CC BY
5
лизме обнаруженных нами в летучих выделениях химических веществ показывают, что период полураспада большинства из них относительно невелик и они довольно быстро выводятся из организма. Тем не менее при ношении новой обуви организм испытывает явления дискомфорта. Указанием на это служат жалобы лиц, носивших обувь, на усиленную потливость ног и раздражение кожи стоп.
В заключение следует отметить, что полученные результаты дают повод для более настороженного отношения ко многим искусственным материалам и клеевым основам и указывают на необходимость дальнейшего совершенствования их гигиенических и эксплуатационных качеств.
Литература
1. Витенберг А. Г., Иоффе Б. В. Газовая экстракция в хроматографическом анализе. Л., 1982.
2. Еськова-Соековец Л. Б., Саутин А. И. и др. — В кн.: Гигиенические аспекты охраны окружающей среды. М., 1978, вып. б, с. 222—224.
3. Hansell С., Leo A. Substituent Constants for Correlation Analysis in Chemistry and Biology. New York, 1979.
4. Perbelini L., Brugone F... Pavan /. — Toxicol, appl. Pharmacol., 1980, vol. 53, p. 220—229.
5. Rickerl D. E.. Baker T. S„ Buss J. S. et al. — Ibid., 1979, vol. 49, p. 417—423.
6. Suzuki M., Tsuge S„ Tekeuchi T. — Analyt. Chem., 1970, vol. 42, p. 1705—1708.
7. Wolf M. S.. Ulis R„ Lorimer \V. V., Selikojj I. J.— Scand. J. Work Environ. Hlth, 1978, vol. 4, p. 114—118.
Поступила 29.12.84
УДК 615.285.7.(115.44.07
Л. А. Комиссарова
ИЗУЧЕНИЕ МУТАГЕН НОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ФОСФОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
Львовский медицинский институт
Накопление сведений о мутагенном действии пестицидов связано с необходимостью направленного поиска веществ, обладающих высокими пестицидными свойствами и безопасными в генетическом отношении [5—8, 10]. Значительна роль пестицидов и в индуцированном мутационном процессе [1—4, 9, 11, 12].
В связи с этим актуальны исследования с целью выявления мутагенной активности вновь синтезируемых пестицидов на различных генетических объектах [13—17].
Целью настоящей работы являлось изучение мутагенности производных нового отечественного пестицида гетеро-фоса — натриевой соли О-этил-О-фенилтиофосфорной кислоты, О-этил-О-фенилхлортиофосфата и О-этилдихлортио-фосфата.
Для исследований использовали метод учета рецессивных, сцепленных с полом летальных мутаций на дрозофиле и цитогенетический метод анализа клеток костного мозга млекопитающих.
Учет рецессивных, сцепленных с полом летальных мутаций проводили по стандартному методу Меллер-5, который сводится к обнаружению и учету рецессивных летальных мутаций, возникающих под влиянием изучаемого агента в половой Х-хромосоме самцов дрозофилы. Рецессивные летали учитывали но числу культур второго поколения (без диких самцов) к общему числу культур, с обязательной постановкой контрольного эксперимента. В качестве нормальной линии использовали линию Д-32, в качестве тестерной — линию М-5.
Для опытов брали самцов линии Д-32, которые содержались на стеклянных фильтрах, погруженных в бюксы с исследуемыми растворами пестицидов, приготовленными в 5 % сахарозе. Время экспозиции 48 ч. Число исследуемых культур максимально приближалось к 1000 для каждого изучаемого препарата. По окончании экспозиции подсчитывали летальный эффект [6]. Полученные результаты представлены в табл. 1.
Данные табл. I показывают, что изученные производные гетерофоса О-этнлдихлортнофосфат, О-этил-О-фенил-хлортиофосфат и натриевая соль О-этил-О-феннлтносфор-ной кислоты при воздействии на дрозофилу в использованных концентрациях не индуцировали достоверный уровень рецессивных летальных мутаций в половых 4 клетках дрозофилы по сравнению с контролем, что может свидетельствовать об отсутствии мутагенности у этой группы веществ. Однако заслуживает внимания очевидная взаимосвязь летального эффекта с уровнем индуцируемых рецессивных леталей, т. е. наличие положительной корреляции цмежду этими признаками (коэффициент корреляции 0,45).
