CC BY
67
лет включительно), как и индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов.
В основу индекса аллергизации (ИАЛ) положено соотношение суммы лимфоцитов и эозинофилов к остальным клеткам белой крови. В результате исследования установлено, что наименьшие значения ИАЛ были у телят с момента рождения и до 1-месячного возраста с нарастанием по мере взросления от 1,03+0,17 до 2,51+0,28 усл. ед. (Р<0,001). Начиная с 2—3-месячного возраста ИАЛ увеличился почти двукратно и с 5 лет удерживался на уровне 4,03+0,38—5,58+0,46 усл. ед., а с 6 лет, в силу своеобразных преобразований в лейкограмме, ИАЛ уменьшился с 3,81+0,37 до 3,08+0,31 (Р<0,05) усл. ед. у коров 10 лет. Исходя из полученных данных можно задекларировать референтные величины для здоровых животных с индексом аллергизации: для телят первого месяца жизни — 1,61+0,18, для возрастной группы 2-3-месячных телят и коров 5 лет — 4,75+0,43, для коров старше 8 лет — 3,51+0,31 усл. ед.
На основании проведённого исследования были сделаны следующие выводы:
1. При анализе интегральных математических показателей лейкограммы периферической крови следует учитывать особенности онтогенеза белой крови, которые существенно изменяют показатели в первый месяц жизни телёнка и у коров старше 8 лет.
2. Изучение простой лейкограммы может указывать на тенденцию развития, а комплексная оценка лейкоцитарных индексов позволяет расширить возможности получения информации о эндогенной интоксикации, состоянии неспецифической реактивности на разных стадиях патологического процесса.
3. Определены референтные величины для 16 индексов лейкограммы в 15 возрастных группах крупного рогатого скота. Индексы, характеризующие эндогенную интоксикацию (ЛИИ, ЯИСЭ, ИСЛК, УИ, ЯИ), неспецифическую резистентность (иБ, иК, ИА, ИС, ИСНМ, ИСЛМ, ИАЛ, ИИР, РОН, ЛИ), и активности воспаления (ЛГИ) объединены в три кластера. Первый включает показатели у телят с момента рождения и до 1 мес. жизни, второй — у животных всех возрастных групп до 8-летнего возраста и третий — у коров старше 8 лет.
Литература
1. Крылов В.Н., Косилов В.И. Показатели крови молодняка казахской белоголовой породы и её помесей со светлой аквитанской // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2009. № 2 (22). С. 121—125.
2. Косилов В.И., Мироненко С.И., Жукова О.А. Гематологические показатели тёлок различных генотипов на Южном Урале // Вестник мясного скотоводства. 2009. Т. 1. № 62. С. 150-158.
3. Губайдуллин Н.М. Гематологические показатели коров-первотёлок бестужевской породы при использовании алюмосиликата глауконита / Н.М. Губайдуллин, Р.С. Зайнуков, И.В. Миронова, Х.Х. Тагиров // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2008. № 1 (17). С. 111-113.
4. Габунщина О.Д. Лейкограмма и лейкоцитарные индексы в крови верблюдов калмыцкой породы // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. 2012. № 1 (13). С. 3-5.
5. Дерхо М.А., Самойлова Е.С. Интегральные индексы интоксикации как критерий оценки уровня эндогенной интоксикации при бабезиозе // Учёные записки Казанской государственной ветеринарной академии имени Н.Э. Баумана. 2011. Т. 207. С. 170-177.
6. Жуков А.П., Бикчентаева Г.Ю., Ростова Н.Ю. Морфологические показатели и индексы крови у голштинов канадской селекции в процессе длительной адаптации // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2012. № 2 (34). С. 86-90.
7. Никитин В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных. М.: Госиздатсельхозлит, 1949. 118 с.
8. Рейс Б.А., Машков Б.А., Карманов П.А. Исследования токсина при перитоните // Хирургия. 1983. № 6. С. 77-79.
9. Яблучанский Н.И. Индекс сдвига лейкоцитов как маркер реактивности организма при остром воспалении // Лабораторное дело. 1983. № 1. С. 60-61.
