УДК 636.2:577.115.16:591.11
Юсьшв Л.Л., @ к. вет. н., провщний науковий сшвроб^ник ([email protected]) 1нститут бюлогп тварин УНААН, м. Львгв, Украгна
ЗМ1НИ ВМ1СТУ ЛШЩШ ТА Б1ЛКА У КРОВ1 МОЛОДНЯКУ ВЕЛИКО1 РОГАТО1 ХУДОБИ ЗА ВВЕДЕННЯ ХОЛЕКАЛЬЦИФЕРОЛУ
Наведено дат про змти вмкту активного метаболту втамту D3 -25-OHD3, загальних лгпгдгв, фосфолгпгдгв, триацилглщерол1в, холестеролу i загального быка у кровi теличок 5-6-мкячного вшу тсля внутршньо-м 'язового введення рiзних доз холекальциферолу. Встановлено бшьший вмкт 25-ОHD3, загальних лiпiдiв, фосфолiпiдiв, триацилглiцеролiв та нижчий вмкт холестеролу у кровi теличок, яким внутршньом'язово протягом мкяця вводили втамт D3 в дозi 31500 МО та 63000 МО на голову через один тиждень, один i два мкящ тсля його введення.
Ключовi слова: телята, кров, холекальциферол, лШди, фосфолтди, триацилглщероли, холестерол, быок.
Вступ. Молодняк велико! рогато! худоби чутливий до HecTa4i в^амшу D, особливо у зимово-весний перюд, дефщит якого зумовлений умовами стшлового утримання i годiвлею [1, 2]. Наявш в лiтературi даш свщчать, що при D-гiповiтамiнозi бюсинтез лшдав у печшщ i шших органах i тканинах тварин порушуеться, що призводить до змш лшщного складу в !х кровi i тканинах [3-7]. Вiтамiн D3 вдаграе суттеву роль у регуляцi! обмшу лiпiдiв як на клiтинному рiвнi, так i на рiвнi щлого органiзму [3, 8-15].
Проте, даш л^ератури про порушення лiпiдного обмшу при D-гiповiтамiнозi досить суперечливг Однi автори вважають, що при нестачi вiтамiну D3 в печшщ знижуеться вмют загальних лiпiдiв, холестеролу i пiдищуеться вмiст фосфатидилсерину [10]. За даними шших авторiв [11], при D-гiповiтамiнозi вмiст загальних лшдав в печiнцi пiдвищувався, а тсля введення в^амшу D3 знижувався до нормальних величин. При цьому вмют холестеролу i фосфолiпiдiв у цш тканинi не змiнювався. Однак, при D-дефiцитi значно змiнюеться склад жирних кислот фосфолшвдв: збiльшуеться вiдносний вмют пальмiтиново!, стеариново!, пальмiтооле!ново! кислот i зменшуеться вмiст арахiдоново! кислоти. Фiзiологiчнi дози вiтамiну D3 нормалiзують лшщний склад печiнки. При цьому холекальциферол ктотно впливае також на синтез жирних кислот.
Пщ впливом вiтамiну D3 у скелетних м'язах телят молочного перюду живлення в умовах in vitro посилюеться синтез фосфолшвдв i зменшуеться синтез холестеролу, у плазмi кровi пiдвищуеться вмiст загальних лiпiдiв, фосфолшвдв i триацилглiцеролiв i зменшуеться вмкт ефiрiв холестеролу, а також змшюеться жирнокислотний склад лiпiдiв [12-14].
® Юськ1в Л.Л., 2010
379
Даш про вплив холекальциферолу при парентеральному введенш молодняку велико! рогато! худоби 5-6-мкячного вжу на обмш загальних лшдав i бiлка в !хньому органiзмi в лiтературi висвiтленi недостатньо. Цим зумовлена актуальшсть вивчення впливу рiзних доз i способiв введення холекальциферолу молодняку велико! рогато! худоби у рiзнi перюди росту на вмiст загальних лшвдв, фосфолiпiдiв, триацилглiцеролiв i холестеролу та загального бiлка в кровi через рiзнi термiни пiсля його введення.
Метою роботи було вивчити вплив рiзних доз холекальциферолу при внутршньом'язовому введенш його теличкам 5-6-мкячного вжу на вмiст загальних лшвдв, фосфолiпiдiв, триацилглiцеролiв i холестеролу через один тиждень, один i два мюящ пiсля введення.
