CC BY
15
Юськ1в Л.Л., к.вет.н., проввдний науковий сшвробггник лаборатори живлення велико! рогато! худоби © 1нститут бюлогп тварин НААН Украгни, Львгв
D-ВIТАМIННИЙ СТАТУС ТЕЛИЧОК 17-18-ТИ М1СЯЧНОГО В1КУ ЗА ВВЕДЕННЯ ХОЛЕКАЛЬЦИФЕРОЛУ
Наведено дат щодо вм1сту активного метаболту втамту D3 - 25-ОНD3, кальцт, неоргашчного фосфору, магнт, активност1 лужног фосфатази у кровг теличок 17-18-ти маячного вгку, чорно-рябог породи у зимово-весняний сттловий пергод в господарств1 зони Прикарпаття. Встановленн вгдмгнностг у вм1ст1 25-ОНD3, кальцт, фосфору, магнт, активност1 лужног фосфатази у кровг теличок через один тиждень, один г два м1сяц1 тсля введення холекальциферолу.
Ключовi слова: велика рогата худоба, кров, метабол1зм, холекальциферол, 25-г1дроксивтамт D3, кальцт, фосфор, магнт, лужна фосфатаза.
Вступ. В^амшне живлення сшьськогосподарських тварин мае важливе значення для розвитку молочного скотарства, що зв'язано iз специфiчними умовами утримання тварин i вирощування молодняка у рiзних географiчних зонах Укра!ни. Серед них особливе мкце займае в^амш D. Нестача в^амшу D призводить не тшьки до порушення обмшу кальцш i фосфору, що негативно впливае на процеси росту та розвитку у молодняка ВРХ. Крiм цього, знижуеться заплщнювашсть у телиць i корiв, можлива вiдсутнiсть статевих ци^в, аборти, затримка послiду, народження ослабленого або спотвореного приплоду (потовщення суглобiв, кривi ноги) [1-3].
Вщкриття метаболiчних шляхiв, якими вiтамiн D3 перетворюеться в бiологiчно активнi форми, i з'ясування механiзму !х ди дозволило сформулювати концепцiю про гормональну дiю деяких гiдроксильованих похiдних в^амшу D3 [4]. Активнi метаболити в^амшу D проявляють свою дiю на рiвнi оргашв-мiшеней через специфiчнi рецептори вiтамiну D, якi, взаемодшчи у ядрi з вiдповiдною послщовшстю ДНК, контролюють транскрипцiю вiдповiдних гешв [4-6]. Холекальциферол пiсля всмоктування i звязування з кальцшзвязуючим бiлком (СаЗБ) у кишечнику транспортуеться в печшку, де гщроксилюеться по 25-му атому вуглецю з утворенням 25-гщроксивггамшу D3 (25-ОНD3). Ця реакцiя вщбуваеться в ендоплазматичному ретикулумi за участю НАДФН, молекулярного кисню, йонiв Mg2+ i цитохрому Р-450. Реакцiя шпбуеться кiнцевим продуктом. 25-ОНD3 являе собою основну форму в^амшу, що циркулюе в кровi тварин i зв язаний з транспортним бiлком та е критерiем оцiнки D-вiтамiнного статусу оргашзму.
Проведенi нами дослiдження i данi ряду авторiв, свiдчать про дефщит вiтамiну D у ВРХ у кшщ стiйлового перiоду, що зумовлено зменшенням вмiсту цього в^амшу i його попередникiв у кормах у процес зберiгання та вщсутшстю
© Юськ1в Л.Л., 2011
ультрафюлетового опромшювання [1, 3, 4]. Це негативно впливае на рiзнi сторони продуктивност ВРХ, особливо на вщтворювальну функцш i життездатнiсть телят.
У ветеринарнiй медициш залишаеться актуальним вивчення динамiки активних метаболтв вiтамiну D, рiзних форм кальцш, фосфору, магнiю, активностi лужно! фосфатази залежно вiд ступеня забезпеченост його холекальциферолом. Також невiдома точна довготермшова безпечна доза вiтамiну D для телиць за парентерального введення.
У зв'язку з цим, метою нашо! роботи було дослщити вмкт активного метаболiту вiтамiну D3 - 25-OHD3 та концентрацiю кальцiю, фосфору, магнш i активнiсть лужно! фосфатази у кровi теличок 17-18-ти мкячного вiку, чорно-рябо! породи, природньо-географiчно! зони Прикарпаття через рiзнi термiни тсля парентерального введення рiзних доз в^амшу D3 впродовж одного мiсяця.
