Таблица 2
Частота аберраций хромосом в клетках костного мозга крыс при воздействии некоторых производных гетерофоса
Типы аберрации (фрагменты)
Вещество Число Число Число % метафаз
Доза животных исследован - аберраций с аберра-
ных метафаз одиночные парные циями
О-этилдихлортиофосфат 1/5 LD 6 600 11 8 3 1,83±0,54
1/50 LD 6 600 9 7 2 1,50±0,49
О-этил-О-фенилхлортиофос- 1/5 LD 6 600 10 7 3 1,66±0,52
фат 1/50 LD 7 700 7 5 2 1,16±0,43
Натриевая соль О-этил-О-фе- 1/5 LD 6 600 8 5 3 1,33±0,46
нилтиофосфорной кислоты 1/50 LD 6 600 6 2 4 1 ±0,40
Контроль — 12 1200 11 10 1 0,92±0,27
тиофосфат, О-этнл-О-фенилхлортиофосфат и натриевая соль О-этил-О-фенилтиофосфорной кислоты не обладают мутагенной активностью в изученных дозах. Однако в исследованиях как на дрозофиле, так и на хромосомах соматических клеток млекопитающих отмечена тесная положительная корреляция между реакцией на пестициды мух и крыс. Взаимосвязь между мутациями, сцепленными с полом, и мутациями в клетках костного мозга выражается коэффициентом корреляции, равным 0,84.
Литература
1. Василос А. Ф. Цитотоксические и цитогенетнческие свойства пестицидов. Кишинев, 1980.
2. Касьяненко А. Г., Королева Н. С. — Изв. АН СССР. Серия биол., 1979, № 3, с. 401—409.
3. Куэьменко Н. М., Диденко Г. Г. и др. — Гиг. и сан., 1980, № 9, с. 88—90.
4. Куринный А. И. — В кн.: Генетические последствия загрязнения окружающей среды. Ашхабад, 1982, с. 31 — 32.
5. Куринный А. И. — Цитол. и генет., 1983, № 6, с. 16— 21.
6. Куринный А. И., Пилинская М. А. Исследования пестицидов как мутагенов внешней среды. Киев, 1976.
7. Медведь Л. И., Каган Ю. С. — Изв. АН СССР. Серия биол., 1978, с. 668—682, № 5.
8. Мельников Н. И. — Журн. Всесоюз. хим. о-ва им. Д. И. Менделеева, 1978, № 2, с. 136—142.
9. Оценка пестицидов как мутагенных факторов окружающей среды (перспективный аналитический обзор). М..« 1980.
10. Пилинская М. А., Куринный А. И. — В кн.: Проблемы гигиены и токсикологии пестицидов. КЛев, 1981, ч. 11, с. 37—43.
11. Хильчевская Р. И. — Журн. Всесоюз. хим. о-ва им. Д. И. Менделеева, 1979, № 1, с. 18—25.
12. Чепинога О. П. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 197'0, вып. 8, с. 30—39.
13. Benes V., Sram R. — Int. J. industr. Med. Surg., 1969, vol. 38, p. 39—41.
14. Buselmaier W., Röhrborn G., Propping P. European Environmental Mutagen Society, 1972, II, p. 76—77.
15. Ford C.. Hamerton /. — Stain Technol., 1956, vol. 31, p. 247—248.
16. Grant W. — Mutat. Res, 1973, vol. 21, p. 7—9.
17. Rhaese H. 1. — Fortschr. Bot., 1974, Bd 36, S. 209—218.
Поступила 19.03.85
УДК 613.632 + 6Н.7]-074 + 615.9.015.36.076.9
С. В. Сперанский ТАКТИКА ЭКСПЕРИМЕНТА ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ 1,О50
Новосибирский НИИ гигиены
Как известно, классический способ определения ЬО50 требует испытания каждой дозы на не менее чем 6 животных. Минимальное число доз, достаточное для расчета параметров летальности, равно 4:1 — доза, при которой все животные выживают, 2 — частично смертельные, 1 — вызывающая гибель всей группы. При этом интервал между дозами должен быть постоянным. Между тем исследуемые вещества могут существенно различаться по широте зон токсического действия (крутизне наклона кривой летальности). Применение такого интервала (шага) между дозами, который во всех случаях обеспечит соблюдение упомянутых требований, ведет к «перерасходу» животных, испытанию «лишних» доз, которые не дают никакой дополнительной информации о действии яда.
