Научная статья на тему 'Биологические особенности штамма-продуцента микробиопрепарата Т-2 trichodermasp. - антагониста возбудителя ложной мучнистой росы подсолнечника'

Биологические особенности штамма-продуцента микробиопрепарата Т-2 trichodermasp. - антагониста возбудителя ложной мучнистой росы подсолнечника Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

CC BY
288
72
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПОДСОЛНЕЧНИК / ЛОЖНАЯ МУЧНИСТАЯ РОСА / МИКРОБИОПРЕПАРАТ / ШТАММ-ПРОДУЦЕНТ Т-2 TRICHODERMA SP / SUNFLOWER / DOWNY MILDEW / MICROBIOPREPARATION / ANTAGONIST / STRAIN-PRODUCER Т-2 TRICHODERMA SP

Аннотация научной статьи по промышленным биотехнологиям, автор научной работы — Маслиенко Л.В., Воронкова А.Х., Шипиевская Е.Ю.

Для разработки технологического регламента производства микробиопрепарата изучены биологические особенности штамма-продуцента Т-2 Trichoderma sp. антагониста ложной мучнистой росы подсолнечника. Изучены морфолого-культуральные свойства штамма-продуцента на трёх агаризированных средах. Наиболее благоприятным для роста мицелия и спороношения является выращивание гриба при температуре 25-30 оС на среде Рудакова. Максимальный рост мицелия со спороношением и наибольшую сухую массу обеспечило стационарное выращивание гриба на жидкой среде в диапазоне рН от 3 до 6. Из источников углеродов максимальный рост мицелия гриба и увеличение его сухой массы обеспечило введение в питательную среду крахмала. Из источников азота штамм гриба лучше всего ассимилирует кукурузный экстракт. Оптимальная сложная жидкая питательная среда для культивирования штамма-продуцента среда Рудакова.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по промышленным биотехнологиям , автор научной работы — Маслиенко Л.В., Воронкова А.Х., Шипиевская Е.Ю.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Biological features of the strain-producer of microbiopreparation Т-2 Trichoderma sp. - an antagonist of the Downy Mildew pathogen on sunflower

To develop technician regulations for production of microbiopreparations there were studied biological features of strain-producer Т-2 Trichoderma sp. an antagonist of Downy Mildew on sunflower. Morphological and cultural traits of the strain-producer were studied on three agar mediums. Fungus cultivation at the temperature 25-30 оС on the Rudakov’s medium is the most favorable for mycelium growth and spore formation. The stationary fungus cultivation on liquid medium with рН from 3 to 6 provided the maximal mycelium growth and spore formation and the biggest dry mass. Introduction into the nutrient medium of starch as a source of carbons provided the maximal growth of fungus mycelium and increase of its dry mass. Fungus strain assimilates best of all the maize extract as a source of nitrogen. The Rudakov’s medium appeared to be the optimal compound liquid nutrient medium for cultivation of the strain-producer.

Текст научной работы на тему «Биологические особенности штамма-продуцента микробиопрепарата Т-2 trichodermasp. - антагониста возбудителя ложной мучнистой росы подсолнечника»

ISSN 2412-608Х. МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. Вып. 2 (170), 2017

Защита растений и иммунология

УДК 632.937:632.444.2

БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ШТАММА-ПРОДУЦЕНТА МИКРОБИОПРЕПАРАТА Т-2 TRICHODERMA SP. -АНТАГОНИСТА ВОЗБУДИТЕЛЯ ЛОЖНОЙ МУЧНИСТОЙ РОСЫ ПОДСОЛНЕЧНИКА

Л.В. Маслиенко,

доктор биологических наук

А.Х. Воронкова,

младший научный сотрудник Е.Ю. Шипиевская,

кандидат биологических наук

ФГБНУ ВНИИМК

Россия, 350038, г. Краснодар, ул. им. Филатова, д. 17 Тел.: (861) 275-85-19 E-mail: biometod@yandex.ru

Для цитирования: Маслиенко Л.В., Воронкова А.Х., Шипиевская Е.Ю. Биологические особенности штамма-продуцента микробиопрепарата Т-2 Trichoderma sp. - антагониста возбудителя ложной мучнистой росы подсолнечника // Масличные культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. - 2017. - Вып. 2 (170). - С. 81-87.

