CC BY
15
54 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
на фуллерен. Осуществлено ковалентное присоединение Cu (I) накапливаться в клеточном ядре. Впервые получены к производным фуллерена красителей флуоресцеина, лиганды на основе производных 2-алкилтио-5-(пиридил-эозина, противоопухолевого антибиотика рубоксила и дру- метилен-3,5-дигидро-4Н-имидазол-4-онов, содержащие гих красителей. Методами стационарной и кинетической фрагменты биотина и углеводов. Данные соединения яв-спектрофлуориметрии показано, что при возбуждении кра- ляются перспективными в качестве векторных лигандов сителя в составе гибридной структуры в синглетное воз- для направленной доставки в опухолевые клетки печени бужденное состояние происходит эффективный перенос и молочной железы. возбуждения или электрона с красителя на фуллерен с по- Заключение. В результате данной работы синтезирова-следующей генерацией активных форм кислорода. Фото- ны перспективные координационные соединения Cu (II), динамическая активность гибридных структур исследова- Cu (I) на основе 2-тиогидантоинов, 2-алкилтиоимидазо-лась в водных растворах и в структуре липосом по влиянию лов, обладающих противоопухолевой активностью, срав-на дезоксирибонуклеиновую кислоту и клеточные культуры. нимой с используемыми в клинической практике аналогами. Результаты и выводы. Показано, что объединение в од- Авторы выражают благодарность Российскому научному фон-ну гибридную структуру красителя и фуллерена позволяет ду за поддержку исследований. повысить фотодинамическую активность традиционных красителей в 5—50 раз или использовать красители, возбу- Н.В. Красногорова1, Ю.Д. Хромина1, Д.В. Новиков1. ждаемые только в синглетное состояние, что значительно С. Г. Фомина1, Н.Н. Гурина1, А. В. Алясова2, расширяет возможности поиска оптимальных красителей П.А. Будай3, В. В. Новиков1 для создания высокоэффективных фотосенсибилизаторов ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЕЙ ЭКСПРЕССИИ нового поколения. МАТРИЧНОЙ РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ Исследования поддержаны Программой Президиума РАН № 1 ГЕНОВ FCyRIIIa И FCyRIIip У БОЛЬНЫХ «Наноструктуры: физика, химия, биология, основы технологий» и гран- КОЛОРЕКТАЛЬНЫМ РАКОМ том РФФИ № 16-34-01156-мол_а. 1ФГАОУ ВО «ННГУ им. Н. И. Лобачевского», Нижний Новгород; О. О. Красновская, В.М. Герасимов, Т.В. Иванишин, 2ГБОУВПО НижГМА Минздрава России, Нижний Новгород; Ю.В. Федоров, А.Г. Мажуга, Е.К. Белоглазкина, 3ГБУЗНО НОКОД, Нижний Новгород Д.А. Скворцов, М.Э. Рубцова, О.А. Донцова, Н.В. Зык Введение. Низкоаффинный рецептор FcyRIII пред-НОВЫЕ КООРДИНАЦИОННЫЕ СОЕДИНЕНИЯ ставлен 2 генами: FcyRIIIa и FcyRIIIp, которые являются СО (II), CU (I, II) НА ОСНОВЕ ИМИДАЗОЛИН- паралогичными и идентичны на 98 %. Известно, что уровень 4-ОНОВ, ОБЛАДАЮЩИХ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ белка CD16 изменяется в сыворотке крови при онкологи-АКТИВНОСТЬЮ ческих заболеваниях и может служить важным прогности-ФГБОУВО «МГУ им. М.В. Ломоносова», Москва ческим показателем при мониторинге этих патологий. Введение. Открытие цисплатина в 1965 г. положило Однако особенности изменений уровней экспрессии генов начало широкому спектру исследований антипролифера- FcyRIIIa и FcyRIIIв являются мало изученными, и остается тивных свойств металлосодержащих координационных непонятным, какой из генов вносит вклад в повышение соединений. Измененный метаболизм опухолевых клеток сывороточного уровня растворимого CD16 у больных кои накопление ионов меди по сравнению со здоровыми тка- лоректальным раком (КРР). нями являются основой для разработки координационных Цель исследования — сравнение уровней экспрессии соединений меди с антипролиферативной