CC BY
12
продолжительность заболевания. Положительное влияние на костную ткань у больных диффузным токсическим зобом осуществляют высокий уровень остеокальцина, тестостерона и свободного тироксина в крови.
Ключевые слова: остеопороз, остеопения, факторы риска, диффузный токсический зоб.
Стаття надшшла 6.06.2015 р.
blood, low level of estradiol, advanced age and great duration of the disease. The positive influence on the osseous tissue in the patients with DTG is given by the high level of osteocalcin, testosteron and free thyroxin in blood.
Key words: osteoporosis, osteopenia, risk factors, hyperthyroidism.
Рецензент Старченко I.I.
УДК 616.316.-091.8-092
РОЛЬ ПОЛ1МОРФ1ЗМУ ЯДЕРНОГО ФАКТОРА ТРАНСКРИПЦП NF-KB1 У ПАТОГЕНЕЗ1 ГЕНЕРАЛ1ЗОВАНОГО ПАРОДОНТИТУ
В стата приведет результати молекулярно-генетичного дослщження ролi ядерного фактора транскрипцп NF-кВ1 у патогенезi генералiзованого пародонтиту. Розподш полiморфних варiантiв гену NF-KB1y пащенив i3 ттактним пародонтом та генотипом (Del/Del) складае 5 (11%) i3 генотипом (Del/Ins) 23 (51%), i3 генотипом (Ins/Ins) 17 (38%). У хворих на генералiзований пародонтит популяцшний розподш складае i3 генотипом (Del/Del) 9 оаб (16 %), i3 генотипом (Del/Ins) вiдповiдно 30 (55%) та (Ins/Ins) 16 (29%). З'ясовано, що генотип (Del/Del) е незмшним i визначальним фактором, що обумовлюе розвиток генералiзованого пародонтиту, клшчна картина якого вiдповiдае швидкопрогресуючому.
Kjii040Bi слова: генерал1зований пародонтит, генотип, шмпморф1зм, фактор транскрипцп.
Робота е фрагментом НДР «Роль запальних захворювань зубощелепного апарату в розвитку хвороб, пов'язаних i3 системным запаленням», номер державног реестраци №0112U0011538, та «Комплекте дождження генетично обумовлених особливостей NFKß-опосередкованог сигнальног трансдукцй, що визначаерозвиток хрошчного системного запалення, у хворих на метаболiчний синдром та цукровий дiабет 2 типу» номер державног реестраци №0111U001774.
На сьогодш запальш та запально-дистроф1чн1 захворювання тканин пародонта i слизово! оболонки порожнини рота (СОПР) дом1нують у загальнш структур! патолопчних процешв вказано! анатом1чно! локатзацп [4, 5]. Хрошчне запалення тканин пародонта супроводжуеться р1зким тдвищенням р1вня прозапальних цитоюшв, iнтерлейкiну-1ß туморнекротичного фактора-а, активност лактатдепдрогенази, аспартатамшотрансферази, супероксиддисмутази. С-реактивний проте1н, TNF-а, тдвищений р1вень лейкоципв кров! можуть слугувати незалежними факторами ризику виникнення атеросклерозу, стенокардп [7, 11]. 1х вившьнення при загостренш шфекцшного процесу шщдае каскад б1ох1м1чних реакцш, що е безпосередньою причиною пошкодження ендотелда ендокарда i судин.
Ефектившсть сучасних п1дход1в до терапп генератзованого пародонтиту знижуеться в результат зростаючо! резистентносп м1кроорган1зм1в до лшарських засоб1в та безпосередньо! участ в1рулентних форм м1кроорган1зм1в у патогенез! [8]. Вщсутшсть позитивно! динамши внаслщок застосування традицшно! терапп дае поштовх науковцям до доповнення арсеналу традицшних метод1в обстеження ос1б даного контингенту бшьш специф1чними та шдивщуал!зованими. Напрацювання останшх роюв дали можливють стверджувати, що бшьшють запальних захворювань тканин пародонта е багатофакторними ¡з генетичним компонентом [9, 10].
