CC BY
32
8 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
цита является стимуляция аденозином образования нологических, иммунологических и других подходов 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ), облегчающего доставку для борьбы с онкологическими заболеваниями, химиотера-кислорода в ткани. Контроль за внутрисосудистыми уров- певтические средства, в том числе на основе металлоком-нями аденозина и его клеточными эффектами осуществля- плексных соединений, занимают и будут занимать в обозри-ет аденозиндезаминаза (АДА) — фермент его деградации. мом будущем важное место в противоопухолевой терапии. Цель исследования — установить особенности актив- Широко используемые препараты платины имеют ряд не-ности ГПО, АДА, содержание 2,3-ДФГ в эритроцитах па- гативных побочных эффектов. В этой связи актуальным циентов с распространенными формами рака различных является поиск новых металлосодержащих комплексов, локализаций. обладающих большей противоопухолевой активностью Материалы и методы. Исследования проводили в эри- и меньшей токсичностью для нормальных клеток человека. троцитах крови 28 пациентов раком легких (РЛ), 16 — ра- Цель исследования — изучить механизмы действия ря-ком желудка (РЖ), 22 — раком кишечника (РК) T3-4NxM0 да новых карбоксилатных комплексов палладия на опухо-стадий до начала адьювантной ХТ. Контроль — 25 человек левые клетки. того же возраста. Спектрофотометрически определяли ак- Материалы и методы. В работе использовали карбокси-тивность ГПО (по изменению уровней восстановленного латные комплексы палладия, содержащие в своей структуре глутатиона), АДА (по снижению оптической плотности в качестве лигандов диметилдипиридин и фенантролин. аденозина), содержание 2,3-ДФГ. Эксперименты проводили на линии клеток HeLa (аденокар-Результаты. По активности ГПО группы пациентов цинома шейки матки человека) в трехкратной повторности. были неоднородны. У 4 пациентов РЛ (14 %), 3 пациентов Цитотоксичность определяли после 72 ч действия соедине-РЖ (19 %) и 4 — РК (18 %) (всего 11 пациентов, 17 % ний с помощью МТТ-теста. Профиль клеточного цикла из общей выборки) ГПО эритроцитов не отличалась определяли с помощью метода проточной цитофлуориме-от контроля (соответственно (5,30 ± 0,87) и (6,53 ± 1,13) трии. Уровень экспрессии генов p21, 14-3-3, pcna и поха нмоль/мин-мг). У остальных выявлено достоверное сни- определяли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) жение активности ГПО эритроцитов (р < 0,01), составив- в режиме реального времени с использованием реакцион-шей при РЛ (1,34 ± 0,77) нмоль/мин-мг, при РЖ и РК — ной смеси qPCRmix-HS SYBR (Евроген, Россия) после 12 ч (1,66 ± 1,20) и (1,73 ± 1,18) нмоль/мин-мг. Параллельно действия комплексов в дозе 1С50. Оценку морфологических установлено достоверное снижение активности АДА изменений клеток при действии комплексов проводили (р < 0,05). При РЛ (93,36 ± 34,10) нмоль/мин-мг (контр- с помощью флуоресцентной микроскопии. оль — (170,64 ± 24,80) нмоль/мин-мг), при РЖ и РК — Результаты. Проведен синтез образцов структурно раз-(85,32 ± 35,09) и (128,78 ± 34,89) нмоль/мин-мг. При этом личных карбоксилатных комплексов палладия для иссле-в эритроцитах с дисметаболическими нарушениями реги- дования их активности. Определение доз 1С50 показало, стрировали повышение уровней продукции 2,3-ДФГ что изучаемые комплексы обладают цитотоксичностью, ( (11,98 ± 3,16) по сравнению с контролем (5,23 ± 2,22) мк- близкой к комплексу платины цисплатину. Анализ клеточ-моль/мл, p < 0,05). Установленные нарушения метаболиз- ного цикла при действии исследуемых соединений выявил ма эритроцитов у пациентов с раком различных локализа- остановку клеток в G1-фазе, а также накопление клеток ций распространенных