Матер1али i методи. Дослiд проведено у зимово-весняний перюд на 3-х групах теличок чорно-рябо! породи, 5-6-мiсячного вiку, по 5 голiв в кожнiй у господарствi Дрогобицького району, Львiвсько! области Теличкам першо! групи (контрольно!) в^амш D3 не вводили; теличкам друго! групи один раз в тиждень протягом мюяця парентерально вводили вггамш D3 в дозi 31500 МО, а теличкам третьо! групи — 63000 МО в^амшу D3 на голову. Шсля введення холекальциферолу впродовж мкяця вiд тварин всiх груп вщбирали кров для дослiджень: через один тиждень, один i два мкящ.
У сироватцi кровi телят визначали вмiст активного метаболiту в^амшу D3 — 25-OHD3 методом iмуноферментного аналiзу; вмiст триацилглiцеролiв, холестеролу i загального бiлка визначали на бiохiмiчному аналiзаторi "Humalyzer 2000" з використанням бiотест-наборiв фiрми "Human" (Нiмеччина). Вмкт загальних лiпiдiв i фосфолiпiдiв визначали шляхом використання бiотестнаборiв фiрми Pliva Lachema (Чехiя) [16]. Статистичну обробку одержаних цифрових даних проводили за комп'ютерною програмою. Результати середнiх значень вважали статистично вiрогiдними при p < 0,05 - *, p < 0,01 - ** та p< 0,001 - ***, порiвняно до теличок контрольно! групи.
Результати дослщження. З наведених у таблиц 1 даних видно, що вмют загальних лiпiдiв у теличок 5-6-мшячного вiку до введення холекальциферолу становив 2,72-2,77 г/л, фосфолшвдв — 0,96-0,98 ммоль/л, а триацалглiцеролiв — 0,34-0,37 ммоль/л. При цьому, проведеними нами дослщженнями було встановлено, що вмют активного метабол^у вiтамiну D3 — 25-OHD3, який е критерieм ощнки ступеня забезпечення вiтамiном D, в сироватщ кровi теличок до введення холекальциферолу був на нижнш межi фiзiологiчних коливань i становив 15,02-18,56 нмоль/л.
Шсля парентерального введення в^амшу D3 протягом мiсяця, вмiст загальних лшдав, фосфолiпiдiв i холестеролу у сироватщ кровi теличок дослiдних груп вiдрiзнявся вiд !х вмiсту у кровi теличок контрольно! групи на вах стадiях дослiдження (табл. 2). Так, через один тиждень шсля введення в^амшу D3, у сироватщ кровi теличок третьо! дослiдно! групи вмкт загальних лiпiдiв був вищий на 10% (р<0,05), фосфолiпiдiв — на 10% (р<0,01), триацилглiцеролiв — на 24% (р<0,05), а вмкт холестеролу був нижчий на 14% (р<0,05), порiвняно до !х вмкту у сироватцi кровi теличок контрольно! групи.
380
Таблиця 1
Вмкт метаболтв у сироватщ кров1 молодняку велико? рогато? худоби 5-6 _мкячного в1ку до_ введення вггамшу D3 (М±т, п=5)_
Дослщжуваш Групи тварин
показники 1 2 3
Лшщи загальш, г/л 2,74±0,08 2,72±0,04 2,77±0,05
Фосфолшщи, ммоль/л 0,958±0,017 0,976±0,021 0,984±0,023
Триацилглщероли, моль/л 0,342±0,018 0,351±0,025 0,370±0,022
Холестерол, ммоль/л 2,66±0,06 2,70±0,05 2,64±0,05
Бшок загальний, г/л 68,51±2,12 70,34±2,20 67,74±2,44
Через один мкяць пiсля введення в^амшу D3 вмiст загальних лiпiдiв у сироватщ кровi теличок друго! i третьо! груп був вищий, вщповщно на 8% (р<0,01) i 11% (р<0,001), вмiст фосфолiпiдiв — на 6% i 10% (р<0,05). При цьому вмкт холестеролу у сироватщ кровi телят друго! i третьо! груп був менший, вiдповiдно, на 12% i 16% (р<0,01). Проведеними нами дослщженнями було встановлено, що вмiст 25-OHD3 у сироватцi кровi теличок друго! i третьо! груп у цей час був вищим вщповщно в 1,50 i 1,83 раза (р<0,01; р<0,001), порiвняно з контролем.
