CC BY
61
ISSN 2412-608Х. МАСЛИЧНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. Вып. 4 (164), 2015
УДК 632.937:632.4:633.853.493
УСЛОВИЯ И СРОКИ ХРАНЕНИЯ РАЗНЫХ ПРЕПАРАТИВНЫХ ФОРМ МИКРОБИОПРЕПАРАТОВ НАОСНОВЕ ПЕРСПЕКТИВНЫХ ШТАММОВ-АНТАГОНИСТОВ ВОЗБУДИТЕЛЯ БЕЛОЙ ГНИЛИ
Л.В. Маслиенко,
доктор биологических наук
ФГБНУ ВНИИМК
Россия, 350038, г. Краснодар, ул. им. Филатова, д. 17 Тел.: (861) 275-85-19 E-mail: biometod@,yandex. ru
Для цитирования:Маслиенко Л.В.Условия и сроки хранения разных препаративных форм микробиопрепаратов на основе перспективных штаммов-антагонистов возбудителя белой гнили// Масличные культуры. Научно-технический бюллетень Всероссийского научно-исследовательского института масличных культур. - 2015. -Вып. 4 (164). - С. 74-80.
Ключевые слова: белая гниль, рапс, штаммы-антагонисты, микробиопрепараты, препаративные формы.
В результате ступенчатого скрининга из коллекции лаборатории биометода ВНИИМК отобраны штаммы, активно разлагающие склероции белой гнили рапса и обладающие ростостимули-рующей активностью к культуре рапса, -Xk-1-4 СИае(отштоНуасеити Б-12 Bacilluslicheniformis. В целях разработки элементов технологического регламента производства микробиопрепаратов на основе этих штаммов определяли условия и сроки хранения препаративных форм жидкая культура и порошок в двух модификациях. Установлено, что жидкую культуру микробиопрепарата на основе штамма гриба Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum можно сохранить с титром на уровне 1,0-9,0 х 106 КОЕ/мл в течение двух месяцев как в условиях холодильника, так и в условиях переменной температуры с добавкой 0,1 % аскорбиновой кислоты, 5,0 % ПВП и 10,0 % гумата натрия. Лучшей препаративной формой для микробиопрепарата на основе штамма гриба Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum установлен порошок на перлите, полученный смывом спор с твёрдой питательной среды с последующим смешиванием с наполнителем, сохраняющий
титр при переменной температуре на уровне 107 КОЕ/мл в течение девяти месяцев. В отличие от грибного препарата, жидкую культуру микробиопрепарата на основе бактерии Б-12 Bacillus licheniformis можно хранить в условиях переменной температуры в течение шести месяцев с сохранением титра на уровне 1010 КОЕ/мл с добавкой 1,0 % ПВП или 10,0 % гумата натрия, или 5,0 % глицерина. В препаративной форме порошок на перлите титр бактериального препарата сохранялся на уровне 1010 КОЕ/г в условиях переменной температуры в течение девяти месяцев.
UDC 632.937:632.4:633.853.493
Conditions and periods of storage of the different preparation forms of microbiopreparations based on perspective strain-antagonists of a white rot pathogen.
MaslienkoL.V.,doctor of biology FGBNUVNIIMK
17, Filatovastr., Krasnodar, 350038, Russia Tel.: (861) 275-85-19 [email protected]
Key nw//.v:white rot, rapeseed, strains-antagonists, microbiopreparations, preparation forms.
