ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ. XII СЪЕЗД АССОЦИАЦИИ КЛИНИЧЕСКИХ ЦИТОЛОГОВ РОССИИ (г. САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 28.09.2017г. – 30.09.2017г.) Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

ТЕЗИСЫ ДОКЛАДОВ

XII СЪЕЗД АССОЦИАЦИИ КЛИНИЧЕСКИХ ЦИТОЛОГОВ РОССИИ

(г. САНКТ-ПЕТЕРБУРГ 28.09.2017г. - 30.09.2017г.)

ОПЫТНАЯ ЭКСПЛУАТАЦИЯ АВТОМАТОВ ОКРАСКИ АФОМК-16, АФОМК-16-25 В ПАТОЛОГОАНАТОМИЧЕСКОМ ОТДЕЛЕНИИ БОЛЬНИЦЫ

АВАНЕСОВА В.А.*, БЕЗРУКОВ А.В., КУЗНЕЦОВ М.В., ЛЕЙБОВИЧ Б.Е.*, СНИХОВСКАЯ К.В.

ГК ЭМКО, ООО МЛТ (г. Москва, г. Дубна); *Дорожная клиническая больница на станции Воронеж-1 ОАО «РЖД» (г. Москва, г. Дубна, г. Воронеж, РФ).

Автоматы окраски АФОМК-16-ПРО АФОМК-16-25-ПРО, более года находятся в опытной эксплуатации в условиях патологоанатомического отделения (ПАО) Дорожной клинической больницы на станции Воронеж-1.

Автомат АФОМК-16-ПРО включает 16 станций, в т.ч. - станцию нагрева, станцию с проточной ванной, штативы и ванны на 12 стёкол. Автомат АФОМК-16-25-ПРО включает 16 станций, в т.ч. - станцию нагрева; станцию с проточной ванной; станцию-шлюз для автоматизированной загрузки - выгрузки штативов. Штативы и ванны - на 25 стёкол. Управление и программирование - с цветного сенсорного экрана (возможно программирование до 32 программ объёмом до 30 операций). Доступ к станциям произвольный, программируется не только последовательность и длительность операций, но и их режимы и параметры. В т.ч., возможно применение режимов, ускоряющих технологические процессы (активация, окунание, пр.). За счёт подключения к вентиляции существенно ограничивается загрязнение воздуха лаборатории парами растворителей и обеспечивается безопасная работа.

Опытная эксплуатация продолжается с августа 2016г. по настоящее время. Управление и программирование не вызывает затруднений у лаборантов. Отработаны варианты обзорной методики гемаксилином-эозином (Н&Е) для каждого прибора. Для АФОМК-16-ПРО опробованы некоторые специальные методики: окраска по

Ван Гизону, окраска альциановым синим и др. На АФОМК-16-25 рабочая производительность при окраске Н&Е - не менее 75 стёкол в час, загрузка осуществляется по одному штативу. Работает с автоматом одна лаборантка, включая выполнение единственной неавтоматизированной операции -заключение под покровное стекло. Для компактного автомата АФОМК-16-ПРО, производительность примерно в два раза меньше из-за меньшей ёмкости штативов. Для обзорной методики Н&Е при окраске по 1 штативу производительность до 36 препаратов в час при параллельной обработке с загрузкой по два штатива - до 48 стёкол в час. У АФОМК-16 ванны меньшей ёмкости - он экономичней работает с реагентами и это может быть удобно для специальных окрасок. Кроме того, у АФОМК-16 нет шлюза, а, следовательно, на одну технологическую станцию больше. Два автомата могут дополнять друг друга: АФОМК-16-25 - для обзорной методики, АФОМК-16 - для специальных методик. При использовании автоматов очень мал перенос реагентов между ваннами, что обеспечивает экономное расходование красок и других реагентов, так, например, на одном литре гематоксилина за 4 месяца было покрашено 12000 (двенадцать тысяч) стёкол. Приборы легко подключаются, обеспечивают безопасность работы за счёт принудительно вентилируемой рабочей камеры, имеют небольшие размеры и массу, умещаются на любом столе и в любом вытяжном шкафу. Могут работать с реагентами и

принадлежностями любых производителей (т.н. «открытая система»).

