CC BY
118
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА... 1 31
} ill УДК 546.273'131:577.352.2:615.831
М.В. Дмитриева , H.A. Оборотова , О.Л. Орлова , А.П. Полозкова , И.И. Агапов , М.П. Кирпичников ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА БОРХЛОРИНА
1ФГБУ «РОНЦим. H.H. Блохина» РАМН, Москва
2ФНЦ Трансплантологии и искусственных органов им. В.И. Шумакова, Москва 3МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва
Контактная информация:
Дмитриева Мария Вячеславовна, младший научный сотрудник лаборатории разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО
адрес: 115478 Москва, Каширское шоссе, 24; тел.: +7(499)612-81-86; +7(499)324-18-14 e-mail: marv [email protected]
Статья поступила 23.01.2014, принята к печати 27.01.2014.
Резюме
В течение последнего десятилетия большой интерес в качестве фотосенсибилизаторов для фотодинамической терапии злокачественных новообразований вызывают производные хлоринов. Целью данной работы являлось создание стерически стабилизированной липосомальной лекарственной формы нового отечественного фотосенсибилизатора борхлорина для внутривенного введения. В результате фармацевтических исследований выбран оптимальный состав компонентов и разработана технология получения липосомальной лекарственной формы гидрофобного борхлорина. Включение препарата в свежеприготовленные липосомы составило не менее 99 %, средний диаметр везикул - 185±10 нм. Разработанная лекарственная форма показала низкую «темновую» токсичность и высокую цитотоксическую активность в отношении клеток глиомы крысы С6.
Ключевые слова: борхлорин, липосомы, технология, фотодинамическая терапия, глиома С6
M.V. Dmitrieva1, N.A. Oborotova1, O.L. Orlova1, A.P. Polozkova1, I.I. Agapov2, M.P. Kirpichnikov3 BORCHLORIN LIPOSOMAL DOSAGE FORM
1FSBI «N.N. Blokhin RCRC» RAMS, Moscow
2V.I. Shumakov Federal Research Center of Transplantation and Artificial Organs, Moscow
3Lomonosov Moscow State University
Abstract
Chlorin derivatives have great interest as photosensitizers for photodynamic therapy of malignant neoplasms during the last decade. The main goal of this research was to develop sterically stabilized liposomal dosage form for intravenous intake of new home-produced photosensitizers Borchlorin. Optimum composition and formulation of liposomal dosage form of hydrophobic Borchlorin are results of the Study. Concentration of Borchlorin in freshly prepared liposomes is upwards 99% and vesicles average size is - 185±10 nm. Developed dosage form shows low dark photo-toxity and high cytotoxicity against rat glioma cells C6.
Key words: borchlorin, liposomes, technology, photodynamic therapy, rat glioma C6.
Введение
Одним из ведущих направлений развития фотодинамической терапии злокачественных новообразований является создание сенсибилизаторов, обладающих высокой фототоксической активностью [6-12; 15; 18; 21]. В течение последнего десятилетия большой интерес в качестве ФС вызывают тетрапиррольные соединения, в частности производные хлоринов. Установлено, что ФС хлориново-го ряда обладают интенсивной полосой поглощения в длинноволновой красной области спектра, оптимальной туморотропностью и высокой фототоксичностью при отсутствии «темновой» токсичности [4; 9; 17; 18; 20].
В институте элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова РАН (ИНЭОС им. А.Н. Несмеянова) синтезирован новый оригинальный ФС на основе борированного хлорина е6 (БХ), который имеет ряд конкурентных преимуществ. Активная субстанция БХ имеет максимум поглощения 662±1 нм, обладает достаточно высокой селективностью накопления в опухоли по отношению к нормальной ткани и низкой токсичностью. В основе противоопухолевого эффекта БХ лежит уникальный механизм
действия - быстрый фотонекроз, в то время как другие ФС вызывают недостаточно эффективную и более медленную гибель опухолевых клеток за счет апоптоза и аутофагии. Также значительным преимуществом данной субстанции является возможность использования в качестве агента для лучевой терапии, в частности, нейтронзахватной терапии -метода локального воздействия на опухоль, что обусловлено наличием в молекуле борированной структуры - карборана. Кроме того, установлено, что бо-рирование может усиливать противоопухолевое действие ФС [13; 14; 19; 22].
