CC BY
20
VВсероссийская научно-практическая конференция с международным участием «ГЕНЕТИКА ОПУХОЛЕЙ КРОВЕТВОРНОЙ СИСТЕМЫ -ОТ ДИАГНОСТИКИ К ТЕРАПИИ»
по Сэнгеру определена нуклеотидная последовательность участков интронов примыкающих к 5-10 экзонам гена (n=74), а также фрагмента З'-нетранслируемой последовательности ТР53 (n=92), содержащего сигнал полиаденилирова-ния. Теоретическое прогнозирование возможных последствий обнаруженных мутаций проводилось с применением программы NetGene2.
Результаты. В опухолевом материале 74 больных ДВККЛ выявлены 12 типов мутаций в интронных участках: g.7675266A>G, g.7675010C>A, g.7674988A>G, g.7674326C>G, g.7674153C>G, g.7673691G>T, g.7673681T>C, g.7673664T>C и g.7673523A>G. Мутация g.7674326C>G, имеющая доказанную биологическую значимость по данным экспериментов in vitro, согласно данным The Human Cancer Mutation Database, относится к изменениям, влияющим на сплайсинг. Согласно прогнозу NetGene2, из выявленных нами в группе больных ДВККЛ интронных замен, g.7675010C>A приводит к образованию дополнительного акцепторного сайта сплайсинга, что может приводить к включению в последовательность м-РНК части интрона 5.
Санкт-Петербург 26-27 апреля 2019 г.
В 9 случаях в образцах опухолевой ткани ДВККЛ был выявлен г$78378222, разрушающий сигнал полиаденилирования ТР53 и приводящий к нарушению трансляции белка р53. В 5/9 случаев определен гомозиготный минорный генотип С/С по Г878378222, что свидетельствовало о потере гетерозиготно-сти в данном локусе, которая способствует значительному приросту злокачественного потенциала клеток.
Выводы. До настоящего времени при изучении ТР53 в опухолевой ткани больных ДВККЛ исследования были сосредоточены на поиске мутаций в 5-8 экзонах гена, кодирующих ДНК-связывающий домен белка р53. По этим причинам, безусловно, требуется дальнейшее исследование спектра изменений в не-кодирующих последовательностях гена ТР53 и определение их функционального эффекта при ДВККЛ. Полученные нами данные свидетельствуют о функциональной селекции на этапах опухолевой прогрессии ДВККЛ изменений в интронах и в З'-нетранслируемой последовательности гена ТР53.
О. А. Гаврилина, Е. Н. Паровичникова, Т. В. Абрамова, Л. А. Гребенюк, Л. А. Шишигина, Г. А. Алимова, Т. Н. Обухова, В. В. Троицкая, Г. А. Басхаева, В. Г. Савченко
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
ЗНАЧЕНИЕ FISH ИССЛЕДОВАНИЯ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ФИЛАДЕЛЬФИЙСКОЙ ХРОМОСОМЫ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМИ ВЛИМФОБЛАСТНЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ В РАМКАХ РЕГИСТРАЦИОННОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ОЛЛ2016.
Введение. Больные РЬ-позитивным острым лимфобластным лейкозом (РЬ+ОЛЛ) составляют около 25% среди всех ОЛЛ взрослых, причем заболеваемость этим вариантом В-ОЛЛ увеличивается с возрастом больного. Несмотря на появление ингибиторов тирозинкиназ и увеличение эффективности терапии РЬ+ОЛЛ, эта группа больных по-прежнему относится к высокому риску рецидива и должна рассматриваться как группа пациентов, нуждающихся в траснплантации аллогенного костного мозга. В связи с этим становится актуальной точная верификация этого заболевания в дебюте с целью проведения адекватного эффективного лечения.
Цель. Оценить частоту встречаемости РЬ+ОЛЛ в рамках регистрационного исследования и определить необходимость выполнения
прицельного FISH исследования для выявления t(9;22) у больных В-ОЛЛ.