Таблиця 2
Вмкт метабол1т1в у сироватщ кров1 молодняку велико? рогато? худоби 5-6
мкячного в1ку за _ введення в1там1ну D3 (М±т, п=5)
Дослщжуваш показники Групи тварин
1 2 3
один тиждень п1сля введення
Лшщи загальш, г/л 2,88±0,06 2,94±0,08 3,17±0,05*
Фосфолшщи, ммоль/л 0,980±0,022 1,04±0,026 1,08±0,025**
Триацилглщероли, ммоль/л 0,330±0,021 0,386±0,020 0,409±0,024*
Холестерол, ммоль/л 2,70±0,07 2,41±0,05** 2,33±0,04***
Бшок загальний, г/л 78,42±2,41 83,30±2,60 89,64±2,56*
один м1сяць тсля введення
Лшщи загальш, г/л 2,90±0,04 3,12±0,03** 3,23±0,06***
Фосфолшщи, ммоль/л 0,966±0,024 1,02±0,022 1,06±0,026*
Триацилглщероли, ммоль/л 0,326±0,020 0,380±0,026 0,392±0,025
Холестерол, ммоль/л 2,91±0,08 2,57±0,07* 2,44±0,06**
Бшок загальний, г/л 74,12±2,33 86,64±2,45** 88,20±3,06**
два м1сяц1 тсля введення
Лшщи загальш, г/л 2,94±0,05 3,12±0,07 3,26±0,08**
Фосфолшщи, ммоль/л 0,970±0,018 1,07±0,020** 1,08±0,025**
Триацилглщероли, ммоль/л 0,298±0,018 0,363±0,023* 0,374±0,021*
Холестерол, ммоль/л 3,14±0,08 2,96±0,07 2,85±0,06*
Бшок загальний, г/л 80,17±3,02 88,50±2,54 89,32±2,77
У сироватцi кровi теличок третьо! дослщно! групи через два мкящ пiсля введення вiтамiну D3 вiдмiчали вiрогiднi рiзницi вмiсту загальних лшвдв, фосфолiпiдiв i холестеролу, порiвняно до теличок контрольно! групи.
Ц даш свiдчать про стимулюючий вплив вггамшу D3 на синтез лiпопроте!нiв плазми кров^ якi е основною транспортною формою лiпiдiв в органiзмi телят. Пщвищення вмiсту загальних лiпiдiв кровi телят вiдбувалося за
381
рахунок збшьшення частки фосфолшдав, триацилглiцеролiв, тодi як частка холестеролу зменшувалась.
Поряд з цим, при pi3HOMy ступеш забезпечення в^амшом D3 були виявленi рiзницi у вмкт загального бiлка дослiдних груп теличок, порiвняно до контрольно!. Так, через один тиждень пiсля введення холекальциферолу вмiст загального бiлка у сироватщ кровi теличок друго! дослщно! групи був вищий на 6%, а третьо! дослiдно! групи — на 14% (P<0,05) , порiвняно з контрольною групою. Через один мкяць пiсля внутрiшньом'язового введення препарату вмют загального бiлка у сироватщ кровi теличок друго! дослiдно! групи був вищий на 17% (P<0,01), а третьо! дослщно! групи — на 19% (P<0,01), порiвняно з контрольною групою.
Висновки. Парентеральне введення теличкам 5-6-мiсячного вiку вiтамiну D3 у дозах 31500 МО та 63000 МО на голову раз у тиждень протягом мкяця в зимово-весняний стшловий перюд призводить до вiрогiдного тдвищення в сироватщ кровi вмiсту загальних лшвдв i бiлка та свiдчить про його тривалу регуляторну дiю. Збшьшення вмкту загальних лiпiдiв вiдбувалося за рахунок збшьшення частки фосфолшвдв, триацилглiцеролiв, тодi як частка холестеролу зменшувалась.
Л1тература
1. Витамины в питании животных / А. Р. Вальдман, П. Ф. Сурай, И. А. Ионов, Н. И. Сахацкий. — Харьков: Оригинал, 1993. — 423 с.
2. Куртяк Б.М. Жиророзчинш вггамши у ветеринарнш медицинi i тваринництвi / Б.М.Куртяк, В.Г.Янович. — Львiв: Трiада Плюс, 2004. — 426 с.
3. Механизм биологического действия витамина D3: современные представления / Л.И. Апуховская, Л.И. Омельченко, М.В. Стефанов, Ю.Г. Антипкин // Журн. АМН Укра!ни. — 1996. — Т. 2, № 1. — С. 15-33.