В связи с гидрофобными свойствами данного вещества предложен путь инкапсуляции БХ в липосомы и создание стерически стабилизированной ЛЛФ для внутривенного введения. Преимущество использования липосомальной системы доставки препарата позволяет обеспечить:
1. повышение накопления ФС в опухоли посредством пассивного нацеливания;
2. снижение накопления ФС в чувствительных здоровых тканях;
3. защиту ФС от деградации и преждевременного клиренса;
4. проникновение ФС в опухолевую клетку.
№ 1/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
32 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА...
Кроме того, липосомы биодеградируемы и А1 и А0 - соответственно оптические плотности раство-не вызывают иммунного ответа [1-3; 5; У; 9; 1б]. ров образца липосомальной дисперсии борхлорина; Данная статья посвящена разработке опти- а - навеска PCO борхлорина, в мг; мального состава и технологии получения ЛЛФ В1 и В0 - соответственно разведения липосомальной дис-борхлорина, изучению и оценке цитотоксической персии и PCO борхлорина. активности полученной лекарственной формы борхлорина и его субстанции. Определение степени включения борхлорина Материалы и методы в липосомы В связи с тем, что борхлорин является гид-Препараты и реактивы рофобным веществом и при получении липосом ■ субстанция борхлорина (ИНЭОС им. включается непосредственно в липидный бислой, А.Н Несмеянова); количество включенного препарата определяли как ■ яичный фосфатидилхолин (Е PC S) соотношение концентрации препарата в липосо-(Lipoid, Германия); мальной дисперсии после экструзии к концентра- ■ холестерин (Sigma, Япония); ции борхлорина в липосомальной дисперсии, полу- ■ пегелированный дистеароилфосфатиди- ченной после гидратации липидной пленки. Пока-лэтаноламин (PEG-2000-DSPE) (Lipoid, затель выражали в процентах: Германия); ■ сахароза (Химмед, Россия); C ■ натрия хлорид (Химмед, Россия); КВП —_— х 100 где ■ хлороформ стабилизированный, ХЧ C (Химмед, Россия); п ■ спирг этиловый 95 %-ный (ФС 42-30У2-94). КВП - количество включенного препарата, %; Приборы и аппаратура Сф - концентрация борхлорина в дисперсии после фильт-Весы аналитические Sartorius 2405 (Sartorius рации, мг/мл; AG, Германия), весы лабораторные Sartorius Сп - концентрация борхлорина в дисперсии после полу-LA1200S (Sartorius AG, Германия), pH-метр чения, мг/мл. HANNA pH 211 (Hanna Instruments, Германия), испаритель роторный Rotavapor R-200 (Büchi La- Определение pH липосомальной дисперсии bortechnik AG, Швейцария), ультразвуковая ванна Определение значения pH осуществляли с Transsonic T310 (Elma, Германия), экструдер помощью метода потенциометрии. В липосомаль-LipexTM Thermobarrel Extruder (Northern Lipids Inc., ной дисперсии значение pH измеряли не разбавляя. Lipex Biomembranes, Inc.,Канада), нейлоновые Предварительно измеряли значение pH воды для мембранные фильтры «Pall» ^б с диаметром пор инъекций. 1,2; 0,45 и 0,22 мкм (Pall Corporation, США; ООО Палл Евразия, Россия), наносайзер Nicomp 380 Выбор Submicron Particle Sizer (Particle Sizing Systems, оптимального состава липосом США), спектрофотометр Cary 100 (Varian, Inc., Ab- с борхлорином стралия), установка сублимационной сушки «Ed- Выбор компонентов для получения липосо-wards Minifast DO.2» (Ero Electronic S.p. A., Ита- мального борхлорина основывался на их функцио-лия), ридер Labsystem Multiscan plus. нальности. В качестве основного компонента, форми-Получение липосом с борхлорином рующего бислой, применяли лецитин. Для прида-Липосомы с борхлорином получали методом ния бислою необходимого уровня жесткости до-Бенгема в модификации для гидрофобных субстан- бавляли холестерин. Для предотвращения опсони-ций с использованием яичного фосфотидилхолина зации и поглощения липосом клетками РЭС в