Ключевые слова: подсолнечник, ложная мучнистая роса, микробиопрепарат, штамм-продуцент

Т-2 Trichoderma sp.

Для разработки технологического регламента производства микробиопрепарата изучены биологические особенности штамма-продуцента Т-2 Trichoderma sp. - антагониста ложной мучнистой росы подсолнечника. Изучены морфолого-культуральные свойства штамма-продуцента на трёх агаризированных средах. Наиболее благоприятным для роста мицелия и спороношения является выращивание гриба при температуре 2530 оС на среде Рудакова. Максимальный рост мицелия со спороношением и наибольшую сухую массу обеспечило стационарное выращивание гриба на жидкой среде в диапазоне рН от 3 до 6. Из источников углеродов максимальный рост мицелия гриба и увеличение его сухой массы обеспечило введение в питательную среду крахмала. Из источников азота штамм гриба лучше всего ассимилирует кукурузный экстракт. Оптимальная

сложная жидкая питательная среда для культивирования штамма-продуцента - среда Рудакова.

UDC 632.937:632.444.2

Biological features of the strain-producer of microbiopreparation Т-2 Trichoderma sp. - an antagonist of the Downy Mildew pathogen on sunflower.

Maslienko L.V., doctor of biology Voronkova А.Kh., junior researcher Shipievskaya Е-Yu., PhD in biology

All-Russia Research Institute of Oil Crops by Pustovoit V.S. (VNIIMK) 17, Filatova str., Krasnodar, 350038, Russia Те1: (861) 275-85-19

E-mail: biometod@yandex.ru

]

Key words: sunflower, downy mildew, microbiopreparation, antagonist, strain-producer Т-2

Trichoderma sp.

To develop technician regulations for production of microbiopreparations there were studied biological features of strain-producer Т-2 Trichoderma sp. - an antagonist of Downy Mildew on sunflower. Morphological and cultural traits of the strain-producer were studied on three agar mediums. Fungus cultivation at the temperature 25-30 оС on the Rudakov's medium is the most favorable for mycelium growth and spore formation. The stationary fungus cultivation on liquid medium with рН from 3 to 6 provided the maximal mycelium growth and spore formation and the biggest dry mass. Introduction into the nutrient medium of starch as a source of carbons provided the maximal growth of fungus mycelium and increase of its dry mass. Fungus strain assimilates best of all the maize extract as a source of nitrogen. The Rudakov's medium appeared to be the optimal compound liquid nutrient medium for cultivation of the strain-producer.

Введение. Подсолнечник - ведущая масличная культура в России и многих других странах мира. Серьезным препятствием для получения высоких урожаев подсолнечника зачастую становятся различные болезни. Ложная мучнистая роса (ЛМР), вызываемая облигатным паразитом - оомицетом Plasmopara halstedii (Farl.) Berl. et de Toni, относится к числу наиболее вредоносных. Основным способом борьбы с этой болезнью является селекционный. Создаваемые в нашей стране сорта и гибриды подсолнечника были устойчивыми к наиболее распространённым расам патогена. Однако с началом 90-х годов XX столетия, когда в

Россию начали завозить семенную продукцию подсолнечника иностранных фирм (Франции, Испании, США и других), увеличилась вероятность ввоза новых рас патогена с семенами из-за рубежа. С интенсификацией возделывания подсолнечника и увеличением разнообразия сортимента ускорился естественный процесс сопряжённой эволюции паразита и хозяина, способствующий формированию новых рас. В связи с этим ранее устойчивые сорта и гибриды поражаются болезнью в сильной степени, что приводит к существенному снижению урожая и его качества.

Существующий химический способ защиты подсолнечника от ЛМР с помощью фунгицида Апрона (металаксил, ме-феноксам) снизил свою эффективность в связи с возникающей резистентностью возбудителя болезни [1].

Решение проблемы защиты от болезней связано с разработкой комплекса мероприятий, включающих и микробиологический метод. Снижение отрицательного влияния химических средств защиты растений на окружающую среду и человека остаётся одной из наиболее актуальных проблем современности. Разработка микробиологических средств защиты от фитопатогенов является важной, неотъемлемой компонентой интегрированной защиты растений в современном растениеводстве, а в ряде случаев - единственным средством контроля.

