CC BY
44
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
УДК: 553.973 DOI: 10.24411/2075-4094-2018-15916
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА И БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТОВ ГУМИНОВЫХ КИСЛОТ САПРОПЕЛЯ (АЗОВСКАЯ ПОЙМА, КРАСНОДАРСКИЙ КРАЙ)
В .В. ПЛАТОНОВ*, Л.И. БЕЛОЗЕРОВА**, М.Н. ГОРОХОВА***
ООО «Террапроминвест, ул. Перекопская, д. 5 Б, Тула, 300045, Россия Первый МГМУ им. И.М. Сеченова, Абрикосовский пер., д. 1, стр. 1, Москва, 119435, Россия Новомосковский институт РХТУ им. Д.И. Менделеева, ул. Дружбы, д. 8, Новомосковск, 301650, Россия
Аннотация. Впервые выполнена хромато-масс-спектрометрия толуольного, хлороформного, ацетонового и этанольного экстрактов гуминовых кислот сапропеля Азовской поймы, Краснодарского края. Идентифицированы и количественно определены соединения, определяющие структурно-групповой состав каждого экстракта, получены масс-спектры и структурные формулы соединений. Проведены сравнительный анализ химического состава экстрактов, биотестирование с применением дрожжевого теста и различных штаммов микроорганизмов, позволившие установить взаимосвязь особенностей структуры соединений экстрактов с их физиологической активностью.
Ключевые слова: гуминовая кислота, сапропель, толуольный экстракт, хлороформный экстракт, ацетоновый экстракт, этанольный экстракт.
COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF THE CHEMICAL COMPOSITION AND BIOLOGICAL ACTIVITY OF EXTRACTS OF SULFURIC HUMIC ACID (AZOV REGION, KRASNODAR REGION)
V.V. PLATONOV*, L.I. BELOZEROVA**, M.N. GOROKHOVA***
ООО "Terraprominvest", Perekopskaya street 5 B, Tula, 300045, Russia The first Moscow State I.M. Sechenov Medical University, Abrikosovskii per.1, d.1, Moscow, 119435, Russia Novomoskovsk D.I. Mendeleev Institute of Chemical Technology, Druzhby str., 8, Novomoskovsk, 301650, Russia
Abstract. The chromatography-mass spectrometry of toluene, chloroform, acetone and ethanol extracts of humic acids of sapropel of the Azov floodplain, the Krasnodar Territory was performed for the first time. The compounds determining the structural-group composition of each extract were identified and quantified. Mass spectra and structural formulas of compounds were obtained. A comparative analysis of the chemical composition of the extracts, biotesting using yeast dough and various strains of microorganisms, allowed to reveal the relationship between the specific features of the structure of the extract compounds and their physiological activity.
Key words: humic acid, sapropel, toluene extract, chloroform extract, acetone extract, ethanol extract.
Введение. Органическое вещество сапропелей (ОВС) характеризуется содержанием широкого набора соединений: водорастворимых (ВРВ), легко- и трудногидролизуемых (ЛГВ и ТГВ) веществ, фуль-во- (ФК), гиматомелановых (ГМК) и гуминовых (ГК) кислот, гумина (Г), аминокислот, спиртов, липидов, каротиноидов, кетонов, ксантонов, ксантофиллов, флавоноидов, стероидов, предельных, непредельных, нафтеновых и ароматических кислот, углеводородов, производных хлорофилла, витаминов, ферментов, металлопорфиринови др. [1-4].
Перечисленный спектр соединений, несомненно, отражает генетическую связь ОВС с исходным биоматериалом, участвовавшим в формировании химического состава ОВС, а также указывает на широкие возможности применения, как исходных сапропелей, так и различных препаратов на их основе в сельскохозяйственном производстве экологически чистой продукции, ветеринарии, животноводстве, медицине, технике, принимая во внимание высокую специфическую физиологическую активность большинства из перечисленных выше групп соединений [5, 6].
С целью углубления наших сведений об особенностях химического состава ОВС, расширения областей применения различных препаратов на основе ОВС, считалось целесообразным предварительно выделенные из сапропеля ГК разделить на узкие фракции, например, последовательной экстракцией ГК органическими растворителями различной полярности, которые затем изучить комплексом современных физико-химических методов анализов, включая ИК-Фурье, УФ/ВИС, :Ии 13С ЯМР-спектроскопию, рент-гено-флуоресцентный анализ, хромато-масс-спектрометрию, а также биотестирование экстрактов ГК.
Были изучены толуольный, хлороформный, ацетоновый и этанольный экстракты ГК, полученные исчерпывающей последовательной экстракцией последних в аппарате Сокслета при температурах кипения растворителей.
Выход экстрактов составил 4.8; 8.5; 23.4 и 48.3 (масс. % от ГК).
Цель исследования - сравнительное изучение химического состава и биологической активности экстрактов, полученных последовательной исчерпывающей экстракцией ГК сапропеля Азовской поймы, Краснодарского края толуолом, хлороформом, ацетоном и этанолом.
Материалы и методы исследования. Хромато-масс-спектрометрия выполнялась с использованием газового хроматографа GC-2010, соединенного с тройным квадрупольным масс-спектрометром под управлением программного обеспечения (ПО) GCMSSolution 4.11. Для идентификации и количественного определения содержания соединений поддерживали следующие условия хроматографирования: ввод пробы с делением потока (1:20), колонка ZB-5MS (30 м*0,25 мм*0,25 мкм), температура инжектора 280°С, газ-носитель - гелий, скорость газа через колонку 0,90 мл/мин. Регистрация аналитических сигналов осуществлялась при следующих параметрах масс-спектрометра: температура переходной линии и источника ионов 280 и 250°С, соответственно, электронная ионизация (ЭИ), диапазон регистрируемых масс от 50 до 500 Да [7-11].
Результаты и их обсуждение. Хроматограммы экстрактов приведены на рис. 1-4 и структуры то-луольного и ацетонового экстрактов наиболее представительных соединений для каждого из них приведены рис. 5, 6.