со-(лецитин), холестерина и PEG-2000-DSPE. став лекарственной формы вводили фосфолипид, конъюгированный с PEG-2000-DSPE. Определение размера липосом В процессе исследования получили 12 соста-Анализ среднего диаметра липосом прово- вов с различными молярными соотношениями пре-дили методом корреляционной спектроскопии све- парат/лецитин и лецитин/холестерин. торассеяния с помощью прибора наносайзера. Оценку качества этих составов проводили по трем основным параметрам - средний размер БМЛ Количественное и МОЛ соответственно, КВП и pH липосомальной определение борхлорина в липосомах дисперсии. Полученные результаты приведены в Количественное содержание препарата в ле- табл. 1. карственной форме определяли методом спектро-фотометрии с использованием PCO при X бб2 нм. Выбор Компоненты, входящие в состав липосом, в этой оптимального растворителя области спектра практически не поглощают. для гидратации липидной пленки Оптическую плотность спиртовых растворов В качестве растворителя для гидратации ли-липосомального борхлорина и PCO измеряли отно- пидной пленки использовали воду для инъекций, сительно 95%-ного этилового спирта. Количество раствор криопротектора (раствор сахарозы при мо-борхлорина (х, мг/мл) рассчитывали по формуле: лярном соотношении лецитин : сахароза = 1 : 5) и изотонический раствор натрия хлорида. Влияние A X a X B типа растворителя на качество липосомальной дис-X — 1 1 где персии борхлорина оценивали по двум параметрам: Aq X B0 средний размер липосом и pH дисперсии. Результаты исследования приведены в табл. 2.
№ 1/том 13/2014 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1_2014.¡ndd 32 {g} 03.03.2014 15:10:58
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА... 1 33
Таблица 1
Модели составов липосомальной лекарственной формы борхлорина
№ Молярное соотношение компонентов Средний 0 липосом, нм рн квп, %
Препарат/ лецитин Лецитин/ холестерин БМЛ МОЛ
1 4 1 371±15 205±6 7,1 89
2 1:100 3 1 261±20 208±8 7,5 92
3 2 1 290±16 235±8 6,4 91
4 1:140 3 1 556±22 255±16 6,3 93
5 1:170 3 1 656±15 211±8 6,8 96
6 1:180 3 1 435±18 188±10 5,4 97
7 1:185 3 1 230±10 196±12 6,4 98
8 1:190 3 1 578±15 207±10 6,1 93
9 4 1 907±25 250±14 6,0 97
10 1:200 3 1 266±20 185±10 6,9 99
11 2 1 908±22 240±10 5,5 99
12 1:210 3 1 476±16 205±8 6,1 99
Таблица 2
Выбор растворителя для гидратации липидной пленки_
№ Растворитель Средний 0 липосом, нм рН липосомальной дисперсии
БМЛ МОЛ
1 Вода для инъекций 266±20 185±10 6,9
2 Раствор сахарозы 261±15 215±10 7,3
3 Изотонический раствор натрия хлорида 404±22 206±8 5,7
Таблица 3
Сравнительный анализ технологических схем получения ЛЛФ борхлорина
№ Параметр Вариант №1 Вариант №2
1 Растворитель для гидратации пленки Вода для инъекций* Раствор сахарозы**
2 Гидратация липидной пленки Процесс гидратации затруднен Процесс гидратации протекает легко и быстро
3 Описание липосомальной дисперсии Вязкая, зеленого цвета, с большим количеством пены Невязкая, молочно-зеленого цвета, с небольшим количеством пены, которая не отстаивается и застывает
4 Средние размеры липосом, нм БМЛ 266±20 261±15
МОЛ 185±10 215±10
после лио-филизации 180±10 190±10
общий объем делили на 2 части: 1 - для гидратации пленки, 2 - для введения раствора криопротектора ** в общем объеме воды для инъекций растворяли навеску сахарозы, полученным р-ром гидратировали пленку
Таблица 4
Влияние экструзии на качество липосомальной дисперсии борхлорина
п циклов Средний размер МОЛ, нм N циклов Средний размер МОЛ, нм
1 263±20 7 205±7
2 206±12 8 209±10
3 209±13 9 209±8
4 204±8 10 194±10
5 190±5 11 227±15
6 211±8 12 215±6
Рис. 1. «Темновая» токсичность субстанции и ЛЛФ борхлорина
№ 1/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
34 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА...