В России нет микробиологических препаратов, зарегистрированных для защиты сельскохозяйственных культур от возбудителей ложной мучнистой росы. Однако исследования в области поиска биологических средств защиты растений от возбудителя этой болезни проводятся и в нашей стране и за рубежом [1-7].

В лаборатории биометода Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур имени В.С. Пус-товойта (ФГБНУ ВНИИМК) в течение многих лет ведутся исследования по раз-82

работке микробиологических средств защиты масличных культур от болезней. Создана уникальная коллекция штаммов грибов и бактерий - антагонистов возбудителей белой, серой гнилей, фузариоза и фомопсиса, продуцентов микробиопрепаратов для защиты от болезней масличных и других сельскохозяйственных культур [8]. В последние годы проводится работа по поиску перспективных штаммов для создания микробиопрепаратов против возбудителя ложной мучнистой росы [9]. В результате скрининга грибов и бактерий из коллекции лаборатории выделено 14 перспективных штаммов антагонистов возбудителя ложной мучнистой росы подсолнечника. Одним из перспективных штаммов-продуцентов микробиопрепарата против ЛМР является гриб ^2 Тпекойвтта sp. Наряду с фунгицид ной активностью против ЛМР установлено отсутствие угнетающего влияния штамма на культуру подсолнечника и выявлено его ростостимулирующее действие, которое проявляется в увеличение массы корня проростков за счет интенсивного развития боковых корней [10].

Для разработки технологического регламента производства микробиопрепарата изучали морфолого-культуральные и физиологические признаки штамма-продуцента ^2 Тпекойвтта sp., осуществляли подбор оптимальных сложных жидких питательных сред при поверхностном культивировании.

Материалы и методы. Морфолого-культуральные признаки и физиологические свойства перспективного штамма антагониста ^2 Тпекойвтта sp. изучали по общепринятым методикам [11; 12; 13].

Морфологические признаки активного штамма определяли с помощью микроскопа «Motic BA 300». Изучали строение, цвет и размер мицелия, конидиеносцев и конидий [14].

Культуральные признаки изучали на трёх твёрдых питательных средах: карто-фельно-сахарозном агаре (КСА), Чапека и Рудакова [15]. На каждую питательную среду одновременно в центр чашки Петри (ЧП) высевали штамм антагониста и помещали в термостат при температуре 25,0 оС. Описывали форму колоний, их структуру, цвет с лицевой и обратной стороны, край, начало и характер спороношения.

Физиологические признаки штамма изучали на жидкой питательной среде Чапека, заменяя источники углеродного и азотного питания, в тех же дозировках. Источниками углеродного питания служили крахмал, глюкоза, маннит, сахароза; азотного питания - тиомочевина, мочевина, хлористый аммоний, азотнокислый аммоний, кукурузный экстракт.

Для определения оптимальной температуры культивирования штамм выращивали на среде Чапека при температурах 20,0; 25,0; 30,0 и 35,0 оС.

Для определения оптимальной кислотности среды штаммы выращивали на жидкой среде Чапека при оптимальной температуре. Добавлением лимонной кислоты или щёлочи рН среды устанавливали в пределах 3,0; 6,0; 8,0 и 10,0.

Оптимальные элементы питания штамма гриба-антагониста, питательные среды, температуру и рН среды определяли следующим образом: гриб культивировали поверхностным способом в течение десяти суток в колбах Эрленмейера объемом 250,0 мл, со 100 мл жидкой питательной среды, при температуре 25,0 оС. Рост мицелиальной пленки (газона) оценивали по шкале:

0 - нет роста;

1 - рост мицелия отдельными колониями;

2 - мицелиальная плёнка сплошная тонкая;

3 - мицелиальная плёнка сплошная толстая.

По окончании культивирования определяли сухую массу мицелиальной пленки - высушиванием влажного мицелия при температуре 105,0 оС до постоянного веса. Повторность в каждом опыте трехкратная.

Подбор оптимальных питательных сред для выращивания перспективного штамма-антагониста проводили на жидких средах при стационарном культивировании. Испытывали ряд сложных питательных сред: Чапека, Рудакова, Ви-керхема и среда № 1, в состав которых входят минеральные соли, сахара, микроэлементы и кукурузный экстракт.