Влияние пробиотика Витафорт на микробиоценозы фекалий молодняка сельскохозяйственных животных
Ф.С. Хазиахметов, д.с.-х.н, профессор, А.Ф. Хабиров, к.б.н., Р.Х. Авзалов, д.б.н., профессор, ФГБОУ ВО Башкирский ГАУ
В животноводстве России всё большую популярность приобрели пробиотические добавки, содержащие различные штаммы микроорганизмов, способствующие развитию полезной микрофлоры [1—10]. Представители облигатной микрофлоры — лакто- и бифидобактерии в кишечнике имеют существенное значение в жизнедеятельности организма. Однако главная их роль заключается в поддержании колонизационной резистентности слизистой кишечника к контаминации условно-патогенными микроорганизмами, в предупреждении транслокации возбудителей пищевых токси-
коинфекций из кишечника взрослых животных в органы и ткани и в снижении риска развития дисбактериозов, провоцирующих и осложняющих желудочно-кишечные болезни у молодняка сельскохозяйственных животных.
Использование пробиотиков на основе Bacillus subtilis способствует коррекции микробиоценоза, стимуляции интенсивности роста и увеличения продуктивности молодняка сельскохозяйственных животных, поскольку в ходе эволюции данные микроорганизмы выработали защитный механизм от условно-патогенных и патогенных воздействий бактерий на организм хозяина.
В связи с вышеизложенным одним из перспективных направлений при выращивании молодняка сельскохозяйственных животных является ис-
пользование пробиотиков, при этом мало изучен пробиотик Витафорт, содержащий в своём составе бактерию Basilius subtilis штамм 11B.
Цель исследования — изучить влияние пробио-тика Витафорт на количественный состав микроорганизмов: бифидобактерий, лактобактерий, эше-рихий, золотистого стафилококка, Bacillus subtilis, дрожжевых грибов и клостридий, содержащихся в фекалиях телят 60-суточного, поросят и ягнят 120-суточного возраста.
Материал и методы исследования. Для изучения влияния пробиотика Витафорт на формирование кишечного микробиоценоза и их выживаемости провели опыт по исследованию фекалий телят, поросят и ягнят по схеме, представленной в таблице.
Телят, поросят и ягнят выращивали в одинаковых условиях кормления и содержания. В конце научно-хозяйственного опыта проводили взятие фекалий для микробиологического исследования. Бактериологическое исследование фекалий проводили согласно методическим рекомендациям «Выделение и идентификация бактерий желудочно-кишечного тракта животных», утверждённым Департаментом ветеринарии МСХ РФ №13-5-02/1043 от 11 мая 2004 г. Навески фекалий массой 1 г гомогенизировали в 9 мл стерильного буферного раствора (содержание посевного материала 10-1 г/мл). Из основного разведения путём переноса 1 мл суспензии делали ряд последовательных десятикратных разведений в стерильном буферном растворе с содержанием нативного посевного материала от 10-2 до 10-10 г/мл.
Для индикации патогенных энтеробактерий проводили посев из основного разведения на среды Левина и Плоскирева. С целью изучения культурально-биохимических свойств E. coli использовали питательные среды: Эндо, МПА, МПБ, МПЖ, Симмонса, среды Гисса; изучали индолообразование и продукцию сероводорода. На 5-процентном кровяном агаре проводили учёт морфологически различных колоний с гемолити-
ческими свойствами, подсчитывая их процент от общего количества выделенных микроорганизмов этого семейства.
Золотистый стафилококк выделяли на желточно-солевом агаре в чашках Петри с последующим ми-кроскопированием выросших колоний. Бактерии округлой формы с характерным гроздевидным расположением были отнесены к роду Staphylococcus. Через 1 сут. инкубации учитывали колонии с золотистым пигментом, у выделенных микроорганизмов определяли способность ферментировать манит (+), проверяли в реакции плазмокоагуляции (+), определяли лецитиназную активность (+).
Для выделения анаэробных спорообразующих бактерий использовали среду Вильсона — Блера. О наличии клостридий судили по обнаружению колоний чёрного цвета в глубине столбика среды в нижней части пробирки. При микроскопирова-нии по Грамму обнаруживали грамположительные палочки со слегка закруглёнными краями.
Дрожжеподобные грибы выделяли на среде Сабуро с тетрациклином (45 мг/л). Выросшие грамположительные крупные круглой или овальной формы клетки, дающие на среде бесцветные или слабоокрашенные колонии круглой формы, относили к грибам рода Candida.
Популяционный уровень каждой группы микроорганизмов выражали в десятичных логарифмах. Для этого количество колоний переводили в десятичные логарифмы и, учитывая соответствующее разведение, рассчитывали популяционный уровень в lg КОЕ/г фекалий.