Рис. 2. Цитотоксичность при облучении субстанции и ЛЛФ борхлорина.
Изучение цитотоксичности субстанции и липосомальной дисперсии борхлорина на клетках глиомы крысы С6 Клетки глиомы крысы С6. находящиеся в логарифмической фазе тоста, равномерно распределяли по лункам 96-луночного плейта из расчета 1х104 клеток в 100 мкл на лунку и инкубировали в темноте в атмосфере, содержащей 6,1 % CO2, при +37 °C в течение 24 ч. Затем в лунки того же плейта помещали вещества в разных концентрациях в среде с 10 % ЭТС по 100 мкл в лунку. Клетки с веществами инкубировали в атмосфере, содержащей 6,1 % углекислого газа, при +37 °C в течение 1 часа.
Для исследования цитотоксичности при облучении по окончании инкубации облучали, используя монохромный источник света с X 633 нм, в течение 30 мин. Затем инкубировали в темноте в атмосфере, содержащей 6,1% CO2, при +37 °C в течение 48 ч. После чего среду с веществами удаляли и вносили по 100 мкл МТТ в среде в концентрации 0,5мг/мл и инкубировали при +37 °C в течение 24 часов. Осадок растворяли в 200 мкл ДМСО. Колориметрические измерения проводили на риде-ре Labsvstem Multiscan plus при 540 нм. Вычисляли уровень ингибирования роста клеток в культуре (ПК) по формуле:
ИК(%) = [ODk ~ ODo ] X 100% , где V ' L ODk J
ODK - оптическая плотность в контрольных лунках без воздействия,
ODO - оптическая плотность в опытных лунках.
Результаты и обсуждение
На первоначальном этапе работы главной задачей было определение оптимального состава ЛЛФ борхлорина. Из 12 наработанных ЛЛФ выбран состав №10 с молярным соотношением препарат/лецитин = 1:200 и лецитин/холестерин = 3:1, который обеспечивал включение борхлорина на уровне 99%, приемлемый размер липосом 185±10 нм и значение pH 6,9 (табл. 1).
Далее проводили оценку качества липосо-мальных дисперсий, образовавшихся после гидратации липидной пленки различными растворителями. Полученные данные показали, что вода для инъекций обеспечивает получение дисперсии с оптимальным средним размером липосом и значением pH (табл. 2).
Следующим этапом исследования являлась разработка технологии получения ЛЛФ борхлорина. Нами предложены 2 технологические схемы.
1 вариант
Точные навески лецитина, холестерина и PEG-2000-DSPE растворяли в хлороформе. К субстанции борхлорина прибавляли 10 мл хлороформа и помещали в УЗ-ванну «Transsonic» на 5-10 мин для ускорения процесса растворения. Смешивали хлороформные растворы компонентов лекарственной формы, фильтровали через нейлоновый мембранный фильтр «Pall» с размером пор 0,22 мкм и переносили в круглодонную колбу вместимостью 2 л. Органический растворитель отгоняли при температуре 37±1 °С с получением полупрозрачной липидной пленки, которую досушивали под вакуумом в течение 50 мин. Пленку гидратировали водой для инъекций с образованием дисперсии больших мультиламеллярных липосом. Для получения малых одноламеллярных липосом применяли метод экструзии, последовательно пропуская дисперсию через нейлоновые мембранные фильтры «Pall» с размером пор 1,2 мкм (1 раз); 0,45 мкм (1 раз); 0,22 мкм (5 раз). Затем к дисперсии добавляли необходимый объем раствора криопротектора (сахароза), перемешивали и проводили стерилизующую фильтрацию. Полученную стерильную липосо-мальную дисперсию борхлорина разливали во флаконы по 4 мл и лиофилизировали в камере сублимационной сушки.
2 вариант
Главное отличие второй технологической схемы от первой заключается в гидратации липидной пленки непосредственно раствором криопротектора (сахарозы) с дальнейшим проведением стерилизующей фильтрации. Полученную стерильную липосомальную дисперсию борхлорина разливали во флаконы по 4 мл и лиофилизировали в камере сублимационной сушки.
Результаты оценки качества липосомальных дисперсий борхлорина, полученных с помощью двух описанных выше технологий, особенности каждой технологической схемы, ее достоинства и недостатки приведены в табл. 3.
