CC BY
22
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^OHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHoi' MegnuUHH Ta 6i0TexH0iroriH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies
doi: 10.15421/nvlvet7827
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 363.2:577.115.16:546.41.18
D-вiтамiнний статус корiв та 1хшх телят у раннш постнатальний перiод
у зимово-стiйловий перiод
Л.Л. Юсьюв [email protected]
Львiвський нацюнальнийунiверситет ветеринарног медицини та бютехнологт iменi С.З. Гжицького,
вул. Пекарська, 50, м. Львiв, 79010, Украна
У статт1 наведено дат щодо вмгсту активного метаболту втамту Б3 - 250ИВ3, концентрацгг кальцгю, фосфору, магнгю та активностг лужног фосфатази в кровг коргв та гхнгх телят у раннш постнатальний перюд.
Досл1д проведено на високопродуктивних коровах-аналогах украгнськог чорно-рябог молочног породи у пергод сухостою г тсля отелення та отриманих вгд них телятах. Цосл1д проводили у зимово-стгйловий пергод у Державному тдприемствг «Дослгдне господарство» «Пасгчна» 1нституту кормгв та сгльського господарства Подглля НААН.
Для бгохгмгчних дослгджень вгд коргв брали кров з яремног вени на 5-7-й день тсля отелення. Кров вгд телят брали на 5-7-й г 28-30-й днг тсля народження. Встановлено, що у зимово-стгйловий перюд вмгст 25-ггдроксихолекальциферолу у кровг телят 5-7-денного вгку знаходився у межах вгд 29 до 34 нмоль/л. Встановлено динамгку змгн вмгсту кальцгю загально-го г його фракцгй, фосфору неоргашчного, магнгю та активностг лужног фосфатази та гг гзоензимгв у кровг телят вгд 5-7-до 28-30-денного вгку. Концентрацгя 25-ггдроксивтамту Б3 у кровг телят у першг днг тсля народження була нижчою, а концентрацгя кальцгю г неоргашчного фосфору - вищою, поргвняно до гх значеньу кровг матергву тсляотельний перюд.При цьому встановлено, що актившсть лужног фосфатази у сироватцг кровг телят була вищою, поргвняно до гг значення у сироватцг кровг матергв. Збыьшення активностг лужног фосфатази у сироватцг кровг телят виражено бгльшою м1рою за рахунок гг юсткового ензиму.
Ключовi слова: корови, телята, вгтамгн Б3, метаболгзм, кров, 25-ггдроксихолекальциферол.
D-витаминный статус коров и их телят в ранний постнатальный период
в зимне-стойловый период
Л.Л. Юськив [email protected]
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого,
ул. Пекарская, 50, г. Львов, Украина
В статье приведены данные по содержанию активного метаболита витамина Б3 - 250ИБ3, концентрации кальция, фосфора, магния и активности щелочной фосфатазы в крови коров и телят в ранний постнатальный период.
Опыт проведено на высокопродуктиных коров-аналогах украинской черно-рябой молочной породы в период сухостоя и после отела и полученных от них телят. Опыт проводили в зимне-стойловый период в Государственном предприятии «Опытное хозяйство» «Пасична» Института кормов и сельского хозяйства Подолья НААН.
Для биохимических исследований от коров брали кровь из яремной вены на 5-7-й день после отела. Кровь от телят брали на 5-7-й и 28-30-й дни после рождения. Установлено, что в зимне-стойловый период концентрация 25-гидроксиколекальциферола в крови телят 5-7-дневного возраста была в пределах от 29 до 34 нмоль/л. Установлено динамику изменений содержания кальция общего и его фракций, фосфора неорганического, магния и активности щелочной фосфатазы и ее изоэнзимов в крови телят от 5-7- до 28-30-дневного возраста.
Citation:
Yuskiv, L.L. (2017). D-vitamin status of cows and their calves in the early postnatal period during the winter-stall period. Scientific Messenger LNUVMB, 19(78), 136-140.
Концентрация 25-гидроксивитамина D3 в крови телят в первые дни после рождения была ниже, а концентрация кальция и неорганического фосфора - выше по сравнению с их значением в крови матерей в послеродовой период. При этом установлено, что активность щелочной фосфатазы в сыворотке крови телят была выше, по сравнению с ее значением в сыворотке крови матерей. Увеличение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови телят выражено в большей степени за счет ее костного энзима.