Xk-1-4 ChaetomiumolivaceumandB-12 Bacillus licheniformis - the strains actively decomposing sclerotia of a white rot on rapeseed and possessing a growth stimulating activity to a rapeseeds - were selected by graded screening from a collection of the laboratory of biological methods of VNIIMK. Conditions and periods of storage of preparation forms liquid culture and powder in two modifications were determined to develop elements of the technological regulations for production of microbiopreparations on a base of these strains. A liquid culture based on a strain of a fungus Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum can be kept with a titer on a level 1.0-9.0 х 106 KFU/ml within two months both in fridge and at variable temperature adding 0.1% ascorbic acid, 5.0% PVP and 10.0% sodium humate. The best preparation form for a microbiopreparation based on a strain of a fungus Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum is a powder on per-lite, developed by spore washout from a hard nutrient medium, further mixed withfiller, keeping a titer at variabletemperature on a level 107 KFU/ml within nine months. Compared to a fungus preparation, a liquid culture of microbiopreparation based on B-12 Bacilluslicheniformiscan be kept at variable temperature during six months with a titer holding the level of 1010 KFU/ml adding 1.0% PVP or 10.0% sodium humate or 5.0 % glycerin. When using preparation
from powder on perlitetiter of the preparation have been kept on the level 1010 KFU/gat variable temperature within nine months.
Введение. Особую опасность для многих сельскохозяйственных растений, в т.ч. и масличных культур (подсолнечника, сои и рапса), представляет белая гниль Sclerotiniasclerotiorum (Lib.) DeBary. В регионе Северного Кавказа белая гниль особенно вредоносна в последние годы на озимом рапсе. Вредоносность болезни выражается в преждевременном усыха-нии растений, снижении урожая и ухудшении его качества.
В мире достаточно активно ведутся исследования с целью снижения вредоносности белой гнили на многих сельскохозяйственных культурах с использованием штаммов микробов-антагонистов [1-10], однако микробиопрепаратов на основе активных штаммов явно недостаточно.
В лаборатории биометода ВНИИМК создана уникальная коллекция перспективных штаммов-продуцентов микробиопрепаратов, включающая штаммы грибов, относящихся к родам Penicillium, Chaetomium, Trichoderma, Sordaria, Gliocladium, Aspergillus, Fusarium, Talaromyces, и штаммы бактерий, относящихся к родамBacШus и Pseudomonas, -антагонистовмногих заболеваний масличных и других сельскохозяйственных культур[11]. В результате ступенчатого скрининга из коллекции отобраны штаммы, активно разлагающие склероции белой гнили рапса и обладающие ростостимулирующей активностью к культуре рапса, -Xk-1-4 Chaetomium olivaceumи Б-12 Bacillus licheniformis [12].
В целях разработки элементов технологического регламента производства микробиопрепаратов на основе отобранных штаммов определяли условия и сроки хранения разных препаративных форм.
Материалы и методы. Исследования проводили на центральной экспериментальной базе, в лаборатории биометода ВНИИМК.
Опытные образцы разных препаративных форм микробиопрепаратов на основе перспективных штаммов-антагонистов изготавливали в лаборатории биометода ВНИИМК. Испытывали препаративные формы: жидкая культура (ЖК) - при глубинном культивировании штаммов на искусственных питательных средах и порошок (П) в двух модификациях: при глубинном культивировании штаммов на жидкой питательной среде с последующим смешиванием отценрифугированной жидкой культуры с наполнителем перлит в соотношении 1:0,4 и 1:0,8 и при поверхностном культивировании штамма на твёрдой питательной среде с последующим смывом спор и смешиванием суспензии с наполнителем перлит (для штамма Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum). Для увеличения срока хранения препаративной формы ЖК испытывали стабилизаторы и питательные добавки: поливинилпироллидон (ПВП), гумат натрия, аскорбиновую кислоту, глицерин, хлористый магний, сульфат магния. Опытные образцы микробиопрепаратов хранили в холодильнике при температуре 10 оС и в условиях переменной температуры (18-25 оС) в лаборатории.