активностью. матричной рибонуклеиновой кислоты (мРНК) генов Координационные соединения Co, основного компонен- FcyRIIIa и FcyRIIIp у больных КРР. та витамина В12, также представляются перспективными Материалы и методы. В работе использовали перифе-для разработки новых химиотерапевтических агентов. рическую кровь 23 больных КРР и 24 здоровых лиц. С по-Цель исследования — синтез координационных соеди- мощью специфичных праймеров проводили раздельное нений Co (II), Cu (II) на основе 2-тиогидантоинов, 2-ал- определение уровней мРНК генов FcyRIIIa и FcyRIIIp ме-килтиоимидазолов, обладающих противоопухолевой ак- тодом полимеразной цепной реакции с обратной транс-тивностью. крипцией с детекцией в реальном времени относительно Материалы и методы: реактивы Sigma Aldrich, ядерный референтного гена UBC с красителем Cy5 и гасителем RTQ2. магнитный резонанс, масс-спектроскопия, инфракрасная Результаты. Установлено, что как у здоровых лиц, так спектроскопия, электрофорез в агарозном геле, МТТ-тест, и у больных КРР уровень мРНК FcyRIIIa превышал уро-конфокальная микроскопия, TUNEL, проточная цито- вень мРНК FcyRIIIp в 3,3 и 2,8 раза соответственно. метрия. При этом у больных КРР в периферической крови наблю-Результаты. Были получены серии лигандов и соответ- далось снижение уровня мРНК FcyRIIIa и повышение ствующих координационных соединений Cu (I, II), Co (II), уровня мРНК FcyRIIIp (p < 0,05) по сравнению со здоро-на основе 2-тиогидантоинов, 2-алкилтиоимидазолов, обла- выми лицами. В исследуемой группе 16 пациентов получа-дающих цитотоксичностью по отношению к опухолевым ли полихимиотерапию. После лечения у больных КРР клеткам HEK-293, MCF-7, SiHa. Исследовано соотноше- наблюдалось повышение средних значений уровней мРНК ние структура — цитотоксичность полученных лигандов FcyRIIIa в 1,37 раза и мРНК FcyRIIIp в 1,23 раза по сравне-и координационных соединений. Показана способность нию с уровнями мРНК генов FcyRIII до лечения. Однако смешанновалентных координационных соединений Cu (II), наблюдаемые изменения не были статистически значимы.
№1 / том 15 / 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
55
Заключение. Таким образом, у больных КРР наблюдается повышение уровня экспрессии мРНК гена FcyRIIIß на фоне снижения уровня экспрессии мРНК гена FcyRIIIa. Полученные данные свидетельствуют о том, что повышение сывороточного содержания растворимого CD16 скорее всего связано с более высоким уровнем мРНК гена FcyRIIIß.
Г.И. Кричевская, А.С. Андрюшин, О.С. Слепова, С. В. Саакян, Е.Б. Мякошина, Т.А. Андреева, А. В. Трухина, Г. П. Захарова, А.М. Майбогин РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ БИОПТАТОВ ОПУХОЛЕЙ ОРБИТЫ И ГЛАЗА
ФГБУ «МНИИ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава России, Москва
Введение. Известно значение многочисленных офталь-мотропных возбудителей хронических инфекций в воспалительной патологии глаза. Однако только в единичных сообщениях оценивается их роль в этиопатогенезе опухолей глаза и орбиты.
Цель исследования — сравнительное изучение частоты выявления дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) широко распространенных офтальмотропных возбудителей в биоптатах опухолей глаза, орбиты и в плазме крови.
Материалы и методы. Биоптаты опухолей и плазма крови 28 пациентов с верифицированными лимфомами орбиты (ЛО, n = 7), меланомой хориоидеи (МХ, n = 10), ретинобластомой (РБ, n = 11) исследовали методом поли-меразной цепной реакции в реальном времени на наличие геномов вирусов простого герпеса 1-го и 2-го типа, вируса Эпштейна — Барр (ВЭБ), цитомегаловируса (ЦМВ), вирусов герпеса человека 6-го и 8-го типов (ВГЧ-6, -8), ток-соплазмы, хламидии трахоматис, микоплазмы гоминис и Ureaplasma spc.