J
Значительный интерес представляет накопление данных о влиянии представителей класса фосфороргапических пестицидов на хромосомный аппарат млекопитающих.
Цитогенетический анализ клеток костного мозга крыс проводили на препаратах, приготовленных по методу С. Ford [15] с некоторыми модификациями, необходимыми для получения препаратов хорошего качества. Сравнительное изучение мутагенной активности О-этилдихлортио-фосфата, О-этил-О-фенилхлортиофоЬфата и натриевой соли О-этил-О-фенилтиофосфорнон кислоты проводили при пе-роральном поступлении веществ в организм млекопитающих в дозах, эквивалентных по токсичности 1/5 и 1/50 LD50 каждого из изучаемых веществ, что составляло соответственно 120 и 12, 240 и 24, 812 и 81,2 мг/кг. Полученные результаты представлены в табл. 2.
Анализ результатов показал, что ни одно из изученных веществ не вызывает достоверного повышения частоты аберраций хромосом по сравнению с контролем. Во всех случаях основным типом повреждений были одиночные и парные фрагменты.
Таким образом, результаты исследований свидетельствуют о том, что производные гетерофоса — О-этилдихлор-
Таблица 1
Результаты исследования мутагенности производных гетерофоса на имаго дрозофилы
Вещество Доза препарата Экспозиция, ч Летальный эффект, % Число изученных хромосом % рецессивных леталей
О-этилдихлортио-
фосфат LDC0 48 62,3 983 0,71±0,24
О-этил-О-феннл-
хлортиофосфат ld5„ 48 47,8 952 0,63±0,22
Натриевая соль О-
этил-О-фенилтио-
фосфорной кисло-
ты LD,,0 48 38,9 933 0,54±0,19
Контроль — — — 1065 0,56±0,20
3 Гигиена и санитария № I
65
Таблица 2
Частота аберраций хромосом в клетках костного мозга крыс при воздействии некоторых производных гетерофоса
Типы аберрации (фрагменты)
Вещество Число Число Число % метафаз
Доза животных исследован - аберраций с аберра-
ных метафаз одиночные парные циями
О-этилдихлортиофосфат 1/5 LD 6 600 11 8 3 1,83±0,54
1/50 LD 6 600 9 7 2 1,50±0,49
О-этил-О-фенилхлортиофос- 1/5 LD 6 600 10 7 3 1,66±0,52
фат 1/50 LD 7 700 7 5 2 1,16±0,43
Натриевая соль О-этил-О-фе- 1/5 LD 6 600 8 5 3 1,33±0,46
нилтиофосфорной кислоты 1/50 LD 6 600 6 2 4 1 ±0,40
Контроль — 12 1200 11 10 1 0,92±0,27
тиофосфат, О-этнл-О-фенилхлортиофосфат и натриевая соль О-этил-О-фенилтиофосфорной кислоты не обладают мутагенной активностью в изученных дозах. Однако в исследованиях как на дрозофиле, так и на хромосомах соматических клеток млекопитающих отмечена тесная положительная корреляция между реакцией на пестициды мух и крыс. Взаимосвязь между мутациями, сцепленными с полом, и мутациями в клетках костного мозга выражается коэффициентом корреляции, равным 0,84.
Литература
1. Василос А. Ф. Цитотоксические и цитогенетнческие свойства пестицидов. Кишинев, 1980.
2. Касьяненко А. Г., Королева Н. С. — Изв. АН СССР. Серия биол., 1979, № 3, с. 401—409.
3. Куэьменко Н. М., Диденко Г. Г. и др. — Гиг. и сан., 1980, № 9, с. 88—90.
4. Куринный А. И. — В кн.: Генетические последствия загрязнения окружающей среды. Ашхабад, 1982, с. 31 — 32.
