CC BY
6
Таблица 2
Изменение числа микроядер (в °/оо ) в полихроматофнльных эритроцитах костного мозга мышей после введения технического препарата ГХЦГ (¡г±5;)
Число Срок исследования, я
Доза, мг/кг подсчитанных клеток 24 36 48
loo (i/lo ld50) 200 (1/5,5 LDso) 9 000 11 000 5,3±0,39* 4,3±0,28 2.7±0,63 2,2±0,41 2,3±0,59 1,7±0,30
Контроль 10 000 3,8±0,28 3,8±0,25 3,7±22
Примечание, нию с контролем.
Звездочка — /><0,02 по сравне-
Согласно результатам исследований, ТДэд (средняя токсичная доза) для ТП по критерию выживаемости культивируемых клеток китайского хомячка составила 200 мкг/мл. Мутагенный фактор при 2-часовой экспозиции клеток данной концентрации ТП а 4 раза превышал спонтанный уровень (Я<0,01). При дальнейшем увеличении концентрации ТП выживаемость клеток резко снижалась, что препятствовало выявлению мутантных клонов из-за общетоксического действия препарата (табл. 1).
В опытах in vivo по учету индуцированных микроядер в эритроцитах костного мозга мыши наблюдалось превышение в 1,4 раза числа эритроцитов с мнкроядрами при однократной инъекции '/s LDso (/><0,02). Максимальное число микроядер обнаруживалось через 24 ч после введения ТП; через 36 ч количество их снижалось до контрольного уровня (табл. 2).
По международной номенклатуре вещество считается мутагенным, если оно индуцирует in vitro в системе V-79/ГГФРТ число мутаций, не менее чем в 3 раза превышающее уровень спонтанных точковых мутаций [6].
В наших опытах четырехкратное превышение спонтанного уровня достигалось только при среднетоксичной дозе.
Уменьшение числа микроядер после их индукции указывает на возможность неспецифического ингибирования мнто-тической активности клеток эритрондного ряда и расценивается как следствие общетокснческого действия препарата.
По данным литературы, мутагенная активность ГХЦГ в клетках костного мозга мышей выявлялась в значительно меньших дозах. Так, Д. С. Маркарян |2] на уровне 4% LDso наблюдал повышение в 1,7 раза частоты перестроек хромосом через 21 ч после введения препарата по сравнению с контролем. Меньший мутагенный ответ в наших экспериментах, очевидно, можно объяснить различиями в технологии производства и степени частоты ГХЦГ.
Таким образом, проведенные эксперименты показывают, что технический ГХЦГ проявляет относительно низкую мутагенную активность в узком диапазоне доз. Результаты исследований заслуживают внимания специалистов, работающих в области гигиены применения пестицидов. Апробированные на примере ГХЦГ методы, как представляется, целесообразно более широко использовать в исследованиях по оценке мутагенной активности пестицидов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Куринный А. И., Пилинская М. А. — Цитол. и генет., 1974, № 4, с. 342.
2. Маркарян Д. С. — Генетика, 1966, № 1, с. 132.
3. Пашин Ю. В.. Торопцев С. Н. — Бюлл. экспер. биол., 1983, № 1, с. 72.
4. Чеботарь А. А., Суржу А. И. — В кн.: Теоретические и практические подходы к проблеме мутагенеза и канцерогенеза окружающей среды. М., 1976, с. 33.