Обобщая данные табл. 3, можно отметить, что оба варианта технологии позволяют получить ЛЛФ борхлорина надлежащего качества и их можно использовать при серийной наработке данной лекарственной формы. Однако невозможность корректировки концентрации препарата в процессе наработки ЛЛФ и получение более крупных липосом по второй технологической схеме ограничивает ее использование.
В процессе разработки технологии также изучали влияние стадии экструзии через мембранный фильтр «Pall» с размером пор 0,22 мкм на ка-
№ 1/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА... 35
чество получаемой липосомальной дисперсии (таб- Ведется отработка режима лиофилизации и л. 4). В результате данного исследования было ус- разработка методики качественного анализа ЛЛФ тановлено, что в процессе экструзии происходит борхлорина. уменьшение диаметра липосом и после 5 циклов достигает минимального значения (190±5 нм). Выводы Дальнейшая фильтрация приводит к увеличению размера липосом, снижая качество липосомальной 1. Получена лекарственная форма борхло-дисперсии. рина, позволяющая вводить препарат Результаты изучения цитотоксической ак- внутривенно. тивности показывают, что «темновая» токсичность 2. Выбран оптимальный состав компонен-субстанции и липосомальной дисперсии борхлори- тов для ЛЛФ борхлорина, обеспечиваю-на совпадают а цитотоксическая активность отли- щий средний размер частиц 185±10 нм и чается незначительно. Для «темновой» токсичности включение препарата в везикулы не ме-ИК50 составляет больше 50мкМ, для световой ток- нее 99%. сичности - ИК50=0,15 мкМ, ИК90(субстанции бор- 3. Разработана технология получения ЛЛФ хлорина)=0,3мкМ и ПК90(ЛЛФ борхлори- борхлорина надлежащего качества. на)=0,8мкМ (рис. 1 и 2). 4. Показано, что ЛЛФ борхлорина имеет К настоящему времени наработаны 6 экспе- низкую «темновую» токсичность и об-риментальных серий препарата для проведения ладает высокой цитотоксической актив-доклинических испытаний и изучения стабильно- ностью в отношении клеток глиомы сти препарата в процессе хранения. крысы С6. Литература 1. Барышников А.Ю. Наноструктурированные липосомальные системы как средство доставки противоопухолевых препаратов // Вестник РАМН. - 2012. - № 3. - С. 23-30. 2. Барышников А.Ю., Барышникова М.А. Иммунолипосомы и мишени их действия // Российский химический журнал. Журнал Российского химического общества им. Д.И.Менделеева. - 2012. - T. LVI, № 3-4. - C. 60-7. 3. Барышникова М.А., Зангиева М.Т., Барышников А.Ю. Взаимодействие липидных нанокапсул с клеткой // Российский биотерапевтический журнал. - 2013. - Т. 12, № 1. - С. 11-5. 4. Генина Э.А. Методы биофотоники: Фототерапия. - Саратов: Новый ветер, 2012. - С. 80-96. 5. Дмитриева М.В., Оборотова H.A., Санарова Е.В. и др. Наноструктурированные системы доставки противоопухолевых препаратов // Российский биотерапевтический журнал. - 2012. - Т. 11, № 4. - С. 21-7. 6. Меерович И.Г., Оборотова H.A. Применение липосом в фотохимиотерапии: 1. Липосомы в ФДТ // Российский биотерапевтический журнал. - 2003. - № 4. - С. 3-8. 7. Меерович И.Г., Оборотова H.A. Применение липосом в фотохимиотерапии: 2. Липосомальные формы для создания фотоактивируемых липосомальных препаратов в фотобиологических исследованиях // Российский биотерапевтический журнал. - 2004. - Т. 3, № 1. - С. 6-12. 8. Меерович И.Г., Грин М.А., Миеерович Г.А. Новые фотосенсибилизаторы ближнего инфракрасного диапозона на основе производных бактериохлорина Р. Предварительные результаты и изучение in vivo // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5, № 2. - С. 98-104. 9. Миронов А.