У патогенез! генетичного фактора лежить вар!атившсть гешв чи !х пол1морф1зм. Проте вщсутнють ч1тких цитолопчних показниюв штактно! слизово! у вшовому та тендерному аспекп, унеможливлюе розробку критерп прогнозування розвитку захворювань вказано! анатом1чно! локатзацп. Останне свщчить про актуальнють вивчення цих питань i обумовлюе необхщнють дослщження рол! генетичного компоненту у виникненш та перебiгу генералiзованого пародонтиту на основ! морфофункцюнальних вiдмiнностей кл^инного складу слизово! оболонки порожнини рота в гендерному аспекп. Потребуе нов^шх гiпотеза [1, 2] щодо едносн генетично! детермiнованостi та схильносн до запально-дистрофiчних захворювань, як! розвиваються в тканинах пародонта, що дасть можливють визначати пусков! мехашзми виникнення хрошчного системного запалення на rai патологи тканин пародонта. Таким чином, вивчення генетично обумовлених чинниюв розвитку генерал!зованого пародонтиту та змш слизово! оболонки порожнини рота за умов наявносн запально-дистроф!чного процесу в тканинах пародонта в аспект! диференщацп ештел!альних кттин е актуальним та перспективним науковим напрямком.
Метою роботи було встановлення генетично обумовлених чинниюв розвитку генер^зованого пародонтиту та змш слизово! оболонки порожнини рота за умов наявносп запально-дистрофiчного процесу в тканинах пародонта.
Матерiал та методи дослщження. Контрольну (45 осiб) та дослщну - (55 осiб) групи спостережень склали особи молодого вшу, вщповщно iз iнтактним пародонтом та хворi на генералiзований пародонтит.
Видшення полiморфно! дiлянки гена NF-kB1 проводили iз клiтин букального епiтелiю обстежених шляхом полiмеразно! ланцюгово! реакцп [3]. Забiр матерiалу проводили стерильними одноразовими стоматолопчними брашами, з подальшим внесенням в епендорфи з реактивом «ДНК-експрес» (НПФ «ЛиТех», Росiя). Впродовж 2 годин, тсля забору матерiалу його транспортували до науково-дослiдного iнституту генетичних та iмунологiчних основ розвитку фармакологи та фармакокшетики ВДНЗ Укра!ни «УМСА». Геномну дезоксирибонукле!нову кислоту видiляли за допомогою набору «ДНК-експрес» (ЛиТех, Москва).
Полiморфну дiлянку гена NF-kB1 (rs28362491) амплiфiкували за допомогою полiмеразно! ланцюгово! реакцп. Кiнцевий об'ем реакцшно! сумiшi склав 25 мкл та мютив: специфiчнi олiгонуклеотиднi праймери - по 66 нг кожного, прямий - 5'-TGGGCACAAGTCGTTTATGA-3'; зворотнiй - 5'-CTCGAGCCGGTAGGGAAG-3'; 2,5 мкл 10-кратний буфер для амплiфiкаци; 2 мМ хлориду магнiю; 0,2 мМ сумiшi дезоксинуклеотидтрифосфатiв (dNTP); 2,5 од. Taq ДНК-полiмерази; 20-50 нг геномно! ДНК.
У пробiрки зверху нашаровували 25 мкл мшерального масла. Амплiфiкацiю проводили на амплiфiкаторi "Терцик" (ООО „ДНК-Технология", Росiя).
Для щентифшацл алелей проводили рестрикцiйний аналiз амплiконiв за допомогою ендонуклеази рестрикцл PfIMI (СибЭнзим, Росiя) при 37°С. Продукти розщеплення полiморфно! дiлянки гену NF-кВlвиявляли за допомогою горизонтального електрофорезу в 2% агарозному гелi в однократному ТВЕ (50 мМ трис-Н3В03 та 2 мМ ЕДТА, pH 8.0), протягом 2 годин при напрузi 2V на l см гелю. В якосп маркеру молекулярно! ваги ДНК використовували pBR322/Alu I. Гелi забарвлювали етидiумом бромiдом iз наступною вiзуалiзацieю результатiв в УФ-свгт. Отриманi результати клiнiчних та комплексних морфологiчних дослiджень проаналiзованi з використанням ряду методiв бюлопчно! статистики. Статистичш дослiдження виконанi у вiддiлi статистичних дослiджень ДВНЗ «Тернопiльський державний медичний унiверситет iменi 1.Я. Горбачевського МОЗ Укра!ни». Обробка даних проводилась за допомогою лщензшно! програми Statistica компанл StatSoft.
Аналiз полiморфних варiантiв гену NF-kB1 проводили за допомогою популяцшно-статистичного методу. При статистичному опрацюванш результатiв, молекулярно-генетичного дослiдження, згiдно iз визначеним генотипом (Del/Del), (Del/Ins), (Ins/Ins), за основу для з'ясування генетично! структури популяцп брали закон генетично! рiвноваги Хардi-Вайнберга. На пiдставi цього закону, зпдно з даними щодо частоти прояву в популяци рецесивного фенотипу, що мае гомозиготний генотип розраховували поширенють полiморфних варiантiв NF-kB1 у обстежених групах. Статистичне обгрунтування вiрогiдностi вiдмiнностей розподiлу генотипiв проводили за допомогою критерда %2 iз поправкою на безперервнiсть Стца [6].