В процессе эксплуатации выявлены некоторые конструктивные недостатки, а именно: отдельные детали автоматов оказались выполненными из нестойкого к воздействию ксилола материала. Эти материалы заменены, переработана конструкция корпусных деталей автоматов,

деталей ванн и штативов АФОМК-16-ПРО. Кроме того, выявлены и устранены некоторые программные ошибки.

В настоящее время, автоматы могут успешно использоваться в патолого-анатомических отделениях ЛПУ с небольшой и средней загрузкой (до 450 - 500 стёкол в день).

TRIAL USAGE OF AUTOMATED SLIDE STAINERS AFOMK-16, AFOMK-16-25 IN THE PATHOLOGY DEPARTMENT OF HOSPITAL

Avanesova V.A.*, Bezrukov A.V., Kuznetsov M.V., Leibovich B.E.*, Snihovskaja K.V.

Авторы:

Аванесова В.А. - Врач-патологоанатом высшей квалификационной категории; Безруков А.В. - Ген. директор ООО МЛТ, кандидат техн. наук; Кузнецов М.В. - Инженер-методист ООО МЛТ ;

Лейбович Б.Е.* - Зав. ПАО больницы, врач-патологоанатом высшей категории; Сниховская К.В.- Лаборант ООО МЛТ.

АВТОМАТИЗАЦИЯ АНАЛИЗА ЦЕРВИКАЛЬНОГО МАЗКА

БАБУШКИН С.А.1, СОСНИН Д.Ю.2, ФАЛКОВ Б.Ф.1

1 - West Medica (г. Москва), 2 - Кафедра клинической лабораторной диагностики ДПО ФГБОУ ВО «ПГМУ им. академика Е. А. Вагнера» МЗ РФ (г. Пермь), 3 - West Medica (г. Пермь)

Сергей Андреевич Бабушкин - исполнительный директор West Medica, г. Москва Дмитрий Юрьевич Соснин - доктор медицинских наук, доцент кафедры клинической лабораторной диагностики ДПО ФГБОУ ВО «ПГМУ им. академика Е. А. Вагнера» МЗ РФ, г. Пермь Борис Фимович Фалков - директор по разработкам West Medica, г. Пермь.

Анализ цервикального мазка (Пап-тест) - выполняется в рамках цитологического исследования, которое, в свою очередь, помогает своевременно выявить онкологические заболевания (в частности, рак шейки матки).

Выполнение данного анализа - это большая ответственность и высокие требования, предъявляемые к врачам цитологам. При таких требованиях увеличивается и нагрузка на высококвалифицированный персонал. От врача-цитолога требуется выполнить большее количество исследований при сохранении качества и уменьшении затрат. Когда сотрудник устаёт после выполнения больших объемов работы, то степень влияния человеческого фактора возрастает, что в данном случае сказывается на производительности и качестве исследований. Решение задачи состоит либо в увеличении штата, либо в изменении режима работы. Увели-

чение штата влияет на экономику лаборатории, а выход персонала в ночное время, например, не снижает степень влияния человеческого фактора.

На помощь приходят новые технологии. Автоматизация анализа цервикального мазка и применение искусственного интеллекта. Применение этих технологий обеспечивает создание виртуального цитологического препарата, оценку адекватности мазка, поиск и прекласификацию клеток по ВеШеэёа. После завершения анализа система представляет к просмотру на мониторе сгруппированные по типу клетки как в виде галереи, так и на цифровой копии цитологического препарата. При этом значительно возрастает достоверность и объективность исследования, обеспечиваются высокие количественные и качественные характеристики анализа.

Функциональные возможности системы позволяют также проводить постоянное обучение врачей, благодаря демонстрации на экране монитора различных особенностей клеток, что напрямую влияет на качество выдаваемых результатов.

Возможности автономной работы с функцией удаленного доступа позволяют врачу-цитологу концентрированно применять свои знания и компетенции в самой ответственной части - подготовке заключения.

