CC BY
38
10 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
ных сосудов по сравнению с ороговевающей формой рака. Также было отмечено отсутствие темновой токсичности При обеих формах плоскоклеточного РНГ обнаружена на культуре клеток HeLa как для исходных ППФ, так и для большая выявляемость Ройоркш^-лимфатических сосу- диад в действующих концентрациях вплоть до 2-10-4 М. дов по сравнению с LYVE-1+-сосудами. При плоскоклеточ- Заключение. Наблюдаемые эффекты увеличения фоном неороговевающем РНГ отмечены большие значения тодинамической активности диад фуллерен — краситель объемных плотностей Ройор1ашп+-лимфатических сосудов показывают перспективность подобных ковалентных по сравнению с ороговевающей формой рака. В то же вре- конъюгатов как новых эффективных фотосенсибилиза-мя численная плотность Ю-67+-клеток была больше торов для применения в фотодинамической терапии. при ороговевающей форме плоскоклеточного РНГ. Исследования поддержаны Программой Президиума РАН № 1 Заключение. При плоскоклеточном неороговевающем «Наноструктуры: физика, химия, биология, основы технологий» игран-РНГ отмечены большие значения объемных плотностей том РФФИ № 16-34-01156мола. СВ34+-кровеносных и Ройор1атп+-лимфатических сосудов по сравнению с гиперкератозом и ороговевающей формой А.А. Белоглазкина, А.А. Барашкин, А.Г. Мажуга, рака губы, что может быть структурной основой для более Е.К. Белоглазкина, Н.В. Зык выраженной прогрессии опухолевого роста и метастазиро- ИМИДАЗОЛ-4-ОНЫ вания. И ИХ ДИСПИРОПРОИЗВОДНЫЕ - НОВЫЙ КЛАСС ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ А.Ю. Белик, А.Ю. Рыбкин, Н.С. Горячев, ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ И.И. Пархоменко, А.А. Терентьев, Е.А. Хакина, Химический факультет ФГБОУВО О. А. Краевая, П. А. Трошин, А. И. Котельников «МГУ им. М.В. Ломоносова», Москва ФОТОДИНАМИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ Введение. Онкологические заболевания уносят огром-ВОДОРАСТВОРИМЫХ КОВАЛЕНТНЫХ КОНЪЮГАТОВ ное число человеческих жизней и занимают 2-е место ФУЛЛЕРЕН — ФЛУОРЕСЦЕИН И ФУЛЛЕРЕН — по смертности после сердечно-сосудистой патологии. Еже-ЭОЗИН В МОДЕЛЬНОЙ СРЕДЕ И НА КУЛЬТУРЕ годно в мире умирают от онкологических заболеваний бо-КЛЕТОК HELA лее 70 млн человек. Лечение и диагностика этих заболева-ФГБУНИПХФ РАН, Черноголовка, Московская область ний являются одними из наиболее важных направлений Введение. Производные фуллерена представляют ин- современной медицины. Последние 15 лет наблюдается терес для применения с точки зрения создания новых пре- повышенный интерес к поиску непептидных низкомолеку-паратов для фотодинамической терапии, так как способны лярных соединений, способных препятствовать взаимодей-с высоким квантовым выходом (~1) переходить в триплет- ствию клеточных белков р53 — MDM2. Белок р53 — опухо-ное состояние и эффективно генерировать синглетный левый супрессор, играющий важную роль в жизненном кислород 1O2. Однако эффективность фотодинамического цикле клетки и апоптозе, а MDM2 является его эндоген-действия фуллеренов ограничивается их слабым поглоще- ным ингибитором. Если блокировать взаимодействие этих нием в красной области спектра, наиболее удобной для фо- белков, то высвобождающийся р53 активирует процесс тодинамической терапии. Одним из путей решения данной разрушения опухоли, что является новым направлением проблемы является создание гибридных диад путем при- в терапии онкологических заболеваний. соединения к фуллерену красителя, эффективно поглоща- Цель исследования — разработка перспективного клас-ющего в видимой области спектра. са ингибиторов белков р53 — MDM2 в качестве новых неЦель исследования — определение фотодинамической пептидных низкомолекулярных противоопухолевых пре-активности