Ключевые слова: коровы, телята, витамин D3, метаболизм, кровь, 25-гидроксихолекальциферол.
D-vitamin status of cows and their calves in the early postnatal period
during the winter-stall period
L.L. Yuskiv [email protected]
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska Str., 50, Lviv, 79010, Ukraine
The article presents data about the content of active metabolite of vitamin D3 - 25OHD3, calcium (total, bounded with protein and ultrafiltrated), inorganic phosphorus, magnesium and alkaline phosphatase activity and its isoenzymes in the blood of cows and their calves in the early postnatal period.
Studies were conducted in the cows of the Ukrainian Black-and-White dairy breed and calves obtained from them. The experiment was performed during the winter housing period in pilot farm «Pasichna» of Institute offorage and agricultural Podillya NAAS of Ukraine, located in the natural geographical areas of Podillya. The blood for tests was collected from the jugular vein before morning feeding in the 5th-7th day since calving. The blood from the calves was collected in the following dates: at 5th-7th days old and at 28-30th days old. Vitamin D provision rate of animal organism was evaluated for the content of 25OH D3 concentration in blood. The level of 25-hydroxycholecalciferol is considered as a total reflection of the endogenous formation of cholecalciferol in the skin and its receipts from feed or vitamin preparations. The concentration of 25ОНD3 in the blood of the examined animals was detected by means of the enzymelinked immunoassay using the test system developed by the Immunodiagnostik. The method is based on the competitive binding of 25OHD3 serum and 25OH D3-biotin with vitamin D3-binding protein (VDBP), that immobilized on 96-well immunological plates. The content of calcium (total, bounded with protein and ultrafiltrated), inorganic phosphorus, magnesium and alkaline phosphatase (ALP) activity were detected using the biological test kits produced by the Pliva Lachema firm (the Czech Republic).
The performed research reported that the content of 25-hydroxycholecalciferol in serum of calves at 5-7-days age old was in the range of 29 to 34 nmol/l and slightly increased for the 28-30-days. It was established the dynamics of changes in the content of total calcium and its fractions, inorganic phosphorus, magnesium and activity of alkaline phosphatase and its isoenzymes in calves blood from 5-7- to 28-30-day-olds. The concentration of 25-hydroxyvitamin D3 in the blood of calves in the first days after birth was lower, and the concentration of calcium and inorganic phosphorus - higher compared with their values in the blood of mothers in the postpartum period. It was found that the activity of alkaline phosphatase in the calf serum was higher, compared with its value in the serum of mothers. The increase in activity of alkaline phosphatase in the calf serum is expressed to a greater extent due to its bone enzyme.
Key words: cows, calves, vitamin D3, metabolism, blood, 25-hydroxycholecalciferol
Вступ
Умови годiвлi i утримання тшьних KopiB мають значний вплив на життездатшсть новонароджених телят, ix фiзiологiчну зршсть, подальний рют i розви-ток та реатзацш генетичного потенщалу продуктивности Важливе мюце у забезпечет життедшльност телят у ранньому постнатальному перiодi займае вь тамш D. У молодняку ВРХ у вщ 1-12 тсящв легш форми D-дефщитного стану дiагностують бшьш шж у 40%. Причому телята, що народилися восени i зимою, хворшть частше (Levchenko et al., 1981; Levchenko, 2004; Maslova, 2005; Vlizlo, 2007).
На D-вггамшний статус оргашзму в ранньому постнатальному перiодi мае безпосереднш вплив забез-печешсть i'xrnx матерiв цим вгтамшом та рiвень його активних метаболтв у молозивi i молощ, яке спожи-вае потомство (Horst and Reinhardt, 1983; Kurtyak and Yanovych, 2004; Van Saun, 2004; Luk'yanova, 2005).
Критерiем оцшки щодо потреби у вгташш D, яку запропонували Horst R.L. i ствавт. (Horst et al., 1936) е концентращя 25-пдроксихолекальциферолу у кровг Рiвень 25-пдроксихолекальциферолу вважаеться су-
марним ввдображенням ендогенного утворення холе-кальциферолу в шшр1 та його надходження i3 корму або вггамшних препапв.