Статистическую обработку данных проводили общепринятыми методами вариационной статистики с использованием пакета статистического анализа для Microsoft Excel. Оценку значимости различий средних арифметических проводили с использованием t-критерия Стьюдента, различия считали статистически значимыми при Р<0,05.
Результаты исследования. Анализ микробиологического исследования кала телят показал,
Особенности кормления телят, поросят и ягнят в период проведения научно-хозяйственных опытов
Группа
Количество, голов
Условия кормления в период опытов
Телята, возраст 60 сут.
Контрольная Опытная 1 Опытная 2
10 10 10
основной рацион (ОР)
ОР + Ветом в дозе 75 мг на 1 гол/сут
ОР + Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг ж.м/сут
Поросята-отъёмыши, возраст 120 сут.
Контрольная Опытная 1 Опытная 2 Опытная 3
10 10 10 10
основной рацион (ОР)
ОР + Витафорт в дозе 0,05 мл на 10 кг ж.м/сут ОР + Витафорт в дозе 0,5 мл на 10 кг ж.м/сут ОР + Витафорт в дозе 1 мл на 10 кг ж.м/сут
Ягнята, возраст 120 сут.
Контрольная 1 Контрольная 2 Опытная 1 Опытная 2 Опытная 3
10 10 10 10 10
основной рацион (ОР) ОР + Ветом в дозе 50 мг на 1 кг ж.м/сут ОР + Витафорт в дозе 0,02 мл на 10 кг ж.м/сут ОР + Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг ж.м/сут ОР + Витафорт в дозе 0,2 мл на 10 кг ж.м/сут
что наибольший пик роста колоний бактерий B. subtilis в каловых массах приходится на 3-4-е сут. их скармливания, что составляло в I опытной гр.
8.3-103, во II — 17,6-103. При этом количество бацилл в фекалиях телят контрольной гр. не превышало 102 КОЕ/г. В последующие дни учёта их численность постепенно снижалась, что, по-видимому, обусловлено саморегулирующей деятельностью и защитной реакцией организма на возрастающую контаминацию колоний бацилл и их метаболитов. Этот факт принципиально важен для выявления максимального эффекта действия и установления оптимального срока продолжительности скармливания препарата. Второй пик незначительного роста колоний отмечен у телят II опытной гр. после прекращения дачи пробиотика, что также обусловливается приспособленностью бактерий в данной кишечной нише. После прекращения дачи пробиотика концентрация культур клеток не была стабильной, а постепенно элиминировалась из желудочно-кишечного тракта, оставаясь на высоком уровне в течение 3 сут. — 3,2—2,4-103 КОЕ/г. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что использование пробиотика Витафорт в дозе 0,1 мл (из расчёта 108 КОЕ) на 10 кг живой массы телят способствовало повышению сохранности и увеличению их живой массы, в процессе стимулирования метаболических и иммунных процессов организма бактериями-пробионтами.
В начале опыта в кишечнике поросят-отъёмышей всех групп было выявлено значительное содержание патогенных и условно-патогенных штаммов микроорганизмов за исключением патогенных энтеро-бактерий, энтеропатогенных и лактозонегативных кишечных палочек. Уровень лактозопозитивных кишечных палочек у поросят-отъёмышей всех групп находился в пределах 3,0+0,10—4,0+0,42 lg КОЕ/г. Содержание гемолитической кишечной палочки в кишечнике поросят-отъёмышей составило в пределах 6,2—7,6%, что свидетельствует о нарушении микробиоценоза кишечника (доля гемолитических эшерихии при патологии кишечника увеличивается до 6,1—26,8%). Уровень клостридий в кишечнике животных контрольной группы (основной рацион) находился в пределах 3,4+0,31 lg КОЕ/г, I опытной гр. — 3,2+0,12 lg КОЕ/г, II опытной — 3,1+0,13 lg КОЕ/г, III опытной - 3,0+0,03 lg КОЕ/г, а содержание дрожжевых грибов в кишечнике поросят всех групп было на уровне 2,0+0,29-2,4+0,31 lg КОЕ/г.