стадий, вероятно, универсальные. в области subG1, что говорит об индукции клеточной ги-Они указывают на дисфункцию антиоксидантов и избыток бели. Изучение уровня экспрессии проапоптотических Н2О2 что ведет к окислению гемоглобина. Также на напря- генов, а также генов остановки клеточного цикла показало, женность транспорта газов указывает низкая активность что комплексы палладия активируют в 6—14 раз экспрес-АДА, способствующая сохранению уровней аденозина сию гена p21 и в 2 раза экспрессию гена noxa. и повышенное образование 2,3-ДФГ. Заключение. В результате исследования показана вы-Заключение. Активность ГПО и АДА — маркеры дис- сокая эффективность цитотоксического действия карбок-функции эритрона еще на доанемическом этапе. силатных комплексов палладия с гетероциклическими азотсодержащими лигандами на культуре опухолевых кле-А.А. Балакина1, К.С. Пещерова2, Т.С. Ступина1, ток, что связано с остановкой клеточного цикла и индук-А.Б. Корнев1, И.А. Якушев3, И.П. Столяров3, цией клеточной гибели. А.А. Терентьев1 ИЗУЧЕНИЕ МЕХАНИЗМОВ ЦИТОТОКСИЧЕСКОГО А.А. Барашкин, А.А. Белоглазкина, Г.А. Котовский, ДЕЙСТВИЯ КАРБОКСИЛАТНЫХ КОМПЛЕКСОВ М.А. Кунин, Н.А. Карпов, А.Г. Мажуга, Е.К. Белоглазкина, ПАЛЛАДИЯ С ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИМИ Н.В. Зык АЗОТСОДЕРЖАЩИМИ ЛИГАНДАМИ РАЗРАБОТКА ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ФГБУНИнститут проблем химической физики РАН, ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ — Черноголовка, Московская область, Россия; ИНГИБИТОРОВ БЕЛОК-БЕЛКОВОГО 2ФГБОУВО «Ивановский государственный университет», ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ P53-MDM2 НА ОСНОВЕ Иваново, Россия; ДИСПИРОИНДОЛИНОНОВ ФГБУН Институт общей и неорганической химии им. МГУ им. М.В. Ломоносова, химический факультет, Н. С. Курнакова РАН, Москва, Россия Москва, Россия Введение. Несмотря на бурное развитие и внедрение Введение. В развитых странах самыми распространен-в клинику множества современных физических, нанотех- ными видами рака являются рак предстательной железы
Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 9
и рак кишечника. Известно, что данные виды рака сильно подвержены влиянию белка p53. Белок p53 в организме выполняет функцию «стража генома», в случае повреждения генетического аппарата данный белок запускает каскад процессов, приводящих к смерти клетки. Главный антагонист белка p53 — онкобелок MDM2. Данные белки прочно связываются, что приводит к возникновению и быстрому росту опухоли. Известно, что соединения, содержащие в себе спироиндолиноновый фрагмент, способны блокировать данное взаимодействие и могут быть использованы в качестве противоопухолевых препаратов. Важнейшая задача медицины заключается в разделении энантиомеров препаратов, так как оптически чистый препарат обладает более эффективным действием на хиральные рецепторы.
Цель исследования — разработать и провести биотестирование серии потенциальных ингибиторов белок-белкового взаимодействия p53-MDM2, а также разделение соединений на оптические антиподы.
Материалы и методы. В качестве исходных соединений использовались различные аминокислоты (саркозин и про-лин), 5-замещенные изатины, а также полученные в рамках данной работы гидантоины, тиогидантоины, оксазалоны и роданины. Подтверждение структур полученных соединений проводилось с помощью комплекса физико-химических методов (ЯМР 'H, 13С, ИК- и масс-спектроскопия, элементный анализ, РСА). Биологическая активность синтезируемых соединений определена в стандартном МТТ-тесте на цитотоксичность на клеточных линиях LNCap, PC3 и HCT p53 (+/+) и HCT p53 (-/-). Разделение энантиомеров проводилось на хиральной колонке, установление удельного угла вращения — при помощи поляриметра.