Результати дослщження та Тх обговорення. Аналiз результатiв молекулярно-генетичного дослщження показав, що 30 (55%) хворих на генералiзований пародонтит мали генотип (Del/Ins) -гетерозигота, ще 16 ошб (29 %) характеризувалися генотипом (Ins/Ins) - гомозигота, фрагменти полiморфно! дшянки розмiром 94 bp. Найбшьш вираженi клiнiчнi прояви запально-дистрофiчних змш в тканинах пародонта, характеристика яких вщповщала ктшчнш картинi швидко прогресуючого, спостерiгали у 9 осiб (16%) iз генотипом (Del/Del) - гомозигота (табл.).
Таблиця
Розподш полiморфних вар1ант1в гешв NF-KB1y пацieнтiв i3 iнтактним пародонтом та хворих
на генералiзований пародонтит
Характеристика обстежених Гомозигота (D/D) Гетерозигота (D/I) Гомозигота (I/I)
Пащенти 1з штактним пародонтом (45 оЫб) 5 (11%) 2З (51%) 17 (З8%)
Хвор1 на генерал1зований пародонти (55 оЫб) 9 (16 %) З0 (55%) 16 (29%)
Примака: - розподiл генотипiв полiморфiзмiв (ins/ins, ins/del, del/del) визначали у вщповщносп Í3 законом генетично! рiвноваги Хард^Вайнберга; - вiрогiднiсть вiдмiнностей визначено за KpmepieM х2 Í3 поправкою на безперервшсть Yates.
За результатами кореляцшного аналiзу, i3 визначенням коефiцieнта кореляци CnipMeHa (р<0,05), отримаш данi, щодо вiдсутностi кореляцшних зв'язкiв мiж визначеними параметрами у oci6 i3 полiморфним варiантом (Del/Del). Вщсутнють кореляци в даному випадку свiдчить, що незалежно вiд того, як змшюються показники (PMA, наявна чи вщсутня супутня соматична
патолопя та ш), умовно головний, в даному випадку генотип (Del/Del) е незмшним i визначальним фактором, що обумовлюе розвиток генералiзованого пародонтиту, клiнiчна картина якого вщповщае швидкопрогресуючому. В той же час, у 30 ошб i3 генотипом (Del/Ins) визначено наявнють прямого кореляцiйного зв'язку за Сшрменом (р<0,05) мiж iмуногiстохiмiчним профiлем iндивiдуума та наявною супутньою соматичною патолопею iз коефiцiентом кореляцiï (r=+0,60), мiж шкiдливою звичкою (курiння) та iндексом РМА (r=+0,17), що вказуе на безпосередню роль даних параметрiв у виникненш та розвитку генералiзованого пародонтиту.
Необхщно зазначити наявнiсть достовiрного зворотного кореляцшного зв'язку за Спiрменом (р<0,05), мiж iндексом PMA i супутньою соматичною патолопею (r=-0,40) та iмуногiстохiмiчним профiлем iндивiдуума (r=-0,37). Характеристика визначених кореляцiйних зв'язкiв мiж параметрами дае можливють стверджувати, зареестровано клiнiчнi прояви ГП, при даному полiморфному варiантi не е генетично-детермiнованими, а можливо, обумовлеш впливом комплексу екзогенних та мюцевих патогенних чинникiв [5], яю iнiцiюють розвиток iндукованого генералiзованого пародонтиту, враховуючи можливi шляхи активацiï NF-kB1, що сприяе появi чи посилюе ncpcoir иатолопчних реакщй у тканинах пародонта.
Систематика ГП за "генетичним"та "¡MyHoricToxiMiHHHM" профтем
Kjiinm мни
Гумсралънпй
ймфошгги
№ШП|)ОШЯВ
Необхщно зазначити
вiдсутнiсть достовiрного прямого кореляцшного зв'язку за Сшрменом (р<0,05), мiж параметрами в генотипi (Ins/Ins), що також дае можливють припущення, що патогенетичш механiзми генералiзованого
пародонтиту у ошб iз даним полiморфним варiантом несуть генетичну складову, проте особливостi клiнiчних проявiв е бшьш доброякiсними та характеризуються хронiчним тривалим перебiгом в порiвняннi iз полiморфними варiантом (Del/Del) (рис.).