Титр во всех опытах определяли методом Коха [13]. Определение числа коло-ниеобразующих единиц (КОЕ) в 1,0 мл или 1 г включает три этапа: приготовление разведений, посев на питательную среду в чашки Петри (ЧП) и подсчет выросших колоний. Для этого 1,0 мл ЖК или 1 г порошка стерильной пипеткой или шпателем переносили в колбу с 99,0 мл стерильной воды и ставили на качалку на 10-15 мин. Из полученной суспензии готовили разведение от 1 : 10 до 1 : 1000000000. Суспензию из соответствующего разведения закапывали по 1,0 мл в три чашки Петри (ЧП). Затем заливали в чашки по 15,0-20,0 мл агаризированной среды, остуженной до 45-50 °С, и смешивали питательную среду с посевным материалом легкими вращательными дви-
жениями. ЧП ставили в термостат с оптимальной температурой и через 5-7 дней считали среднее число колоний в трёх ЧП.
Титр вычисляли по формуле:
Т = а х 10п / V,
гдеТ - количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1,0 мл/г;
а - среднее число колоний, выросших после посева из данного разведения;
V - объем суспензии, взятый для посева; 10п - коэффициент разведения.
Результаты и обсуждение.Условия и
сроки хранения микробиопрепарата на основе штамма гриба Хк-1-4 Chaetomium olivaceumв различных препаративных формах.
Препаративная форма ЖК, полученная при глубинном культивировании штамма гриба Хк-1-4 Chaetomiumolivaceum, имела титр 1,0-2,0 х 107 КОЕ/мл и была технологична в применении. К сожалению, эта препаративная форма быстро теряла титр как в условиях холодильника (табл. 1), так и в условиях переменной температуры (табл. 2).
Таблица 1
Влияние стабилизаторов и сроков хранения микробиопрепарата на титр препаративной формы жидкая культура (глубинное культивирование штамма гриба Хк-1-4 Скае1отшто11уасеит) при температуре 10 оС
г. Краснодар, 2012 г.
Стабилизатор, % Титр, КОЕ/мл
перед закладкой на хранение через месяц через двамеся-ца
Контроль без стабилизатора 1,2 х 107 1,0 х 106 4,0 х 105
ПВП 1,0 -//- * 1,2 х 106 4,5 х 105
3,0 1,0 х 106 3,8 х 105
5,0 3,5 х 106 1,9 х 106
Гуматнатрия 5,0 3,0 х 106 8,6 х 105
10,0 3,0 х 106 1,0 х 106
20,0 1,8 х 106 4,0 х 106
50,0 1,8 х 106 3,9 х 105
Аскорбиновая кислота 0,1 1,0 х 10' 4,8 х 106
0,25 5,6 х 106 3,0 х 106
Глицерин 5,0 3,0 х 106 8,9 х 105
10,0 3,5 х 106 1,0 х 106
Хлористый магний 5,0 2,0 х 106 8,0 х 105
10,0 2,8 х 106 8,9 х 105
Сульфат магния 5,0 3,0 х 106 9,0 х 105
10,0 3,5 х 106 1,0 х 106
* здесь и далее титр аналогичен контрольному без стабилизатора
Таблица 2
Влияние стабилизаторов и сроков хранения микробиопрепарата на титр препаративной формы жидкая культура (глубинное культивирование штамма гриба Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum) при температуре 18-25оС
г. Краснодар, 2012 г.