AUTOMATIZATION OF CERVICAL SCREENING TEST

S. Babushkin -"West Medica" company (Moscow)

D. Sosnin - department of clinical laboratory diagnostics of Perm State Medical University named after Academician E.

A. Wagner (PSMU) (Perm)

B. Falkov - "West Medica" company (Perm)

Авторы:

Sergey Babushkin is an executive director of "West Medica" company (Moscow)

Dmitrii Sosnin - doctor of medical sciences, associate professor at the department of of clinical laboratory diagnostics of Perm State

Medical University named after Academician E. A. Wagner (PSMU) (Perm) Boris Falkov - development director of "West Medica" company (Perm)

АНАЛИЗ ПАТОЛОГИИ ЩИТОВИДНОМ ЖЕЛЕЗЫ У ДЕТЕЙ, ОБСЛЕДОВАННЫХ В СПБ ДГБ №19 ИМ. К.А. РАУХФУСА В 2013-2016 ГОДАХ

БАРАШКОВА С.В.1, ВОРОБЬЕВ С.Л.2, ПРОДАНОВИЧ Е.М.1, БУДЬКО М.Б.1, ВИШНЕВКИНА Н.И.1

1 - ДГБ №19 им. К.А. Раухфуса, 2 - НМХЦ им. Н.И. Пирогова МЗ РФ (г. Санкт-Петербург, РФ)

Актуальность. Заболевания щитовидной железы (ЩЖ) занимают одно из ведущих мест среди эндокринной патологии любого возраста. Диагностика поражений ЩЖ имеет первостепенное значение в практике детского эндокринолога, поскольку ее функциональное состояние играет важную роль в интеллектуальном и физическом развитии и росте детей, может являться серьезным самостоятельным заболеванием или утяжелять течение других болезней. Стандартом исследования при узловых образованиях ЩЖ, наряду с оценкой эндокринологического статуса, является выполнение тонкоигольной аспираци-онной биопсии (ТАБ) под ультразвуковым контролем.

Цель. Проанализировать результаты цитологического и гистологического исследования пациентов, прошедших обследование и лечение в 2013-2016гг.

Материалы и методы исследования. В 20132016 годах в стационаре была выполнена прицельная ТАБ под ультразвуковым контролем 167 пациентам с узловыми образованиями ЩЖ. Пункцию проводили в положение лежа с за-

прокинутой головой с использованием шприца объемом 10 мл и иглой 25G. Контроль УЗИ осуществлялся с помощью стационарного аппарата Siemens 2000 с линейным датчиком 6-12 Гц. Материал из шприца наносился на предметные стекла, которые затем окрашивали эозином-метилено-вым синим по методике Май-Грюнвальд-Гимза. Статистический анализ базы данных проводили с использованием программы STATISTICA 8.0 с применением непараметрических методов, поскольку при анализе большинство показателей не подчиняется закону нормального распределения выборки. Значимость различий между группами считали при р<0.05.

Результаты и обсуждение. В стационаре 167 детям выполнено 199 ТАБ, из них в 50 случаях (25.1%) материал был признан неинформативным (в дальнейшем исключен из анализа). Во 2 категорию (доброкачественные процессы) по системе Bethesda включили 46.7% исследований, фолликулярные опухоли (ФО) выявлены в 16.1% случаев, на папиллярный рак (ПР) пришлось 9.6% заключений и предположение о раке обнаружены в 2.5% биопсий. По полу преобладали

девочки 1:1.33. Медиана возраста составила 14 лет (25 перцентиль - 13 лет; 75 перцентиль - 16 лет). По локализации образования чаще обнаруживали в правой доле ЩЖ (75 случаев против 46 в левой доле). Цитологические проявления аутоиммунного тиреоидита (АИТ) обнаружены в 50 случаях или в 33.6%, из них 84% вошли во 2 категорию, в 10% биопсий установлена сочетан-ная патология с ПР, в 2% - с ФО и 1% выявлен в 5 категории (р=0.003382). АИТ чаще обнаруживали при узловых образованиях размерами до 1 см (72.5%) и в 25% случаев с размерами узлов от 11 до 20 мм (р=0.002280). По полу, возрасту и локализации узлов ЩЖ статистически значимых различий не обнаружено. При анализе по категориям по системе ВеШеэёа выявлены различия по размеру узлов (р=0.0008). В категории доброкачественных образований 63.4% узлов были менее 1 см, 32.4% - от 1 до 2 см. Фолликулярные опухоли имели размеры менее 1 см в 41.9% случаев и от 1 до 2 см в 51.6%. В 6 категории папиллярные микрокарциномы составили 16.7% случаев, более чем в половине биопсий рак имел размеры до 2 см (55.5%) и в 27.8% размер опухоли превышал 2 см. При анализе ранговых корреляций Спирмена выявлена умеренная положительная связь размера узловых образований с категорией по системе ВеШеэёа (Р=0.35) и умеренная отрицательная связь АИТ с размером узлов (Р=0.31). На основании результатов ТАБ опухолевых поражений ЩЖ в стационаре было выполнено 40 оперативных вмешательств (36 детей). При гистологическом исследовании в 18 случаях установлен ПР, из них 10 опухолей с узловым типом роста: в 7 случаях опухоль была