5. Куринный А. И. — Цитол. и генет., 1983, № 6, с. 16— 21.
6. Куринный А. И., Пилинская М. А. Исследования пестицидов как мутагенов внешней среды. Киев, 1976.
7. Медведь Л. И., Каган Ю. С. — Изв. АН СССР. Серия биол., 1978, с. 668—682, № 5.
8. Мельников Н. И. — Журн. Всесоюз. хим. о-ва им. Д. И. Менделеева, 1978, № 2, с. 136—142.
9. Оценка пестицидов как мутагенных факторов окружающей среды (перспективный аналитический обзор). М..« 1980.
10. Пилинская М. А., Куринный А. И. — В кн.: Проблемы гигиены и токсикологии пестицидов. КЛев, 1981, ч. 11, с. 37—43.
11. Хильчевская Р. И. — Журн. Всесоюз. хим. о-ва им. Д. И. Менделеева, 1979, № 1, с. 18—25.
12. Чепинога О. П. — В кн.: Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. Киев, 197'0, вып. 8, с. 30—39.
13. Benes V., Sram R. — Int. J. industr. Med. Surg., 1969, vol. 38, p. 39—41.
14. Buselmaier W., Röhrborn G., Propping P. European Environmental Mutagen Society, 1972, II, p. 76—77.
15. Ford C.. Hamerton /. — Stain Technol., 1956, vol. 31, p. 247—248.
16. Grant W. — Mutat. Res, 1973, vol. 21, p. 7—9.
17. Rhaese H. 1. — Fortschr. Bot., 1974, Bd 36, S. 209—218.
Поступила 19.03.85
УДК 613.632 + 6Н.7]-074 + 615.9.015.36.076.9
С. В. Сперанский ТАКТИКА ЭКСПЕРИМЕНТА ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ 1,О50
Новосибирский НИИ гигиены
Как известно, классический способ определения ЬО50 требует испытания каждой дозы на не менее чем 6 животных. Минимальное число доз, достаточное для расчета параметров летальности, равно 4:1 — доза, при которой все животные выживают, 2 — частично смертельные, 1 — вызывающая гибель всей группы. При этом интервал между дозами должен быть постоянным. Между тем исследуемые вещества могут существенно различаться по широте зон токсического действия (крутизне наклона кривой летальности). Применение такого интервала (шага) между дозами, который во всех случаях обеспечит соблюдение упомянутых требований, ведет к «перерасходу» животных, испытанию «лишних» доз, которые не дают никакой дополнительной информации о действии яда.
Мы предлагаем такую тактику эксперимента, при которой шаг между дозами определяется в ходе самих опытов. В итоге необходимое число животных сокращается примерно вдвое при соблюдении требований классического метода определения параметров летальности.
Первый этап — нахождение широкой (8-кратной) вилки. Обозначим ориентировочную 1.05о исследуемого ве-
щества буквой Г (гипотетическая). На I этапе исследования испытываем дозы '/в Г, Г и 8 Г (каждую на 1 животном). II этап исследования определяется результатом I.
Второй этап — нахождение узкой (двукратной) вилки. Если все животные выжили, испытываются дозы 16 Г и 32 Г. Если все животные погибли, испытываются дозы 1/16 Г и 1/32 Г. Если на I этапе получена «вилка», т. е. при действии больших доз (или наибольшей) животные погибли, а при действии меньшей (или наименьшей) выжили, то испытываются 2 дозы с двукратным шагом внутри широкой вилки. Так, например, если погибло животное, получившее дозу 8 Г, а животное, получившее дозу Г, выжило, то испытываются дозы 4 Г и 2 Г. Как и на I этапе,* каждая доза испытывается на 1 животном. При этом полагают, что минимальная смертельная доза при двукратном шаге не выйдет за пределы 500-кратного интервала (1/16—32 Г). Тогда в итоге II этапа мы обязательно будет иметь 2 дозы, отличающиеся друг от друга в
2 раза, большая из которых вызывает гибель животного.
а меньшая не вызывает.