Незважаючи на велику кшьшсть робгг, що ведуть-ся рiзними групами дослвднишв задля встановлення нормального рiвня впамшу D в кровi тварин (Wagner et al., 2008), актуальним залишаеться питання щодо оптимального рiвня вгтамшу D в органiзмi телят у рiзнi перюди !х росту i розвитку та впливу репональ-них факторiв i умов утримання корiв на процеси за-своення i трансформацп холекальциферолу в 'хнього потомства.
Метою роботи було дослвдити вмют активного метаболпу впамну D3 - 25-OHD3, концентраци каль-цш, фосфору, магнш та активносп лужно! фосфатази в кровi корiв та !хшх телят у раншй постнатальний перюд.
MaTepia™ i методи дослвджень
Дослвд проведено на високопродуктивних коровах-аналогах укра'нсько' чорно-рябо' молочно! породи у перiод сухостою i пiсля отелення та отриманих
в1д них телятах. Дослвд проводили у зимово-стшловий перюд у Державному шдприемств1 «До-слвдне господарство» «Пасчна» 1нституту корм1в та сшьського господарства Подшля НААН. До рацюну год1вл1 кор1в входили корми, яш традицшно викори-стовуються в цьому господарствах. Вш вщповвдав р1вню молочно! продуктивносп кор1в i !х ф1зюлопч-ному стану та загальноприйнятим нормам (Kalashnikov, 2003; Bohdanov, 2012).
Для бiохiмiчних дослiджень ввд корiв брали кров з яремно! вени на 5-7-й день тсля отелення. Кров вщ телят брали на 5-7-й i 28-30-й дт пiсля народження. У кровi визначали вмiст 25-OHD3 iмуноензимним методом ELISA, вiдповiдно до протоколу для викори-стання набору 25-Hydroxy Vitamin D «Immundiagnostik» (Kondrahin, 2004; Vlizlo, 2012). Вмют кальцiю (загального, проте!нзв'язаного i ультрафшьтрувально-го), фосфору неорганiчного, магнiю та актившсть лужно! фосфатази (ЛФ) у сироватш кровi визначали, використовуючи бютест-набори фiрми «Pliva Lachema» (Чехiя) (Vlizlo, 2012). Актившсть iзоензимiв лужно! фосфатази вивчали з використанням iнгiбiторiв i розраховували згiдно з методом, описа-ним в роботi (Vagner et al., 1981; Levchenko, 2010).
Статистичну обробку експериментальних даних проводили загальноприйнятими методами варiацiйноi
статистики з вирахуванням середнього значення (М) й похибки (± m). Задля визначення достовiрностi ввд-мiнностей мiж одержаними величинами двох вибiрок використовували t-критерiй Стюдента. Результати вважали вiрогiдними при Р < 0,05 - 0,001. Опрацю-вання i статистичну обробку одержаних цифрових даних виконували за допомогою програми Microsoft Excel.
Результати та 'ix обговорення
На основi проведених дослiджень, ми встановили, що вмiст 25-гiдроксихолекальциферолу в сироватш кровi телят у 28-30-денному вiцi суттево не вiдрiзняв-ся ввд його значення у 5-7-денному вiцi i становив у середньому 32,55 нмоль/л (табл.1). Також подiбними були бiльшiсть показникiв мiнерального обмшу в кровi телят вiд 5-7-денного до 28-30-денного вiку. Зокрема, вмют кальцiю загального на 28-30 день шс-ля народження у кровi телят був нижчим, нiж у 5-7-денному вщ. При цьому вмют кальцiю проте!н-зв'язаного в 28-30-деному вiцi також був нижчим в 1,37 раза порiвняно з його значенням у 5-7-денному вщ (P < 0,01). Вмiст ультрафшьтрувального кальцiю у 28-30-денному вiцi, навпаки, мав тенденцiю до зро-стання.