Результаты. В целом геномы различных патогенов выявлены в 46 % биоптатов опухолей (86 % ЛО, 45 % РБ и 20 % МХ) и только в 3,6 % анализов плазмы крови (р > 0,05). Спектр возбудителей при ЛО, МХ и РБ разнился: при ЛО обнаружены только лимфотропные герпесвирусы (ВЭБ, ВГЧ-6, -8) с преобладанием ВЭБ; при РБ - ЦМВ, ВЭБ, ВГЧ-6; при МХ - хламидии, ВЭБ, ЦМВ.
Заключение. Выявлена высокая частота детекции ДНК ВЭБ и ВГЧ-6 в ткани ЛО по сравнению с МХ и РБ. Необходимы дальнейшие исследования для оценки роли герпес-вирусов и других обнаруженных микроорганизмов в этиопатогенезе опухолей глаза и орбиты.
М.Е. Кукушкин, А.Г. Мажуга, Е.К. Белоглазкина, Н.В. Зык СОЗДАНИЕ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ДИСПИРОПРОИЗВОДНЫХ 2-ТИОКСО-ТЕТРАГИДРО-4Н-ИМИДАЗОЛ-4-ОНОВ
Химический факультет ФГБОУВО «МГУ им. М.В. Ломоносова», Москва
Введение. В настоящее время актуальной является задача поиска непептидных низкомолекулярных ингибиторов белка MDM2, который взаимодействует с белком р53, являющимся опухолевым супрессором, играющим ключевую роль в жизненном цикле клетки и апоптозе. Ингибитор связывается с MDM2, за счет чего высвобождается р53,
который запускает процесс разрушения опухоли. Таким образом, повышение активности клеточного белка р53 путем блокирования взаимодействия с его эндогенным ингибитором онкобелком МБМ2 является новым направлением в терапии раковых заболеваний. Так, большинство синтезируемых соединений-ингибиторов в своей структуре имеют спироиндолиноновый фрагмент, который имитирует взаимодействие Trp23 из р53 с MDM2, заполняя в нем глубокий гидрофобный карман, являющийся наиболее важным участком для их связывания.
Цель исследования — синтез различных производных 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов двух структурных типов, содержащих в себе спироиндолиноновый фрагмент, для их дальнейшего биологического тестирования и определения зависимости структура — активность.
Материалы и методы. Исходя из наличия коммерчески доступных реагентов, разработаны способы получения спироиндолинонов путем 1,3-диполярного циклоприсо-единения продукта взаимодействия изатинов и N-замещенных аминокислот с производными 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов с образованием соединений, в структуре которых имеется жесткий каркас из 3 спиросочлененных гетероциклов, содержащий заместители различной природы, в основе которого лежит спироиндолиноновое ядро. Структура получаемых соединений была подтверждена с использованием комплекса физико-химических методов, таких как корреляционная ядерная магнитно-резонансная спектроскопия, масс-спектрометрия высокого разрешения (HRMS) и рентгеноструктурный анализ.
Результаты. Разработан универсальный синтетический подход к получению новых классов диспиропроизводных на основе 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов и предложен препаративно удобный метод синтеза данных соединений. На клеточных линиях LNCap, PC3 и HCT p53(+/+) и HCT p53(-/-) исследована цитотоксичность полученных соединений и определены предварительные соединения-лидеры. Методом конфокальной флуоресцентной микроскопии на примере клеточной культуры HEK-293 показано, что конъюгат диспиропроизводных на основе 2-тиоксо-тетрагидро-4Н-имидазол-4-онов и флуоресцентного красителя diSulfoCy5 проникает через клеточную мембрану.
Заключение. По полученным в ходе работы результатам было установлено, что исследуемые классы спироиндоли-нонов проявляют хорошую аффинность к сайту связывания белков р53 — MDM2, что дает возможность судить о потенциальной перспективности проводимых исследований.
Е.В. Кулигина, А.А. Немудрая, Г. В. Кочнева, В.А. Рихтер ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЙ ПРЕПАРАТ ЛАКТАПТИН: СПОСОБЫ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ
ИХБФМ СО РАН, Новосибирск
Введение. Создание систем адресной доставки лекарственных средств к клеткам опухоли является актуальным и активно развивающимся направлением исследований. Противоопухолевый препарат Лактаптин индуцирует апоптоз раковых клеток человека в культуре и тормозит рост и метастазирование опухолей животных и человека. Адресная доставка Лактаптина позволит повысить эффек-
№1 / том 15 / 2016
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