Рис. 1. Хроматограмма толуольного экстракта ГК сапропеля
Рис. 2. Хроматограмма хлороформного экстракта ГК сапропеля
Рис. 3. Хроматограмма ацетонового экстракта ГК сапропеля
Рис. 4. Хроматограмма этанольного экстракта ГК сапропеля
Перечень соединений, их количественное содержание и структура для хлороформного и этанольного экстрактов приведены [3, 4].
Перечень соединений, их количественное содержание для толуольного и ацетонового экстрактов (табл. 1, 2), структура (рис.5, 6).
Таблица 1
Перечень соединений толуольного экстракта
№ Ret. Time % S Compound Name
1. 6.980 43.85 1,5-Heptadien-3-yne
2. 8.122 0.00 1,3,5-Cycloheptatriene
3. 8.327 0.01 Benzyloxytridecanoicacid
4. 9.227 0.01 8-Phenyloctanoic acid
5. 10.508 0.01 2-Butanol, 3-benzyloxy-
6. 10.905 0.00 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)-, phenylmethyl ester
7. 11.569 0.10 Ethylbenzene
8. 12.225 0.05 p-Xylene
9. 13.699 0.07 o-Xylene
10. 14.589 0.02 1-Chloroundecane
11. 14.936 0.00 Bicyclo[2.1.1]hexan-2-ol, 2-ethenyl-
12. 16.272 0.02 5,8,11,14-Eicosatetraenoic acid, phenylmethyl ester, (all-Z)-
13. 16.579 0.01 4-Pentadecyne, 15-chloro-
14. 17.426 0.01 2,6,6-Trimethyl-bicyclo[3.1.1]hept-3-ylamine
15. 18.292 0.01 6,9,12-Octadecatrienoic acid, phenylmethyl ester, (Z,Z,Z)-
16. 18.520 0.00 3-Trifluoroacetoxypentadecane
17. 19.134 0.21 Benzoylformicacid
18. 19.532 0.03 3-tert-Butyl-5-chloro-2-hydroxybenzophenone
19. 19.814 0.02 Spiro[2.2]pentane-1-carboxylic acid, 2-cyclopropyl-2-methyl-
20. 19.996 0.01 3-Methyl-4-(phenylthio)-2-prop-2-enyl-2,5-dihydrothiophene 1,1-dioxide
21. 20.175 0.01 Cyclohexane, 1,2,4-tris(methylene)-
22. 20.833 0.02 4-Chloro-3-n-butyltetrahydropyran
23. 21.130 0.00 Z,Z,Z-1,4,6,9-Nonadecatetraene
24. 22.352 0.10 Oxalic acid, isobutyl octyl ester
25. 23.324 0.01 Isobornylacetate
26. 23.473 0.02 Megastigma-3,7(E),9-triene
27. 24.063 0.03 Decanal
28. 24.329 0.03 Z,Z, Z-4,6,9-Nonadecatriene
29. 24.536 0.01 Cyclopropanemethanol, 2-isopropylidene-.alpha.-methyl-
30. 24.897 0.02 3-Decyn-2-ol
31. 25.290 0.07 5-Tetradecen-3-yne,(Е)-
32. 25.679 0.02 7-Methylene-9-oxabicyclo[6.1.0]non-2-ene
Продолжение таблицы 1
33. 26.015 0.02 10,12-Octadecadiynoic acid
34. 26.233 0.01 8,11,14-Eicosatrienoic acid, (Z,Z,Z)-
35. 26.380 0.02 Cyclohexane, 1,3-butadienylidene-
36. 26.550 0.01 cis-p-Mentha-2,8-dien-1-ol
37. 26.792 0.01 Z,Z-2,5-Pentadecadien-1-ol
38. 27.055 0.04 9,12,15-Octadecatrienoic acid, 2-phenyl-1,3-dioxan-5-yl ester
39. 27.899 0.03 trans-p-mentha-1(7),8-dien-2-ol
40. 28.114 0.01 Farneseneepoxide, E-
41. 28.313 0.03 Benzaldehyde, 3-benzyloxy-2-fluoro-4-methoxy-
42. 28.592 0.01 Bicyclo[3.1.1]heptan-3-ol, 6,6-dimethyl-2-methylene-, [1S-(1.alpha.,3.alpha.,5. alpha.)]-
43. 28.768 0.01 2,4-Pentadien-1-ol, 3-pentyl-, (2Z)-
44. 29.296 0.01 3,5-Octadienoic acid, 7-hydroxy-2-methyl-, [R*,R*-(E,E)]-
45. 30.243 0.16 Decane, 2,6,7-trimethyl-
46. 30.662 0.03 Bicyclo[2.2.1]heptane-2,5-diol, 1,7,7-trimethyl-, (2-endo,5-exo)-
47. 31.035 0.01 (E) -3(10)-Caren-4-ol
48. 31.828 0.01 Cyclohexanone, 2-methyl-5-(1-methylethenyl)-
49. 32.597 0.03 Spiro[androst-5-ene-17,1 '-cyclobutan]-2'-one, 3-hydroxy-, (3.beta.,17.beta.)-
50. 34.228 0.02 (7R,8R)-7-Hydroxymethyl-8-methoxy-trans-bicyclo[4.3.0]-3-nonene
51. 34.362 0.01 12,15-Octadecadiynoic acid, methylester
52. 36.206 0.01 trans-Z-. alpha. -Bisabolene epoxide
53. 37.866 0.08 Tridecane
54. 38.193 0.00 cis-Z-.alpha.-Bisabolene epoxide
55. 38.801 0.03 1-Octanol, 2-butyl-
56. 39.518 0.01 [1,1'-Bicyclopropyl]-2-octanoic acid, 2'-hexyl-, methyl ester
57. 42.578 0.28 Propanedioicacid, phenyl-