Стабилизатор, % Титр, КОЕ/мл
перед закладкой на хранение через месяц через дваме-сяца
Контроль без стабилизатора 1,2 х 107 1,0 х 106 3,0 х 105
ПВП 1,0 -//- * 1,5 х 106 4,8 х 105
3,0 8,0 х 105 3,9 х 105
5,0 8,6 х 105 1,0 х 106
Гумат натрия 5,0 1,0 х 106 8,0 х 105
10,0 3,0 х 106 1,9 х 106
20,0 7,0 х 106 1,0 х 106
50,0 3,0 х 106 3,9 х 105
Аскорбиновая кислота 0,1 1,5 х 107 9,0 х 106
0,25 4,0 х 106 1,6 х 106
Глицерин 5,0 3,0 х 106 9,0 х 105
10,0 3,8 х 106 3,0 х 106
Хлористый магний 5,0 1,8 х 106 5,9 х 105
10,0 2,0 х 106 6,5 х 105
Сульфат магния 5,0 2,0 х 106 8,6 х 105
10,0 1,8 х 106 3,0 х 106
* здесь и далее титр аналогичен контрольному без стабилизатора
Через два месяца хранения титр препарата в контроле, как в холодильнике, так и в условиях переменной температуры, снизился на два порядка (1,2 х 107 - 4,0 х 105 КОЕ/мл). Лучшими добавками установлены 0,1 % аскорбиновая кислота, 5,0 % ПВП и 10,0 % гумат натрия. В этих вариантах титр снизился на один порядок и составил 1,0-9,0 х 106 КОЕ/мл.
Микробиопрепарат в препаративной форме порошок на перлите хранился в условиях переменной температуры лучше жидкой культуры (табл.3).
Установлено, что в течение первого месяца хранения титр препарата для всех его модификаций, в зависимости от количества наполнителя и условий культивирования штамма, даже незначительно увеличивался. В дальнейшем, при хранении препарата в течение девяти месяцев, титр оставался с тем же порядком, что и перед закладкой на хранение. При этом титр препарата, полученного при выра-
щивании на твёрдой питательной среде с последующим смывом спор и смешиванием суспензии с перлитом, был на порядок выше, чем у препарата, полученного при глубинном культивировании штамма с последующим смешиванием с наполнителем.
Таблица 3
Влияние срока хранения микробиопрепарата на основе штамма гриба Х^1-4 Chaetomium о1^асеит в препаративной форме порошок на титр в условиях переменной температуры
Таким образом, наиболее перспективной препаративной формой микробиопрепарата на основе штамма гриба Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum, технологичной при производстве, долго сохраняющей титр при переменной температуре, можно считать порошок на перлите, полученный смывом спор с твёрдой питательной среды с последующим смешиванием с наполнителем.
Условия и сроки хранения микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 Bacilluslicheniformisв различных препаративных формах.
Титр ЖК микробиопрепарата, получаемого при глубинном культивировании штамма бактерии Б-12 Bacillus licheniformis, был 1,0-2,0 х 1012 КОЕ/мл. Препаративная форма жидкая культура была технологична при применении, но также хранилась без изменения титра как в условиях холодильника, так и в услови-
ях переменной температуры в течение месяца.
Для увеличения срока хранения препаративной формы ЖК нами испытывались стабилизаторы и питательные добавки. Биопрепарат хранили в холодильнике при температуре 10 °С (табл. 4) и в условиях переменной температуры (18-25 °С) в лаборатории (табл. 5).
Таблица 4
Влияние стабилизаторов и сроков хранения на титр микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 Bacillus licheniformise препаративной форме жидкая культура (глубинное культивирование) при температуре 10 оС
г. Краснодар, 2012 г.
Стабилизатор, % Титр, КОЕ/мл
перед закладкой на хранение через, месяцев
1 3 6
Контроль без стабилизатора 1,9х1012 2,0х1012 2,1х1011 7,0 х 109
ПВП 1,0 -//-* 2,3х1012 1,3х1011 1,2 х 1010
3,0 1,1х1012 3,2х1011 8,3 х 1010
5,0 2,5х1012 1,6х1011 1,1 х 1010
Гумат натрия 5,0 2,5х1012 2,1х1011 1,8 х 1010
10,0 4,3х1012 3,0х1011 2,1 х 1010
20,0 9,5х1012 2,1х1011 3,7 х 1010
50,0 2,5х1012 1,8х1011 1,3 х 1010
Аскорбиновая кислота 0,1 2,6х1012 5,0х1011 9,3 х 109
0,25 2,6х1012 1,6х1011 2,2 х 1010
Глицерин 5,0 6,0 х 1011 2,6х1011 1,4 х 1010
10,0 2,0 х 1011 2,4х1011 2,3 х 1010
Хлористый магний 5,0 1,0 х 1011 2,3х1011 2,3 х 1010
10,0 2,0 х 1011 2,5х1011 2,3 х 1010
Сульфат магния 5,0 5,0 х 1011 3,5х1011 1,3 х 1010
10,0 9,0 х 1011 3,3х1011 1,4 х 1010
* здесь и далее титр аналогичен контрольному без стабилизатора
Установлено, что через месяц хранения ЖК в холодильнике титр в контроле не изменился, а в вариантах с 10,0 и 20,0 %гуматом натрия даже повысился (4,3 х 1012 КОЕ/мл и 9,5 х 1012 КОЕ/мл против 2,0 х 1012 КОЕ/мл в контроле).
