CC BY
35
БИОЛОГИЧЕСКАЯ ХИМИЯ
УДК 547.484.22.: 615.276.:615.28
СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ АМИДОВ И ЭФИРОВ 2-(1,5-ДИМЕТИЛ-3-ОКСО-2-ФЕНИЛ-2.3-ДИГИДРО-1Н-ПИРАЗОЛ-4-ИЛ)АМИНО-5,5-ДИМЕТИЛ-4-ОКСОГЕКС-
2-ЕНОВОЙ КИСЛОТЫ
А.Ю. КИРИКОВ1 Н.М. ИГИДОВ1
A.Г. ГОЛЬДШТЕЙН1
B.П. КОТЕГОВ1 Р.Р. МАХМУДОВ 2
1) Пермская государственная фармацевтическая академия
Пермский государственный национальный исследовательский университет
e-mail: [email protected]
Изучена дециклизация 3-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Н-пиразол-4-ил)имино -5-трет-бутил-з(Н)-фуран-2-она под действием первичных аминов и спиртов, приводящая к образованию Ы-замещенных амидов и эфиров 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты. Изучена биологическая активность полученных соединений.
Ключевые слова: 3-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил)имино-5-трет-бутил-3(Н)-фуран-2-он, амиды 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты, антимикробная, противовоспалительная активность.
Введение. Известно, что 2-аминопроизводные ароилпировиноградных кислот подвергаются циклодегидратации в среде уксусного ангидрида с образованием 5-арил-3-имино-2,3-дигидро-2-фуранонов [1,2]. В настоящее время они находят широкое применение для синтеза разнообразных ациклических и гетероциклических систем, обладающих биологической активно-стью.Для сравнительной оценки реакционной способности, а также для дальнейшего синтеза потенциальных биологически активных веществ был получен ранее неизвестный 3-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Н-пиразол-4-ил)имино -5-трет-бутил-3(Н)-фуран-2-он (II) циклизацией енаминокислоты (I) в уксусном ангидриде.
Схема 1. Образование 3-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил) имино-5-трет-бутил-3(Н)-фуран-2-она
Материалы и методы. С целью биологического тестирования нами были получены Ы-замещенные амиды (Ша-ш) и сложные эфиры (1Уа-с) 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-Ш-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты дециклизацией фуранона (II) под действием первичных аминов и спиртов.
Ri= (СН3)3С-(Ша); С6Н5СН2- (Illb); C6Hn- (Шс); 4-С1С6Н4- (Illd); 4-BrC6H4- (Ule); 4-CH3C6H4-(IIIf); 2-С2Н5ОС6Н4- (Illg); 2-СНз-5-Ж)2С6Нз- (Illh); 4-CH3CONHC6H4-(IIIi); 4-СН3ОС6Н4- (Illj); 2-C2H5C6H4 -(IIIk); пиридил-4 (IIIl); 4-СНзпиридил-2 (Vm); R2=CH3-(IVa); C2H5-(IVb); (CH3)2CH-(IVc);
Схема 2. Образование N-замещенных амидов и сложных эфиров 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты
Противовоспалительная активность. Противовоспалительное действие 10 соединений (Ша-^ПШДШДП^ИУс) изучали на белых нелинейных крысах массой 200-250 г на модели карраге-нинового отека [3]. Соединения вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде водной суспензии за 1 ч до введения каррагенина. В качестве препарата сравнения использовали диклофенак натрий, который инъецировали из расчёта 8 мг/кг в условиях, аналогичных описанным для тестируемых соединений. Объём лап животных измеряли онкометрически до и через 3ч после инициации воспаления. Эффект оценивали по уменьшению прироста отёка лап в сравнении с контрольной группой крыс.