58. 43.345 0.00 Benzeneaceticacid, hexylester
59. 44.242 0.01 9-Octadecenoic acid (Z)-, phenylmethyl ester
60. 45.588 0.01 7-Oxabicyclo[4.1.0]heptane, 1-methyl-4-(2-methyloxiranyl)-
61. 46.374 0.02 Benzeneaceticacid, 2-tetradecyl ester
62. 47.136 0.46 2-Methoxy-4-vinylphenol
63. 50.960 0.02 10,12-Docasadiyndioic acid
64. 51.520 0.02 Hydroxydehydrostevicacid
65. 55.258 0.03 4-Hydroxy-2-methoxybenaldehyde
66. 55.767 0.01 1b,5,5,6a-Tetramethyl-octahydro-1-oxa-cyclopropa[a]inden-6-one
67. 56.396 0.01 Cyclopropaneaceticacid, 2-hexyl-
68. 57.958 0.07 2,5-Octadecadiynoic acid, methylester
69. 58.380 0.01 Retinal
70. 58.681 0.04 Cholest-22-ene-21-ol, 3,5-dehydro-6-methoxy-, pivalate
71. 59.319 0.07 5-Octen-2-one, 3,6-dimethyl-
72. 59.538 0.03 7,7a-Dimethyl-3a,4,5,7a-tetrahydro-3H-benzofuran-2-one
73. 59.927 0.01 1,1,6-trimethyl-3-methylene-2-(3,6,9,13-tetramethyl-6-ethenye-10,14-dimethylene -pentadec-4-enyl) cyclohexane
74. 60.325 0.01 Pseduosarsasapogenin-5,20-dien
75. 60.420 0.08 Alloaromadendrene
76. 60.578 0.09 .beta. -copaene
77. 60.992 0.02 Dihydro-isosteviolmethylester
78. 61.131 0.00 Diazoprogesterone
79. 62.788 0.02 6.beta.,6.beta.-Dibromo-6,7-methylenetestosterone
80. 66.976 0.01 1b,4a-Epoxy-2H-cyclopenta[3,4]cyclopropa[8,9]cycloundec[1,2-b]oxiren-5(1aH)-one , 2,7,9,10-tetrakis(acetyloxy)decahydro-3,6,8,8,10a-pentamethyl-
81. 68.240 0.08 17.beta.-Hydroxy-5.alpha.-androstan-3-one, trimethylsilyl ether
82. 68.819 0.01 9,10-Secocholesta-5,7,10(19)-triene-3,24,25-triol, (3.beta.,5Z,7E)-
83. 69.590 0.03 Ethyliso-allocholate
Продолжение таблицы 1
84. 70.077 0.08 Cholestane, 4,5-epoxy-, (4.alpha.,5.alpha.)-
85. 70.987 0.01 Z,Z-8,10-Hexadecadien-1-ol
86. 72.410 0.16 1-Octadecyne
87. 73.084 0.81 3-Hexadecene, (Z)-
88. 73.623 0.02 4-((1E)-3-Hydroxy-1-propenyl)-2-methoxyphenol
89. 73.841 0.06 1-Heptadec-1-ynyl-cyclopentanol
90. 74.943 0.61 Tetradecanoicacid
91. 76.947 0.21 Cyclododecanol
92. 77.609 0.40 9,12-Octadecadienoic acid (Z,Z)-
93. 77.803 0.47 2-Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl-
94. 78.043 0.03 2-Dodecen-1-yl(-)succinicanhydride
95. 78.433 0.04 3-Hexadecyne
96. 78.565 0.08 Pentadecanoicacid
97. 78.727 0.03 .beta. Carotene
98. 79.015 0.08 (R)-(-)-14-Methyl-8-hexadecyn-1-ol
99. 79.126 0.16 1-Hexadecanol
100. 79.713 0.04 Allyl n-octylether
101. 80.060 0.03 1-Heptatriacotanol
102. 80.989 0.19 13-Octadecenal, (Z)-
103. 81.778 1.86 n-Hexadecanoicacid
104. 82.103 0.27 18-Norabietane
105. 83.184 0.21 9,9-Dimethoxybicyclo[3.3.1]nona-2,4-dione
106. 83.313 0.11 1-Phenanthrenecarboxaldehyde, 1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydro -1,4a-dimethyl-7-(1-methylethyl)-, [1S-(1.alpha.,4a.alpha.,10a.beta.
107. 83.700 0.12 1-Hexadecyne
108. 86.106 0.02 3.alpha.-(Trimethylsiloxy)cholest-5-ene
109. 86.361 0.21 1-Eicosanol
110. 87.110 0.24 7,8-Epoxylanostan-11-ol, 3-acetoxy-
111. 88.682 0.11 Cyclopropaneoctanoic acid, 2-[[2-[(2-ethylcyclopropyl)methyl] cyclopropyl]methyl]-, methyl ester
112. 88.983 0.53 cis-Vaccenicacid
113. 89.761 0.01 Tricyclo[20.8.0.0(7,16)]triacontane, 1(22), 7(16)-diepoxy-
114. 90.437 0.62 Octadecanoicacid
115. 90.640 0.23 7-epi-trans-sesquisabinene hydrate
116. 92.156 0.12 4-Methyldocosane
117. 93.162 0.14 9-Eicosyne
118. 94.093 0.26 OleicAcid
119. 95.462 0.16 Oleylalcohol, trifluoroacetate
120. 95.841 0.18 Hexacosane
121. 96.359 0.19 Palmitoleicacid
122. 96.658 0.19 (R)-(-)-(Z)-14-Methyl-8-hexadecen-1-ol
123. 96.955 0.34 1,2-Diazaspiro(2.5)octane
124. 97.124 0.56 4,8,12,16-Tetramethylheptadecan-4-olide
125. 97.267 1.51 1,1-Bis(o-chlorophenyl) chloromethane