инкапсулирована (в 5 случаях установлен солидный вариант строения, в 4 - фолликулярный и в 1 - типичный папиллярный), и в 5 случаях отмечался диффузный мультифокальный тип роста (4 с фолликулярным вариантом и 1 - в преобладающем tall-cell гистологического варианта). Фолликулярные аденомы были диагностированы у 14 детей, из них в 4 случаях онкоцитарный (В-клеточный) вариант. Фолликулярный мало-инвазивный рак установлен у 1 ребенка. Остальные случаи пришлись на диффузный нетоксический зоб (4 ребенка) и диффузный токсический зоб (1 ребенок). При сопоставлении цитологического и гистологического заключений в трех случаях были выявлены несоответствия диагнозов (7.5%), из них в 2 случаях при диагностике материала ТАБ фолликулярной опухоли в гистологическом исследовании был установлен диффузный аденоматозный нетоксический зоб. В 1 случае с цитологической картиной ФО (4 категория) был установлен ПР, что повлекло в последующем проведение тиреоидэктомии.

Заключение. Среди заболеваний ЩЖ у детей по результатам ТАБ 28.2% случаев относятся к опухолевой патологии, из них половина случаев по данным гистологического исследования составляет ПР. На момент диагностики размер ПР в большинстве случаев превышал 1 см. По материалам ТАБ в детском возрасте отмечается высокая частота лимфоцитарного тиреоидита (33.6%), который в 13% случаев представлял сочетанную патологию и сопровождал опухолевый процесс.

ANALYSIS OF THE THYROID PATHOLOGY IN CHILDREN EXAMINED IN RAUHFUS CHILDREN'S CITY HOSPITAL AT 2013-2016 YEARS

Авторы:

Барашкова С.В. — зав. ПАО СПб ДГБ №19 им. К.А. Раухфуса; Воробьев С.Л. — директор центра, кандидат мед. наук; Проданович Е.М. — врач-патологоанатом СПб ДГБ №19 им. К.А. Раухфуса; Будько М.Б. — врач-хирург СПб ДГБ №19 им. К.А. Раухфуса; Вишневкина Н.И. — зав. отд. УЗД СПб ДГБ №19 им. К.А. Раухфуса.

РЕЗУЛЬТАТЫ ЖИДКОСТНОМ ЦИТОЛОГИИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ ЭНДОМЕТРИЯ

БАТОРОЕВ Ю.К., КИСЛИЦЫНА Л.Ю, САМАРСКАЯ О.С., СОСОВА Л.Л., КОМИССАРОВА Э.К., ГАЛИАКБЕРОВА О.Н., ЛИСИЧНИКОВА И.В.

Иркутская государственная академия последипломного образования, Иркутский областной онкологический диспансер (г. Иркутск, РФ)

Диагностика заболеваний эндометрия, включая рак эндометрия, является актуальной проблемой современной морфологической диагностики.

Рак тела матки - самая частая злокачественная опухоль женских половых органов в развитых странах и вторая по частоте после рака шейки матки злокачественная опухоль женских половых органов в мире.

Несмотря на современные возможности ранней диагностики злокачественных новообразований, показатели заболеваемости и смертности от рака эндометрия не только не снижаются в последние десятилетия, но и имеют тенденцию к приросту.

Диагноз рака эндометрия устанавливают после биопсии эндометрия. Ретроспективный анализ данных пациенток с раком эндометрия свидетельствует о том, только у 34 (5%) есть морфологическая верификация болезни на допера-ционном этапе.