Мы предлагаем такую тактику эксперимента, при которой шаг между дозами определяется в ходе самих опытов. В итоге необходимое число животных сокращается примерно вдвое при соблюдении требований классического метода определения параметров летальности.
Первый этап — нахождение широкой (8-кратной) вилки. Обозначим ориентировочную 1.05о исследуемого ве-
щества буквой Г (гипотетическая). На I этапе исследования испытываем дозы '/в Г, Г и 8 Г (каждую на 1 животном). II этап исследования определяется результатом I.
Второй этап — нахождение узкой (двукратной) вилки. Если все животные выжили, испытываются дозы 16 Г и 32 Г. Если все животные погибли, испытываются дозы 1/16 Г и 1/32 Г. Если на I этапе получена «вилка», т. е. при действии больших доз (или наибольшей) животные погибли, а при действии меньшей (или наименьшей) выжили, то испытываются 2 дозы с двукратным шагом внутри широкой вилки. Так, например, если погибло животное, получившее дозу 8 Г, а животное, получившее дозу Г, выжило, то испытываются дозы 4 Г и 2 Г. Как и на I этапе,* каждая доза испытывается на 1 животном. При этом полагают, что минимальная смертельная доза при двукратном шаге не выйдет за пределы 500-кратного интервала (1/16—32 Г). Тогда в итоге II этапа мы обязательно будет иметь 2 дозы, отличающиеся друг от друга в
2 раза, большая из которых вызывает гибель животного.
а меньшая не вызывает.
Третий этап — обеспечение пределов двукратной илки. На данном этапе число животных увеличивается до . Так, если от дозы 4 Г животное погибло, а после введения дозы 2 Г выжило, то обе дозы испытываются еще на 5 животных каждая. Результаты испытания могут быть следующими:
1. При действии дозы 4 Г все животные погибли, при действии дозы 2 Г все выжили.
2. Обе дозы вызывали частичную смертность животных.
3. При действии дозы 4 Г все животные погибли, а доза 2 Г оказалась частичносмертельной.
4. Доза 4 Г оказалась частичносмертельной, а при действии дозы 2 Г все животные выжили.
Четвертый этап — основной. Вариант 1 свидетельствует об узкой золе токсического действия. На IV
3 _
этапе испытываются дозы с шагом 1/2 или 1,26, т. е. 2-1,26 Г = 2,52 Г и 2- (1,26)2 Г = 3,16 Г (каждая на 6 животных). Вариант 2 свидетельствует о широкой зоне токсического действия. На IV этапе число животных при испытании доз 8 Г и Г дополняется до 6 (т. е. каждая из
этих доз испытывается еще на 5 животных). Варианты 3 и 4 характеризуют среднюю широту зоны токсического действия. Для них применяется шаг 1/2 или 1,43, т. е. для варианта 3 испытываются дополнительные дозы 2-1,43 Г = 2,86 Г и 1,43 Г, а для варианта 4: 2-1,43 = = 2,86 Г и 4 1,43 = 5,72 Г. В ряде случаев результаты, полученные на IV этапе, могут позволить провести расчет 1^50 одним из классических методов (например, по Кер-беру). Однако при получении результатов, соответствующих вариантам 2—4, требуется испытание еще одной дозы («вверх» или «вниз») — с заданным шагом (V этап, дополнительный).
По нашим данным (определение параметров летальности для 48 веществ), средний «расход» животных при использовании описанной тактики составляет около 30. Подчеркнем, что «экономия» животных достигается исключительно за счет гибкого применения адекватного шага (интервала между дозами) без снижения требований к точности эксперимента.