126. 97.449 0.48 1-Phenanthrenemethanol, 1,2,3,4,4a,9,10,10a-octahydro-1,4a-dimethyl-7-(1 -methylethyl)-, [1S-(1.alpha.,4a.alpha.,10a.beta.)]-
127. 97.804 0.90 Eicosanoicacid
128. 98.191 0.21 1H-Imidazole, 1-(1-oxooctadecyl)-
129. 98.692 0.16 Tetratetracontane
130. 99.675 0.22 2-Propenoic acid, 2-methyl-, octyl ester
131. 100.334 0.26 l-(+)-Ascorbicacid 2,6-dihexadecanoate
132. 100.967 1.61 1-Heneicosanol
133. 101.151 0.72 Heneicosane
134. 101.420 0.10 2-Pentacosanone
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
Продолжение таблицы 1
135. 101.702 0.71 Erucicacid
136. 101.833 0.14 Phthalic acid, di(2-propylpentyl) ester
137. 101.965 0.61 Pentadecanal-
138. 103.064 2.32 Docosanoicacid
139. 103.767 0.24 9-Tricosene, (Z)-
140. 103.926 0.35 2-methyloctacosane
141. 104.053 0.09 Cyclononasiloxane, octadecamethyl-
142. 104.287 0.17 9,10-Secocholesta-5,7,10(19)-triene-1,3-diol,
25-[(trimethylsilyl)oxy]-, (3.beta.,5Z, 7E)-
143. 104.953 0.42 Oxirane, heptadecyl-
144. 106.226 1.21 Tricosanoicacid
145. 107.171 1.37 Behenicalcohol
146. 107.311 2.19 Triacontane
147. 107.993 1.39 17.alfa.,21.beta. -28,30-Bisnorhopane
148. 108.651 0.30 Z-3-Octadecen-1-ol acetate
149. 110.383 4.81 Tetracosanoicacid
150. 111.479 0.56 2-methylhexacosane
151. 111.827 0.21 1,6,10,14,18,22-Tetracosahexaen-3-ol,
2,6,10,15,19,23-hexamethyl-, (all-E)-
152. 112.187 0.16 2-Heptacosanone
153. 113.278 0.53 9-Octadecen-1-ol, (Z)-
154. 116.875 2.44 Octatriacontylpentafluoropropionate
155. 117.533 0.21 9-Octadecenoic acid, (E)-
156. 117.832 0.64 2-Nonadecanone
157. 121.125 0.45 Benzene, p-di-tert-pentyl-
158. 125.842 1.42 Cholesta-4,6-dien-3-ol, (3.beta.)-
159. 126.219 2.02 .gamma.-Tocopherol
160. 126.953 0.87 Octadecanal
161. 127.505 1.68 .beta.-Sitosterolacetate
162. 131.135 0.45 Rapamycin
163. 132.653 0.68 Triacontane, 1-bromo-
164. 133.089 1.96 dl-. alpha.-Tocopherol
165. 133.187 1.65 1,1'-Bicyclohexyl, 2-(1-methylethyl)-, cis-
166. 134.594 1.74 Z-28-Heptatriaconten-2-one
167. 135.557 0.17 5. alpha.-Cholest-8-en-3-one, 14-methyl-
168. 147.499 2.64 30-Norlupan-28-oic acid, 3-hydroxy-21-methoxy-20-oxo-, methyl ester, (3.beta.)-
A. Ambrein
(mainlib) Ambrein
B. gamma.-Tocopherol
83 Э1 1°7 122 135
1« 177
205 217 231 246 260 274
302 316 330 344 35S 372
20 30 40 50 60 70 (mainlib} y-Tocopherol
90 100 110 120 130 140 150 160 170 ISO 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430
C.
Tetracontane-1,40-diol
Jl, l,f 1f° 1,V 12,||8, 2If. 2?2 ffi. 376 390 W 418 432 446 460 474 488 502 516 546 ^ 574 534
20 40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
(mainlib) Tetracontane-1,40diol
Cholest-5-en-3-ol (3.beta.)-, carbonochloridate
40 50 60 70 80 » 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 2Э0 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440 450 460
(mainlib) Cholest-5-en-3-ol (3(3)-. carbonochloridate
E.
dl-. alpha.-Tocopherol
5
нет 430
43 » ? J 1 " чг T 4? . 205 ™ 181 j 217 233 246 260 274 288 302 316 344 358 415
10 20 30 40 50 60 70 ■ {mainlib) dl-a-Tocopherol
90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 300 310 320 330 340 350 360 370 380 390 400 410 420 430 440
F. Betulin
(mainlib) Betulin
G. E,E,Z-1,3,12-Nonadecatriene-5,14-diol
H. D-Galactono-l,4-lactone, 5,6-O-octylidene-
Й Si \7 I Ф 4! 151 16» 171 IS!
251 21D 217 225 242
2D 2D 4D 55 £5 75 3D 5D 1DD 110 125 125 14D 152 1GD 17D 13D 152 255 215 22D 22D 24D 255 2£5 275 20D 25D 2D5
(" 2 I I i : II 1 '.ill! - li III
I. .alpha.-Gu ai ene
I,, mIiI
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 (mainlib) ct-Guaiene
189 204
190 200 210
J. 9-Eicosyne
¿aJ.