Через три месяца хранения в условиях холодильника титр снизился как в контроле, так и во всех вариантах на один порядок. Лучшим вариантом отмечена
г. Краснодар, 2012 г.
Вариант Титр, КОЕ/г, при температуре 18-25 оС
перед закладкой на хранение через, месяцев
1 3 6 9
Суспензия + перлит 1:0,8 8,7 х 106 2,0 х 107 8,5 х 106 2,0 х 106 1,0 х 106
1:0,4 5,7 х 107 1,0 х 108 2,8 х 107 1,8 х 107 1,0 х 107
Глубинная-культур а + перлит 1:0,8 3,0 х 106 3,6 х 106 3,0 х 106 8,0 х 105 1,0 х 105
1:0,4 6,6 х 106 7,0 х 106 7,0 х 106 2,5 х 106 8,5 х 105
добавка 0,1 % аскорбиновой кислоты, титр составил 5,0 х 1011 КОЕ/мл против 2,1 х 1011 КОЕ/мл в контроле.
Через шесть месяцев хранения ЖК в условиях холодильника титр препарата в контроле снизился на три порядка и составил 7,0 х 109 КОЕ/мл. Во всех вариантах с добавками титр был выше контроля на порядок и лучшими добавками установлены 20,0 %гумат натрия и 3,0 % ПВП-титр составил 3,7-8,3 х 1010 КОЕ/мл.
При хранении ЖК микробиопрепарата на основе бактерии Б-12 Bacillus licheniformisв условиях переменной температуры лаборатории в течение месяца титр в контроле незначительно снизился, но остался на уровне 1012 КОЕ/мл (табл. 5).
Таблица 5
Влияние стабилизаторов и сроков хранения на титр микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 Bacillus licheniformis в препаративной форме жидкая культура (глубинное культивирование) при температуре 18-25оС
В вариантах с 1,0 % ПВП, 10,0 и 20,0 % гуматом натрия и 0,25 % аскорбиновой
кислотой титр ЖК даже повысился и составил 5,1-8,1 х 1012 КОЕ/мл против 1,0 х 1012 КОЕ/мл в контроле.
Через три месяца хранения в условиях переменной температуры титр препарата в контроле снизился на порядок и составил 2,3 х 1011 КОЕ/мл. Лучшим вариантом установлен 10,0 % гумат натрия, титр составил 9,7 х 1011 КОЕ/мл.
Через шесть месяцев хранения ЖК препарата в условиях переменной температуры титр в контроле снизился на три порядка и составил 6,3 х 109 КОЕ/мл. Во всех вариантах с добавками титр был выше контроля на порядок, но лучшими определены 50,0 и 10,0 % гумат натрия, 1,0; 3,0 и 5,0 % ПВП, а также 5,0 и 10,0 % глицерин, где титр составил 3,1-5,0 х 1010 КОЕ/мл.
Таким образом, установлено, что ЖК микробиопрепарата на основе бактерии Б-12 BacШuslicheniformis можно хранить в условиях переменной температуры в течение шести месяцев с сохранением титра на уровне 1010 КОЕ/мл с добавкой 1,0 % ПВП или 10,0 % гумата натрия, или 5,0 % глицерина.
