BIOPSY BY PUNCTION IN DIAGNOSTICS OF THE PANCREAS DISEASES
Zakharov D.A., Mikhetko A.A., Perov V.V., Belova I.V., Bogdanets A.A. Авторы:
Захаров Д.А. — врач ультразвуковой диагностики, хирург; Михетько А.А. — зав. цитол. лаб., канд. мед.наук; Перов В.В. — врач цитол. лаб.; Белова И.В. — врач цитол. лаб.; Богданец А.А. — врач цитол. лаб.
ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА КЛЕТОЧНЫХ БЛОКОВ
ПРИ ЦИТОЛОГИЧЕСКОМ ИССЛЕДОВАНИИ ВЫПОТНЫХ ЖИДКОСТЕЙ
О.А. ЕРОХИНА, Л.Б. КЛЮКИНА, Е.В. ТОЛКАЧ, М.Н. УРБАНОВИЧ, Е.Е. МАКЕЙЧИК, О.О. КОХАНОВСКАЯ, Е.А. ГАПАНОВИЧ
РНПЦ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова, г. Минск, Республика Беларусь
Идентификация злокачественноой природы поражения при микроскопическом изучении выпотных жидкостей является важной и трудной задачей клинической цитологии. Современный уровень цитологической диагностики предполагает использование иммуноцитохимических исследований (ИЦХ), способствующих уточнению гистологической формы и органной принадлежности новообразований. При выполнении ИЦХ-анализа ряд авторов отдают предпочтение технике клеточных блоков (КБ) (L. Koss, 1992; W. Gray, 2003, J.M.M. Grefte и соавт., 2008; C. Queros и соавт1., 2008).
Цель исследования
Разработать методы приготовления КБ из выпот-ных жидкостей и оценить их пригодность в цитологической диагностике.
Материал и методы исследования
Разработка методов приготовления парафиновых КБ проведена на основе макро- и микроскопического исследования 70 выпотных жидкостей (54 плевральных и 16 асцитических), полученных у 61 онкологического больного. Жидкости обрабатывали с помощью центрифуги Kubota 8100 (Япония) или цитоцентрифу-ги Cytospin-4 («Thermo Shandon Limited», Великобритания), соответственно по 35 экссудатов, случайный отбор. Для получения цитологического материала экссудаты центрифугировали на центрифуге или ци-тоспине в течение 8 минут со скоростью 1500 об/мин. Всего с применением центрифуги и цитоспина приготовлено и окрашено по Паппенгейму соответственно 322 и 308 цитологических препаратов.
Микроскопическую оценку мазков экссудатов проводили с целью определения природы поражения и адекватности клеточного материала для использования метода КБ. Если клеточные элементы мазка были сохранными, клеточность высокая (материал выявлен более, чем в 50 % полей зрения) или
умеренная (материал выявлен в 10-50 % полей зрения) и обязательно присутствовали клетки опухоли, то из оставшейся жидкости готовили КБ. Всего из материала, обработанного с помощью центрифуги и цитоспи-на, приготовлено 134 КБ: соответственно 70 и 64 КБ (микропрепараты КБ окрашивали гематоксилином-эозином). При их микроскопическом изучении оценивали сохранность клеточного материала, диагностическую клеточность срезов, наличие клеток опухоли, характер расположения клеток в препаратах. Основанием для решения вопроса о пригодности препаратов КБ к проведению ИЦХ-реакции служили сохранность клеточных элементов, высокая и умеренная диагностическая клеточность, наличие клеток опухоли. Математическая обработка данных выполнена в компьютерной программе «Microsoft Office Excel», все расчеты проведены с достоверностью, превышающей 95 % (р<0.05).
Результаты исследования и их обсуждение
При разработке метода КБ важное значение придавалось получению из экссудата адекватного клеточного субстрата, обеспечивающего решение задач уточняющей онконозологической диагностики. Известно, что при исследовании цитологических препаратов вы-потных жидкостей определение характера процесса основано, прежде всего, на выявлении клеток злокачественной опухоли и оценке изменений цитоморфо-логических особенностей клеток мезотелия. Именно поэтому совокупность клеток злокачественной опухоли и мезотелия в цитологических мазках и микропрепаратах КБ обозначена как диагностический материал. Отдельно учитывали наличие в исследуемом экссудате клеток злокачественной опухоли, проведена количественная оценка указанных параметров. Согласно полученным данным, показатели диагностической и опухолевой клеточности цитологических мазков экссудатов достоверно выше аналогичных показателей в микропрепаратах КБ (88.6 ± 3.8 %
и 78.4 ± 3.6 %, 1=1.96, р<0.05; 81.4 ± 4.6 % и 67.9 ± 4.0 %, 1=2.19, р<0.05), что свидетельствует о необходимости совершенствования способа концентрации клеточного осадка выпотных жидкостей с целью повышения информативности препаратов КБ.