Результаты и обсуждение. Морфоло-го-культуральные признаки штамма Т-2 Тпекойвтта

Морфологические признаки. Мицелий состоит из бесцветных, сильно ветвистых гиф 1-12 мк в диаметре. Хламидоспоры интеркаллярные, реже верхушечные, на коротких боковых веточках, шаровидные, бесцветные, гладкие, до 14 мк в диаметре, образуются в среде. Конидиеносцы сильно ветвистые в подушечках, в прерывистых или концентрических зонах, с главной осью около 4,5 мк толщины, с боковыми веточками, одиночными или в группах по 2-3. Все веточки отходят под широким углом. Стеригмы образуют ложные мутовки, изменчивые по величине - 8-14 х 2,4-3 мк, прямые или слегка согнутые, кеглевидные, суженные у основания. Конидии шаровидные, слегка шероховатые, 3,6-4,5 мк в диаметре

Культуральные признаки. Культураль-ные признаки штамма гриба-антагониста изучали через десять суток инкубации при температуре 25 оС (рис. 1, табл. 1).

Колонии быстрорастущие, занимали всю поверхность питательной среды за 34 суток.

среда Чапека

среда КСА

среда Рудакова

Рисунок 1 - Рост штамма Т-2 ТпсИойвтша $р. на агаризированных питательных средах (возраст 10 суток) при температуре 25 оС

Таблица 1

Культуральные признаки штамма Т-2 Trichoderma sp. при культивировании на агаризированных средах (возраст 10 суток) при температуре 25 оС.

г. Краснодар, ВН ИИМК, 20] [6 г.

Вариант Характеристика колонии Диаметр колонии, см, через, суток Спо-роно-ше-ние

Среда рост колонии цвет, со стороны рост мицелия, балл 3 10

лицевой обратной

Чапека Слабый, колонии занимают всю поверхность ЧП, подушечки по краям редкие, в центре расположены кон-центрическими зонами Зелёный Свет-ло-зе-лёный 5 5,0 х 5,5 9,0 х 9,0 Массовое

КСА Средний, колонии занимают всю поверхность ЧП, подушечки расположены плотными концентрически-ми зонами, но между зонами мицелий редкий Голу-бова-то-зе-лёный с небольшим беловатым налётом Свет-ло-зе-лёный 5 8,8 х 9,0 9,0 х 9,0 Массовое

Рудакова Сильный, колонии занимают всю поверхность ЧП, подушечки расположены плотными концентрически-ми зонами Голу- бова- то-зе- лёный, с беловатым налётом сверху Корич- нево-зе- лёный 5 9,0 х 9,0 9,0 х 9,0 Массовое

На среде Чапека рост слабый, колонии занимали всю поверхность ЧП, но подушечки редкие, расположены концентрическими зонами, зелёного цвета, мицелий между зонами прозрачный. С обратной

стороны среда окрашена в светло-зелёный цвет.

На КСА рост средний, колонии занимали всю поверхность ЧП, подушечки расположены плотными концентрическими зонами, но между зонами мицелий редкий, голубовато-зелёного цвета с небольшим беловатым налётом. С обратной стороны окраска среды светло-зелёная.

На среде Рудакова рост сильный, колонии занимали всю поверхность ЧП, подушечки расположены плотными концентрическими зонами, голубовато-зеленые в центре, со светлым налётом сверху. С обратной стороны среда окрашена в коричнево-зелёный цвет.

Таким образом, наиболее сильный рост колоний штамма Т-2 Тпекоёвгта ¿р. с обильным спороношением через 10 суток культивирования при температуре 25 оС отмечен на агаризированной питательной среде Рудакова.

Физиологические признаки штамма Т-2 Тпекоёвгта ¿р.

Определение оптимальной температуры и реакции среды для культивирования штамма Т-2 Тпекоёвгта ¿р.

Гриб - аэроб. Установлено, что наиболее благоприятным для роста мицелия и спороношения является выращивание гриба при температурах 25-30 оС (табл. 2).

Таблица 2

Влияние температуры на рост штамма Т-2 Тпскойегта sp. в условиях стационарного культивирования на жидкой среде Чапека

г. Краснодар, В ВНИИМК, 2016 г.