Наведенi нами результати кореляцшного налiзу дають можливють запропонувати
-хелперп CD-4
Генотип D/I
ш
Т-Ялпсри CD-.1
Генотип I
Генотип D/D
умовно-стабшьний ГП
стабшьнийгп прогресуючий ГП
Рис. 1мунолог1чно обумовлеш мехашзми кл1шчного переб1гу ГП.
систематику ГП обумовлену характером запальних шфшьтратах Т- чи В-клiтин та генотипом.
Розподш полiморфних варiантiв гену NF-kB^ пацiентiв iз iнтактним пародонтом та генотипом (Del/Del) складае 5 (ll%) iз генотипом (Del/Ins) 23 (51%), iз генотипом (Ins/Ins) 17 (38%). У хворих на генералiзований пародонтит популяцшний розподiл складае iз генотипом (Del/Del) 9 оаб (16 %), iз генотипом (Del/Ins) вiдповiдно 30 (55%) та (Ins/Ins) 16 (29%). З'ясовано, що генотип (Del/Del) е незмшним i визначальним фактором, що обумовлюе розвиток генералiзованого пародонтиту, ктшчна картина якого вщповщае швидкопрогресуючому.
Перспективи подальших до^джень. В подальшому плануетъся розглянути патогенетичш мехашзми виникнення продуктивних процеав слизовоi оболонки порожнини рота через полiморфiзм ядерного фактора транскрипци NF кВ1, який контролюе експресЮ гешв iмунноi eidmeidi, апоптозу i клтинного циклу.
1. Айала Ф. Современная генетика / Ф. Айала, Дж. Кайгер // - М.: Книга по требованию, - 2012. - 294 с.
2. Баранов В. С. Цитогенетика эмбрионального розвития человека / В. С. Баранов, Т.В. Кузнецова //- «Н-Л», - 2007. - 658 с.
3. Баранов В. С. Генетический паспорт - основа индивидуальной и предикативной медицины / В. С. Баранов // - «Н-Л», - 2009. - 528 с.
4. Григорян А. С. Ключевые звенья патогенеза заболеваний пародонта в свете данных цитоморфометрического метода исследования / А. С. Григорян, А. И. Грудянов // Стоматология. - 2001. - № 1. - С. 5 - 8.
5. Григорян A. C. Болезни пародонта / A. C. Григорян, А. И. Грудянов, H. A. Рабухина // - М.: «Медицинское информационное агентство». - 2004. - 320 с.
6. Реброва О. Ю. Статистический аналих медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTIKA / О. Ю. Реброва // - М.: Медиа Сфера, - 2002. - 312 с.
7. Kinane D. F. Periodontal manifestations of systemic disease / D. F. Kinane, G. J. Marshall // Aust. Dent. J. - 2001. - № 46 (1). - Р. 2 - 12.
8. Reichert S. The interleukin-1 promoter haplotype ATA is a putative risk factor for aggressive periodontitis / S. Reichert, H. K. Machulla, J. Klapproth [et al.] // J. Periodontal Res. - 2008. - Vol. 43, № 1. - Р. 40 - 47.
9. Schulz S. The del/del genotype of the nuclear factor-kappaB -94ATTG polymorphism and its relation to aggressive periodontitis / S. Schulz, L. Hierse, W. Altermann [et al.] // J. Periodontal Res. - 2010. - № 45 (3). - P. 396 - 403.
10. Schulz S. Single nucleotide polymorphisms in interleukin-lgene cluster and subgingival colonization with Aggregatibacter actinomycetemcomitans in patients with aggressive periodontitis // S. Schulz, J.M. Stein, U. Zimmermann // Hum. Immunol. -2011. - № 72 (10). - P. 940 - 946.
11. Talbert J. The effect of periodontal therapy on TNF-alpha, IL-6 and metabolic control in type 2 diabetics / J. Talbert, J. Elter, H.L. Jared [et al.] // J. Dent. Hyg. Spring. - 2006. - P. 802 - 807.
РОЛЬ ПОЛИМОРФИЗМА ЯДЕРНОГО ФАКТОРОВ ТРАНСКРИПЦИИ NF-KB1 В ПАТОГЕНЕЗЕ ГЕНЕРАЛИЗОВАННОГО ПАРОДОНТИТА Гасюк Н. В.
В статье приведены результаты молекулярно-генетического исследования роли ядерного фактора транскрипции NF-kB1 в патогенезе генерализованного пародонтита. Распределение полиморфных вариантов гена №-кВ1у пациентов с интактным пародонта и генотипом (Del / Del) составляет 5 (11%) с генотипом (Del/Ins) 23 (51%), с генотипом (Ins/Ins) 17 (38%). У больных генерализованным пародонтитом популяционное распределение полиморфных вариантов ядерного фактора транскрипции составляет из генотипом (Del/Del) 9 человек (16%), с генотипом (Del/Ins) соответственно 30 (55%) и (Ins/Ins) 16 (29%). Выяснено, что генотип (Del/Del) является неизменным и определяющим фактором, обусловливающим развитие генерализованного пародонтита, клиническая картина которого соответствует быстропрогрессирующему.