Результаты. По итогам работы была получена большая серия препаратов на основе диспиропроизводных различных классов. Все соединения были исследованы на цито-токсичность на клеточных линиях LNCap, PC3 и HCT p53 (+/+) и HCT p53 (-/-). После разделения препарата на хираль-ной колонке были получены два чистых оптических изомера. В результате дополнительных биологических испытаний было установлено, что в то время, как один из оптических антиподов проявляет противоопухолевую активность (IC50 = 1^М), другой не проявляет.
Заключение. В рамках данной работы получена серия диспиропроизводных на основе гетероциклических соединений различных классов, проведены биологические испытания и найдено соединение-лидер. Также в чистом виде выделены оптические антиподы веществ и показано, что только один из энантиомеров проявляет противоопухолевую активность.
Работа выполнена при поддержке РФФИ, грант № 16-33-60166.
А.Е. Бармашов1, М.А. Барышникова12, К.Р. Матевосян3, А.В. Колотаев2, В.Н. Осипов12, Д.С. Хачатрян2 ИССЛЕДОВАНИЕ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СОЕДИНЕНИЙ ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;
2ФГУП «ИРЕА», Москва, Россия; 3РХТУим. Д.И. Менделеева, Москва, Россия
Введение. Оценка влияния новых потенциальных противоопухолевых соединений на пролиферацию и жизнеспособность опухолевых клеточных линий необходима для понимания их эффективности. Цитотоксический эффект in vitro учитывается при скрининге большинства противоопухолевых соединений перед их исследованиями in vivo на моделях опухолей у животных.
Цель исследования — оценить in vitro противоопухолевую активность ряда новых соединений.
Материалы и методы. Цитотоксическая активность 80 соединений из класса амидов, хиназолонов, четвертичных солей, карболинов, медного комплекса ЭДТА, пиридопи-римидинов, содержащих 2-арилоксазольный фрагмент, оценена в МТТ-тесте. Исследование проводили на клеточных линиях опухолей человека: карциноме толстой кишки HCT-116, карциноме предстательной железы РС-3, карциноме легкого А549, аденокарциноме молочной железы MCF-7, Т-клеточном лимфобластном лейкозе Jurkat. Активными считали соединения, у которых IC50 была меньше или равна 100 мкМ.
Результаты. Цитотоксическую активность проявили 48 из 80 исследованных соединений, из них 17 были активны в концентрациях 10 мкМ и менее. К соединениям, перспективным для дальнейших исследований, можно отнести: OVF-002 (IC5027—70 мкМ в зависимости от клеточной линии), OVF-009 (IC509,2—100 мкМ), D02528 (IC505,5-6,9 мкМ), D11903 (IC506—8,3 мкМ), K0A209 (IC507-30 мкМ), KOA247 (IC504,9—6,5 мкМ), KOA258 (IC503,6-4,2 мкМ), KOA259 (IC502—3,9 мкМ), Sf-131 (IC505-52,5 мкМ), Sf-144 (IC507—33,8 мкМ), Sf-145 (IC504,9-6,5 мкМ), Sf-147 (IC501,7—2 мкМ), Sf-148 (IC504,5-6,1 мкМ), Sf-149 (IC501,9—2,5 мкМ), Sf-150 (IC505,6-6,2 мкМ).
Заключение. Из 80 исследованных соединений 17 перспективны для дальнейшего изучения их противоопухолевой активности in vivo.
Р.А. Бармин1, П.А. Тараканов2, М.Е. Неганова2, Д.В. Мищенко34
ИЗУЧЕНИЕ ФОТОФИЗИЧЕСКИХ И ФОТОХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВОДОРАСТВОРИМЫХ ФОРМ ФТАЛОЦИАНИНА ЦИНКА
ФГБОУ ВПО МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия; 2ФГУПИФАВ РАН, Черноголовка, Россия; 3ФГУП ИПХФ РАН, Черноголовка, Россия 4НОЦ «Медицинская химия» МГОУ, Черноголовка, Россия
Введение. Среди наиболее популярных и интенсивно развивающихся методов органосохраняющего лечения онкологических заболеваний можно выделить фотодинамическую терапию (ФДТ). Актуальной проблемой в настоя-
Спецвыпуск/ том 16 / 2017
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