Температура, оС Рост мицелия Вес сухого мицелия,

20 Средний 0,06 ± 0,01

25 Обильный 0,11 ± 0,05

30 Сильный 0,09 ± 0,01

35 Средний 0,05 ± 0,01

* - вес мицелия в расчете на 100 мл питательной среды

Гриб Т-2 Тпекойвтта ¿р. оказался требовательным к реакции среды. Максимальный рост мицелия со спороношением и наибольшую сухую массу обеспечило стационарное выращивание гриба на жидкой среде Чапека в диапазоне рН среды от 3 до 6 (табл. 3).

Таблица 3

Влияние рН среды на рост штамма Т-2 Тпскойегта sp. в условиях стационарного культивирования на жидкой среде Чапека при температуре 25 оС

г. Краснодар, ВНИИМК, 2016 г.

рН среды Рост мицелия Вес сухого мицелия, г*

3 Обильный 0,12 ± 0,01

6 Средний 0,06 ± 0,007

8 Слабый 0,01 ± 0

10 Слабый 0,01 ± 0

* - вес мицелия в расчете на 100 мл питательной среды

Определение оптимальных элементов питания для культивирования штамма Т-2 Тпекоёвгта ¿р.

При стационарном выращивании гриба на жидкой среде Чапека при температуре 25 оС с добавлением разных источников углерода максимальный рост мицелия и увеличение его сухой массы обеспечило введение в питательную среду крахмала (табл. 4).

Таблица 4

Влияние источников углерода на рост штамма Т-2 ТпсНойегта sp. в условиях стационарного культивирования на жидкой среде Чапека при температуре 25 оС

г. Краснодар, ВНИИМК, 2016 г.

Источник углерода Рост мицелия Вес сухого мицелия, г*

Крахмал Обильный 0,24 ± 0,08

Глюкоза Средний 0,15 ± 0,03

Маннит Слабый 0,05 ± 0

Сахароза Средний 0,11 ± 0,05

* - вес мицелия в расчете на 100 мл питательной среды

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

В серии лабораторных опытов выявлено, что из источников азота кукурузный

85

экстракт способствовал обильному росту мицелия гриба и максимальной сухой массе по сравнению с другими вариантами (табл. 5).

Таблица 5

Влияние источников азота на рост штамма Т-2 ТпсНойегта sp. в условиях стационарного культивирования на жидкой среде Чапека при температуре 25 оС

г. Краснодар, ВН ИИМК, 2016 г.

Источник азота Рост мицелия Вес сухого мицелия, г*

Мочевина Средний 0,13 ± 0,01

Тиомочевина Слабый 0,01 ± 0

NH4 NO3 Средний 0,07 ± 0,01

NH4 Cl Средний 0,09 ± 0,01

Кукурузный экстракт Обильный 0,29 ± 0,07

* - вес мицелия в расчете на 100 мл питательной среды

Определение оптимальных жидких питательных сред для штамма Т-2 Trickoderma ¿р.

Подбор оптимальных питательных сред для штамма Т-2 проводили при стационарном культивировании на жидких питательных средах сложного состава -Рудакова, Чапека, Викерхема и среде № 1, содержащих углероды и соединения азота, фосфора, калия и магния, а также микроэлементы в разном соотношении (табл. 6).

Таблица 6

Влияние жидких питательных сред и срока стационарного культивирования на рост штамма Т-2 ТпсНойегта sp. при температуре 25 оС

г. Краснодар, В НИИМК, 2016 г.

Питательная среда Рост мицелия, балл*, через, суток Вес сухого мицелия, г** через 10 суток

3 5 10

Чапека 0 0 1 0,09 ± 0

Рудакова 1 2 3 0,93 ± 0,03

Викерхема 1 2 2 0,43 ± 0,07

Среда N°1 2 2 3 0,67 ± 0,03

Примечание: * - рост мицелия в баллах:

0 - нет роста;

1 - рост мицелия отдельными колониями;

2 - мицелиальная плёнка сплошная тонкая;

3 - мицелиальная плёнка сплошная толстая; ** вес мицелия в расчете на 100 мл питательной среды

Установлено, что максимальный рост мицелиальной плёнки со спороношением гриба обеспечивают среды Рудакова и № 1. Уже через пять суток культивирования на этих средах отмечена сплошная тонкая мицелиальная пленка со спороношением, тогда как на среде Чапека мицелий только обрастал посевной блок. Через 10 суток культивирования на средах Рудакова и № 1 образовались сплошные толстые ми-целиальные плёнки со спороношением, на среде Викерхема - сплошная тонкая мицелиальная плёнка со спороношением, а на среде Чапека - отдельные колонии так и не срослись в одну мицелиальную плёнку. Масса сухого мицелия через 10 суток культивирования была максимальной на среде Рудакова. Также большая масса сухого мицелия отмечена на средах Викерхема и № 1.