Применение пробиотика Витафорт способствовало увеличению в кишечнике бактерий рода Bacillus subtillis. Если в фекалиях поросят-отъёмышей контрольной гр. бактерии рода Bacillus subtillis не были обнаружены, то у животных опытных групп их содержание было на уровне
6.4-10,4% lg КОЕ/г. При использовании про-биотика Витафорт резко возросло содержание представителей облигатной микрофлоры. Так, со-
держание бифидо- и лактобактерий в кишечнике поросят-отъёмышей опытных групп было выше по сравнению с показателями в контрольной гр. соответственно на 4,8—22,0% и 13,2—35,8%, при более высоких показателях у молодняка II опытной гр. По сравнению с началом опыта содержание лак-топозитивной кишечной палочки возросло при использовании пробиотика на 4,0—4,6 lg КОЕ/г, а уровень энтерококков у поросят II опытной гр. увеличился на 2 lg КОЕ/г (Р< 0,01).
Таким образом, проведёнными исследования -ми установлено, что использование пробиотика Витафорт в дозе 0,5 мл в расчёте на 10 кг живой массы тела животного оказало наибольший эффект на степень колонизации кишечника поросят-отъёмышей лакто- и бифидофлорой.
Установлено, что в фекалиях ягнят I контрольной гр. количество исследуемых микроорганизмов находилось на уровне: бифидобактерий — 9,5 lg КОЕ/г, лактобактерий — 8,0 lg КОЕ/г, E.coli 5,3 lg КОЕ/г, золотистого стафилококка (St. aureus) — 5,3 lg КОЕ/г, Bacillus subtilis не обнаружено. Данные количественные значения рассматривались как фоновые физиологические показатели и были приняты за 100%. При использовании пробиотика Витафорт у ягнят опытных групп возросло содержание представителей облигатной микрофлоры. Так, у ягнят II опытной гр., получавших пробиотик Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг живой массы, содержание бифидо- и лактобактерий в кишечнике к концу опыта было выше на 6,3 (P<0,05) и 11,3% (P<0,05) по сравнению с молодняком I контрольной гр.
Увеличение количества бифидо- и лактобак-терий способствовало уменьшению количества условно-патогенных микроорганизмов, так как они препятствуют избыточному их размножению и тем самым способствуют улучшению иммунитета животного.
Среди представителей условно-патогенной микрофлоры в фекалиях ягнят контрольных гр. было обнаружено повышенное количество Edi — до 5,3—9,7l g КОЕ/г вместо 2,7 g КОЕ/г у молодняка II опытной гр. (P<0,05). В группах ягнят, получавших пробиотик Витафорт, регистрировалось снижение уровня кишечной палочки с минимальным значением также во II опытной гр. — 2,7 lg КОЕ/г (P<0,05). Данная динамика установлена и при изучении уровня золотистого стафилококка. Так, у ягнят I контрольной гр. содержание St.aureus было на уровне 5,3±0,23 lg КОЕ/г, а у ягнят, получавших Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг живой массы, — 4,4±0,30 lg КОЕ/г. У молодняка всех опытных групп содержание Bac.subtillis было выше, чем у сверстников I контрольной гр. Увеличение их содержания в наибольшей степени наблюдалось в кишечнике ягнят III опытной гр. Клостридии и дрожжеподобные грибы рода Candida у ягнят контрольной и опытных групп не были обнаружены.
Таким образом, использование пробиотика Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг живой массы в рационах ягнят оказало положительное влияние на качественные изменения микробиоценоза.
Выводы. Результаты исследования показали, что становление микрофлоры кишечника телят, поросят и ягнят контрольной и опытных групп отличалось по составу кишечного биоценоза. Установлено, что использование пробиотика Витафорт в дозе 0,1 мл на 10 кг живой массы в рационах телят и ягнят, а в рационах поросят в дозе 0,5 мл на 10 кг живой массы положительно воздействует на качественные изменения микробиоценоза.
Литература
1. Андреева А.В., Николаева О.Н. Иммунобиологические изменения в организме телят под влиянием композиций фитопробиотиков и полисолей микроэлементов // Достижения науки и техники АПК. 2008. № 4. С. 36-39.
2. Башаров А.А., Хазиахметов Ф.С. Пробиотики серии Витафорт в рационах телят // Зоотехния. 2011. № 3. С. 17-18.
3. Диетические корма, ароматические и вкусовые добавки при выращивании молодняка сельскохозяйственных животных:
практическое руководство / Ф.С. Хазиахметов, Б.Г. Шари-фянов, Х.Х. Тагиров и др. Уфа: Мир печати, 2006. 36 с.