Матер1ал 1 методи. Дослiд проведено у зимово-весняний перюд на теличках 17-18-ти мкячного вiку, чорно-рябо! породи, в трьох групах по п'ять голiв в кожнiй, у господарствi Дрогобицького району, Львiвсько!' областi. Пiсля першого взяття кровi i дослiдження !! на показники, що характеризують D-вiтамiнний статус, теличкам дослiдних груп внутршньом'язово вводили холекальциферол. Теличкам першо! групи (контрольно!) вiтамiн D3 не вводили; теличкам друго! групи один раз в тиждень протягом мкяця парентерально вводився вiтамiн D3 в дозi 210 МО на кшограм маси тiла, теличкам третьо! групи -в дозi 420 МО, вщповщно. Кров для дослiджень брали вщ всiх груп теличок через 1 тиждень, 1- i 2 мкящ тсля припинення введення холекальциферолу, який вводили парентерально впродовж мкяця.
У сироватщ кровi визначали вмiст активного метабол^у вiтамiну D3 - 25-ОНЭ3 методом iмуноферментного аналiзу шляхом використання тест-системи фiрми Immundiagnostik. Для дослщження вмiсту кальцiю, неорганiчного фосфору i магнiю та активностi лужно! фосфатази (ЛФ) використовували бiотестнабори фiрми Р1^а Lachema (Чехiя) [10]. Активнiсть кктково! (термолабiльно!) фракцi! лужно! фосфатази визначали за рiзницею мiж активнiстю загально! i термостабiльно! лужно! фосфатази [11]. Статистичну обробку одержаних цифрових даних проводили за комп'ютерною програмою. Результати середтх значень вважали статистично вiрогiдними при: р < 0,05 —*, р < 0,01 —** та р< 0,001 —***, порiвняно до теличок контрольно! групи.
Результати дослщження. З наведених у таблищ 1 даних видно, що до введення холекальциферолу вмкт активного його метабол^у - 25-0Н03 в сироватщ кровi дослiджуваних теличок був у межах 21,48-26,02 нмоль/л. Вщомо, що вмют 25-ОHD3 у сироватщ кровi залежить вiд вжу, умов утримання i клiнiчного стану тварин [5, 6]. На початку дослщу вмют кальцiю загального у сироватщ кровi дослiджуваних тварин становив 2,20-2,28 ммоль/л, ультрафшьтрувального - 1,32-1,40 ммоль/л; неоргатчного фосфору - 1,77-1,80 ммоль/л i магнiю - 0,824-0,830 ммоль/л.
Таблиця 1
Вмкт 25-ОНD3 1 мшеральних компоненте у сироватщ кров1 теличок до _введення вггамшу D3 (М±т, п=5)_
Дослщжуваш Групи тварин
показники 1 2 3
25-ОНЭ3, нмоль/л 24,16±2,76 21,48±3,02 26,02±3,24
Кальцш загальний, ммоль/л 2,20±0,07 2,28±0,06 2,23 ±0,07
Бшок-зв'язаний кальцш, ммоль/л 0,880±0,03 0,889±0,02 0,879±0,03
Ультрафшьтрувальний 1,32±0,04 1,40±0,05 1,35±0,05
кальц1й, ммоль/л
Фосфор неоргашчний, ммоль/л 1,77±0,06 1,78±0,07 1,80±0,07
Магн1й, ммоль/л 0,824±0,004 0,830±0,005 0,826±0,004
Лужна фосфатаза 102,91±5,02 98,47±5,16 93,23±4,78
загальна (ЛФ), Од/л
К1стковий 1зофермент ЛФ, Од/л 90,72±4,88 85,42±4,24 86,37±4,96
Пiсля парентерального застосування холекальциферолу протягом одного мiсяця, нами були встановлет рiзницi у вмiстi активного метабол^у вiтамiну D3 -25-0Н03 у сироватцi кровi теличок дослщних груп, порiвняно до контрольно! (табл. 2). Так, вмкт 25-OHD3 у сироватщ кровi теличок друго! i третьо! дослiдних груп, яким впродовж мкяця вводили холекальциферол, був вищим, нiж у сироватцi кровi теличок контрольно! групи: через 1 тиждень тсля введення - в 2,10 i 2,64 раза (р<0,01; 0,001), через 1 мiсяць - в 1,53 i 2,04 рази (р<0,01; р<0,001), вiдповiдно. Через два мюящ пiсля парентерального введення вiтамiну вмют 25-OHD3 був вiрогiдно вищим лише у сироватщ кровi теличок третьо! дослщно! групи (р<0,05). Перетворення холекальциферолу до 25-OHD3 вiдбувалося тривалий час.
Шсля внутрiшньом'язового введення холекальциферолу встановлено рiзницi мiж показниками вмiсту загального, ультрафшьтрувального та зв'язаного з бiлками кровi кальцiю у сироватцi кровi теличок дослщних груп, порiвняно до контрольно!. Так, вмкт загального кальцiю через 1 тиждень тсля введення препарату у сироватщ кровi теличок друго! групи був вищий на 15% (р<0,01), а третьо! - на 19 % (р<0,01) порiвняно з контролем, а частка його ультрафшьтрувально! фракци була також вiрогiдно бшьшою.