С целью увеличения срока хранения и возможности наработки микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 Ba-cШuslicheniformis в заводских условиях нами отрабатывалась препаративная форма порошок с добавлением перлита (табл. 6).
Таблица 6
Влияние срока хранения микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 БасИ-luslicheniformis в препаративной форме порошок на перлите на титр при темпе-
ратуре 18-25оС _ г. Краснодар, 2012 г.
Срок хранения, месяц Титр, КОЕ/г
Перед закладкой на хранение 1,1x10"
1 2,9x10"
2 1,8x10"
3 3,7x10"
4 1,6х1010
5 1,3х1010
6 1,0х1010
9 1,0х1010
г. Краснодар, 2012 г.
Стабилизатор, % Титр, КОЕ/мл
перед закладкой на хранение че рез, месяцев
1 3 6
Контроль безстабилизатора 1,9 х 1012 1,0 х 1012 2,3 х 1011 6,3 х 109
ПВП 1,0 -//- 7,6 х 1012 1,3 х 1011 3,9 х 1010
3,0 1,1 х 1012 1,2 х 1011 3,9 х 1010
5,0 1,5 х 1012 1,7 х 1011 3,4 х 1010
Гумат-натрия 5,0 1,7 х 1012 1,5 х 1011 1,4 х 1010
10,0 8,1 х 1012 9,7 х 1011 3,1 х 1010
20,0 6,4 х 1012 2,2 х 1011 1,1 х 1010
50,0 2,0 х 1012 5,2 х 1011 5,0 х 1010
Аскорбиновая-кислота 0,1 1,0 х 1012 1,0 х 1011 2,9 х 1010
0,25 5,1 х 1012 5,0 х 1011 2,5 х 1010
Глицерин 5,0 3,0 х 1012 5,1 х 1011 3,5 х 1010
10,0 2,3 х 1011 3,5 х 1011 3,1 х 1010
Хлори- стыймаг- ний 5,0 2,5 х 1011 3,3 х 1011 1,3 х 1010
10,0 1,0 х 1011 4,0 х 1011 2,0 х 1010
Сульфат-магния 5,0 7,0 х 1011 6,7 х 1011 1,7 х 1010
10,0 9,8 х 1011 6,8 х 1011 1,5 х 1010
* здесь и далее титр аналогичен контрольному без стабилизатора
Установлено, что в течение первых трех месяцев хранения препаративной формы порошок на перлите в условиях переменной температуры в лаборатории титр не изменялся (1,1-2,9 х 1011 КОЕ/г). В дальнейшем, при хранении препарата в течение шести месяцев, происходило снижение титра, но он оставался высоким и составлял 1,0 х 1010 КОЕ/г.
Таким образом, наиболее технологичными препаративными формами микробиопрепарата на основе штамма бактерии Б-12 Bacillus licheniformis при производстве и хранении можно считать жидкую культуру при глубинном культивировании с добавкой ПВП или гу-мата натрия, или глицерина, а также порошок на перлите.
Выводы. 1. Для перспективных штаммов-антагонистов Xk-1-4 Chaetomium olivaceum и Б-12 Bacillus licheniformis разработаны препаративные формы микробиопрепаратов жидкая культура и порошок в двух модификациях.
2. Жидкую культуру микробиопрепарата на основе штамма гриба Xk-1-4 Chaetomium olivaceum можно сохранить с титром на уровне 1,0-9,0 х 106 КОЕ/мл в течение двух месяцев как в условиях холодильника, так и в условиях переменной температуры с добавкой 0,1 % аскорбиновой кислоты, 5,0 % ПВП и 10,0 % гумата натрия.
