CC BY
6
Методы исследования
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1097 УДК 616.21/.23-02:614.]-076.5
Г. И. Сидоренко, Н. Н. Беляева, Е. И. Кутепов, А. А. Шамарин, Ж. Г. Чарыева, Е. П. Лещева
ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК КАК КРИТЕРИЙ ЭКОЛОГИЧЕСКОГО РИСКА
НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А. Н. Сысина РАМН. Москва
Многочисленные работы, в том числе и последних лет, в основном были посвящены изучению влияния факторов окружающей среды на здоровье, характеризуемое демографическими показателями, заболеваемостью, инвалидностью и физическим развитием, что не в полной мере отражает как состояние здоровья населения, так и характер взаимоотношений в системе среда — здоровье [24. 25].
Значительно меньшее внимание уделяется диагностике преморбидных состояний, которая позволяет выявлять ранние неблагоприятные изменения в состоянии здоровья населения и рекомендовать целенаправленные профилактические мероприятия [II, 21—23, 26, 28|.
Для диагностики преморбидных состояний используют различные показатели, отражающие лишь некоторые стороны состояния иммунного и психического статуса, сердечно-сосудистой системы, органов дыхания и др.. причем оценка получаемых результатов носит выраженный "параметрический характер", при котором любые отклонения показателей трактуются как неблагоприятные, без учета того обстоятельства, что разнонаправленные изменения величины одного и того же показателя у отдельных индивидуумов могут отражать различные состояния, не позволяя дифференцировать как с качественной. так и с количественной стороны преморбидные состояния и прогнозировать вероятность их исхода.
В связи с этим важнейшим направлением исследований в области гигиены окружающей среды остается разработка высокоинформативных неинвазивных методов для диагностики ранних изменений в состоянии здоровья человека, возникающих под воздействием неблагоприятных факторов [22—24].
Исследования, проведенные в последнее время в нашем институте, показали целесообразность комплексного подхода к изучению преморбидных состояний, в основе которого лежит синдромный подход, позволяющий оперировать не сред-негрупповыми величинами отдельных показателей, а распространенностью среди популяции тех или иных синдромов, т. с. структурой популяции, отражающей различные уровни здоровья [12. 13, 17. 26].
Как известно, первой мишенью действия факторов окружающей среды на организм являются пограничные эпителиальные ткани, которые имеют генетически детерминированные клеточные механизмы защиты от воздействия факторов окружающей среды. Химические соединения, проникая через тканевые барьеры, взаимодействуют с молекулярными, субклеточными и клеточными структурами, вызывают уже при первом контакте определенный ответ организма [2, 3, 27, 30]. Подтверждением этому являются данные наблюдений о роли, в частности, альдегидов и кстонов, оказывающих раздражающее действие на слизистые верхних дыхательных путей детского и отдельных возрастных групп взрослого населения, в распространенности обострений 'хронических заболеваний верхних дыхательных путей.
Как и для кожи, надежность защитной функции слизистой оболочки обеспечивается не столько ее механическими качествами, сколько способностью к быстрому восстановлению утраченных или поврежденных структур и структурно-функциональными связями со всеми'органами и системами организма, благодаря чему слизистая оболочка может использовать не только собственные возможности, но и ресурсы всего организма [4].
Немногочисленные работы об изменениях слизистых носа и полости рта детей в зависимости от загрязнения атмосферного воздуха [5, 9] основываются на оценке среднегрупповых величин отдельных показателей, в этих работах отсутствуют критерии оценки характера изменений в слизистых оболочках, что затрудняет разработку адекватных профилактических мероприятий, направленных на оздоровление окружающей среды и профилактику нарушений здоровья населения.
В упомянутых ранее исследованиях слизистой оболочки полости рта у детей оценивали количество клеток базального и плоского эпителия с ядром и без него, не учитывая стадий его дифференцировки. Было выявлено, что у детей, заболеваемость которых была в 2 раза выше, чем у проживающих в менее загрязненном районе, увеличивается число эпителиоци-тов без ядра [5].
Как показывают исследования, эпителиальные клетки слизистой оболочки полости рта различной степени дифференцировки находятся в определенных стабильных соотношениях друг с другом, которые меняются при различных неблагоприятных воздействиях факторов окружающей среды [6, 14].
Морфологическое описание буккального эпителия, находящегося на различных стадиях дифференцировки [14. 29]. позволило И. А. Быковой и соавт. [6] предложить показатель "индекс дифференцировки". Однако авторы [6] не приводят критериев отбора "здоровых" людей и их возрастные параметры. в связи с чем предложенная ими классификация процентного распределения клеток по стадиям дифференцировки не может рассматриваться как универсальная. Показано, что у больных при различных воспалительных процессах обнаруживаются менее дифференцированные клетки, вплоть до базаль-ных. Предложенный индекс дифференцировки стал использоваться при оценке патологических процессов [6], а также при изучении влияния экологических факторов на состояние здоров!,я у детей [1.3]. В частности, при изучении язвенно-воспалительных процессов были установлены снижение индекса дифференцировки с 540 до 200 клеток в остром периоде, увеличение при гиперкератозах до 600 и нормализация на этапах его лечения [6].