Сравнение показателей сохранности клеточного материала в парафиновых КБ не выявило статистически значимых различий: отличная сохранность клеток отмечена в 67 центрифужных блоках (95.7 ± 2.4 %) и 62 цитоспиновых (96.9 ± 2.2 %), удовлетворительная — в 3 (4.3 ± 2.4 %) и 2 КБ (3.1 ± 2.2 %) соответственно (1=0.36, р>0.05).
Предметом исследования явилась оценка характера расположения диагностического и опухолевого клеточного материала в цитологических препаратах и микропрепаратах КБ. Установлено, что характер расположения клеток опухоли и мезотелия в мазках и цитоспиновых микропрепаратах КБ совпадает досто-
верно чаще, чем в мазках и центрифужных микропрепаратах КБ (соответственно 92.2 ± 3.4 % и 80.0 ± 4.7 %, 1=2.09, р<0.05). Отмечено также, что в мазках и микропрепаратах КБ, значительная часть клеточных элементов представлена скоплениями, формирующими структуры, что давало возможность цитологу высказать суждение о гистологической структуре опухоли до выполнения ИЦХ-исследования (соответственно 67.2 ± 4.0 % и 61.9 ± 4.1 %).
Выводы
В соответствии с избранными параметрами микроскопическое изучение 134 препаратов КБ позволило признать пригодными для ИЦХ-анализа 107 КБ (79.9 ± 3.5 %), не выявлено различий данных показателей при исследовании препаратов центрифужных и цитоспиновых блоков (78.6 ± 4.9 % и 81.3 ± 4.9 % соответственно, 1=0.39, р>0.05).
USING THE CELL BLOCK METHOD IN CYTOLOGY OF SEROUS EFFUSIONS
Erokhina O.A., Kliukina L.B., Tolkach A.V., Urbanovich M.N., Makeichyk A.E., Kokhanovskaya O.O., Hapanovich A.A.
Авторы:
Клюкина Л.Б. — главный научн. сотр. отдела канцерогенеза с морфологической группой; доктор мед. наук, проф.; Ерохина О.А. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО, канд. мед. наук; Толкач Е.В. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО; Урбанович М.Н. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО; Макейчик Е.Е. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО; Кохановская О.О. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО; Гапанович Е.А. — врач лаб. диагностики цитол. лаб. ПАО.
АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЦИТОЛОГИИ В РЕСПУБЛИКЕ БАШКОРТОСТАН
Э.А. ИМЕЛЬБАЕВА, В.Н. РУЧКИН, Р.Х. АМИНЕВА, Ш.М. ХУСНУТДИНОВ, А.Ж. ГИЛЬМАНОВ, В.Х. МУСТАФИНА
Башкирский государственный медицинский университет, Республиканский клинический онкологический диспансер, г.Уфа, Республика Башкортастан
В Республике Башкортостан (РБ) датой рождения клинической цитологии считается 1970г., а цитологической службы РБ — 1986г., когда было принято решение об организации Централизованной цитологической лаборатории при РКОД и создана сеть цитологических лабораторий на территории Республики. В связи с этим 12 декабря 2011 г. была проведена Первая Республиканская научно-практическая конференция клинических цитологов, посвященная 25-летию цитологической службы РБ. Для участия в работе конференции были приглашены сотрудники онкологического диспансера (цитологи, онкологи, патологоанатомы, эндоскописты, хирурги), представители кафедр онкологии, поликлинической терапии, лабо-
раторной диагностики Башкирского государственного медицинского университета. Всего приняло участие 65 человек из 42 районов Республики, включая 42 врачей-цитологов. Первая часть конференции посвящена теме «Цитологическая диагностика заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ)», вызывающей наибольшие затруднения в работе цитологических лабораторий Республики. Рассмотрены вопросы, связанные с эпидемиологией опухолевых заболеваний ЖКТ, морфологической диагностикой предраковых заболеваний желудка, цитологическими исследованиями интраоперационного материала при заболеваниях желудка, цито-гистологических параллелей при язвенном раке желудка. Представлены материалы