CC BY
25
Следовательно, для обеспечения экономичной, эффективной и безопасной антибактериальной терапии в каждом конкретном случае необходим тщательный подход к выбору препарата с учетом состояния организма, изучения свойств возбудителя и его чувствительности к антибиотику, а также свойств самого лекарственного препарата.
Таким образом, наше исследование свидетельствует о необходимости более детального изучения их практическими врачами в целях обеспечения рационального использования материальных и финансовых ресурсов ЛПУ
Список литературы:
1. Белоусов Д.Б. Основы фармакоэкономических исследований: учебное пособие / Д.Б. Белоусов. - М.: 2000. - 87 с.
2. Воробьев П.А., Авксентьева М.В., Воробьев П.А., Герасимов В.Б., Горохова С.Г., Кобина С.А. Экономическая оценка эффективности лекарственной терапии (фармакоэкономический анализ) / Под ред. П. А. Воробьева. - М., 2000. - 80 с.
3. Охлопкова К.А., Суслова О.В., Ахминина Н.И. и др. Хламидийная этиология заболеваний нижних отделов дыхательных путей у детей раннего возраста // Педиатрия. - 2001. - № 1.
4. Самсыгина Г.А., Дудина Т.А. Тяжелые внебольничные пневмонии у детей: особенности клиники и терапии // Consilium medicum. Приложение. Педиатрия. - 2002. - № 2. - С. 12-16.
5. Russell W., Steele R.W., Thomas M.P., Kolls J.K. Current management of community-acquired pneumonia in children: an algorithmic guideline recommendation // Infect Med. - 1999. - V. 16. - № 46-54.
РАЗРАБОТКА СОСТАВА ЛИПОСОМАЛЬНОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ТИОСЕНСА ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ
© Санарова Е.В.*
Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН,
г. Москва
Тиосеис - отечественный фотосенсибилизатор II поколения, синтезированный в ФГУП ГНЦ «НИОПИК», является производным фтало-
* Соискатель, младший научный сотрудник лаборатории Разработки лекарственных форм научно-исследовательского института Экспериментальной диагностики и терапии опухолей. Научный руководитель: H.A. Оборотова, заведующая лабораторией Разработки лекарственных форм научно-исследовательского института Экспериментальной диагностики и терапии опухолей, доктор фармацевтических наук, профессор.
цианина. Работа посвящена разработке состава липосомальной лекарственной формы Тиосенса. В статье сравниваются три состава липосомальной лекарственной формы Тиосенса по параметрам: средний размер полученных липосом и процент включения гидрофобного фотосенсибилизатора в липосомальный бислой.
Широкое распространение раковых заболеваний и малая эффективность существующих методов их лечения способствуют разработке методик направленно воздействующих на опухолевые клетки. Одной из таких перспективных методик является фотодинамическая терапия (ФДТ), основанная на введении в организм пациента фотосенсибилизатора (ФС), его селективном накопление в опухолевой ткани и последующем облучении сенсибилизированной опухоли лазером. При локальном воздействии лазерного облучения определенной длины волны ФС генерирует образование синглетного кислорода и активных радикалов, оказывающих повреждающее воздействие на опухолевые клетки [4].
Введение многих ФС в организм осложнено наличием у них гидрофобных свойств. Для солюбилизации таких веществ необходимо создание лекарственной формы (ЛФ), обеспечивающей возможность введения in vivo и сохранение эффективности действия ФС. Одной из таких ЛФ являются липосомы, представляющие собой везикулы, окруженные фосфоли-пидной мембраной. Кроме того, за счет эффекта повышенной проницаемости (EPR-effect) липосомы обеспечивают избирательное накопление ФС в опухолевой ткани [5].
Тиосенс - ФС инфракрасной области, поглощающий в диапазоне длин волн 717 ± 4 нм, где собственное поглощение биологической ткани минимально^]. Он проявляет гидрофобные свойства (нерастворим в воде, плохо растворим в органических растворителях) и включается в липосомальный бислой (рис. 1), поэтому создание липосомальной ЛФ является актуальным направлением исследований.
водная фаза
фосфолипнд &> холестерол д тиосенс Рис. 1. Расположение тиосенса в структуре липосомы
В данной работе были исследованы три состава липосомальной ЛФ Тиосенса (табл. 1). Все они содержали: лецитин - основной липосомаль-
ный фосфолипид [3], холестерол - обеспечивающий прочность липосо-мальной мембраны и полиэтиленгликоль (ПЭГ) - предотвращающий поглощение липосом макрофагами ретикулоэндотелиальной системы, за счет стерической стабилизации везикул.
Таблица 1
Составы липосомальной лекарственной формы тиосенса в расчете на 1 колбу
Компоненты Состав № 1, мг Состав № 2, мг Состав № 3, мг
Тносенс 11,04 14,02 16,01
Лецнтин 2200,00 2525,00 2532,00
Холестерин 246,00 151,00 152,00
ПЭГ 17,60 23,00 25,00
Все составы готовились по одной методике. Сначала холестерин, лецитин и ПЭГ растворяли в 15-20 мл органического растворителя (хлороформ). Затем растворяли субстанцию Тиосенса в хлороформе и подвергали воздействию УЗ в течение 2-3 мин для полного растворения. Оба хлороформных раствора смешивали и количественно переносили в кругло-донную колбу, которую присоединяли к роторному испарителю BUCHI Rotavapor R-200 (BUCHI Labortechnik AG Швейцария). Хлороформ отгоняли при температуре фазового перехода липидов для получения тонкой липидной пленки. Полученную пленку подсушивали под вакуумом в течение 30-40 мин до полного исчезновения запаха хлороформа, гидратиро-вали определенным количеством деионизированной воды.