4. Нугуманов Г.О., Хазиахметов Ф.С., Андреева А.В. Влияние пробиотика Витафорт и Ветом на состав кишечной микрофлоры поросят-отъёмышей // Фундаментальные исследования. 2013. № 6 (Ч. 3). С. 606-610.
5. Тагиров Х.Х., Долженкова Г.М., Вагапов И.Ф. Мясная продуктивность бычков при скармливании им кормовой добавки Биодарин // Зоотехния. 2015. № 7. С. 25-26.
6. Миронова И.В., Косилов В.И. Переваримость коровами основных питательных веществ рационов коров чёрно-пёстрой породы пр использовании в кормлении пробиотиче-ской добавки Ветоспорин-актив // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2015. № 2 (52). С. 143-146.
7. Хазиахметов Ф.С., Камильянов А.А. Влияние пробиотика Витафорт на микробиоценозы фекалий ягнят // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2015. № 5 (55). С. 218-220.
8. Хазиахметов Ф.С. Рациональное кормление животных. СПб.: Лань, 2011. 368 с.
9. Никулин В.Н., Мустафин Р.З. Эффективность применения пробиотика лактомикроцикол при выращивании телят красной степной породы // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2008. № 3 (19). С. 210-212.
10. Буравов А. Потенциал мясной продуктивности симментальского скота, разводимого на Южном Урале / А. Буравов, А. Салихов, В. Косилов, Е. Никонова // Молочное и мясное скотоводство. 2011. № 1. С. 18-19.
Морфологические и биохимические показатели крови бычков разных генотипов
Д.М.Ахмедов, соискатель, ТАИргашев,д.с.-х.н., Институт животноводства ТАСХН, В.И. Косилов, д.с.-х.н., профессор, ФГБОУ ВО Оренбургский ГАУ
Гематологические показатели, так же как и клинические, очень лабильны к условиям среды, это эволюционно закреплено у живого организма и обеспечивает его адаптацию в постоянно изменяющемся мире. Гематологические показатели крови и динамика их компонентов в половозрастном аспекте изучались у многих видов и пород сельскохозяйственных животных [1-4]. Отмечая их большую роль в обменных, окислительно-восстановительных и защитных функциях организма, авторы подчёркивают, что эти показатели также могут быть опосредованно связаны через обмен веществ с некоторыми продуктивными признаками по типу физиологических корреляций, что помогает эффективнее вести отбор животных.
Исследования, проведённые ранее по данному вопросу, показывают, что общие закономерности изменений картины крови зависят от возраста, породы, сезона года, уровня кормления и продуктивности [5-9].
Материал и методы исследования. Экспериментальная часть исследования проведена в производственных условиях долинной зоны Республики Таджикистан.
Объектом исследования были бычки таджикского типа чёрно-пёстрой породы (I гр.), молодняк местной популяции чёрно-пёстрой породы (II гр.)
и животные таджикского внутрипородного типа швицезебувидного скота (III гр.).
В крови определяли количество эритроцитов, лейкоцитов, белка и содержание гемоглобина, а в сыворотке крови - содержание общего белка и его фракции.
Статистическую обработку цифрового материала выполняли методом вариационной статистики [10].
Результаты исследования. Анализ полученных данных свидетельствует, что у бычков местной популяции чёрно-пёстрой породы и их сверстников таджикского типа чёрно-пёстрого скота в возрасте 18 мес. (лето) отмечалась повышенная концентрация гемоглобина - 114,3 и 118,7 г/л, а в возрасте 21 мес. наблюдалось его снижение до уровня 103,7 и 102,7 г/л соответственно (табл.). При этом у бычков таджикского внутрипород-ного типа швицезебувидного скота в этот период изучаемый показатель повышался от 99,7 г/л до 106,7 г/л (107,0%; P<0,01). Следует отметить, что эта закономерность наблюдалась в крови животных и по содержанию эритроцитов и лейкоцитов. Достаточно отметить, что в возрасте полутора лет по концентрации эритроцитов животные I и II гр. превосходили аналогов III гр. на 0,97-1012/л (114,7%; P<0,001) и 1,26-1012/л (120,5%; P<0,001) соответственно. По содержанию лейкоцитов отмечалась аналогичная закономерность.
Таким образом, общая концентрация гемоглобина, эритроцитов и лейкоцитов в крови подопытных бычков характеризовалась оптимальными