водорастворимых поликатионной и полиани- паратов. онной диад фуллерен — флуоресцеин, а также полианион- Материалы и методы. Для синтеза целевых диспиросо-ной диады фуллерен — эозин. единений использованы доступные саркозин и изатин, Материалы и методы. Водорастворимые диады и ис- а кроме того, производные N, O-содержащих гетероцикли-ходные полизамещенные производные фуллерена (ППФ) ческих соединений, также легко синтезируемые с высоким синтезированы в ИПХФ РАН, структура соединений до- выходом в 1—2 синтетические стадии, исходя из коммер-казана методами инфракрасной и ультрафиолетовой спек- чески доступных препаратов. Структуры полученных со-троскопии, спектроскопии ядерного магнитного резонан- единений однозначно установлены с помощью комплекса са на ядрах 1Н и 13С и электроспрей-масс-спектрометрии. физико-химических методов (ядерный магнитный резо-Фотодинамическая активность соединений оценивалась нанс, инфракрасная масс-спектроскопия, элементный на культуре клеток HeLa по методу МТТ, а также в модель- анализ, в случае необходимости — рентгеноспектральный ной системе с помощью красителя НСТ. Разработаны ме- анализ). Биологическая активность синтезируемых соеди-тоды определения концентрации ППФ и диад в исследуе- нений определена в стандартном МТТ-тесте на цитоток-мых системах методом люминесценции и методом сичность на клеточных линиях LNCap, PC3, HCT р53 (+/+) спектроскопии гигантского комбинационного рассеяния. и HCT р53(-/-). Результаты. Было показано существенное усиление Результаты. Разработаны синтетические подходы к со-фотодинамической активности диад по сравнению с ис- зданию диспиропроизводных на основе различных гетеро-ходными соединениями как в модельной среде (в 3 раза для циклических производных, а именно: 2-тиогидантоинов, диады фуллерен — эозин и в 9 раз для диады фуллерен — их S-алкилированных производных, гидантоинов и окса-флуоресцеин), так и на культуре клеток HeLa (в 3 раза). золонов. Получена библиотека соединений с различными
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
11
заместителями, которая была исследована на цитотоксич-ность на клеточных линиях LNCap, PC3, HCT p53(+/+) и HCT p53( - / - ), а также на клеточной линии нормальных фибробластов легкого эмбриона человека. Для одного из соединений-лидеров было произведено разделение на хи-ральной колонке с выделением двух энантиомеров, один из которых показал высокую цитотоксичность. Для данных соединений также были исследованы механизмы гибели клетки и проникновения веществ в клетку.
Заключение. В рамках данной работы получена библиотека диспиропроизводных на основе гетероциклических соединений различных классов, проведено ее биотестирование. На основании связи «структуры — активность» выявлено соединение-лидер.
Работа вътолена при поддержке РФФИ, грант № 16-33-60166.
Ю.А. Белый, А. В. Терещенко
ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА СКЛЕРАЛЬНОГО ЛОЖА ПОСЛЕ ЭНДОРЕЗЕКЦИИ ВНУТРИГЛАЗНОГО НОВООБРАЗОВАНИЯ
Калужский филиал ФГАУ «МНТК«Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России
Введение. Эндорезекция внутриглазного новообразования до недавнего времени как метод лечения оспаривалась из-за возможности обсеменения опухолевыми клетками, а также вероятности системной диссеминации. Сегодня она начинает использоваться все чаще и чаще в комбинации с брахитерапией, термотерапией, фотодинамической терапией. Однако полностью риск обсеменения и диссеминации исключить невозможно. Поэтому актуальным является поиск методов обработки склерального ложа после эндорезекции внутриглазного новообразования.
Цель исследования — разработка методики обработки склерального ложа после эндорезекции внутриглазного новообразования с применением фотодинамического воздействия.
