткань мозгового слоя почки представлена системой вытянутых пустотелых образований, отводящих мочу в зону почечной лоханки.
Скармливание подсвинкам органической формы меди не сказалось отрицательно на работоспособности мочевыделительной системы (рис 3).
3. Гистологический срез почки опытной свинки 396.
Стрелкой указано почечное тельце. Гематоксилин- эозин. Ув-Объектив 16х; ОК-7х
В таблице 6 показаны средний диаметр, периметр и площадь почечных телец, а также размеры канальцев коркового слоя и диаметр канальцев мозгового слоя.
6. Промеры почечных структур, ц (ц )
Показатели Размеры почечных телец
диаметр - мин. диаметр - сред. периметр площадь
М(п=50) 78,49 92,65 300,43 6395,71
±т 5,81 5,88 19,34 769,09
Размеры канальцев коркового слоя
М(п=50) 31,04 46,54 152,47 1299,37
±т 1,75 2,46 8,80 116,76
Диаметр канальцев мозгового слоя
М(п=50) 19,26
±т 0,82
Одним из основных барьеров поступлений веществ извне является печень. Ее роль достаточно многогранна, но для данного исследования наибольшее значение имели её функции, как пищеварительной железы и фильтра и усвоения питательных веществ рациона.
Гистологическая структура печени свидетельствует о её вполне нормальном состоянии и активной деятельности (рис. 4). На рисунке видны края печёночных долек обращенные к венозному протоку. Из центра долек отходят печёночные балки, строящиеся из печёночных клеток, гепатоцитов. Внутри каждой клетки развито ядро, управляющее всеми её жизненными процессами. В печеночных балках образуется желчь, стекающая к желчным ходам и через желчное депо (желчный пузырь) поступающая в 12 - перстную кишку. В гепатоцитах формируется резерв гликогена и обеспечивается сложная цепь процессов усвоения питательных веществ рациона и фильтрации против неблагоприятных химических воздействий.
Рисунок 4 Гистологический срез печени опытной свинки 396.
Гематоксилин- эозин. Ув.- Объектив 16х; - ОК-7х
Гистологическая структура печени свидетельствует о её нормальном состоянии и активной деятельности.
В итоге следует, что печень отражает благополучие организма, и его структура в этом отношении служит важным показателем в оценке условий кормления и содержания животных (табл.7). В таблице показаны морфологические признаки развития печени.
7. Промеры печёночных клеток, ц (ц2)
Показатели Клеточные ядра Толщина печёночн. балок
диаметр- минимум диаметр- средний периметр площадь
М(п=50) 4,35 5,40 17,13 20,32
±m 0,0S 0,13 0,42 1,11
Гепатоциты
М (n=S0) S,74 12,99 41,9б 117,3 13,4
±m 0,3S 0,3S 1,24 21,6 0,06
Незначительные структурные изменения в организме произошли у животных контрольной группы. Это хорошо видно на рисунках S,6 и таблицах S,9,10.
Дольки печени имеют многоугольные формы примерно одинаковых размеров, балочная структура не нарушена. Гепатоциты с зернистой цитоплазмой, встречаются единичные двуядерные на периферии долек. Ядра гепатоцитов по сравнению с животными опытной группы меньшей величины 117,3 ±21,б и Sl,02 ± 6,2s.
5. Гистологический срез паренхимы печени контрольной
х
подсвинки № 20. Гематоксилин-эозин Ув.-. Объектив 16 ; ОК-7х
2
8. Промеры печёночных клеток, ц (ц )
Показатель Клеточные ядра Толщина печёночн. балок
диаметр- минимум диаметр- средний периметр площадь
М (п=50) 4,32 5,40 17,13 20,32 -
±т 0,12 0,13 0,42 1,11 -
Гепатоциты
М (п=50) 8,74 11,04 35,27 81,02 13,40
±т 0,38 0,38 1,23 6,25 0,40
Рисунок 6.Гистологический срез тканей желудка подсвинки №20 Гематоксилин-эозин. Ув.- Объектив 2.5х; ОК-7х
9. Толщина мускульных слоев желудка, ц (ц2)
Показатель Толщина
циркулярного внешнего продольного
М (п=25) 747,5 864,6
±т 17,6 16,8
10. Промеры слоёв желудка и кишечника, контрольной и _______________опытной группы, д______________________
Материл Толщина слоёв
слизисто- го базальной основы слизистого мускульного
циркуляр ного продоль- ного
Контроль №20 желудок 460,2±31,5 215,9±21,75 747,5±17,6 864,6±16,8
кишечник 369,6±24,7 73,21±4,76 144,8±5,1 169±15,0
Опытная №396 желудок - - 412,2±32,9 1666±10,8
кишечник 565,9±12,2 63,41±7,67 212,0±5,31 220,9±2,7
Увеличение продольного мускульного слоя желудка опытных животных
может быть вызвано наличием минерального ингредиента в пищевой добавке.