Выводы. 1. Наиболее благоприятным для роста мицелия и спороношения является выращивание гриба Т-2 Trichoderma sp. при температуре 25-30 оС.

2. Максимальный рост мицелия со спороношением и наибольшую сухую массу обеспечило стационарное выращивание гриба Т-2 Trichoderma sp. на жидкой среде в диапазоне рН среды от 3 до 6.

3. В качестве источников углеродов максимальный рост штамма Т-2 Tricho-derma sp. и увеличение его сухой массы обеспечило введение в питательную среду крахмала.

4. Из источников азота штамм Т-2 Trichoderma sp. лучше всего ассимилирует кукурузный экстракт.

5. Оптимальная сложная жидкая питательная среда для культивирования штамма-продуцента - среда Рудакова.

Исследования выполнены при финансовой поддержке РФФИ и администрации Краснодарского края, грант № 16-48230293.

Список литературы

1. Gulya T.J., Draper J., Harbour J., Holen C., Knodel J., Lamey A. [et al.] Metalaxyl resistance in sunflower downy mildew in North America // Proc. of 21th Sunfl. research workshop, January 14-15, 1999. - P. 118-123.

2. Терёшина М.В. Биологическое обоснование

методов ранней диагностики и приёмов снижения вредоносности ложной мучнистой росы подсолнечника: автореф. дис. ... канд. биол. наук. -Краснодар, 1996. - 15 с.

3. Пат. 2182767 РФ, МКИ F C A01N63|00, A01N63|04 Способ защиты огурца от пероноспороза / Иващенко И.И., Чебыкин М.Ю. - N 99115630/13; Заяв. 19.07.1999; Опубл. 27.05. 2002; НКИ.

4. Tosi L., Giovannettii M., Zazzerini A., Sbrana C. Interactions between Plasmopara helianthi and arbuscular mycorrizal fungi in sunflower seedlings susceptible and resistant to downy mildew // Phytopathol. Mediterraneae. - 1993. - Vol. 32. - № 2. -P. 106-114.

5. Tosi L., Zazzerini A. Interactions between Plasmopara helianthi, Glomus mossea and two plant activators in sunflower plants // Europ. J. Plant Pathol. - 2000. - Vol. 106. - № 8. - P. 735-744.

6. Yonsel Y.S., Sevim M. Microbial dressing of sunflower seeds with Trichoderma harzianum Kuen 1585 // Proc. of 19th Intern. Sunfl. Conf., Edirne, Turkey, May 29- June 3, 2016. - P. 993.

7. Cifetcigil T.H., Ozer N., Sabudak T. A preliminary study on control of sunflower downy mildew (Plasmopara halstedii) with culture filtrates of antagonistic fungi // Proc. of 19th Intern. Sunfl. Conf., Edirne, Turkey, May 29- June 3, 2016. - P. 1106.

8. Маслиенко Л.В. Обоснование и разработка микробиологического метода борьбы с болезнями подсолнечника: автореф. дис. . д-ра биол. наук. -Краснодар, 2005. - 48 с.

9. Маслиенко Л.В., Арасланова Н.М., Ковчиги-на М.А. Поиск оптимального метода искусственного заражения подсолнечника возбудителем ложной мучнистой росы для определения эффективности опытных образцов микробиопрепаратов // Масличные культуры: Науч.-тех. бюл. ВНИИМК.

- 2014. - Вып. 2 (159-160) . - С. 156-162.

10. Маслиенко Л.В., Воронкова А.Х., Арасланова Н.М., Ковчигина М.А., Шипиевская Е.Ю., Наумов Г.Н. Скрининг штаммов антагонистов к возбудителю ложной мучнистой росы подсолнечника // Наука Кубани. - 2016. - № 3. - С. 48-55.

11. Наумов Н.А. Методы микологических и фитопатологических исследований. - Л.: Сельхоз-издат, 1937. - 272 с.