Водночас вмiст неорганiчного фосфору був вiрогiдно вищим у сироватцi кровi теличок третьо! дослiдно! групи через 1 тиждень i 1- i 2- мюящ пiсля введення вiтамiну D3 впродовж мiсяця. Вiрогiдне збiльшення неоргатчного фосфору пояснюеться впливом вiтамiну D3 на кишковий iзофермент лужно! фосфатази i посилення транспорту iонiв фосфату в кишечнику. Актившсть загально! лужно! фосфатази у кровi теличок, яким вводили внутршньом'язово холекальциферол впродовж одного мкяця, була нижчою, порiвняно до активносп у сироватцi кровi теличок, яким в^амш не вводили. Так, через через 1 тиждень тсля введення препарату, актившсть загально! лужно! фосфатази у кровi теличок
друго! дослщно! групи була нижчою в 1,24 раза (р>0,5), ккткового iзоферменту -в 1,06 раза, порiвняно до активност у сироватщ кровi теличок контрольно! групи.
Таблиця 2
Вмкт 25-ОНD3 1 м1неральних компонент1в у сироватщ кров1 теличок за _введення вггамшу D3 (М±т, п=5)_
Дослщжуваш Групи тварин
показники 1 2 3
Шсля введення - 1 тиждень
25-ОНЭ3, нмоль/мл 22,06±2,05 46,34±2,08** 58,20±4,32***
Кальцш загальний, ммоль/л 2,16±0,06 2,48±0,07** 2,56±0,08**
Бшок-зв'язаний кальцш, ммоль/л 0,907±0,02 1,02±0,04* 1,02±0,05*
Ультрафшьтрувальний 1,25±0,05 1,46±0,06* 1,54±0,06**
кальцш, ммоль/л
Фосфор неоргашчний, ммоль/л 1,76±0,07 1,90±0,08 2,05±0,08*
Магнш, ммоль/л 0,822±0,004 0,852±0,006** 1,014±0,008***
Лужна фосфатаза 114,27±5,34 92,26±5,08* 81,80±4,90**
загальна (ЛФ), Од/л
Юстковий 1зофермент ЛФ, Од/л 87,12±4,36 82,00±4,16 79,50±4,55
Шсля введення - 1 м1сяць
25-ОНЭ3, нмоль/мл 26,22±2,34 40,15±3,07** 53,40±4,0 ***
Кальцш загальний, ммоль/л 2,19±0,07 2,46±0,06* 2,67±0,08**
Бшок-зв'язаний кальцш, ммоль/л 0,924±0,03 0,996±0,04 1,04±0,05
Ультрафшьтрувальний 1,27±0,04 1,46±0,06* 1,63±0,05***
кальцш, ммоль/л
Фосфор неоргашчний, ммоль/л 1,60±0,06 1,92 ±0,07** 1,95±0,08**
Магнш, ммоль/л 0,851±0,005 0,866±0,006 0,889±0,007**
Лужна фосфатаза 111,34±5,27 88,62±4,64* 82,28±4,43
загальна (ЛФ), Од/л
Юстковий 1зофермент ЛФ, Од/л 77,88±4,12 80,68±4,74 79,16±5,32
Шсля введення - 2 м1сящ
25-ОНЭ3, нмоль/мл 33,08±4,16 44,12±5,62 48,72±5,12 *
Кальцш загальний, ммоль/л 2,18±0,08 2,33±0,07 2,39±0, 08
Бшок-зв'язаний кальцш, ммоль/л 0,909±0,03 0,934±0,03 0,963±0,04
Ультрафшьтрувальний 1,27±0,03 1,40±0,04* 1,43±0,06*
кальцш, ммоль/л (58%) (60%) (60%)
Фосфор неоргашчний, ммоль/л 1,72±0,07 1,94±0,08 2,07±0,08*
Магнш, ммоль/л 0,844±0,006 0,864±0,007 0,868±0,008*
Лужна фосфатаза 104,91±5,16 83,26±4,88* 81,01±5,24*
загальна (ЛФ), Од/л
Юстковий 1зофермент ЛФ, Од/л 75,62±4,33 70,48±4,12 68,92±3,89
Ще бiльшою мiрою були виражеш змiни в активностi лужно! фосфатази та !! iзоферментiв у сироватщ кровi теличок третьо! дослiдно! групи. Протягом
всього дослщу було встановлено, що в сироватщ KpoBi друго!, i особливо третьо! дослщних груп вщбувалось зниження активност загально! лужно! фосфатази за рахунок зниження активност кюткового iзоферменту.