В контрольной группе (гистологический препарат №20) хорошо развиты ворсинки и крипты тонкой кишки (рис. 7). Выстилка - цилиндрическим каёмчатым эпителием с включением небольшого количества слизеобразующих клеток. Внутриэпителиальные лимфоциты единичные. Цилиндрический каемчатый эпителий на вершинах ворсинок слущивается, в просвете секрет с большим количеством слущенных клеток.
7. Гистологический срез тонкой кишки подсвинки №20 Гематоксилин-эозин. Ув.- Объектив 2.5
2
11. Параметры структур тонкого кишечника, ц (ц )
Размеры Размер продольный, Ц Периметр, Ц Площадь, 2 Ц Размер поперечный, Ц
Ворсинки, п=16 252,6±59,0 - - 104,2 ±9,25
Эпителий, п=50 - - 18,03±1,36
Каёмочный слой - - 8,49±0,67
поверхностного эпителия, п=25
Крипты, п=16 230,3±23,1 - - 33,5±2,92
Либеркюновы железы, п=50 35,0±2,57 146,5±10,1 1592±215 44,76±3,09
Базальный слой основы слизистой, п=16 - - - 73,21±4,76
Однако, как показывает таблица 11 длина ворсинок, толщина эпителиального слоя и каёмчатого слоя эпителия у контрольных животных были меньшей величины, и, по - видимому, всасывание питательных веществ из желудочно-кишечного тракта у данных животных было неполноценным.
В гистологических препаратах селезенки отличий по сравнению со стороны опытной группы практически нет. В белой пульпе отмечено правильное расположение лимфатических фолликулов довольно однородных по величине (рис. 7).
Рисунок 8. Гистологический срез селезенки подсвинки №20 Гематоксилин-эозин. Ув.- Объектив 2.5х; ОК.-7х
В красной пульпе отмечается умеренное полнокровие, равномерное распределение спленоцитов, со стороны трабекул особенностей нет. Мелкие артерии фолликулов с тонкой соединительнотканной стенкой, без признаков полнокровия.
Таким образом, скармливание органической минеральной добавки меди свиньям на откорме положительно сказалось на их росте и развитии.
Среднесуточный прирост живой массы свиней III - опытной группы получавших 50 г/т «Биоплекс медь» составил 836 г, или на 4,5 % выше по сравнению с контрольными животными, получавшими сернокислую медь в количестве 40 г/т комбикорма.
В целом общая структура органов пищеварения мало отличалась у опытных откармливаемых животных по сравнению с контролем, хотя обнаруживалась определенная реакция на пищевые добавки, чаще всего положительного характера. В структуре органов у исследованных подопытных группах были небольшие отклонения в части, по базальному отделу соединительнотканной основы кишечника - она была тоньше, нежели в контроле, возможно, за счёт благоприятствующего состава гумуса, обогащенного минеральными добавками.
Литература:
1.Биологическя роль меди [Текст]/ Симпозиум, состоявшийся в Москве 4 - 6 апреля 1967г - М.: Изд. Наука. - 1970.
2.Георгиевский, В.И. Минеральное питание животных/ В.И.Георгиевский, Б.Н.Аненков, В.Т.Самохин// - М.: Колос, - 1979. - 470 с.
3.Калашников, А.П. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных/А.П.Калашников, В.И.Фисинин, В.В.Щеглов и др.//Справочное пособие. М: - 2003.
4.Самохин, В. Т.Профилактика нарушений обмена микроэлементов у животных/ В.Т.Самохин// - М., - 2003. - 131с.
5.Хеннинг, А. Минеральные вещества, витамины, биостимуляторы в кормлении сельскохозяйственных животных [Текст]/А.Хеннинг// - М.: Колос. - 1976. - 559с.