Полученные везикулы были мультиламеллярны (многослойны) и имели достаточно большие размеры (состав № 1 - 610 ± 20 нм; состав № 2 -464 ± 20 нм; состав № 3 - 471±20 нм), которые измеряли на приборе Ni-comp 380 Submicron Particle Sizer (Particle Sizing Systems, США). Для получения однослойных липосом с размерами 100-200 нм проводили фильтрацию под давлением через поликарбонатные фильтры (Whatman) с размером пор 1,2 (предфильтрация), 0,45 и 0,22 мкм (стерильная фильтрация). Первый состав не подвергался предфильтрации и после прохождения через фильтры с размером пор 0,45 мкм липосомы укрупнялись до 561 ± 20 нм и не выдерживали стерильной фильтрации. Второй состав также не подвергался предфильтрации, так как размеры частиц были около 0,45 мкм, но после прохождения через фильтры с размера пор 0,45 и 0,22 мкм, везикулы укрупнялись до 296±20 нм. Третий состав был подвергнут всем трем степеням фильтрации и средний размер полученных везикул составил 130 ± 20 нм. Состав № 1, умеющий после фильтрации липосомы достаточного большого размера был подвергнут измельчению в УЗ-ванне в течение 45 минут. Первоначально малый размер (122 ± 20 нм) озвученных везикул через 15 часов составил 335 ± 20 нм, поэтому использование УЗ нерационально.
В дальнейшем данную лекарственную форму для возможности длительного хранения будут подвергать лиофильной сушке [2], поэтому необходимо исследовать влияние криопротектора на липосомальную дисперсию. В качестве криопротектора мы использовали сахарозу 10 % и 20 %. Объем добавляемого раствора сахарозы рассчитывали на основании данных полученных после количественного определения субстанции в профильтрованной ЛФ. Количественное содержание Тиосенса, включенного в фосфоли-пидный слой липосом, определяли спекгрофотометрически, с использованием раствора стандартного образца (PCO), при длине волны 717 ± 4 нм на спектрофотометре СФ-46 ЛОМО (Россия). Ингредиенты входящие в состав липосом (лецитин, холестерин, ПЭГ), в этой области практически не поглощают, что было доказано путем измерения оптической плотности пустых липосом. Процент включения определяли только для составов № 2 и № 3 (так как при изготовлении липосом на основе состава № 1 получали везикулы крупного размера), он составил 83,10 % и 55,30 % соответственно. После добавления растворов сахарозы размеры липосом обеих составов изменились незначительно, а включения составили для второго состава с 10 % сахарозой - 90,40 %, с 20 % сахарозой - 94,00 %; для третьего состава - 99,6 % с 10 % сахарозой и 98,9 % с 20 % сахарозой (процент включения после добавления криопротектора рассчитывался от концентрации, до которой разводят липосомальную дисперсию после фильтрации).
На основании проведенных исследований можно сделать вывод о нежелательном использовании УЗ в технологии получения липосом данного лекарственного препарата, так как первоначально малый размер озвученных липосом со временем увеличивается. По мимо этого, озвучивание может оказывать неблагоприятное влияние на компоненты ЛФ и саму субстанцию. Процесс фильтрации должен включать этап предфильтрации для предотвращения в дальнейшем забивания фильтра крупными липосомами. Было выявлено, что добавление криопротектора обеих концентраций незначительно влияет на размер липосом и включение Тиосенса в липосомаль-ный слой. Это позволяет использовать криопротектор в 10 % конентрации.
В дальнейшем будет проводиться работа по оптимизации состава ЛФ с целью обеспечения сохранения технологических показателей после лио-филизации.
Список литературы:
1. Ермакова К.В., Борисова Л.М., Киселева М.П., Смирнова З.С., Мее-рович И.Г., Оборотова H.A., Меерович Г.А., Лукьянец Е.А., Ворожцов Г.Н. Эффективность фотодинамической терапии с тиосенсом на глиоме С6 // Российский биотерапевтический журнал. - 2008. - № 1. - С. 15-16.
2. Игнатьева Е.В., Гатинская Л.Г., Голубева С.Ф., Дмитричева H.A., Ярцева И.В. Оценка качества лиофилизированной липосомальной лекар-
ственной формы тиосенса // Российский биотерапевтический журнал. -2010. - № 2. - С. 87-88.
3. Ярцева И.В., Ильин Д.О., Гатинская Л.Г., Машалова Н.А., Игнатьева Е.В. Количественное определение лецитина в лиофилизированной лекарственной форме тиосенса // Российский биотерапевтический журнал. -2010. - № 2. - С. 87.
4. Ortel B., Shea C.R., Calzavara-Pinton P. Molecular mechanisms of pho-todynamic therapy // Frontiers in Bioscience. - 2009. - № 14. - P. 4157-4172.
5. Nunes S.M.T., Sguilla F.S., Tedesco A.C. Photophysical studies of zinc phthalocyanine and chloroaluminum phthalocyanine incorporated into liposomes in the presence of additives // Brazilian Journal of Medical and Biological Research. - 2004. - № 37. - P. 273-284.