В связи с вышеизложенным, актуальным является применение цитологического метода для выявления предраковых заболеваний и ранних форм рака тела матки.

Метод жидкостной цитологии - это новая технология приготовления цитологических препаратов из жидкой клеточной суспензии. Существует несколько вариантов приготовления жидкостных препаратов. Одним из них является технология на основе клеточного обогащения в градиенте плотности и центрифугирование. (система SurePath фирмы Becton Dickinson).

На сегодняшний день жидкостная цитология аспирата эндометрия, в т. ч. на основе системы SurePath, широко применяется в различных странах, является основой скрининга рака эндометрия в Японии. Методика аспирации является более щадящей процедурой для пациентки, по сравнению с диагностическим выскабливанием, а получаемый материал по информативности и качеству не уступает гистологическому.

Цель: оценить возможность и эффективность жидкостной цитологиия эндометрия как скри-нингового метода в выявлении предрака и рака эндометрия.

Материалы и методы.

За период с января по июнь 2017г. в централизованной цитологической лаборатории Иркутского областного онкологического диспансера были исследованы 130 образцов аспиратов эндометрия методом жидкостной цитологии на основе технологии SurePath. Материал после аспиратции помещался во флакон с консервирующей жидкостью. Приготовление и окрашивание препаратов проходило стандартизиро-ванно, применялось окрашивание по методу Папаниколау. Все образцы изучались на увеличении х10, х20, х 40. При изучении материала была использована цитологическая классификация изменений эндометрия, разработанная группой японских цитопатологов the JSCC group study. В дальнейшем ретроспективно изучены и сопоставлены гистологические образцы соско-бов эндометрия у всех 130 женщин, проведены цитогистологические параллели. Разработан бланк цитологического заключения по жидкостной цитологии эндометрия.

Результаты исследования.

Исследованы образцы аспиратов эндометрия у 130 пациенток в возрасте от 24 лет до 79 лет (средний возраст 48 лет), проходивших лечение в отделении гинекологии Иркутского городского перинатального центра: по поводу атипического кровотечения в менопаузе - 30 пациенток; миомы матки - 17; полипа эндометрия - 20; гиперплазии эндометрия - 15; эндометрита - 5; патологии эндометрия - 15; патологии эндометрия в сочетании с аденомиозом - 13; НОМЦ в репродуктивном периоде - 8; опухоли яичника - 7.

По результатам цитологического исследования образцов аспиратов эндометрия на основе метода жидкостной цитологии даны заключения

в соответствии с классификация изменений эндометрия, разработанная группой японских ци-топатологов the JSCC group study.

При гистологическом исследовании образцов рак эндометрия был установлен в 16 случаях. Средний возраст пациенток с раком эндометрия составил в исследовании 69 лет.

При анализе 16 случаев рака эндометрия цитологически уверенно аденокарцинома была поставлена в 6 случаях; подозрение на аденокарци-ному дано в 2 случаях; в 2-х случаях выявлены атипичные эндометриальные клетки, вероятнее всего, связанные с наличием атипической гиперплазии; в 5 случаях - атипичная эндометриальная гиперплазия. В одном случае рака цитологически верифицирована гиперплазия эндометрия без атипии. Таким образом, большая часть пациенток (95%) на основании цитологического заключения была отнесена в группу риска, требующего дальнейшего углубленного обследования.

Выводы.

Наш опыт в использовании метода жидкостной цитологии эндометрия небольшой. Полученные результаты цитологического исследования образцов эндометрия и сопоставление их с окончательным гистологическим исследованием, позволяют сделать вывод о том, что жидкостная цитология эндометрия при достаточном опыте цитолога, правильном методологическом подходе к забору материала, при получении цитологом всех клинических данных о пациентке может служить как дополнением к традиционному гистологическому исследованию соскоба эндометрия, а также быть самостоятельным методом скринингового морфологического исследования для раннего выявления предрака и начальных форм рака эндометрия в амбулаторных условиях при оказании первичной медико-санитарной помощи, формируя группу женщин с высоким риском.

RESULTS OF FLUID CYTOLOGY OF PATHOLOGICAL CHANGES IN THE ENDOMETRIUM

Batoroev Yu.K., Kislitsina L.Yu., Samarskaya O.S., Komissarova E.K., Galiakberova O.N., Sosova L.L.