Поступила 09.07.85
УДК 613.281:664.959.21:613.29«
Ю. С. Коростелев
БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РЫБНО-БЕЛКОВОГО КОНЦЕНТРАТА ИЗ МИНТАЯ
Тихоокеанский НИИ рыбного хозяйства и океанографии, Владивосток
В настоящее время обеспечение населения нашей страны полноценным белком нельзя представить без использования ресурсов Мирового Океана.
Большая роль в решении этого вопроса отводится Тихоокеанскому региону. За последние годы Тихоокеанский бассейн стал основным поставщиком морепродуктов. Здесь наряду с расширением районов промысла развивается добыча ранее непромысловых морских рыб, одним из представителей которых является минтай, широко используемый для производства пищевой и кормовой продукции. Кроме того, из этой рыбы также осваивается выпуск рыб-но-белковых концентратов (РБК) и гидролизатов.
Для приготовления РБК используют свежий, охлажденный или мороженый минтай. Для получения фарша рыбу тщательно промывают, разделывают и измельчают. Полученный фарш экстрагируют 3—4 раза этанолом для удаления жира, остаточное количество которого не должно превышать 0,4 % от рыбной массы. Далее рыбную массу сушат и измельчают. Готовый концентрат должен представлять собой мелкий рассыпчатый порошол белого, светло-серого или кремового цвета, лишенный рыбного или какого-либо другого постороннего запаха и вкуса.
Целью настоящей работы являлась биологическая оценка РБК при разработке оптимального температурного режима его производства.
Исследования проводили на белых крысах-отъсмышах по методу биологической оценки, предложенной А. Д. Игнатьевым '.
Опыт, длившийся 28 сут, состоял из 4 периодов, продолжительность каждого 7 дней. Последние 3 дня каждого периода были учетными. В это время производили сбор остатков корма, мочи и кала для определения биохимических показателей.
В опыт взяты самцы-отъемышн (24) с исходной средней массой 40 г. Все животные были разделены на 4 группы по 6 в каждой.
Животные 1-й (контрольной) группы получали рацион, содержащий пшено, животные 2-й группы — рацион, содержащий пшено с обогащением 3% РБК (по белку),
экстрагированным при 0 °С, животные 3-й группы — рацион, содержащий пшено с обогащением 3 % РБК (по белку), экстрагированным при 20 °С, животные 4-й группы — рацион, содержащий пшено с обогащением 3 % РБК (по белку), экстрагированным при 70 °С.
Состав кормовых рационов представлен в табл. 1.
Содержание белка в рационах опытных и контрольной групп было равно 5,34 %.
Выживаемость животных в течение всего опыта составляла 100 %.
По внешнему виду животные опытных групп не различались между собой, они были активны, шерсть белая, пушистая, блестящая. Животные контрольной группы были пассивны, шерсть желтого оттенка с участками разрежения.
Прибавка массы тела животных в опытных группах была различной. Так, животные, получавшие рацион с РБК, экстрагированным при 20 °С, дали наибольшую прибавку по сравнению с животными других опытных групп. У контрольных животных масса тела не только не увеличивалась, но даже снижалась. Если принять отрицательную ежедневную прибавку массы тела контрольных животных за I, то подопытные животные ежесуточно по сравнению
Таблица 1
Состав кормовых рационов (в г на 100 г рецептуры) контрольной и опытных групп с 3 % заменой белка на РБК
"Игнатьев А. Д. Гигиеническая наука практике. Ц„ 1972, с. 16—17.
Продукт Контрольная группа Опытная группа
Пшено 83,00 81,50
РБК — 0,19
Маргарин 10,00 10,00
Растительное масло 2,00 2,00
Минеральная смесь (по Джонсону и 2,00 2,00
Фостеру)
Витаминная смесь 2,00 2,00
Сахар 1,00 1,00
Крахмал — 1,31