Антимикробная активность. Антимикробную активность изучали методом последовательных серийных разведений в мясопептонном бульоне (МПБ). Для соединений была определена минимальная подавляющая концентрация (МПК) в отношении музейных штаммов - St. Aureu-sATTC 653811 и E. ColiATCC 25922. Использовали смыв суточной культуры, выращенной на МПБ, стерильным физиологическим раствором натрия хлорида, и готовили исходное разведение с концентрацией 500 млн. микробных тел в 1 мл смыва по бактериальному стандарту. Полученную смесь разводили стерильным МПБ в 100 раз. Это разведение бактериальной культуры с концентрацией 5 млн. микробных тел в 1 мл являлось рабочим раствором, который в количестве 0,1 мл вносили в 2 мл МПБ. Бактериальная нагрузка на 1 мл жидкости составила 250 тыс. микробных тел. Результаты опытов учитывали после 18-20 часов выдержки контрольных и опытных культур в термостате при 3б-37оС. За действующую дозу принимали минимальную подавляющую концентрацию в мкг/мл, которая задерживает рост соответствующего тест-микроба. Бактериостатический эффект исследуемых соединений сравнивали с действием 1% раствора хлорамина Б, 1% раствора диоксидина [3]. Результаты испытаний представлены в табл. 1.
Обсуждение результатов. Соединения (IIIa-m), (IVa-c) - кристаллические вещества желтого или оранжевого цвета, растворимые в изопропиловом и этиловом спирте, трудно растворимые в бензоле, не растворимые в гексане.
Строение полученных амидов и эфиров (IIIa-m), (IVa-c) было доказано на основании данных ИК и ЯМР-1Н спектров. ИК - спектры записаны на приборе Specord М-80, в вазелиновой пасте. Спектры ЯМР 1Н получены на приборе TeslaBS-567A(100 МГц) в DMSO-d6, внутренний стандарт - ГМДС.
В ИК спектрах енаминоамидов (IIIa-m) присутствуют полосы поглощения в области 3180-3372 см-1, принадлежащие валентным колебаниям NH групп енаминного и амидного фрагментов, полоса поглощения при 1686-1706 см-1, карбонила амидной группы, а также полоса по-
глощения при 1582-1628 см-1кетонного карбонила, вовлеченного во внутримолекулярную водородную связь.
В спектрах ПМР соединений (Ша-ш, 1Уа-е), снятых в растворе БМСО-ав, присутствует синглет 9 протонов трет-бутильного радикала при 1.11-1.23 м.д., синглеты протонов двух метиль-ных групп антипирильного фрагмента при 2.18-2.2бм.д. и 2.94-3.13 м.д. соответственно, синглет метинового протона при 5.54-5.97 м.д., мультиплет ароматических протонов при 6.96-7.48 м.д., и синглет протона аминогруппы при 10.48-11.13 м.д.
Нам не удалось вовлечь фуранон (II) в реакцию с 2- и 3- аминопиридинами, бутанолом, ментолом, Ы,Ы-диэтиламиноэтанолом, и бензиловым спиртом. Были выделены либо исходные соединения, либо происходит осмоление.