Авторы:

Батороев Ю.К. - проф. каф. онкологии ИГМАПО, доктор мед. наук; Кислицына Л.Ю. - зав. ЦЦЛ онкодиспансера;

Самарская О.С. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Комиссарова Э.К. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Галиакберова О.Н. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Сосова Л.Л. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера.

СПИНАЛЬНАЯ ПАРАГАНГЛИОМА. ОПИСАНИЕ КЛИНИЧЕСКОГО НАБЛЮДЕНИЯ С ПРИМЕНЕНИЕМ ТОНКОИГОЛЬНОЙ АСПИРАЦИОННОЙ БИОПСИИ

БАТОРОЕВ Ю.К., КИСЛИЦЫНА Л.Ю, САМАРСКАЯ О.С., СОСОВА Л.Л., КОМИССАРОВА Э.К., ГАЛИАКБЕРОВА О.Н. ЛИСИЧНИКОВА И.В.

Иркутская государственная академия последипломного образования, Иркутский областной онкологический диспансер (ГН. Иркутск, РФ)

Параганглиома - опухоль, исходящая из ткани нервных гребешков, которые развиваются в симпатических параганглиях. По классификации ВОЗ они включены в группу параганглиом и гломус-ных опухолей. Наиболее часто их диагностируют в области каротидного гломуса, яремной ямки, орбиты, спинномозговом канале, среднем ухе, в за-брюшинном пространстве. Эти опухоли называют

также зернисто-клеточной, альвеолярной опухолью, карциноидом, нехромаффинной парагангли-омой, хемодектомой. Обладают генетическим и функциональным родством с нервными клетками и волокнами.

Спинальная параганглиома (параганглиома терминальной нити конского хвоста) (Grade I) -довольно редкая, обычно инкапсулированная

опухоль, с характерным эндокриноклеточным альвеолярно-дольковым типом строения, гистологически схожая с симпатической параганглио-мой (феохромоцитомой). Чаще заболевают мужчины в возрасте 46 лет. Частота встречаемости 0.3 на 1.000000.

Микроскопическое строение параганглиомы любой локализации однотипно. В зависимости от группировки клеток, количества стромы и сосудов выделяют альвеолярный (альвеолярно-трабеку-лярный), трабекулярный, ангиоматозный и солидный варианты. Эти варианты часто сочетаются в одной и той же опухоли, но обычно преобладает один из них. При морфологическом исследовании опухоль обычно бывает овоидной или дольчатой формы, серо-коричневого или красно-коричневого цвета, часто окружена тонкой фиброзной псевдокапсулой. Размеры образования - от 1 до 13 см. Могут встречаться зоны некроза и кистозных изменений Параганглиома - это высокодиффе-ренцированная опухоль, содержащая бифазные или бифенотипичные группы хромофобных клеток (тип 1), сгруппированные в гнезда или дольки, окруженные одним слоем поддерживающих клеток (тип 2). Хромофобные клетки круглой или полигональной формы, содержат шаровидные или овоидные ядра с хорошо рифленым хроматином в гранулярной эозинофильной цитоплазме. Поддерживающие клетки, окружающие дольки хромофобных клеток, имеют веретенообразную форму с длинным цитоплазматическим отростком, напоминающим перицит. Хромофобные и поддерживающие клетки окружает фиброзно-со-судистая строма, содержащая эндотелиальные клетки, сосудистые перициты и нервные волокна. Гистологические признаки агрессивности пара-ганглиом включают центральный некроз, наличие инвазии в сосуды и митозы. Единственный достоверный признак злокачественности при па-раганглиоме - метастазирование. Клетки опухоли демонстрируют иммуногистохимические реакции с синаптофизином, хромографином, белками ней-рофиламентов и нейроспецифической энолазы в хромофобных клетках и с Б-100 белком в поддерживающих клетках.

Цитологическая диагностика параганглиом представляет определенные трудности из-за довольно редкой встречаемости опухолей в практике клинического цитолога.

Представляем клиническое наблюдение спи-нальной параганглиомы, диагностированной при тонкоигольной аспирационной пункции.