При морфологической оценке отпечатков слизистых оболочек необходимо учитывать, по крайней мерс, 3 аспекта, несущих информацию о се состоянии. С одной стороны, регистрация малодифференцированных клеток, вероятно, может быть результатом прямого воздействия какого-либо фактора, вызывающего нарушение клеточных контактов в эпителиальном пласте, и результатом начавшейся восстановительной регенерации, возникающей в ответ на повреждение. В любом случае независимо от направленности процесса появление незрелых клеток снижает барьерную и защитную функции слизистого эпителия. С другой стороны, не менее важной является и оценка степени кератинизации. поскольку процессы кс-ратинизации слизистой оболочки полости рта, характеризующиеся преобладанием эпителиоцитов 6-го класса, возникают довольно часто при действии различных химических и физических факторов, гиповитаминозах, профессиональных и медикаментозных отравлениях (соединениями мышьяка, таллия, эпилина и др.), эндокринных и трофических нарушениях [в, 18], причем степень выраженности кератозов может быть различна.
Слизистая оболочка принимает также участие и в обеспечении местного иммунитета, наличием фагоцитов между клетками и рядами эпителия и в соединительной ткани обеспечивает быстрое восстановление структур при повреждении [4[.
Второй аспект оценки состояния слизистой оболочки касается определения количества, вида и морфологии лейкоцитов. В отпечатках, взятых со слизистой оболочки, встречаются нейтрофилы, лимфоциты, моноциты и реже лаброциты и эозинофилы. Хотя приводится сравнительный анализ соотношения этих видов, однако значения нормы не определены [5].
Оценка популяции лимфоцитов под эпителием слизистой оболочки у людей показала, что в физиологических условиях происходит лишь незначительный выход их на поверхность эпителиального пласта |19, 20]. Развитие процесса повреждения приводит не только к увеличению их количества, наиболее значимо выраженному в разгар болезни, но и к качественным изменениям [1, 3, 5]. Особенно это показательно для со-
стояния нсйтрофилов, для которых установлена связь между их морфологическим состоянием и развитием воспалительно-инфекционного процесса [7]. Именно поэтому в большинстве из цитируемых здесь работ деструктурированность нейтрофи-лов оказалась эффективным показателем.
И наконец, третий аспект, характеризующий состояние слизистой оболочки, — это морфологическая оценка микрофлоры. Если для слизистой носа изменение микрофлоры в основном связывают с ингаляционным воздействием химических веществ, то микрофлора полости рта является более интегральным показателем состояния организма. Своеобразие слизистой полости рта состоит в том. что она постоянно находится в контакте с окружающей средой и функционирующие в полости рта механизмы находятся под постоянным двойным влиянием — регулярным воздействием организма и многофакторным влиянием воздействия внешней среды. Изучая функционирование полости рта, можно получить данные как о неблагоприятном внешнем воздействии, так и о нарушениях нейрогуморальной регуляции как следствии какого-либо заболевания [4, 16]. Как известно, количество видов микрофлоры для каждого индивидуума является более или менее постоянной величиной, находящейся во взаимосвязи с показателями иммунного статуса [10, 20], и изменение параметров этой системы свидетельствует о нарушении резистентности организма.
Идентификация видов микрофлоры проводится по их морфологическим особенностям [15]. Проводимый ранее морфологический анализ микрофлоры с использованием балльной оценки [5] оказался малоинформативным, в связи с чем нами был предложен и апробирован новый подход к морфологической оценке микрофлоры слизистых оболочек, включающий идентификацию видов, подсчет их количества и стереометрическое определение интенсивности распределения микрофлоры.
Следует отмстить, что так называемый индекс дифферен-цировки слизистой оболочки полости рта, являясь, по сути дела. лишь показателем, отражающим суммарное количество клеток всех типов дифференцировки, характеризует выраженную патологию, не выявляя ранние изменения слизистой оболочки.
Анализ литературы и материалы собственных натурных наблюдений позволили нам предложить для оценки эпителиального барьера слизистой оболочки полости рта коэффициент дифференцировки (КД), представляющий собой соотношение суммы эпителиоцитов 1—5-го классов к количеству эпителио-цитов 6-го класса дифференцировки:
КД = [X (Э, +...+ Э5)/Э6|.
Оказалось, что средняя величина коэффициента дифференцировки у людей равна примерно единице. Однако в зависимости от возраста и состояния организма он может как уменьшаться, указывая на кератинизацию, так и увеличиваться в несколько раз, характеризуя различные патологические состояния.
Вышеуказанные цитологические показатели состояния слизистой оболочки отражают в основном альтерацию, экссудацию и пролиферацию. Соотношение этих процессов позволяет дифференцировать качественно различные состояния, отражающие острый воспалительный процесс, обострение хронического воспаления, хроническое воспаление в стадии ремиссии или дистрофические процессы. Наряду с этим количественные величины коэффициента дифференцировки эпителиоцитов, количество и морфологические характеристики лейкоцитов, а также количество и виды микрофлоры дают возможность в рамках каждого из указанных состояний выделить градации различной степени выраженности и имеющие различную прогностическую значимость.