5. Abbondandolo A., Bonatti S., Colella С. et al.— Mutât. Res., 1976, Bd 37, S. 239.
6. Bradley M. O.. Bhuyan В., Francis M. C. et al. — Ibid., 1981, Bd 87, S. 81.
7. Heddle J. A.- Ibid., 1973, Bd 18, S. 187.
8. Salamone M.. Heddle J.. Stuart E. et al.—Ibid., 1980, Bd 74, S. 347.
9. Schmid If. - Ibid., 1975, Bd 31, S. 9.
Поступила 26.10.83
УДК 615.285.7.065:616-006.6
Г. Г. Диденко, Т. Д. Гупалович, О. Г. Петровская
ИЗУЧЕНИЕ ВОЗМОЖНЫХ БЛАСТОМОГЕННЫХ СВОЙСТВ ГАРДОНЫ
ВНИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Фосфорорганический инсектицид гардона (транс-изомер-2-хлор-1-(2,4,5-трихлорфенил)-виннлдиметилфосфат) применяется в борьбе с листогрызущнми гусеницами, плодожоркой и другими вредителями на различных культурах. Препарат малотоксичен для теплокровных; относится к группе слабокумулнрующих пестицидов. Гардона не обладает выраженной мутагенной активностью при определении на клетках костного мозга мышей in vivo, на культуре периферической крови человека in vitro [6] и в бактериальных системах [12]. Имеющиеся в литературе данные о бластомогенных свойствах препарата немногочисленны и противоречивы.
В настоящей работе приведены результаты изучения бластомогенных свойств гардоны. Критериями оценки бластомогенности служили онкологические (частота образования опухолей, их гистологическая характеристика и латентный период появления) и биохимические (состояние 14 показателей нуклеинового, белкового, углеводного обмена в тканях) показатели, которые, по данным наших исследований, могут изменяться в предопухолевом периоде при введении ряда канцерогенных веществ [3, 4].
Опыты выполнены на 268 беспородных кры/ах и 325 мышах обоего пола с исходной массой 80 и /8 г соответственно. Гардону (50 % смачивающийся порошок фирмы «Schell», США) вводили животным в желудок в виде водной эмульсин дважды в неделю в максимально переносимых дозах (430 мг/кг крысам и 266 мкг/кг мышам) на протяжении 18—20 нед. Суммарная доза введенного препарата для крыс составила 15,05 г/кг (5,1 LDSo) для мышей — 9,3 г/кг (5 LDso). Продолжительность опыта на крысах 80 нед, на мышах — 72 нед. У животных опытных и контрольных групп органы и выявленные опухоли подвергали гистологической обработке, препараты анализировали микроскопически. Биохимические исследования проводили в динамике после прекращения применения гардоны, спустя 3, 6, 9 и 12 мес. Определяли содержание ДНК, РНК в модификации В. В. Галкина и Г. Д. Бер-дышева [1], общих гистонов [5], фракций гистонов, богатых лизином и аргинином по E. Dp Nooij и соавт. [10], в клеточных ядрах, выделенных из тканей печени и костного мозга крыс и мышей по S. Martin и соавт. [II], активность дезоксирибонуклеазы в модификации О. П. Че-
Частота возникновения опухолей у крыс и мышей при воздействии гардоны
• к Количество животных с опухолями CS w ъ Опухоли легких Опухоли кроветворной системы (а) Опухоли молочной железы Опухоли других органов
Группа животных Пол Эффективное ЧИСЛО ЖИВОТН1 a •ic 5 a с s аденомы аденокарци-номы
абс. % всего, % о * ч а ■— У с абс. % абс. % абс. % абс. % абс. %
Опыты на крысах
Контроль- Самцы 75 9 12 1 8 9,6 — — 1 (в) 1.3
ная Самки 80 6 7,5 9,6 1 3 3,7 2(6) 2,5 1 (г) 1,25
Опытная Самцы 53 4 7.5 8,8 1 3 5,5 — 2(Д) 1,8
Самки 60 6 10 1,15 1 1.7 3(6) 5 2(e) 3,4
Опыты на мытах
Контроль- Самцы 58 14 24,1 30,6 1.1 6 10,3 4 6,9 4 6.9 _ _ _ _
ная Самки 92 32 34,7 1,25 11 11,9 3 3,3 3 3,2 12 13 3 (г) 3,2
Опытная Самцы 61 18 29,5 25,1 1,22 10 13,1 5 8,2 3 4,9 — —
Самки 114 26 22,8 1,23 14 12,8 2 1.7 4 3,5 5 4,4 1 (г) 0,87
Примечание. Звездочка — число животных, проживших более 10 мес от начала введения препарата; — данные отсутствуют; в скобках: а — ретикулосаркомы различной локализации, б — фиброаденома, в — цистаденома предстательной железы, г — рак матки, д — исходящая из щитовидной железы аденокарцинома, е — сецернирующая киста яичников.