Ключевые слова: генерализованный пародонтит, генотип, полиморфизм, фактор транскрипции.
Стаття надшшла 18.04.2015 р.
ROLE OF NUCLEAR POLYMORPHISM TRANSCRIPTION FACTOR NF-kB1 IN THE PATHOGENESIS GENERAL PARODONTITIS Gasyuk N. V.
In the article results of molecular genetic study of the role of nuclear transcription factor NF-kB1 in the pathogenesis of generalized periodontitis. Distribution of polymorphic variants of the gene NF-kB1u patients with intact periodontal and genotype (Del/Del) is 5 (11%) with genotype (Del/Ins) 23 (51%) with genotype (Ins/Ins) 17 (38%). Patients with generalized periodontitis is population distribution of genotype (Del/Del) 9 people (16%) with genotype (Del/Ins) under 30 (55%) and (Ins/Ins) 16 (29%). It was found that genotype (Del/Del) is unchanged and the determining factor that causes the development of generalized periodontitis, clinical picture which meets the quickly progressing.
Key words: generalized periodontitis, genotype polymorphism, the transcription factor.
Рецензент Срошенко Г.А.
УДК 611.637+612.65 : 612.617
ГЕМОДИНАМ1ЧН1 ТА СТРУКТУРЫ ОСОБЛИВОСТ1 ПЕРЕДМ1ХУРОВО1 ЗАЛОЗИ У
ЧОЛОВ1К1В В1КОМ 22-35 РОК1В
Методами ультразвуково! дiагностики та кольорово! анпоехографп дослщжено лшшш i об'емн розмiри передмiхуровоI залози та особливост гемодинамки в нш у чоловшв вком 22-35 роюв. Нами встановлено, що в цьому вщ обсяг органу становить (21,1 ± 2,0) см3, а маса - (21,9 ± 1,8) г, ширина передмiхуровоI залози - (37,4 ± 2,0) мм, товщина - (24,5 ± 1,8) мм i довжина (22,8 ± 2,1) мм. Пкова систолiчна швидюсть кровотоку дорiвнюe (18,85 ± 3,0) см / с, а дiастолiчна швидюсть кровотоку - (5,76 ± 0,03) см / с, тдекс резистентност становить (0,71 ± 0,02) вус. од., а об'емний кровотк - (0,060 ± 0,012) л / хв. У чоловшв зршого вку пстолопчно передмiхурова залоза мае часточкову будову, секреторн вщдши часточок альвеолярно-трубчаси, !х еттелш призматичний, стввщношення мiж залозисто! паренхiмою i м'язово-еласической стромою становить 69,9% до 30,1%. У нормi при кольоровому допплерiвському картування нами отримано ч™е зображення кровоносних судин передмiхуровоI залози. Капсулярн кровоносн судини в поперечному розрiзi представлен точковими окремими кольоровими сигналами дiаметром (3,0 ± 0,2) мм. Уретральт артерп i периуретральт вени мають прямий напрямок i симетрично розмщуються в перiуретральной зонi. Бiля передмiхуровоI залози по передньому i бiчному контуру тд виглядом трубчастих структур визначаються судиннi структури венозних сплетiнь. Дiаметр вен не перевищуе (4,0 ± 0,1) мм.
Ключовi слова : передмiхурова залоза, гемодинамiчнi параметри.
Робота е фрагментом НДР «Морфо-функщоналъний стан передмiхуровоl залози i яечка у чоловтв репродуктивного вк в нормi та умовах патологи» (№ держреестраци 0109и008162).
Як вщомо, захворювання передм1хурово! залози являеться важливою проблемою в урологи [2, 5, 6]. За даними л1тератури в !х етюлогн основна роль належить розладам гемодинамши та 1нфекц1йному фактору [1, 4, 7, 8]. Незважаючи на значну кшьюсть публ1кац1й, як1 стосуються иередм1хурово! залози, проведений нами !х анатз св1дчить про те, що структурно-функц1ональн1 особливост1 кровоносних судин { тканинних елеменпв цього органа у чоловшв р1зного в1ку залишились мало дослщженими [3, 9].
Метою роботи було з'ясувати морфометричш параметри та особливосп гемодинам1ки передм1хурово! залози у чоловшв вшом 22-35 рок1в.