Таблиця 1
Показники Вк (днi)
5-7 28-30
25-ОНБ3, нмоль/л 31,44 + 2,56 32,55 + 2,05
Кальцш загальний, ммоль/л 2,65 + 0,08 2,50 + 0,06
Кальцш протеш-зв'язаний, ммоль/л 0,93 + 0,03 0,68 + 0,01**
Кальцш ультрафшьтрувальнщй, ммоль/л 1,72 + 0,05 1,82 + 0,04
Фосфор неорганiчншй, ммоль/л 1,77 + 0,05 1,83 + 0,05
Магнш, ммоль/л 0,88 + 0,04 0,82 + 0,02
Лужна фосфатаза загальна (ЛФ), Од/л 160,76 + 9,08 177,04 + 8,65
Кишковий iзоензшм ЛФ, Од/л 38,58 + 2,18 38,35 + 1,74
Юстковий iзоензшм ЛФ, Од/л 120,57 + 6,81 137,13 + 6,46
Приметка: в ц1й таблиц ** - P < 0,01, поргвняно з показниками в 5-7-денному вщ
1з наведених у таблиц даних видно, що вмiст неоргашчного фосфору на 5-7-й день тсля народження становив всередньому 1,77 ммоль/л. У 30-денному виц вмют неоргашчного фосфору шдвшцився, проте рiзницi були невiрогiдними, порiвняно iз його значенням у 5-7-денному виц. Також не було ютотних ввд-мiнностей у концентрацй' магнiю в сироватш кровi телят у 5-7- i 28-30-денному вiцi.
Активнiсть лужно! фосфатази та ii iзоензимiв у сироватш кровi телят ввд 5-7-денного до 28-30-денного вiку змiнювалась подiбно до рiвня 25-ОHDз. У 5-7-денному вод активнiсть лужно! фосфатази була у середшх межах 152-170 Од/л. У 30-денному вод актившсть ензиму дещо шдвищилась вiдносно рiвня у 5-7-денному вод. Це збiльшення вiдбувалось, в основному, за рахунок кiсткового iзоензиму лужно! фос-фатази.
У сво!й робот ми вважали за потрiбне порiвняти вмiст 25ОHD3 i показники мшерального обмiну в кровi корiв i !'хшх телят. На основi проведених доедает ми встановили, що вмют 25OHD3 в кровi телят
на 5-7 день шсля народження був нижчим, а вмют кальцш i неорганiчного фосфору - вищим, н!ж у !хнiх матерiв на 5-7 день тсля отеленя (рис. 1, 2).
корови
Рис. 1. Вмют 250HD3 у сироватщ кров1 к'ор1в на
5-7-й день шсля отелення i Тхшх телят у 5-7-добовому Biai (M ± m, n = 5)
Виявлена нами нижча концентрацiя 25OHD3 в кровi новонароджених телят порiвняно з його вмютом
у !х матерiв на 5-7-й день тсля отелення, очевидно, зумовлена тим, що актившсть 25-гiдроксилази у печь нцi новонароджених телят е дуже низькою (Nonnecke et al., 2009), i концентрац1я 25-пдроксихолекальци-феролу в кровi телят у першi днi пiсля народження залежить ввд вмiсту цього метаболiту у кровi матерiв, i, вiдтак, у випоюваному молозивi.
Висока концентрацiя Са в кровi телят у першi дш пiсля народження, ймовiрно, може бути результатом впливу високо! концентрацй' 1,25(ОН)гО у кровi мате-рi на плацентарний транспорт Са, що тдтверджено дослвдженнями на в1вцях (Durand et al., 2008).
1з наведених на рисунку 2 даних видно, що вмют неорганiчного фосфору на 5-7-й день тсля народження був вищим, шж його рiвень у сироватш кровi !хшх матерiв, i становив 1,77 + 0,05 ммоль/л. При цьому встановлено, що актившсть лужно! фосфатази у сироватш кровi телят була вищою, порiвняно до !! значення у сироватцi кровi матерiв. Збiльшення акти-вностi лужно! фосфатази у сироватш кровi телят ви-ражено бiльшою мiрою за рахунок l! кiсткового ензи-му.
2,5
Я
14]
0,5
Ii
1.63
_
1,48
.81 <Р8
Заг.Са БЗ.Са УФ.Са гкорови "телята
Р.н
Mg
Рис. 2. Показники мiнерального обмшу у сироватщ KpoBi uopiii на 5-7-й день шсля отелення i Тхшх телят
у 5-7-добовому Biai (M + m, n = 5)
Висновки
Отриманi данi про динамшу змiн бiоxiмiчниx по-казник1в у кровi телят вiд народження до мюячного вiку, а також результати про нижчий вмiст 25-OHD3 i вищий вмiст кальцiю i неоргашчного фосфору та вищу активнiсть лужно! фосфатази в сироватщ кровi телят 5-7-денного вiку порiвнянно зi значеннями цих показник1в у сироватцi кровi !xнix матерiв на 5-7-й день шсля отелення дають подставу стверджувати про вплив вiку i фiзiологiчного стану на показники D-вгтамшного i мiнерального статусу в органiзмi велико! рогато! худоби.