17Э 193 207 221 237
20 30 40 50 SO 70 80 90 100 110 120 130 140 150 ISO 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 280 290 {mainlib) 9-Eicosyne
Рис. 5. Структуры толуольного экстракта наиболее представительных соединений
Таблица 2
Перечень соединений ацетонового экстракта
№ Ret. Time % S Compound Name
1. 5.523 0.18 3-Furaldehyde
2. 5.617 13.92 2-Pentanone, 4-hydroxy-4-methyl-
3. 6.025 0.12 Methylchloroformate
4. 7.389 0.16 o-Xylene
5. 8.767 0.10 Isopinocarveol
6. 9.197 0.81 1,3-Dioxolane-4-methanol, 2,2-dimethyl-, (S)-
7. 9.754 0.08 2-Methylenecyclohexanol
8. 10.175 0.32 1b,5,5,6a-Tetramethyl-octahydro-1-oxa-cyclopropa[a]inden-6-one
Продолжение таблицы 2
9. 10.698 2.93 2-Propanol, 1,1,1-trichloro-2-methyl-
10. 11.537 0.12 DL-Threonine, N-glycyl-
11. 12.205 0.06 12,15-Octadecadiynoic acid, methylester
12. 12.539 0.10 8-Oxabicyclo[5.1.0]octane
13. 13.504 0.04 7-Oxabicyclo[4.1.0]heptane, 1-methyl-4-(2-methyloxiranyl)-
14. 14.030 0.12 Cyclopropaneaceticacid, 2-hexyl-
15. 14.583 0.13 1-Cyclohexene-1-carboxaldehyde, 4-(1-methylethyl)
16. 14.859 0.19 Propanoic acid, dimethyl(isopropyl)silyl ester
17. 15.419 0.14 Levoglucosenone
18. 17.195 0.17 1-(1-Methoxycyclopropyl) -3-methylbut-2-en-1-ol
19. 17.212 0.16 Ribofuranose, 1,5-anhydro-2,3-O-isopropylidene-, d-
20. 17.513 0.53 Estra-1,3,5(10)-trien-17.beta. -o
21. 17.974 0.11 2-Pentanol, 5-(2-propynyloxy)-
22. 18.220 0.19 Levomenthol
23. 18.452 0.58 3,3,3-Trifluoro-2-(4-hydroxy-6-methyl-2-oxo-2H-pyran-3-ylsulfanyl)-2-trifluoromethyl-propionic acid methyl ester
24. 19.072 0.70 Benzofuran, 2,3-dihydro-
25. 19.492 0.13 Z,Z,Z-1,4,6,9-Nonadecatetraene
26. 20.048 0.04 Cyclopentanol, 1-(methylenecyclopropyl)-
27. 20.295 0.00 2-Methyl-oct-2-enedial
28. 20.535 0.04 3-Methyl-4-(phenylthio)-2-prop-2-enyl-2,5-dihydrothiophene 1,1-dioxide
29. 21.799 3.00 2-Methoxy-4-vinylphenol
30. 22.440 0.05 Ethyliso-allocholate
31. 22.876 0.32 Phenol, 2,6-dimethoxy-
32. 23.700 0.01 Lanosta-7,9(11)-dien-18-oic acid, 22,25-epoxy-3,17,20-trihydroxy-, .gamma.-lactone, (3.beta.)-
33. 24.045 1.07 .alpha.-l-Arabinopyranose, 1,2:3,4-bis-O-(1-methylethylidene)-
34. 24.590 0.21 cis-9-Tetradecen-1-ol
35. 25.055 2.09 1,6-Anhydro-2,3-O-isopropylidene-.beta.-D-mannopyranose
36. 25.168 2.51 5,8a-Dimethyl-3-thiomorpholin-4-ylmethyl-3a, 5,6,7,8,8a,9,9a-octahydro-3H-naphtho[2,3-b]furan-2-one
37. 25.985 1.75 1,6-Anhydro-3,4-O-isopropylidene-.beta.-D-galactopyranose
38. 26.606 1.16 Apocynin
39. 26.816 0.69 Threitol, 1,2:3,4-di-O-isopropylidene-, L-
40. 27.503 1.12 Benzoicacid, 4-hydroxy-
41. 27.660 2.22 2-Propanone, 1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-
42. 28.692 10.29 3-Hydroxy-4-methoxybenzoic acid
43. 29.154 1.53 .alpha.-Amino-3'-hydroxy-4'-methoxyacetophenone
44. 29.642 0.18 Epoxy-2H-cyclopenta[3,4]cyclopropa[8,9]cycloundec[1,2-b] oxiren-5(1aH)-one, 2,7,9,10-tetrakis(acetyloxy)decahydro-3,6,8,8,10a-p
45. 29.871 0.45 9-Eicosyne
46. 30.314 0.91 Azelaicacid
47. 30.521 1.19 Benzeneacetic acid, 4-hydroxy-, methyl ester
48. 31.413 0.24 (Z) 6-Pentadecen-1-ol
49. 32.308 0.28 6-Hexadecenoic acid, 7-methyl,methyl ester (Z)
50. 32.546 3.48 1-Dodecanol, 3,7,11-trimethyl-
51. 32.681 3.92 Benzeneacetic acid, 4-hydroxy-3-methoxy-, methyl ester
52. 33.344 2.95 Mandelic acid, 3,4-dimethoxy-, methyl ester
53. 33.666 0.02 (2,2,6-Trimethyl-bicyclo[4.1.0]hept-1-yl)-methanol
54. 34.183 0.36 Sulfurous acid, octadecyl 2-propyl ester
55. 34.398 2.29 3-Hydroxy-4,5-dimethoxybenzoic acid
56. 34.581 1.17 Cyclododecanol
57. 34.970 0.36 6-Octen-1-ol, 3,7-dimethyl-, propanoate
58. 35.086 0.83 2-Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl-
Продолжение таблицы 2
59. 35.896 0.47 3,7-Dimethyloct-6-enyl isobutylcarbonate
60. 35.986 0.79 n-Nonadecanol-1
61. 36.209 0.36 Cyclohexene, 4-(4-ethylcyclohexyl)-1-pentyl-
62. 36.354 0.34 Sulfurous acid, 2-propyl undecyl ester
63. 36.461 0.27 Furan, 2-hexyl-
64. 36.764 0.30 6-epi-shyobunol
65. 37.096 0.91 Cyclopentadecanone, 2-hydroxy-
66. 37.487 0.31 1,2-Benzenedicarboxylic acid, bis(l-methylethyl) ester
67. 37.582 0.95 Pentadecanoicacid
68. 38.291 0.87 18-Norabietane
69. 38.859 0.54 Ethanol, 2-(9-octadecenyloxy)-, (Z)-
70. 39.256 0.04 1-Heptatriacotanol
71. 39.719 0.13 E,E,Z-1,3,12-Nonadecatriene-5,14-diol
72. 40.374 0.18 2-Bromotetradecane
73. 40.463 0.27 2-Nonadecanone
74. 41.051 1.13 OleicAcid
75. 41.297 0.40 Linoleicacidethylester
76. 41.531 1.20 Octadecanoicacid
