CC BY
28
24
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
емые некоторыми авторами модели, основанные лишь на закономерности диффузии JIB через кожу и не охарактеризованные по показателям адекватности, являются малоинформативными. Указанное определяет необходимость широких фармакокинетических и др. исследований по моделированию контролируемой доставки JIB к биологическим мишеням, используя чрескожный путь введения. Представляется, что такие модели могут быть построены как многочастевые открытые синтетические математические модели, основанные на количественном измерении проникновения JIB через все внешние и внутренние гистогематичес-
кие барьеры на пути к биологической мишени с учетом растворимости ЛВ в жидкостях организма, адсорбции ЛВ форменными элементами крови и высокой динамичности транспортных систем организма.
Выводы. Предложены вербальные и графические модели чрескожного транспорта ЛВ, являющиеся основой для конструирования и разработки многочасте-вых количественных математических компьютерных моделей прогнозирования доставки ЛВ к биологическим мишеням в различных органах и тканях организма при создании готовых аппликационных лекарственных средств.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ И ПЕРЕНОСИМОСТЬ КОМБИНАЦИИ АР АНОЗ А+С АРКО ЛИЗИН
Введение. Новый отечественный противоопухолевый препарат араноза применяется взрослыми детям при меланоме кожи в монотерапии или в комбинации с другими препаратами. В клинике апробированы комбинации аранозы с а-2-интерфероном, 5-фторурацилом и препаратами платины. Положительные результаты отмечены при сочетанном применении аранозы с Д ДП и цик-лоплатамом. В данной работе представлены результаты изучения эффективности новой комбинации аранозы в сочетании с сарколизином.
Материал ы методы. Опыты проведены на мышах линии БВА,и гибридах ВБР1 с лимфолейкозом Ь-1210. Препараты применяливширокомдиапазонедозвразных схемах и режимах, оптимальных для каждого комбинан-та. Аранозу вводилина2-й-б-йднипослеперевивки опухоли ежедневно в разовых дозах 75; 100; 125 и 150 мг/кг, сарколизин - на 2-й и 6-й дни в разовых дозах 3,5; 5 и 7 мг/ кг. Терапевтический эффект оценивали по увеличению
Н.А. Лесная, Е.М. Трегцалина ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
продолжительности жизни мышей (УПЖ,%).
Результаты. Показано, что сарколизин увеличивает антипейкозное действие аранозы при одновременном использовании комбинантов в любых дозах и режимах. Однако лучший терапевтический эффект достигается, если препараты применять в максимально переносимых дозах (МПД). Так, в серии опытов в монотерапии при использовании сарколизина в МПД получено УПЖ=72-111 %, а при использовании аранозы - УПЖ=120-132 %, комбинация препаратов в МПД приводила к УПЖ=208-23б %, т.е. к суммации эффектов. Последовательное введение комбинантов столь же эффективно и нетоксично, если аранозе предшествует сарколизин. При обратном порядке введения усиления эффективности не было, но возрастала токсичность воздействия.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют, что комбинация аранозы с сарколизином эффективна и представляет интерес для клинического изучения.
СРАВНЕНИЕ СТАТУСА РЕЦЕПТОРОВ ЭСТРОГЕНА, ОПРЕДЕЛЯЕМОГО РАЗНЫМИ МЕТОДАМИ
Первым молекулярным фактором прогноза и гор-моночувствительности рака молочной железы (РМЖ) был статус рецепторов эстрогенов (РЭ). Несколько позднее в дополнение к нему стали определять уровень экспрессии рецепторов прогестерона (РП). Наличие обоих видов рецепторов стероидов в первичной опухоли свидетельствует об относительно благоприятном прогнозе течения РМЖ и чувствительности к гормональной терапии. Традиционным способом определения статуса РЭ является биохимический метод, осно-
М.И. Лукаишна, Н.В. Голубцова ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
ванный на использовании цитозоля, полученного из образцов опухолевой ткани. В настоящее время все чаще стали использовать иммуногистохимический (ИГХ) метод определения уровня РЭ.
Задачи. Определить уровнь РЭ иммуногистохими-ческим (ИГХ) и иммуноцитохимическим (ИЦХ) методами; провести корреляционный анализ между биохимическим, ИГХ, ИЦХ методами определения РЭ.
