CC BY
6
УДК 614.774 078
РАСПРОСТРАНЕНИЕ CL. PERFRINGENS В ПОЧВЕ
Доц. Г. И. Сидоренко
%
Кафедра гигиены II Московского медицинского института им. Н. И. Пирогова
CI. perfringens давно привлекает внимание исследователей как возбудитель газовой гангрены, а в последние годы и как возбудитель пищевых отравлений у человека. Установлено, что пищевые отравления у людей вызывают CI. perfringens типов А и F.
Роль CI. perfringens типов В, С и Е в патологии человека до сих пор не выяснена и нуждается в исследовании. Возможное этиологическое значение CI. perfringens типа D в патологии человека раскрыто пока лишь в нескольких сообщениях, которые, однако, требуют дополнительной проверки (White и Bullen; Kohn и Warrack).
В связи с этим сейчас изучается обсеменение CI. perfringens различных объектов внешней среды и, в частности, почвы.
Представляют интерес исследования, в которых проводилось ти-пирование выделенных штаммов (С. И. Наследышева с сотрудниками; Б. Д. Быченко и К. И. Матвеев; О. Р. Коваленко; В. И. Леньков и Б. Д. Быченко; Taelor и Gordon; Dalling; Bennets и др.). Названные авторы выделяли из почвы CI. perfringens типов А и D, a Dalling и Ben-nets— также и типов В и С. CI. perfringens типов Е и F, как нам известно, не выделялись из почвы.
В настоящем сообщении представлены материалы изучения обсеменения CI. perfringens почв различных районов страны. На протяжении 2 лет исследовано 932 пробы почвы. Почву отбирали в Москве и Московской области (120 проб), Мордовской АССР (63 пробы), Грозном (37 проб), Одессе (18 проб) и в Джамбульской области Казахской ССР (694 пробы), причем в последнем случае почву отбирали в экспедиционных условиях дважды: осенью 1962 г. (394 пробы) и весной 1963 г. (300 проб). Особый интерес к почвам Джамбульской области обусловлен тем, что в Южном Казахстане ежегодно (весной и в начале лета) наблюдается значительный падеж овец от инфекционной энтеро-токсемии, вызываемой CI. perfringens типа D.
Для проверки сообщений о возможной этиологической роли С1. perfringens типа D в патологии человека отбор проб различных объектов внешней среды производили в районах, где можно было ожидать максимального распространения этого микроорганизма.
Пробы почвы в Джамбульской области отбирали на огородах, в кошарах для овец, на тырле (месте ночевки овец), на пастбищах вблизи населенных пунктов, на отгонных пастбищах в песках, у мест водопоя животных (арыки, озера, колодцы).
Отрицательный результат протоколировали при отсутствии роста CI. perfringens после 3-кратного посева образца почвы.
Типирование выделенных штаммов производили на белых мышах с моновалентными антитоксическими сыворотками типа А, В, С, D и Е, приготовленными лабораторией индикации и . физиологии анаэробов научно-исследовательского института микробиологии и эпидемиологии им. Н. Ф. Гамалеи под руководством проф. К. И. Матвеева.
Материалы работы представлены ниже.
Характеристика выделенных штаммов CI. pefringens дана в табл. 1. Судя по табл. 1, почвы обсеменены CI. perfringens в 85,7% случаев. Однако в то время как обсеменение почв, которые постоянно загрязняются людьми и животными, составляет 97,9—99%. почвы •местностей с редким населением и, следовательно, мало загрязненные •обсеменены CI. pefringens значительно реже.
Таблица 1
Характеристика штаммов С1. рег!пп£еп5, выделенных из почвы различных районов
X •а Число проб,
л в из которых В ыделены штам-
X СО выделен мы С1. регМп- Токсигенные штаммы типа
а о С1. рег^п- ёепБ
Район и время о — рег«
отбора проб почвы 1=1 £ о а м 5* •
ж о г* с % О 9
О ^ с; \С абс. % о и * 2 О X X а А В и к
о О з: а. о м ь х 1 л\ * £ л
• ГГ С а и О) Л и ^ тш Ь X
Лжамбульская
область, осень %
1962 г. 394 269 68,3 499 314 185 174 -• - 11 - -
Джамбульская
область, весна
1963 г..... 300 297 99,0 565 102 463 391 6 18 46 2 -
Прочие районы
(Москва и Мос-
ковская область,
Мордовская
АССР, Грознен- •
ская область,
Одесса) .... 238 233 97,9 377 160 217 217
Всего. . . 932 799 85,7 1441 576 865 782 6 18 57 2 -
Полученные данные согласуются с работами Е. Н. Мишустина и М. И. Перцовской в отношении санитарно-показательного значения обнаружения С1. регГпг^епэ и титра его в почве.