77. 41.970 0.07 9,10-Secocholesta-5,7,10(19)-triene-1,3-diol, 25-[(trimethylsilyl)oxy]-, (3.beta.,5Z,7E)-
78. 42.153 0.40 cis-1-Chloro-9-octadecene
79. 42.259 0.62 Dodecane, 2-methyl-
80. 43.972 0.98 n-Pentadecanol
81. 44.062 0.64 2-methylhexacosane
82. 44.700 1.58 9-Octadecenoic acid, (E)-
83. 45.157 1.59 Dodecanoicacid, 2-octyl-
84. 45.835 0.56 Triacontane, 1-bromo-
85. 46.463 0.32 Retinal
86. 47.782 1.10 n-Tetracosanol-1
87. 47.905 1.34 Sulfurous acid, 2-propyl tridecyl ester
88. 48.721 2.40 Erucicacid
89. 50.382 0.30 7,8-Epoxylanostan-11-ol, 3-acetoxy
90. 51.212 0.73 3. alpha.-(Trimethylsiloxy)cholest-5-ene
91. 54.574 1.24 9-Octadecenoic acid, 1,2,3-propanetriyl ester, (E,E,E)-
92. 63.696 2.86 Z-28-Heptatriaconten-2-one
93. 73.407 1.33 9,19-Cyclolanostan-3-ol, acetate, (3.beta.)-
94. 78.275 3.00 1,37-Octatriacontadiene
95. 79.982 0.53 30-Norlupan-28-oic acid, 3-hydroxy-21-methoxy-20-oxo-, methyl ester, (3.beta.)-
A. Isopinocan'eol
2D 3D 4D 5D
ijnainhbl Iscpnocarveol
7D ED SD 1DD 110 12D 140 150 160
B. 1b,5,5,6a-Tetramethyl-octahydro-1-oxa-cyclopropa[a]inden-6-one
vl
II
i..., i.i.I:
147 165 17Э 193 208
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 (mainlib) 1b.5,5,6a-Tetramethyl-octahydro-1-o*a-cyclopropa[ainden-6-one
C. Apocynin
29 32 f? . 45
U , 155
10 20 30 40 50 60 70 (mainlib) Apocynin
90 100 110 120 130 140 150 160 170
D. 6-epi-shyobunol
■ffi. .L'r
30 40 50 GO 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 (mainlib) S-epi-shyobunol
E. 18-Norabietane
JiL,........In
50 GO 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270 (mainlib) 18-Norabietane
F. Paromomycin
|и^он о-
ííl м
ÍÍILOUJL
.1л21Э1 218 231 245 259 277 292 305 323
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 2G0 280 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 (mainlib) Paromomycin
G. Ribofuranose, 1,5-anhydro-2,3-O-isopropylidene-, d-
27
55
73
114
157
,111111 ■, .-11111 Г. 7|S ^ .. ■, II.,. Э.1 . ■ .105. . ,. 11., 121 ......... , .11. | .
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 (mainlib) Ribofuranose. 1.5-anhydro-2.30-isopropylidene-. d-
H. 3,3,3-Trifluoro-2-(4-hydroxy-6-methyl-2-oxo-2H-pyran-3-ylsulfanyl)-2-trifluoromethyl-propionic acid methyl
ester
210 227 241
2D 4D 5D GD 7D 3D 3D 1DD 11D 123 130 140 130 133 17D 130 190 2DD 21D 22D 23D 24D 253 233 27D 23D 2SD 3DD 31D 32D 33D 34D 353 3SD 37D 33D
1;п,яя: 1 1 ' Til-у.*-.: ? i'4 . i '.vf.r*" .■ 7h : . ir i ! . :i r. ir .l i ? I'ikKirirmdt y wyw.yv. add methyl eaier
I. Z,Z,Z-1,4,6,9-Nonadecatetraene
1шД
, ,155 161........173 180 .187 193 199 206 212 21Э 225 231. 245
40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 190 200 210 220 230 240 250 260 270
(mainlib) Z.Z.Z-1.4.6. Э-Nonadecat et raene
J. .alpha.-l-Arabinopyranose, l,2:3,4-bis-0-(l-methylethylidene)-
2,3 »
JJUL J
20 30 40 50 60 70 80
(mainlib) a-l-Aabinopyranose, 1,2:3,4-bis-0-{1-methy1ethy1idene)-
|||r 126 139 90 100 110 120 130 140 150 160 170
190 200 210 220 230 240
Рис. 6. Структуры ацетонового экстракта наиболее представительных соединений Результаты хромато-масс-спектрометрии экстрактов даны в табл. 3, 4.
иоиКМАЬ ОР NEW МБйЮДЬ ТЕС^ОЬО^ЕБ, вЕШоп - 2018 - N 1
Таблица 3
Выход групп соединений, масс. % от экстракта
№ Группы соединений Экстракты ГК сапропеля
Толуольный Хлороформный Ацетоновый Этанольный
1 н-Алканы 4,02 1,85 0,74 1,60
2 Изоалканы 4,61 4,15 1,39 0,56
3 Алкены 3,15 2,30 3,89 -
4 Алкины 1,30 2,01 0,45 -
5 Циклоалканы 9,63 0,25 0,36 -
6 Арены 5,17 7,49 - -
7 Фенолы 0,37 3,62 3,32 0,92
8 Карбоновые кислоты 15,42 11,25 23,58 7,71
9 Эфиры 1,00 13,74 3,25 18,16
10 Альдегиды 2,49 7,55 0,63 2,03
11 Кетоны 4,62 8,68 22,41 3,51
12 Спирты 15,3 12,02 18,58 2,70
13 Гликозиды 0,15 0,57 5,21 3,42
14 Стерины 15,83 - 2,90 2,90
Анализ данных табл. 3 позволяет констатировать, что разделение исходных ГК на отдельные экстракты весьма эффективно. Экстракты значительно различаются содержанием групп соединений, идентифицированных в них. Предельные, непредельные и ароматические углеводороды сконцентрированы в толуольном и хлороформном экстрактах; фенолы - хлороформном и ацетоновом; эфиры - хлороформном и этанольном; альдегиды - хлороформном; кетоны - ацетоновом; спирты распределились равномерно в толуольном, хлороформном и ацетоновом; гликозиды и их эфиры - ацетоновом и этанольном экстрактах.
Максимальное количество стероидных соединений, представленных лупанами, холестанами, ла-ностанами, андростанами, р-ситостерином, бетулином, содержится в толуольном экстракте.