Материалы и методы. С декабря 2016 г. начато регистрационное исследование для всех больных в возрасте старше 18 лет с впервые установленным ОЛЛ в 11 центрах Российской Федерации (Москва, Санкт-Петербург, Киров, Нижний Новгород, Волгоград, Сургут, Екатеринбург, Калуга, Ярославль, Саранск). С декабря 2016 по февраль 2019 года зарегистрировано 187 больных с ОЛЛ: медиана возраста 36 лет (18-74 года); 112 (60 %) мужчин и 75 (40 %) женщин; 115 (61 %) с В-ОЛЛ (из них 17 (15 % от всех В-ОЛЛ) с Ph+ОЛЛ), 67 (36 %) с Т-ОЛЛ и 5 (3 %) с лейкозом смешанного фенотипа. 124 (66 %) больных включены в протокол лечения ОЛЛ-2016, остальные 63 (34 %) пациента лечились по другим протоколам в связи
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XV, № 2, 2019
с выявлением критериев исключения (Ph+ОЛЛ 17 (9 %) больных (получали лечение по протоколу Ph+ОЛЛ-2012), зрелый вариант В-ОЛЛ 6 (3 %) больных, старше 55 лет 24 (13 %) больных, у одного пациента диагноз пересмотрен на острый миелобластный лейкоз, у остальных 15 (8 %) больных к моменту установления диагноза проводилась непрограммная химиотерапия или длительная терапия глюкокортикостеро-идами). Всем больным с ОЛЛ проводилось централизованное стандартное цитогенетическое исследование (СЦИ) (G-дифференциальная окраска хромосом) клеток костного мозга и у больных В-ОЛЛ выполнялось FISH исследование с использованием ДНК-зондов для выявления транслокации t(9;22).
Результаты. В лабораторию кариологии ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России поступило 75 аспиратов костного мозга больных В-ОЛЛ (65 % от всех В-ОЛЛ, включенных в регистрационное исследование). По данным СЦИ у 8 (11 %) больных выявлена t(9;22), у 16 (21 %) больных не получено митозов, у 51 больного определен нормальный кариотип или выявлены другие хромосомные аберрации (в том числе, у 3 (11 %) из 75 выявлена t(4;11). При FISH исследовании t(9;22) выявлена у 3 (19 %) больных из 16, у которых не получены мито-
зы и у 4 (8 %) из 50 пациентов с нормальным кариотипом по результатам СЦИ.
Выводы. В рамках регистрационного исследования ОЛЛ-2016 из 75 больных с В-ОЛЛ у 15 (20 %) диагностирован Ph+ОЛЛ, причем у 7 из 15 больных (47 %) только по результатам FISH исследования при отсутствии данных по результатам СЦИ (отсутствие митозов или нормальный кариотип). Данное исследование показало, что выполнение только стандартного цитогенетического исследования у больных с В-ОЛЛ является недостаточным для диагностики Ph+ОЛЛ, который относится к группе высокого риска среди ОЛЛ, и больные нуждаются в обязательном применении ингибиторов тирозинкиназ и рассмотрении вопроса о выполнении аллогенной трансплантации стволовых клеток. Таким образом, всем больным В-ОЛЛ необходимо выполнение FISH исследования с использованием ДНК-зондов для выявления t(9;22).
При отсутствии возможности выполнения FISH исследования необходимо молекулярно-генетическое исследование для выявления не только транскрипта р190, но и р210, так как 30-40 % больных с Ph+ОЛЛ имеют транскрипт р210, более характерный для хронического миелолейкоза.
А. Д. Гарифуллин, С. В. Волошин, И. С. Мартынкевич, А. Ю. Кувшинов, М. П. Бакай, Е. В. Клеина, С. Ю. Линников, С. С. Бессмельцев
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОДИФИЦИРОВАННОЙ РИСК СТРАТИФИКАЦИИ MSMART 3.0 ДЛЯ ОЦЕНКИ ВЫЖИВАЕМОСТИ БОЛЬНЫХ С ВПЕРВЫЕ ВЫЯВЛЕННОЙ
МНОЖЕСТВЕННОЙ МИЕЛОМОЙ
Введение. Проведенные за последнее десятилетие исследования значительно улучшили наше понимание молекулярных основ и механизмов прогрессирования множественной миеломы. Цитогенетическое исследование и метод флуоресцентной in situ гибридизации (FISH) позволяют выявить наиболее частые генетические аномалии при данной патологии. Разделение пациентов в группы риска на основе генетических маркеров используется многими центрами для выбора и оптимизации тактики лечения. Однако системы риск стратификации регулярно обновляются при появлении новой информации о прогностическом значении ге-
нетических аберраций. Окончательно остается неизвестным влияние комплексного кариотипа и комбинации двух генетических аномалий на прогноз заболевания.
Цель. Определить частоту встречаемости генетических аномалий и их влияние на общую и беспрогрессивную выживаемость у пациентов с впервые выявленной множественной миеломой.
Материалы и методы. Обследовано 159 пациентов с впервые выявленной множественной миеломой (медиана возраста 63 года, диапазон 2883; соотношение мужчины/женщины — 1:1,37). Цитогенетическое исследование костного мозга