При исследованиях в Джамбульской области весной почти все про бы почвы содержали С1. реГпгщепэ; в то же время осенью положитель ные находки были значительно ниже (68,3%). Это, по-видимому, объясняется тем, что осенью пробы чаще всего отбирались на отгонных пастбищах, в песках, вдали от населенных мест, где почва загрязняется животными и людьми в малой степени. Кроме того, следует учитывать, что лето и осень 1962 г. были засушливыми, влажность песка составляла 1—2%, а это также, вероятно, способствовало уменьшению положительных находок. Известно, что значительное высушивание почвы резко уменьшает количество микроорганизмов в ней. Высушиванием почвы объясняется также, очевидно, и тот факт, что при исследовании почвы осенью чаще выделялись нетоксигенные штаммы (около 63%), тогда как весной нетоксигенные штаммы выделены только в 18% проб. ч О потере токсичности микроорганизмами и об уменьшении их числа под влиянием высушивания почвы сообщают, в частности, Л. Н. Палец-кая и Н. Т. Киселева.
Интересно, что С1. ре^пг^епБ типов В, С, О, Е выделяется только в местах, где имеется большое число животных (Джамбульская область) и вовсе не выделяется из почвы районов, которые не используются как пастбища (Москва и Московская область, Одесса, Грозный, Мордовская АССР). По-видимому, все объясняется тем, что бактерионосителем указанных типов С1. регГпг^епэ служат животные.
Особенно наглядно это подтверждается анализом данных по Джамбульской области, представленных в табл. 2.
Судя по табл. 2, С1. регГпп^епэ содержится во всех пробах почвы огородов в населенных пунктах и почвы кошар для овец. Среднее место по обсеменению С1. регГпг^епэ занимает почва на тырле и у мест водопоя овец. На отдаленных пастбищах только половина (50,5%) изученных проб содержит С1. ре^пп^епв. Обращает внимание также тот факт,
Таблица 2'
Выделение С1. ре^гтдепБ в зависимости от места забора проб почвы
(по данным Джамбульской области)
Место забора проб ы • • почвы . т • ттт % Общ»*е число ИССЛеДО-ВЧННЫХ п-об почвы Число пгоб. из которых выделен С1. рег-frii gens I « 1 < ёт •. ^Ж ' f * $ • % ] Титр CI. perfringens • 1 Число проб почвы, из которых выделен С1. регГг^епя |
. С1ГДИ них
абс. % нетокси-генные • А в С D Е
• Пастбище ....... У водопоя ....... Тырло ........ Кошара........ Огороды...... 188 95 128 199 84 95 80 108 199 84 50.5 <4,2 <4.4 100 100 1,0 —0,001 0,1 —0,001 0,01 —0,0001 0.001—0,00001 0.01 0.00001 74 52 24 11 ?5 212 25 65 146 4Q 4 2 7 6 1 12 31 1
Всего. . . 694 566 31,t 1,0 —0,00001 196 • < Ю6 • 4 15 44 1
1 В образце почвы фиксировали наличие нетоксигенных штаммов только при отсутствии токсигенных.
2 В образце почвы фиксировали наличие штаммов типа А только при отсутствии штаммов типов В, С, 13 и Е.
Таблица .4
Выделение С1. реНппделБ в зависимости от вида
почвы
что титр С1. регГпг^епэ в почве пастбищ значительно ниже, чем в населенных пунктах и в местах постоянного пребывания животных. Табл. 2 показывает связь между наличием животных и выделением из почвы С1. ре^пг^епБ типов В, С, О и Е. Указанные типы микроорганизма выделялись только из почвы, где находились животные (кошара, тырло, и т. п.). Нахождение штаммов типов В, С и Е только в присутствии овец
позволяет сделать заключение об их малой устойчивости во внешней среде. В то же время О.регГгт-£епБ типа В неоднократно был выделен нами из почвы кошар, где не было овец на протяжении нескольких летних месяцев. Это позволяет судить о большей устойчивости микроорганизма типа О к неблагоприятным внешним воздействиям.
Вепг^э и ОаШп§ писали, что штаммы типов В, С и О могут длительное время сохраняться в почвах пастбищ. Наши данные подтверждают этот вывод только в отношении штаммов типа Э. Штаммы С1. регГпг^епэ типов В и С, по-видимому, обладают слабой сопротивляемостью к внешним воздействиям и быстро отмирают при попадании в почву.
И, наконец, С1. регГпг^епэ типа А, вероятно, является наиболее устойчивым, так как он обнаруживается гораздо чаще, чем все прочие типы, вместе взятые. Кроме того, микроорганизм типа А нередко выделяется из почвы пустынных районов, почти не загрязняемой человеком и животными (на отгонных пастбищах и песках).