4. Антоненко Л.В. Фосфолипиды, связанные с белками плазмы крови детей, больных витамин^-дефицитным рахитом // Украинский биохимический журнал. — 1987. — Т. 59, № 6. — С. 81-84.
5. Horst R. L., Goff J. P., Reinhardt T. A. Calcium and vitamin D metabolism in the dairy cow // J. Dairy Sci. — 1994. — Vol. 77. — P. 1936-1951.
6. Bellido T., Boland R., De Boland A. R. The Phospholipid and faty acid composition of sceletal muscle cells duting culture in the presence of vitamin D3 metabolites // Biochim. et Biophys. Acta: Lipids and Lipid Metab. — 1987. — 992 (L 87), № 2. — P. 162-163.
7. Sugimoto T., Ritter C., Slatopolsky E., Morrissey J. Effect of 1,25-dihydroxyvitamin D3 on phospholipid metabolism in cultured bovine parathyroid cells // Endocrinology. — 1988. — Vol.122, N6. — P. 2387-2392.
8. Kamel G. Blood lipid in infantile rickets // J. Egypt. Med.Assoc. — 1975. — Vol. 58, N3-4. — P. 189- 195.
9. Tuppurainen M., Heikkinen A.M., Penttila I., Saarikoski S. Does vitamin D3 have negative effects on serum levels of lipids? A follow-up study with a sequential combination of estradiol valerate and cyproterone acetate and/or vitamin D3 // Maturitas. — 1995. — 22(1). — Р. 55-61.
382
10. Freund T.S., Marino A.M. Vitamin D3 induced Ca transport and alteration of fatty acid composition in the rat // Vitamin D: Chem., Biochem. And Clin. Update.Proc. 6th Workshop. Merano, 17-22 March, 1985. — Berlin; New York, 1985. — P. 410-411.
11. Fujita T., Matsui T., Watanabe S. T-lymphocyte subsets in osteoporosis: effect of 1-a hydroxyvitamin D3 // Miner. Electrolyte Metab. — 1984. — P. 375-378.
12. Юсьюв Л.Л. Вплив вГтамшу Д3 на синтез лшвдв у скелетних м'язах телят в умовах in vitro / Л.Л. Юсьюв, В.Г. Янович // Бюлопя тварин. — 1999. — Т. 1, № 1. — С. 60-62.
13. Юсьюв Л.Л. Вплив тдвищеного рiвня вггамшу Д3 в ращош телят на вмют лшвдв у плазмi кровi / Л.Л. Юсьюв, В.Г. Янович // Наук.-техн.бюл. 1нст.землер. i бiол. тварин УААН. — 1999. — № 2, Вип. 1. — С. 76-78.
14. Юсьюв Л.Л. Вплив тдвищеного рiвня вггамшу Д3 у ращош телят на жирнокислотний склад лшдав плазми кровГ / Л.Л. Юсьюв, В.Г. Янович // Наук. вкник ЛьвГвсько! держ. акад. вет. мед. Гм. С.З. Гжицького. — 1999. — Вип. 2. — С. 34-38.
15. Янович В.Г. Обмен липидов у животних в онтогенезе / В.Г. Янович, П.З. Лагодюк. — М.: Агропромиздат, 1991. — 316с.
16. БюхГмГчш методи дослщження: Лабораторний практикум / Ф. Ф. Боечко, Л. О. Боечко, Н. В. Чепчуренко, I. В. Шмиголь. — Черкаси: Видавничий вщдш ЧНУ, 2005. — 312 с.
Summary
Yuskiv L.L. Institute of Animal Biology UAAS, Lviv, Ukraine CHANGE OF THE CONTENT OF LIPIDS AND PROTEINS IN BLOOD OF SAMPLING OF CATTLE AFTER PARENTERAL INJECTION OF
CHOLECALCIFEROL
The data about the dynamics of active metabolits of vitamin D — 25-ОHD3, total lipids, phospholipids, tryglycerides, cholesterol and total protein of exchange in blood of calves of 5-6-months old age, after intramuscular injection of different doses of cholecalciferol. The probably higher of level of 25-OH Vit D3, concentration of total lipids, phospholipids, tryglycerides, and total protein and lower the cholesterol intent in blood of calves after injection of cholecalciferol in dodes 31500 МО и 63000 МО on animal during the mont after one week, one and two months after injection was established.
Стаття надшшла до редакцИ 26.04.2010
383