Материалы и методы. В ИГХ-иссяедование включено 59 пациенток с опухолями молочной железы; исеяедо-
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№2/томЗ/2004
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ
25
вано 99 цитологических препаратов, приготовленных из операционного материала больных (РМЖ). Уровень РЭ также был определен биохимическим методом во всех случаях. В работе использованы моноклональные антитела IC0211, полученные в Онкологическом центре, коммерческие моноклональные антитела к РЭ клон 1D5 (Dako).
Результаты исследования. Реактивность антител IC0211 сравнилискоммерческимиантителамикРЭ.Были исследованы 30 опухолей молочных желез, клеточная линия MCF7, которая является гормонзависимой, и линия клеток рака молочной железы T47D, гормоннезави-симая. Антитела IC0211 и 1D5 окрашивали ядра опухолевых и нормальных клеток молочной железы с различной интенсивностью. Интенсивность окраски различалась нетолько впределах одного окрашиваемого образцатка-
ни, но даже в оцениваемом поле зрения, независимо от метода определения РЭ (ИГХ или ИЦХ). Количество окрашенных клеток ткани РМЖ было примерно одинаковым. Коэффициент корреляции имел высокое значение (г=0,94; р<0,001). Рисунок окрашивания клеток линии MCF7 антителами IC0211 и 1D5 был одинаковым. Клетки линии T34D не окрашивались названными антителами. Проведенный сравнительный анализ уровня РЭ, определяемого биохимическим методом и ИГХ, показал умеренную корреляцию между этими методами (г=0,49; р<0,05). Корреляционный анализ между биохимическим методом определения РЭ и ИЦХ также показал высокую степень корреляции методов (г=0,72; р<0,05).
Выводы. ИГХ или ИЦХ окрашивание может быть использовано для определения уровня экспрессии РЭ.
НОВЫЙ МЕТОД ВЫДЕЛЕНИЯ И ОЧИСТКИ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ПОЛИФЕНОЛОВ РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ГИДРОФОБНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ НА ФЕНИЛ-АГАРОЗЕ
В настоящее время доказано, что низкополимерные полифенолы многолетних растений являются «мягкими», но эффективными антиоксидантами, отличающимися цитостатическими свойствами благодаря их ингибирующему воздействию на гиперактивное окислительное фосфорилирование в митохондриях клеток ряда опухолей, таких как вызываемый этил-тиомочевиной гепатоцеллюлярный рак и продуцирование а-фетопротеин гепатокарциномы [Leder, Waugh; Pitot, 2003].
Однако значительная техническая сложность всех известных методик хроматографической очистки полифенолов, т.е. многоэтапных и затратных процедур, является серьезным препятствием на пути широкого использования этих соединений в исследованиях канцерогенеза. Это определяет несомненную важность такой задачи, как создание простого и, насколько возможно, быстрого метода полной и щадящей очистки фракции полифенолов из стандартизированного лекарственного растительного сырья.
Для решения этой задачи мы использовали колоночную гидрофобную хроматографию низкого давления на 6 %-ной поперечно-сшитой фенил-агарозе с диаметром матричных пор 20-40 мкм. Геометрия колонки: 1,2x12,0 см, скорость элюции - 1,0 мл/млн, + 22-25 °С. После нанесения 0,8-0,9 мл образца на колон-
А.А. Маркарян ММ А им. И. М. Сеченова, Москва
ку, уравновешенную 10 мМ калий-фосфатным буфером (pH 6,35), подавали линейный 500-50 мМ понижающийся градиент концентраций №01. Исходным сырьем служил сухой экстракт Фитопрост, полученный из многокомпонентной растительной смеси и зарегистрированный в России в качестве биологической активной добавки к пище. Экстракцию полифенолов проводили 60 %-ным водным раствором этилацетата при 40 °С в течение часа 100 :1 (объем: вес).
В результате методики фракционирования, описанной выше, мы получили препарат полифенолов 99,5 %-ной чистоты с молекулярными массами от 1,0 до 5,0 кДА при общей продолжительности элюции 90 мин. Суммарный выход полифенолов составил 29±2,8 мкг/г сухого экстракта, что говорит об их практически полном извлечении из исходного материала. УФ-спектро-фотометрические исследования установили присутствие в очищенном препарате не более, чем 0,5-0,6 % примесей ароматических и гетероциклических веществ.
Данная работа представляет собой первое сообщение об успешном применении гелей фенил-агарозы для быстрого, полного и одноэтапного получения фракции высокоочищенных полифенолов из стандартизованного растительного сырья. Следует надеяться на успешное применение метода в близких к биофармации исследованиях канцерогенеза.
№2/томЗ/2004
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