Серу- азот- и кислородсодержащие гетероциклические соединения содержаться в максимальном количестве в ацетоновом и этанольных экстрактах, 7.14 и 6.71 масс. % от экстракта, соответственно.
Таблица 4
Выход групп соединений, масс. % от ГК
№ Группы соединений Экстракты ГК сапропеля
Толуольный Хлороформный Ацетоновый Этанольный
Выход экстракта, масс. % от ГК
4.8 8.5 23.4 48.3
1 н-Алканы 0.19 0.16 0.17 0.77
2 Изоалканы 0.22 0.35 0.33 0.27
3 Алкены 0.15 0.20 0.91 -
4 Алкины 0.06 0.17 0.11 -
5 Циклоалканы 0.46 0.02 0.08 -
6 Арены 0.25 0.64 - -
7 Фенолы 0.02 0.31 0.78 0.45
8 Карбоновые кислоты 0.74 0.96 5.52 3.72
9 Эфиры 0.05 1.17 0.76 8.77
10 Альдегиды 0.12 0.64 0.15 0.98
11 Кетоны 0.22 0.74 5.24 1.70
12 Спирты 0.73 1.02 4.35 1.30
13 Гликозиды 0.01 0.05 1.22 1.65
14 Стерины 0.76 - 0.68 1.40
Наиболее наглядно представлено распределение различных групп соединений ГК в отдельных экстрактах в табл. 4. Видно, что основная группа соединений сконцентрирована в ацетоновом экстракте,
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
характеризующимся высоким содержанием (масс. % от ГК): алкенов (0.91); фенолов (0.78), карбоновых кислот (5.52), кетонов (5.24), спиртов (4.35), гликозидов (1.22).
Этанольный экстракт обогащен н-алканами от С8 до С44 (0.77); эфирами карбоновых кислот (8.77); альдегидами (0.98): гликозидами (1.65) и стеринами (1.40), масс. % от ГК (табл. 2)
Согласно установленным особенностям в динамике концентрирования отдельных групп соединений в экстрактах ГК, различии в их структуре, следовало ожидать, что наиболее высокую физиологическую активность должны проявлять ацетоновый и этанольный экстракты. Данное утверждение было подтверждено в результате проведения дрожжевого теста, а также при использовании различных штаммов микроорганизмов, типа: St. aureus - 260, E. Coli, Candida - представителей кокковой, палочковидной и грибковой групп микроорганизмов.
Заключение. Выполнена хромато-масс-спектрометрия отдельных экстрактов гуминовых кислот сапропеля Азовской поймы Краснодарского края. Проведены идентификация и количественное определение соединений, явившихся основой для расчета структурно-группового состава экстрактов. Получены масс-спектры и структурные формулы соединений, что позволило установить различия в химическом составе экстрактов, в их физиологической активности и специфичности действия на живые организмы.
Результаты данного исследования позволили сделать следующие выводы. Ацетоновый, этаноль-ный и толуольный экстракты сапропеля проявляют значительный бактерицидный эффект по отношению к стандартным грамположительным и грамотрицательным бактериям St. aureus, E. Coli и дрожжеподоб-ным грибам рода Candida, сравнимый с таковым у выпускаемых промышленностью антибиотиков. Максимальный лизис дрожжеподобных грибов рода Candida вызывает этанольный экстракт, обогащенный гликозидами и стероидными соединениями, витаминами.
Литература
1. Охочинская О. Д. Химический состав и биологическая активность сапропеля Астраханской области: автореф. дис. канд. хим. наук. СПб., 2000. 19 с.
2. Позняк В.С., Раковский В.Е. О химическом составе органической массы сапропелей Белорусской ССР // Химия и генезис торфа и сапропелей. 1962. С. 289-308.
3. Платонов В.В., Белозерова Л.И., Хадарцев А.А. Хромато-масс-спектрометрия хлороформного экстракта гуминовых кислот сапропеля Азовской поймы Краснодарского края // Вестник новых медицинских технологий. 2017 Т. 24, № 2. С. 200-203.
4. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Белозерова Л.И. Хромато-масс-спектрометрия спиртового экстракта гуминовых кислот сапропеля Азовской поймы Краснодарского края // Вестник новых медицинских технологий. 2017 Т. 24, № 2. С. 204-208.
5. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Фридзон К.Я. Химический состав и биологическая активность сапропеля Оренбургской (п. Соль-Илецк), генетическая связь с составом сапропелеобразователей // Вестник новых медицинских технологий (электронный журнал). 2014. № 1. Публикация 1-6. URL: http//medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E 2014-1/4873-1 pdf (дата обращения 03.07.2014). DOI 10.12737/5040.
6. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Фридзон К.Я. Генетическая связь биологической активности сапропеля Астраханской области с исходным растительным и животным материалом // Вестник новых медицинских технологий (электронный журнал). 2014. № 1. Публикация 1-7. URL: http//medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E 2014-1/4872 pdf (дата обращения 03.07.2014). DOI 10.12737/5039.
7. Хадарцев А.А., Белозерова Л.И., Платонов В.В. Сравнительная характеристика химического состава женьшеня, Элеутерококка и родиолы розовой // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2017. №4. Публикация 1-1. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-4/1-1.pdf (дата обращения: 07.12.2017). DOI: 10.12737/article_5a3216884f5e40.55095987.
8. Хадарцев А.А. , Платонов В.В., Белозерова Л.И. Хромато-масс-спектрометрия спиртового экстракта каланхоэ перистого // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2017. №4. Публикация 1-2. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-4/1-2.pdf (дата обращения: 07.12.2017). DOI: 10.12737/article_5a321623dab5d9.18010308.
9. Хадарцев А.А., Платонов В.В., Белозерова Л.И. Хромато-масс-спектрометрия спиртового экстракта гуминовых кислот сапропеля азовской поймы, Краснодарского края // Вестник новых медицинских технологий. 2017. Т. 24, №2. С. 204-208. DOI: 10.12737/article_5947ca8812bb84.92116413.
10. Хадарцев А. А., Платонов В.В., Белозерова Л.И., Хромато-масс-спектрометрия хлороформного экстракта гуминовых кислот сапропеля азовской поймы, Краснодарского края (краткое сообщение) // Вестник новых медицинских технологий. 2017. Т. 24, №2. С. 200-203. DOI: 10.12737/article_5947c7e65909e7.52978583.