Данные о выделении С1. регГппдепэ в зависимости от вида почвы приведены в табл. 3.
Почва Число исследованных проб почвы Число проб с обнаружением CI. perlringens • Титр CI. per fringe ns
абс. • %
Чернозем . . Песчаная . . Рыхлые пески Глинистая • 162 334 157 279 162 317 82 238 100 94,9 52.2 85.3 0,01—0.000001 0,01—0,00001 1,0 —0,001 1,0 —0,001
Таблица 4
Характеристика термоустойчивости спор выделенных штаммов CI. perfringens
Из табл. 3 следует, что все пробы черноземной почвы содержат <31. регГиг^епБ. Наименее загрязнены микроорганизмами рыхлые пески. Та же зависимость отмечается и в отношении титра С1. регГпп§еп5. Следует указать также, что из рыхлых песков выделялись, как правило, нетоксигенные штаммы. Возможное объяснение этому мы
щ/
уже давали выше.
Учитывая, что пищевые отравления, вызываемые у людей С1. регГиг^епБ типа А, ставятся в связь с термоустойчивостью спор указанного типа (НоЬЬб и соавторы; МсКлИор и др.), мы изучили устойчивость к кипячению спор всех выделенных штаммов. Данные термоустойчивости спор представлены в табл. 4. Как и следовало ожидать, споры типов В, С, И и Е оказались нетермоустойчивыми, они не выдерживали даже кратковременного кипячения. В то же время значительное число штаммов типа А обладает термоустойчивыми спорами (18%), которые, как мы уже писали выше, могут явиться возбудителями пищевых отравлений.
Тип CI. perfringens Число исследованных штаммов Термоустойчивость (в мин.)
до 10 30 • 60 90 120
A..... 782 449 192 90 30 21
IS • • # « 6 6 - - - -
С..... 18 18 - - - -
• • • • • 57 57 - - - -
w E..... 2 2
Выводы
1. CI. perfringens наиболее часто встречается в почвах, загрязняемых человеком и животными. Обсеменение почвы CI. perfringens зависит от вида ее и времени года.
2. Максимально распространены в почве CI. perfringens типа А и нетоксигенные штаммы в отличие от типов В, С, D и Е, выделяемых из ' почвы преимущественно в присутствии животных, которые, по-види-мому, являются носителями этих микроорганизмов.
3. В исследованных пробах 18% CI. perfringens типа А имели термоустойчивые споры, выдерживающие кипячение продолжительностью
более 1 часа.
ЛИТЕРАТУРА
Быченко Б. Д., Матвеев К- И. Ж. микробиол., 1959, № 12, стр. 62.—К о-валенко Я. Р. Анаэробные инфекции сельскохозяйственных животных. М., 1954.— Л е н ь к о в В. И., Быченко Б. Д. Ветеринария, 1958, № 11, стр. 22. — Мишустин Е. Н., Пер цо века я М. И. Микроорганизмы и самоочищение почвы. М., 1954 — Наследышева С. И., Сегаль М. С., Денисова Н. Я. и др. Труды Украинск. ин-та эпидемиологии и микробиологии. Харьков, 1946, т. 10, стр. 181. — Палецкая Л. Н., Киселева Н. Т. Тезисы докл. Конференции по вопросам сельскохозяйственной и почвенной микробиологии. Ташкент, 1961, стр. 22.—В е n n е t s Н., Vet. J., 1932. v. 88, p. 248. — D a 1 1 i n g Т., Vet. Rec., 1924, v. 4, p. 1043. — H о b b s В. C. et al., J.. Hyg. (Lond.), 1953, v. 51, p. 75. — Kohn J., W arrack G. H., Lancet, 1955, v. 1. p. 385.—Mc Kill op E. J., J. Hyg. (Lond.), 1959, v. 57, p. 31.—Taylor A. W., Gordon W. S., J. Path. Bact., 1940, v. 50, p. 271.—White M. H. G., Bullen J. J.. Lancet, 1955, v. 1, p. 384.
Поступила 15/VI 1964 r
THE SPREAD OF CI. perfringens IN THE SOIL
G. /. Sidorenko
From 932 samples of soil obtained from various regions the author recovered 1441 strains of CI. perfringens, of which 576 strains were nontoxigenic, 782 strains — of type A, 6 strains — of type B, 18 strains — of type C, 57 strains — of type D and 2 strains—of type E. The number of Clostridia in the soil depended on the season, the region under investigation and the type of soil. It was found that 18 per cent of the type A strains had thermoresistant spores, that stood boiling for more than an hour.