Вмiст магнш у сироватцi кровi теличок третьо! дослщно! групи був вищим на 23 % (p<0,01), порiвняно до контролю, через 1 тиждень тсля введення холекальциферолу. Проте на подальших етапах дослщження цi рiзницi були несуттевими.
Отже, отриманi нами результати обгрунтовують доцiльнiсть введення вiтамiну D3 з профiлактично-лiкувальною метою теличкам 17-18-ти мкячного вiку в зимово-весняний стшловий перiод протягом не менше одного мюяця.
Висновки. Парентеральне введення теличкам 17-18-ти мкячного вiку в зимово-весняний стшловий перюд призводить до вiрогiдного пiдвищення в сироватцi кровi рiвня його активного метаболiту - 25-OHD3, концентрацi! кальцiю, фосфору, магнiю та зниження актившсть лужно! фосфатази та свщчить про його регуляторну дш. Дiя холекальциферолу проявлялася протягом тривалого часу i залежала вiд дози в^амшу та термiну пiсля припинення його введення.
Л1тература
1. Куртяк Б. М. Жиророзчиннi вiтамiни у ветеринарнш медицинi i тваринництвi / Б.М. Куртяк, В.Г. Янович. — Львiв: Трiада Плюс, 2004. — 426 с.
2. Horst R. L. Vitamin D metabolism in ruminants and its relevance to the periparturient cow / R. L. Horst, T. A Reinhardt // J. Dairy Sci. — 1983. — Vol. 66. — P. 661—678.
3. Клмчна дiагностика внутршшх хвороб тварин / [В.1. Левченко, В.В.Влiзло, 1.П. Кондрахш та ш. ]; за ред. В.1. Левченка. — Бша Церква, 2004. — 608 с.
4. Norman A/W., Roth J., Orci L. The vitamin D endocrine system: steroid metabolism hormonal receptors< and biological response (calcium-binding proteins) //Endocrinol. Rev. — 1982. — Vol. 3, N4. — P. 331—365.
5. Horst R. L. Calcium and vitamin D metabolism in the dairy cow / R. L. Horst, J. P. Goff, T. A. Reinhardt // J. Dairy Sci. — 1994. — Vol. 77. — P. 1936—1951.
6. Spakauskas V. Variation of 25-hidroxyvitamin D in sera of healthy and sick cows / V. Spakauskas, I. Klimiene, M. Ruzauskas, V. Bandzaite // Biologia. — 2006. — № 4. — P. 80—86.
7. Витамин D и его роль в обеспечении здоровья детей и беременних жинщин / [Лукьянова Е.М., Антипкин Ю.Г., Омельченко Л.И., Апуховская Л.И.]. — К.: Сксперт Б, 2005. — 230 с.
8. Hidiroglou M. 25-hidroxyvitamin D in plasma of cattle / M. Hidiroglou, J. Proulx, G. Roubos // J. Dairy Sci. — 1979. — Vol. 62. — P. 1076—1080.
9. Tamura M. The study on vitamin D3 metabolism in dairy cows with special reference to serum levels of vitamiin D3 metabolites / M. Tamura, K. Sugiura // Jap. J. Vet. Sci. — 1979. — Vol. 41. — P. 377—384.
10. Бiохiмiчнi методи дослщження: Лабораторний практикум / [Боечко Ф.Ф., Боечко Л.О., Чепчуренко Н.В., Шмиголь 1.В.]. — Черкаси: Видавничий вщдш ЧНУ, 2005. — 312 с.
11. Вагнер В. К. Методы и результаты исследования изоферментов (кишечной и печеночной фракций) сывороточной щелечной фосфатазы при острых хирургических заболеваниях органов брюшной полости / В.К. Вагнер, В.М. Путилин, Г.Г. Харабуга // Вопр. мед. химии. — 1981. — Т. 27, № 6. — С. 752—754.
Summary Yuskiv L.L.
Institute of biology of animal NAAS, Lviv THE VITAMIN D-STATUS OF HEIFEST 17-18 MONTHS OLD WITH A PARENTERAL INJECTION OF CHOLECALCIFEROL
It was presented data on the content of the active metabolite of vitamin D3 - 25-OHD3, calcium, inorganic phosphorus, magnesium, alkaline phosphatase activity in the blood of heifers 17-18 months old, black-speckled rocks in winter-spring housing season in the farm area Carpathian. The changes of content of 25-OHD3, calcium, phosphorus, magnesium, alkaline phosphatase activity in the blood of heifers, black-speckled breed, which were injected intramuscularly different doses of cholecalciferol. Established differences in the contents of a 25-OHD3, calcium, phosphorus, magnesium, alkaline phosphatase activity in the blood of heifers in one week, one and two months after the introduction of cholecalciferol.
Рецензент - д.вет.н., проф. Головач П.1.