пиноги и соавт. [8J. гексокиназы (гексокиназный тест) по С. А. Нейфаху и соавт. [7], осадочную реакцию на рак по И. М. Данко и соавт. [2], в сыворотке крови, активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в печени по G. Glock и соавт. [9], активность глюкозо-6-фосфатазы по J. Swan-son [13] в надосадочной фракции печени. Данные о частоте образования опухолей, их локализации у крыс и мышей опытных и контрольных групп представлены в таблице. Гардона при введении в больших дозах не обусловливала увеличения частоты образования опухолей различной локализации у крыс обоего пола на протяжении 80 нед по сравнению с контролем (8,8 % в опыте и 9,6 % в контроле; Р>0,3, х2—0,25). Среди самок крыс опухоли выявлены в подопытной группе у 10 % особей, в контрольной — у 7,5% (Я>0,3, х2—0,27), среди самцов —у 7,5 и 12% соответственно (Р>0,1, х2—0,75). В экспериментах на мышах (175 подопытных и 150 контрольных животных) установлено, что различия в частоте возникновения опухолей различной локализации статистически несущественны (25,1 % в опыте и 30,6% в контроле; Я>0,1, х2—1.8). У мышей-самцов частота образования опухолей составила 26,2% в опыте и 24,1 % в контроле, у самок — 22,8 и 34,7 % соответственно (Я>0,1, х2~0,34). У мышей-самок подопытной группы отмечена более низкая встречаемость опухолей молочных желез по сравнению с контролем (4,4 и 13 %; />=0,05, х2—0,5).
Опухоли подопытных и контрольных крыс и мышей гистологически были идентичны, и сроки их появления были одинаковы.
После прекращения введения гардоны (через 6, 9, 12 мес) изменения биохимических показателей не выявлены.
На основании полученных данных можно заключить, что гардона не обладает бластомогенной активностью.
ЛИТЕРАТУРА
1 .Галкин В. В., Бердышев Г. Д.— Биохимия, 1968, т. 33, с. 66—76.
2. Данко И. М., Федорова А. П., Короткоручко В. П. — Укр. 6iaxiM. ж., 1972, т. 44, Кя 1, с. 25—33.
3. Диденко Г. Г. — В кн.: Экспресс-методы определения канцерогенной активности химических веществ. Ереван, 1981, с. 74—77.
4. Диденко Г. Г., Гупалович Т. Д. — В кн.: Украинський бюхЫчный з'1зд, 3 Тези доповией. Донецьк, 1977, с. 103—104.
5. Кедрова В. М., Орлова J1. В. — В кн.: Современные методы в биохимии. М., 1968, т. 2, с. 90.
6. Куринный А. И., Пилинская М. А. Исследование пестицидов как мутагенов внешней среды. Киев, 1976.
7. Нейфах С. А., Грех И. Ф„ Монахов H. К. и др. — Гексокиназный тест. Для диагностики рака желудка и некоторых опухолевых заболеваний крови. Метод, инструкция. Л., 1969.
8. Чепинога О. Н., Задорожная Н. А. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 1967, вып. 5, с. 199—206.
9. Glock G., Мс Lean P. — Biochem. J., 1953, v. 55. p. 400—408.
10. De Nooij E. V., Westenbrink H. — Biochim. Biophys. Acta, 1962, v. 62, p. 608-609.
11. Martin S., England H., Turnington F. et al. — Biochem. J., 1967, v. 89, p. 327.
12. Shirasu G.. Moriva M., Kato K. et al. — Mulat. Res., 1974, Bd 26, S. 243-248.
13. Swanson J. — Meth. Enzymol., 1955, v. 2, p. 541.
Поступила 08.08.S3