Таким образом, посредством цитологических исследований впервые показана возможность дифференциальной диагности-
ки состояний слизистой оболочки, а результаты исследований позволяют рекомендовать использование оценки цитологического статуса слизистой оболочки в эпидемиологических исследованиях.
Литература
1. Барср Г. М.. Бонашевская Т. И., Макеева И. М. // Всесоюзная конф. "Физиология развития человека", 4-я. — М., 1990. - С. 23-24.
2. Бонашевская Т. И. // Гиг. и сан. — 1975. — № 9. — С. 14-16.
3. Бонашевская Т. И., Беляева H. П., Шестакова Л. А. и др. // Всесоюзная конф. "Физиология развития человека", 4-я. - М„ 1990. - С. 38.
4. Боровский Е. В.. Леонтьев В. К. Биология полости рта. — М„ 1991.
5. Булочпикова Е. К., Кумпап Н. Б., Захарова А. Ф. и др. // Гиг. и сан. - 1983. — № 11. — С. 87-88.
6. Быкова И. А.. Агаджанян А. А., Банченко Г. В. // Лаб. дело.
- 1987. - № 1.-С. 33-35.
7. Галанкип В. П., Боцманов К. В. // Арх. пат. — 1982. — № 7. - С. 3-11.
8. Кожевников П. В. // Вестн. дерматол. — 1962. — № 5. — С. 3-7.
9. Костродымов H. Н. // Гиг. и сан. — 1981. — № 11. — С. 48-49.
10. Куваева И. Б.. Ладодо К. С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей. — М.. 1991.
11. Кутепов Е. //., Гедымин Ю. М. // Научная конф. "Проблемы донозологической гигиенической диагностики": Материалы. - Л., 1989. - С. 36—37.
12. Кутепов Е. И. // Гиг. и сан. - 1993. - № I. — С. 6-9.
13. Кутепов Е. П., Варфоломеева И. В. Ц Там же. — 1993. — № 11. - С. 69-71.
14. Лабораторные исследования в стоматологии / Под ред. К. П. Попова. - София, 1978.
15. Мотавкнна H С., Артемкин В. Д. Атлас по микробиологии и вирусологии. — М., 1976.
16. Олейник И. И. Микробиология и иммунология полости рта. - М„ 1991. - С. 226-260.
17. Петрова И. В., Шинкаренко Н. И., Л еще! ¡ко Г. М. и др. // Гиг. и сан. - 1994. - № 8. — С. 49-51.
18. Потоцкий И. А. Гиперксратозы. — Киев, 1977.
19. Сатш М. Р. Органы иммунной системы. — М., 1982.
20. Сатш М. Р. // Вестн. Рос. АМН. — 1994. - № 8. — С. 4-7.
21. Сидоренко Г. И.. Прокопенко /О. И. // Вестн. АМН СССР.
- 1976. - № 4. - С. 18-22.
22. Сидоренко Г. И., Захарченко М. П. // Научная конф. "Проблемы донозологической гигиенической диагностики": Материалы. - Л., 1989. — С. 5—6.
23. Сидоренко Г. И.. Кутепов Е. П., Гедымин М. 10. // Вестн. АМН СССР. - 1991. - № 1. - С. 15-18.
24. Сидоренко Г. И., Кутепов Е. Н. // Гиг. и сан. — 1994. — № I. - С. 13-16.
25. Сидоренко Г. П., Кутепов Е. Н. // Там же. — № 8. — С. 3-5.
26. Сидоренко Г. И., Кутепов Е. Н. // Там же. — С. 33—36.
27. Шапаренко Б. А., Шлопов В. Г., Лавренова Г. В. и др. // Журн. ушн. нос. и горл. бол. — 1986. — № 4. — С. 45—46.
28. Kutepov Е. N. /'/ Symposium on Environment and Health Research in the Countries of the European Community and of the USSR. - Brussels, 1992. - P. 24.1-24.16.
29. Lange D. E. // Dtsch. zahnärztl. Z. - 1973. - Bd 28. -S. 124-132.
30. Proctor D. F., Swift D. L., Quintan M. F. et al. // Arch, environ. Health. - 1969. - Vol. 18. - P. 671-680.
Поступила 31.05.96
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1997 УДК 614.72:676.085.41-074
Н. А. Тараненко, В. Б. Дорогова, Н. М. Мещакова, Л. А. Горбунова ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТИЛ СЕРНИСТЫХ СОЕДИНЕНИЙ В БИОСРЕДАХ
Институт медицины труда и экологии человека ВСНЦ СО РАМН, Ангарск
Одним из современных методов гигиенической оценки В этой связи актуальной является разработка высокочувст-
опасности воздействия химических соединений на здоровье витсльных методов определения токсичных веществ и их мета-населения является биомониторинг [3, 10, 14]. болитов в биосредах организма.