Ф. Фотодинамическая терапия рака - новый эффективный метод диагностики и лечения злокачественных опухолей // Соросовский образовательный журнал. - 1996. - № 8. - С. 32-40. 10. Оборотова H.A. Липосомальные лекарственные формы противоопухолевых препаратов (обзор) //Химико-фармацевтический журнал. - 2001. - Т. 35, № 5. - С. 30. 11. Оборотова H.A., Барышников А.Ю. Липосомальные лекарственные формы в клинической онкологии // Успехи современной биологии. - 2009. - Т. 121, № 5. - С. 464. 12. Оборотова H.A., Санарова Е.В. Роль новых фармацевтических технологий в повышении избирательности действия противоопухолевых препаратов // Российский химический журнал. - 2012. - Т. LVI, № 3-4. - С. 33-40. 13. Ольшевская В.А., Савченко А.Н., Зайцев A.B. и др. Производные 13(1)-п-{2-[п-(клозо-монокарбадодекаборан-1-ил)-метил]аминоэтил}амид-15(2),17(3)-диметилового эфира хлорина е6, проявляющие свойства фотосенсибилизатора. Патент на изобретение РФ №2406726. - 2009 от 27.04.2009 г. 14. Рокиикая Т.И., Зайиев A.B., Ольшевская В. А.и др. Бовдтованные производные хлоотна е6 и drroüco-деожащих поофиринов как проникающие анионы: исследование на бислойных липидных мембранах // Биохимия. - 2012. - 77(9). - С. 1177-85. 15. Смирнова З.С., Оборотова H.A., Макарова O.A. и др. Эффективность и фармакокинетика липосомальной лекарственной формы фотосенсибилизатора «Фотосенс» на основе сульфофталоцианина алюминия // Химико-фармацевтический журнал. - 2005. - Т. 39, № 7. - С. 3-7. 16. Толчева Е.В., Оборотова H.A. Липосомы как транспортное средство для доставки биологически активных молекул // Российский биотерапевтический журнал. - 2006. - Т. 5, № 1. - С. 54-61. 17. Трухачева Т.В., Шляхтин C.B., Исаков Г.А. и др. Фотолон - новое средство для фотодинамической терапии. - Минск: РУП «Белмедпрепараты», 2012. - С. 64. 18. Чан Тхи Хай Иен, Поздеев В.И., Меерович Г.А. и др. Липосомальная лекарственная форма фотодита-зина // Российский биотерапевтический журнал. - 2010. - Т. 9, №2. - С. 105-7. 19. Antonenko Y.N., Kotova E.A., Omarova E.O. et al. Photodynamic activity of the boronated chlorin e6 amide in artificial and cellular membranes // Biochim Biophys Acta. Biochim Biophys Acta. - 2013. - 3(1838). -P. 793-801.
№ 1/tom 13/2014 российский биотерапевтический журнал
1_2014.¡ndd 35 {g} 03.03.2014 15:10:59
36 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ЛИПОСОМАЛЬНАЯ ЛЕКАРСТВЕННАЯ ФОРМА...
20. Derkacheva V.M., Meerovich G.A., Meerovich I.G. et al. Heterooxyaluminium tetra-3-phenyl thiophta-locianin is a new effective photosentizer for phodinamic therapy and fluorescent diagnosis // Bulleten Experimental Biology and Medicine. - 2005. - 139(4). - P. 422-26.
21. Meerovich I.G., Smirnova Z.S., Oborotova N.A. et al. Hydroxyaluminium tetra-3-phenylthiophthalocyanine is a new effective photosensitizer for photodynamic therapy and fluorescent diagnosis // Bulleten Experimental Biology and Medicine. - 2005. - 139(4). - P. 427-30
22. Moisenovich M.M., Ol'shevskaya V.A., Rokitskaya T.I. et al. Novel photosensitizers trigger rapid death of malignant human cells and rodent tumor transplants via lipid photodamage and membrane permeabilization // PLoS One. - 2010. - 5(9). - P. 12717.
СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
ФС - фотосенсибилизаторы
ЛЛФ - липосомальная лекарственная форма
PCO - рабочий стандарт образца
РЭС - ретикулоэндотелиальная система
PEG-2000-DSPE - полиэтиленгликолем
БМЛ - большие мультиламеллярные липосомы
МОЛ - малые одноламеллярные липосомы
№ 1/том 13/2014
РОССИИСКИИ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИИ ЖУРНАЛ