3. Лучшей препаративной формой для микробиопрепарата на основе штамма гриба Xk-1-4 Chaetomiumolivaceum установлен порошок на перлите, полученный смывом спор с твёрдой питательной среды с последующим смешиванием с наполнителем, сохраняющий титр при переменной температуре на уровне 10' КОЕ/мл в течение девяти месяцев.
4. В отличие от грибного препарата, жидкую культуру микробиопрепарата на основе бактерии Б-12 Bacilluslicheniformis можно хранить в условиях переменной температуры в течение шести месяцев с сохранением титра
на уровне 1010 КОЕ/мл с добавкой 1,0 % ПВП или 10,0 % гумата натрия, или 5,0 % глицерина.
5. В препаративной форме порошок на перлите титр бактериального препарата сохранялся на уровне 1010 КОЕ/г в условиях переменной температуры в течение девяти месяцев.
Исследования выполнены при финансовой поддержке РФФИ, грант 11-08-96512.
Списоклитературы
1. Huang H.C. Distribution of Coniothyrium minitans in Manitoba sunflower fields // Canada I. Plant Pathol. - 1981. - No 4. - С. 219-222.
2. Бондаренко А.И., Штейнберг М.Е. Ми-кофлора склероциев белой гнили подсолнечника и её гиперпаразитическая активность // Биологическая регуляция численности вредных организмов. - М., 1986. - С.122-133.
3. Богданова В.Н., Крутова Н.П. Применение гиперпаразита Coniothyrium minitans против белой гнили подсолнечника // Бюллетень ВНИИ защиты растений. - СПб., 1988. -70. - С. 7-11.
4. Тихонов О.И., Маслиенко Л.В. Влияние грибов-антагонистов на выживаемость скле-роциев белой гнили в почве // Болезни подсолнечника. - Краснодар, 1988. - С. 15-18.
5. Апсите А.Ф., Швинка Ю.Э., Стрикауска С.В., Виестурс У.Э., Лисовска А.Я., Бичевскис Е.Я., Свока И.М., Беника Р.Г. Использование триходермина для защиты растений от фито-патогенных микромицетов // Вестник с.-х. науки. - 1989. - №9 (397). - С. 114-118.
6. MaslienkoL. V. Biologicheskiy metod zashchity podsolnechnika i drugikh sel'skokhozyaystvennykh kul'tur ot bolezney // AgroKhKhl. - 1999. - № 8. - S. 8-9.
7. Soytong K., Kanokmedhakul S., Kukongviriyapa V. [et al.]. Application of Chaetomium sp. (Ketomium) as a new broad spectrum biological fungicide for plant disease control: A review article // Fungal Diversity. -2001. - No 7. - P. 1-15.
8. Коломбет Л.В. Грибы рода Trichoderma как продуценты биофунгицидов: прошлое, настоящее, будущее // Мат. первого съезда микологов «Современная микология в России». -М., 2002. - С. 229.
9. Shternshis M., Tomilova O., Shpatova T., Maslienko L., Soytong K. Biological Fungicides Based on Chaetomium for Plant Protection // Int. Conf. on Integration of Science and Technology for Sustainable Development, Bangkok, Thailand, 2007. - P. 304-307.
10. Маслиенко Л.В. Перспективные микробиопрепараты полифункционального типа действия для защиты масличных и других сельскохозяйственных культур от болезней // Мат. УНМеждунар. науч. конф. «Современное состояние и перспективы развития микробиологии и биотехнологии». - Минск, 2010. - С. 491493.
11. Маслиенко Л.В. Лаборатория биологических средств защиты растений (вчера, сегодня, завтра) // История научных исследований во ВНИИМКе за 90 лет. - Краснодар, 2003. -С. 273-281.
12. Маслиенко Л.В., Курилова Д.А., Шипи-евская Е.Ю. Скрининг штаммов-антагонистов возбудителя белой гнили рапса // Масличные культуры. Науч.-тех. бюл. ВНИИМК. - 2012 . - Вып. 2 (151-152). - С. 183-191.