12. Хохряков М.К. Методические указания по экспериментальному изучению фитопатогенных грибов. - Л.: Изд-во ВАСХНИЛ, 1969. - 65 с.

13. Билай В.И. Фузарии. - Киев: Наукова думка, 1982. - 441 с.

14. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. - М.: Колос, 1974. - 273 с.

15. Рудаков О.Л. Микофильные грибы, их биология и практическое значение. - М.: Наука, 1981.

- 160 с.

References

1. Gulya T.J., Draper J., Harbour J., Holen C., Knodel J., Lamey A. [et al.] Metalaxyl resistance in

sunflower downy mildew in North America // Proc. of 21th Sunfl. research workshop, January 14-15, 1999. -P. 118-123.

2. Tereshina M.V. Biologicheskoe obosnovanie metodov ranney diagnostiki i priemov snizheniya vredonosnosti lozhnoy muchnistoy rosy podsolnechnika: avtoref. dis. ... kand. biol. nauk. -Krasnodar, 1996. - 15 s.

3. Pat. 2182767 RF, MKI F C A01N63|00, A01N63|04 Sposob zashchity ogurtsa ot peronospo-roza / Ivashchenko I.I., Chebykin M.Yu. - N 99115630/13; Zayav. 19.07.1999; Opubl. 27.05. 2002; NKI.

4. Tosi L., Giovannettii M., Zazzerini A., Sbrana C. Interactions between Plasmopara helianthi and arbuscular mycorrizal fungi in sunflower seedlings susceptible and resistant to downy mildew // Phytopathol. Mediterraneae. - 1993. - Vol. 32. - No 2. - P. 106-114.

5. Tosi L., Zazzerini A. Interactions between Plasmopara helianthi, Glomus mossea and two plant activators in sunflower plants // Europ. J. Plant Pathol. - 2000. - Vol. 106. - No 8. - P. 735-744.

6. Yonsel Y.S., Sevim M. Microbial dressing of sunflower seeds with Trichoderma harzianum Kuen 1585 // Proc. of 19th Intern. Sunfl. Conf., Edirne, Turkey, May 29- June 3, 2016. - P. 993.

7. Cifetcigil T.H., Ozer N., Sabudak T. A preliminary study on control of sunflower downy mildew (Plasmopara halstedii) with culture filtrates of antagonistic fungi // Proc. of 19th Intern. Sunfl. Conf., Edirne, Turkey, May 29- June 3, 2016. - P. 1106.

8. Maslienko L.V. Obosnovanie i razrabotka mikrobiologicheskogo metoda bor'by s boleznyami podsolnechnika: avtoref. dis. . d-ra biol. nauk. -Krasnodar, 2005. - 48 s.

9. Maslienko L.V., Araslanova N.M., Kovchigina M.A. Poisk optimal'nogo metoda iskusstvennogo zarazheniya podsolnechnika vozbuditelem lozhnoy muchnistoy rosy dlya opredeleniya effektivnosti opytnykh obraztsov mikrobiopreparatov // Maslichnye kul'tury: Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. -2014. - Vyp. 2 (159-160) . - S. 156-162.

10. Maslienko L.V., Voronkova A.Kh., Araslanova N.M., Kovchigina M.A., Shipievskaya E.Yu., Naumov G.N. Skrining shtammov antagonistov k vozbuditelyu lozhnoy muchnistoy rosy podsol-nechnika // Nauka Kubani. - 2016. - № 3. - S. 48-55.

11. Naumov N.A. Metody mikologicheskikh i fitopatologicheskikh issledovaniy. - L.: Sel'khozizdat, 1937. - 272 s.

12. Khokhryakov M.K. Metodicheskie ukazaniya po eksperimental'nomu izucheniyu fitopatogennykh gribov. - L.: Izd-vo VASKhNIL, 1969. - 65 s.

13. Bilay V.I. Fuzarii. - Kiev: Naukova dumka, 1982. - 441 s.

14. Pausheva Z.P. Praktikum po tsitologii rasteniy. - M.: Kolos, 1974. - 273 s.

15. Rudakov O.L. Mikofil'nye griby, ikh biologiya i prakticheskoe znachenie. - M.: Nauka, 1981. - 160 s.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.