Таблица 1
Температура плавления, выходы, противовоспалительная, и антимикробная активность амидов и эфиров 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1Я-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты
№№ соед. Т. пл., 0С Выход (%) Доза, мг/кг п/о Торможение отека, на пике воспаления, (180мин) % МПК, мкг/мл
З.аигеиэ Е.еоН
Ша (СНз)зС- 158-160 65 50 -7,33 1000 1000
ШЪ СбН5СН2- 179-181 62 50 57,67 1000 1000
Ше С6Н 1- 144-146 61 50 16,18 1000 1000
ша 4-С1С6Н4- 124-126 71 50 -50,91 1000 1000
Ше 4-В1С6Н4- 114-118 71 50 19,14 1000 1000
11К 4-СН3С6Н4- 121-123 80 50 -38,01 1000 1000
п^ 2-С2Н5ОС6Н4- 246-248 35 50 - 1000 1000
шь 2-СН3-5-Ш2С6Н3- 154-156 60 50 -24,22 1000 1000
пи 4-СН3СОЫНС6Н4- 76-78 35 50 16,22 1000 1000
пц 4-СН3ОС6Н4- 114-116 62 50 -7,87 500 1000
Шк 2-С2Н5С6Н4 - 108-109 59 50 - 500 500
1111 пиридил-4 206-209 60 50 - 1000 1000
Шш 4-СН3пиридил-2 186-188 78 50 - 500 1000
1Уа -СН3 170-171 41 50 - 1000 1000
1УЪ -С2Н5 151-153 36 50 - - -
1Уе -СН(СН3)2 114-116 80 50 5,89 1000 1000
диклофенак Ыа - - 8 62,1 - -
хлорамин Б (1% р-р) - - - - 500 250
диоксидин - - - - 62,5 1000
Выводы.Структура исследуемых соединений существенно влияет на уровень противовоспалительной активности. Соединения 111с, 111е, ПК и 1Уе показали умеренный противовоспалительный эффект. Наиболее активно тормозит прирост отека стопы соединение ШЪ -на 57,67% после 3 часа, что незначительно уступает препарату сравнения. Наименее активными соединениями, показавшими прирост объёма стопы, превышающий показатели контроля, оказались 111а, ПК,
ПШ, ПЦ, Шр, что говорит об отсутствии противовоспалительного действия. Введение в структуру п-хлорфенильного радикала (ПЫ) вызвало сильный провоспалительный эффект. Все синтезированные соединения показали слабую антимикробную активность.
Таким образом, результаты экспериментов показывают целесообразность дальнейшего изучения противовоспалительной активности в ряду Ы-замещенных амидов 2-(1,5-диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1.Н-пиразол-4-ил)амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновой кислоты.
Литература
1. Синтез и внутримолекулярная циклизация Ы-замещенных 2-амино-4-арил-4-оксобут-2-еновых кислот / А.Е. Рубцов, В.В. Залесов /. Журн. орган. химии. - 2003. - Т.39. -Вып. 6. -С.918-923.
2. Химия иминофуранов. VII*. Внутримолекулярная циклизация 2-Ы-арилзамещенныхпроизводных4-арил-4-оксобут-2-еновых и 2-амино-5,5-диметил-4-оксогекс-2-еновых кислот/ А.В. Тюнева Н.М. Игидов Н.Н. Корягина [и др.] // Журн. орган. химии.-2011. - Т. 46. - Вып.2 -С. 258-264.
3. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ: метод. указ./ Под общей редакцией члена корреспондента РАМН проф. Р.У. Хабриева. - М., 2005. -С. 515-532. - С. 695-701
SYNTHESIS AND BIOLOGICALACTIVITY OF AMIDES AND ESTERS OF 2-(4-ANTIPYRIIAMINO)-
5,5-DIMETHYL-4-OXOGEX-2-ENOICACID
A.YU. KIRIKOV1 N.M. IGIDOV A.G. GOLDSTEIN1 V.P. KOTEGOV R.R. MACHMUDOV2
1) Perm State Pharmaceutical Academy
2)Perm State National Research University
e-mail: [email protected]
The decyclization of 3 - (l,5-dimethyl-3-oxo-2-phenyl-2,3-dihydro-l^-pyrazol-4-yl)imino-5-tert-butyl-3-(^)-furan-2-one under the treatment of primary amines and alcohols leading to the formation of N-substituted amides and esters of 2-((l,5-dimethyl-3-oxo-2-phenyl-2,3-dihydro-lH-pyrazol-4-yl)amino)-5,5-dimethyl-4-oxohex-2-enoic acid was studied. The biological activity of these compounds was studied.
Key words: 3 - (l,5-dimethyl-3-oxo-2-phenyl-2,3-dihydro-l^-pyrazol-4-yl)imino-5-tert-butyl-3-(^)-furan-2-one, amides of 2-((l,5-dimethyl-3-oxo-2-phenyl-2,3-dihydro-lH-pyrazol-4-yl)amino)-5,5-dimethyl-4-oxohex-2-enoic acid, antimicrobial activity, anti-inflammatory activity.