Бiблiогpaфiчнi посилання
Levchenko, V.I. (2004). Klinichna diahnostyka vnutrish-
nikh khvorob tvaryn. Bila Tserkva (in Ukrainian). Vlizlo, V.V. (2007). Biokhimichni osnovy normuvannya vitaminnoho zhyvlennya koriv. Zhyrorozchynni vitaminy. Biolohiya tvaryn. 9(1-2), 25-42 (in Ukrainian).
Levchenko, V.I., Tykhonyuk, L.A., Apukhovs'ka, L.I. (1981). Diahnostyka rannikh form D-hipovitaminozu v telyat za vmistom fosforu i 2,3dyfosfohlitseratu v erytrotsytakh. Visnyk ahrar.nauky. 9, 73-76 (in Ukrainian).
Maslova, T.V. (2005). Jetiologicheskie faktory razvitija D-deficitnogo sostojanija u teljat. Uspehi sovremennogo estestvoznanija. 10, 68 (in Russian).
Kurtyak, B.M., Yanovych, V.H. (2004). Zhyrorozchynni vitaminy u veterynarniy medytsyni i tvarynnytstvi. L'viv: Triada plyus (in Ukrainian).
Luk'yanova, E.M. (2005). Vytamyn D y eho rol' v obespechenyy zdorov'ya detey y beremennykh zhynshchyn. K.: Yekspert B (in Ukrainian).
Van Saun, R.J. (2004). Vitamin D - responsive rickets in neonatal lambs. Can Vet J., 45, 841-844.
Horst, R.L., Reinhardt, T.A. (1983). Vitamin D metabolism in ruminants and its relevance to the periparturi-ent cow. J. Dairy Sci. 66(4), 661-678.
Horst, R.L., Goff, J.P., Reinhardt, T.A. (1936). Calcium and vitamin D metabolism in the dairy cow. J. Dairy Sci. 77, 1936-1951.
Wagner, C.L., Taylor, S.N., Hollis, B.W. (2008). Does vitamin D make the world go «round». Breastfeed. Med. 3, 239-250.
Kalashnikov, A.P. (2003). Normy i raciony kormlenija sel'skohozjajstvennyh zhivotnyh : spravochnoe po-sobie. M: Agropromizdat (in Russian).
Bohdanov, H.O. (2012). Normy i ratsiony povnotsinnoyi hodivli vysokoproduktyvnoyi velykoyi rohatoyi khu-doby: dovidnyk-posibnyk. K.: Ahrarna nauka (in Ukrainian).
Vlizlo, V.V. (2012). Laboratorni metody doslidzhen' u biolohiyi, tvarynnytstvi ta veterynarniy medytsyni: dovidnyk. L'viv: Spolom (in Ukrainian).
Kondrahin, I.P. (2004). Metody veterinarnoj klinicheskoj laboratornoj diagnostiki: spravochnik. M.: KolosS (in Russian).
Vagner, V.K., Putilin, V.M., Harabuga, G.G. (1981). Metody i rezul'taty issledovanija izofermentov (ki-shechnoj i pechenochnoj frakcij) syvorotochnoj shhelochnoj fosfatazy pri ostryh hirurgicheskih zabolevanijah organov brjushnoj polosti. Vopr. med. himii. 27(6), 752-754 (in Russian).
Levchenko, V.I. (2010). Metody laboratornoyi klinich-noyi diahnostyky khvorob tvaryn. K.: Ahrarna osvita (in Ukrainian).
Nonnecke, B.J., Reinhardt, T.A., Waters, W.R. (2009). Short communication: The preruminant calf as a mod-
el for characterizing the effects of vitamin D status in the neonate. J Dairy Sci. 92(11), 5692-5696.
Durand, D., Braithwaite, G.D., Baler, J.P. (1983). The effect of la-hydroxycholecalciferol on the placental transfer of calcium and phosphate in sheep. Br. J. Nutr. 49, 475.
Received 29.09.2017 Received in revised form 18.10.2017 Accepted 23.10.2017