Материалы и методы. Под наблюдением находились 3 пациента в возрасте от 56 до 64 лет, которые поступили в клинику с подозрением на наличие внутриглазного новообразования. При обследовании у всех пациентов была диагностирована меланома хориоидеи (МХ) (T3N0M0). Диагноз был подтвержден при проведении флуоресцентной ангиографии глазного дна и ультразвукового В-скани-рования. Новообразования во всех случаях локализовались в заднем полюсе глаза; размеры основания составляли от 13 х 15 мм и более, высота — более 8 мм. Острота зрения — неправильная светопроекция. Для исключения риска обсеменения и диссеминации во всех случаях после удаления внутриглазного новообразования пациентам была проведена обработка склерального ложа с использованием фотодинамического воздействия. Техника операции: после эндорезекции внутриглазного новообразования на поверхность склерального ложа наносили фотосен-сибилизирующий гель, содержащий фотосенсибилизатор хлоринового ряда, и в воздушной среде осуществляли ин-траокулярное фотодинамическое воздействие по всей поверхности склерального ложа с захватом окружающих тканей на 1,5 мм.
Результаты. С учетом центральной локализации опухоли острота зрения после операции у пациентов не из-
менилась. В отдаленном послеоперационном периоде (от 1 до 2 лет) при осмотре глазного дна во всех 3 случаях на месте удаленной МХ определялась хирургическая ко-лобома хориоидеи без признаков пигментации по всему склеральному ложу и периферии. Рецидивов новообразований и отдаленных метастазов ни в одном случае выявлено не было.
Заключение. Вопрос лечения внутриглазных новообразований больших размеров, локализующихся в заднем полюсе глаза, был и остается спорным. По нашему мнению, внедрение новых технологий витреоретинальной хирургии, а также разработка интраокулярных способов, направленных на разрушение опухолевой ткани и снижение риска диссеминации и метастазирования, делает перспективным и обнадеживающим применение органосохраняющих методов лечения данной патологии.
Е.В. Белянина, М.В. Болотникова, М.В. Лыков ПРИМЕНЕНИЕ ЛАЗЕРНОЙ ДОППЛЕРОВСКОЙ ФЛОУМЕТРИИ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ОБЪЕКТИВНОСТИ ИЗМЕРЕНИЯ КАРРАГИНАН-ИНДУЦИРОВАННОГО ОТЕКА У КРЫС ООО «МБЦ «Генериум», Москва
Введение. Модель каррагинан-индуцированного отека (КИО) является классической моделью in vivo для оценки терапевтической эффективности противовоспалительных лекарственных препаратов. В основе патогенеза КИО лежит острое экссудативное воспаление, в котором важную роль играют нарушения микроциркуляции. При этом используемые методы оценки выраженности отека (например, взвешивание ампутированной отечной лапы) не обладают высокой достоверностью. К одному из современных методов исследования, позволяющему оценить состояние микроциркуляторного русла на тканевом уровне, относится лазерная допплеровская флоуметрия (ЛДФ).
Цель исследования — оценка выраженности КИО у крыс по микроциркуляции с использованием ЛДФ.
Материалы и методы. Исследование проведено на 20 аут-бредных самцах крыс Sprague Dawley массой тела 200—210 г; 1-я группа (n = 10) — контрольная, 2-я (n = 10) — опытная. Животных содержали в соответствии с установленными международными нормами. При воспроизведении модели КИО в левую лапу крыс обеих групп субплантарно под подошвенный апоневроз вводили 1 % раствор каррагинана в объеме 100 мкл. Животным 2-й группы после инъекции каррагинана внутримышечно вводили диклофенак в объеме 50 мкл (доза 3 мг/кг). Микроциркуляцию у крыс регистрировали до введения каррагинана и к 5, 10, 30, 60 и 180-й минутам после введения каррагинана в области подошвенного апоневроза (в 3 точках) с помощью ЛДФ-датчика аппарата MP150 (BIOPAC, США). Одновременно на сроке 3 ч определяли отек стандартным способом (взвешивание лапок). Анализ ЛДФ-грамм и расчет параметра микроциркуляции проводили с использованием программного обеспечения AcqKnowledge (BIOPAC, США).
Результаты. Капиллярный кровоток у животных 1-й и 2-й групп до инъекции каррагинана составил 26,5 ± 0,8 TRU (мл/мин на 100 г ткани). После инъекции каррагинана к 5-й минуте отмечено снижение микроциркуляции —
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