13. НетрусовФ.И., Егорова М.А., Захарчук Л.М. [и др.]. Практикум по микробиологии. -М.: Издательский центр «Академия», 2005. -608 с.
References
1. Huang H.C. Distribution of Coniothyrium minitans in Manitoba sunflower fields // Canada I. Plant Pathol. - 1981. - No 4. - P. 219-222.
2. Bondarenko A.I., Shteynberg M.E. Mikoflorasklerotsievbeloygnili podsolnechnika i ee giperparaziticheskaya aktivnost' // Biologicheskaya regulyatsiya chislennosti vrednykh organizmov. - M., 1986. - S.122-133.
3. Bogdanova V.N., Krutova N.P. Primenenie giperparazita Coniothyrium minitans protiv beloy gnili podsolnechnika // Byulleten' VNII zashchity rasteniy. - SPb., 1988. - 70. - S. 7-11.
4. Tikhonov O.I., Maslienko L.V. Vliyanie gribov-antagonistov na vyzhivaemost'
sklerotsiev beloy gnili v pochve // Bolezni podsolnechnika. - Krasnodar, 1988. - S. 15-18.
5. Apsite A.F., ShvinkaYu.E., Strikauska S.V., Viesturs U.E., Lisovska A. Ya., Bichevskis E.Ya., Svoka I.M., Benika R.G. Ispol'zovanie trikhodermina dlya zashchity rasteniy ot fitopatogennykh mikromitsetov // Vestnik s.-kh. nauki. - 1989. - № 9 (397). - S. 114-118.
6. Maslienko L.V. Biologicheskiy metod zashchity podsolnechnika i drugikh sel'skokhozyaystvennykh kul'tur ot bolezney // Agro KhKhI. - 1999. - № 8. - S. 8-9.
7. Soytong K., Kanokmedhakul S., Kukongviriyapa V. [et al.]. Application of Chaetomium sp. (Ketomium) as a new broad spectrum biological fungicide for plant disease control: A review article // Fungal Diversity. -2001. - No 7. - P. 1-15.
8. Kolombet L.V. Griby roda Trichoderma kak produtsenty biofungitsidov: proshloe, nastoyashchee, budushchee // Mat. pervogo s"ezda mikologov «Sovremennaya mikologiya v Rossii». - M., 2002. - S. 229.
9. Shternshis M., Tomilova O., Shpatova T., Maslienko L., Soytong K. Biological Fungicides Based on Chaetomium for Plant Protection // Int. Conf. on Integration of Science and Technology for Sustainable Development, Bangkok, Thai land, 2007. - P. 304-307.
10. Maslienko L.V. Perspektivnye mikrobiopreparaty polifunktsional'nogo tipa deystviya dlya zashchity maslichnykh i drugikh-sel'skokhozyaystvennykh kul'tur ot bolezney // Mat. VII Mezhd. nauch. konf. «Sovremennoe-sostoyanie i perspektivy razvitiya mikrobiologii i biotekhnologii». - Minsk, 2010. - S. 491-493.
11. Maslienko L.V. Laboratoriya biologi-cheskikh sredstv zashchity rasteniy (vchera, segodnya, zavtra) // Istoriya nauchnykh issledovaniy vo VNIIMKe za 90 let. - Krasnodar, 2003. - S. 273-281.
12. Maslienko L.V., Kurilova D.A., Shipievskaya E.Yu. Skrining shtammov-antagonistov vozbuditelya beloy gnili rapsa // Maslichnyekul'tury. Nauch.-tekh. byul. VNIIMK - 2012 . - Vyp. 2 (151-152). - S. 183191.
13.Netrusov F.I.,Egorova М.А., Zakharchuk LM. [i dr.]. Praktikum po mikrobiologii. - М.: Izdatelsky tsentr «Akademiya», 2005. - 608 s.