11. Хадарцев А.А., Белозерова Л.И., Платонов В.В., Хромато-масс-спектрометрия толуольного экстракта гуминовых кислот сапропеля азовской поймы, Краснодарского края (краткое сообщение) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2017. №2. Публикация 1-2. URL:
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES, eEdition - 2018 - N 1
http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-2/1-2.pdf (дата обращения: 26.04.2017). DOI: 10.12737/article_5909a2a8a80212.06888441.
References
1. Okhochinskaya OD. Khimicheskiy sostav i biologicheskaya aktivnost' sapropelya Astrakhanskoy ob-lasti [Chemical composition and biological activity of sapropel Astrakhan region] [dissertation]. Sankt-Peterburg (Sankt-Peterburg region); 2000. Russian.
2. Poznyak VS, Rakovskiy VE. O khimicheskom sostave organicheskoy massy sapropeley Belorusskoy SSR [On the chemical composition of organic matter of the sapropels of the Belarusian SSR]. Khimiya i genezis torfa i sapropeley. 1962; 289-308. Russian.
3. Platonov VV, Belozerova LI, Khadartsev AA. Khromato-mass-spektrometriya khloroformnogo ek-strakta guminovykh kislot sapropelya Azovskoy poymy Krasnodarskogo kraya [Chromatography-mass spectrometry of the chloroform extract of humic acids of sapropel floodplain Azov in Krasnodar region]. Vestnik no-vykh meditsinskikh tekhnologiy. 2017;24(2):200-3. Russian.
4. Platonov VV, Khadartsev AA, Belozerova LI. Khromato-mass-spektrometriya spirtovogo ekstrakta guminovykh kislot sapropelya Azovskoy poymy Krasnodarskogo kraya [Chromatography-mass spectrometry alcoholic extract of humic acids of sapropel floodplain Azov in Krasnodar region]. Vestnik novykh meditsins-kikh tekhnologiy. 2017;24(2):204-8. Russian.
5. Platonov VV, Khadartsev AA, Fridzon KYa. Khimicheskiy sostav i biologicheskaya aktivnost' sapropelya Orenburgskoy (p. Sol'-Iletsk), geneticheskaya svyaz' s sostavom sapropeleobrazovateley [Chemical composition and biological activity of sapropel Orenburg (p. Sol ' -Iletsk), a genetic link with the composition of approperiately]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy (elektronnyy zhurnal). 2014 [cited 2014 Jul 03] ;1 [about 9 p.]. Russian. Available from: http//medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E 2014-1/4873-1 pdf. DOI 10.12737/5040.
6. Platonov VV, Khadartsev AA, Fridzon KYa. Geneticheskaya svyaz' biologicheskoy aktivnosti sapropelya Astrakhanskoy oblasti s iskhodnym rastitel'nym i zhivotnym materialom [Genetic relationship of biological activity of sapropel Astrakhan region from the source plant and animal material]. Vestnik novykh meditsins-kikh tekhnologiy (elektronnyy zhurnal). 2014 [cited 2014 Jul 03] ;1 [about 8 p.]. Russian. Available from: http//medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E 2014-1/4872 pdf. DOI 10.12737/5039.
7. Khadartsev AA, Belozerova LI, Platonov VV. Sravnitel'naya kharakteristika khimicheskogo sostava zhen'shenya, Eleuterokokka i rodioly rozovoy [the Comparative characteristic of the chemical composition of ginseng, Eleutherococcus and Rhodiola rosea]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie. 2017 [cited 2017 Dec 17];4 [about 14 p.]. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-4/1-1.pdf. DOI: 10.12737/article_5a3216884f5e40.55095987.
8. Khadartsev AA , Platonov VV, Belozerova LI. Khromato-mass-spektrometriya spirtovogo ekstrakta kalankhoe peristogo [gas Chromatography-mass spectrometry alcoholic extract of Kalanchoe pinnate]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie. 2017 [cited 2017 Dec 07];4 [about 10 p.]. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-4/1-2.pdf. DOI: 10.12737/article_5a321623dab5d9. 18010308.
9. Khadartsev AA, Platonov VV, Belozerova LI. Khromato-mass-spektrometriya spirtovogo ekstrakta guminovykh kislot sapropelya azovskoy poymy, Krasnodarskogo kraya [Chromatography-mass spectrometry alcoholic extract of humic acids of sapropel floodplain Azov, Krasnodar region]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2017;24(2):204-8. DOI: 10.12737/article_5947ca8812bb84.92116413.
10. Khadartsev AA, Platonov VV, Belozerova LI, Khromato-mass-spektrometriya khloroformnogo ekstrakta guminovykh kislot sapropelya azovskoy poymy, Krasnodarskogo kraya (kratkoe soobshchenie) [Chroma-tography-mass spectrometry of the chloroform extract of humic acids of sapropel floodplain of Azov, Krasnodar territory (short message)]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2017;24(2):200-3. DOI: 10.12737/article_5947c7e65909e7.52978583.
11. Khadartsev AA, Belozerova LI, Platonov VV. Khromato-mass-spektrometriya toluol'nogo ekstrakta guminovykh kislot sapropelya azovskoy poymy, Krasnodarskogo kraya (kratkoe soobshchenie) [Chromatography-mass spectrometry, the toluene extract of humic acids of sapropel floodplain of Azov, Krasnodar territory (short message)]. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. Elektronnoe izdanie. 2017 [cited 2017 Apr 26];2 [about 8 p.]. Available from: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2017-2/1-2.pdf. DOI:
10.12737/article 5909a2a8a80212.06888441._
Библиографическая ссылка:
Платонов В.В., Белозерова Л.И., Горохова М.Н. Сравнительная характеристика химического состава и биологической активности экстрактов гуминовых кислот сапропеля (Азовская пойма, Краснодарский край) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2018. №1. Публикация 1-2. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2018-1/1-2.pdf (дата обращения: 11.01.2018). DOI: 10.24411/2075-40942018-15916.