Больная Б., 67 лет, имеющая в анамнезе рак щитовидной железы Т3ШМ0 3ст 3 кл гр. (морфологически - папиллярный рак) обратилась в

Иркутский обл. онкодиспансер с жалобами на боль в области копчика, усиливающуюся в положении лежа на спине. Проведена МРТ: объемное кистозно-солидное образование копчика неправильной формы с четкими неровными контурами, размерами 44х32мм, протяженностью 46мм, неоднородной структуры, неравномерно накапливающее контраст. Со стороны прилегающих костных структур деструктивных изменений не выявлено. Под МСКТ навигацией выполнена тонкоигольная аспирационная пункция (ТАБ) образования копчика.

Цитологическое заключение по результатам ТАБ: найдены элементы опухоли из преимущественно мелких клеток, с некоторыми чертами плазмоцитоидности, со скудной нежной, в части клеток «хвостатой» цитоплазмой, с округло-овальными ядрами, с гранулярной структурой хроматина; клетки опухоли расположены солидно, формируют розеткоподобные и альвеолопо-добные структуры. Отмечается наличие одиночно расположенных крупных дву- и многоядерных клеток, с гиперхромными нагромождающимися ядрами. Митозы не обнаружены. Цитологическая картина опухоли с некоторыми чертами нейроэндокринной дифференцировки, возможно, параганглиома .

Пациентке проведено оперативное вмешательство: резекция костей таза комбинированная с реконструктивно-пластическим компонентом под ЭТН.

Гистологическое исследование операционного материла: макроскопически опухолевидное образование копчика 2,5*2*2 см. При микроскопическом исследовании в фиброзной строме обнаружен рост опухоли из округлых мономорф-ных клеток с формированием нодулеподобных, гнездных структур. Костные балки обычного строения, в межбалочном пространстве - очаги роста опухоли. Иммуногистохимическое исследование: клетки позитивны с Chrom A+, Synapt+фо-кально, SlOO+слабое окрашивание, CytAE1\AE3+, СЭ56+яркое диффузное окрашивание, Ki 67 до 1%. Заключение: гистоструктура и фенотип соответствуют спинальной параганглиоме .

Диагноз при выписке: спинальная параганглиома. Состояние после хирургического лечения. В настоящее время больная находится на динамическом наблюдении, данных, подтверждающих рецидив опухоли и метастазы, не получено.

Вывод: точный дооперационный цитологический диагноз параганглиомы при получении полноценного материала и правильной интерпретации клинических данных, особенностей цитологической картины возможен.

SPINAL PARAGANGLIOMA. CLINICAL CASE PRESENTATION WITH APPLICATION OF FINE NEEDLE ASPIRATION

Batoroev Yu.K., Kislitsina L.Yu., Samarskaya O.S., Komissarova E.K., Galiakberova O.N., Sosova L.L.

Авторы:

Батороев Ю.К. - проф. каф. онкологии ИГМАПО, доктор мед. наук; Кислицына Л.Ю. - зав. ЦЦЛ онкодиспансера;

Самарская О.С. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Комиссарова Э.К. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Галиакберова О.Н. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Сосова Л.Л. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера.

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ СКРИНИНГ НА РАК ШЕЙКИ МАТКИ С ТОЧКИ ЗРЕНИЯ РОССИЙСКИХ ПРОИЗВОДИТЕЛЕЙ МЕДИЦИНСКИХ ИЗДЕЛИЙ

БЕЗРУКОВ А.В., БУХАРОВ С.Г., КУЗНЕЦОВ Д.А. МИШУКОВА А.А.

ГК ЭМКО, ООО МЛТ (г. Дубна - г. Москва, РФ)

Скрининг на рак шейки матки (РШМ) - самый успешный за всю историю скрининг онкологических заболеваний. Наиболее широко и длительно скрининг рака шейки матки проводят с применением цитологического исследования мазков с шейки матки. В последнее время в качестве дополнения цитологического скрининга, используется и ВПЧ тестирование, что позволяет в некоторых случаях добиться более экономичного расходования средств за счёт удлинения интервалов обследования. Тем не менее, цитологические методы являются основой для скрининга на РШМ.

Согласно приказам Минздрава РФ, согласно проекту Национальной стратегии борьбы с онкологическими заболеваниями, скрининг должен проводиться с применением окрашивания мазков по Папаниколау, т.е. путём выполнения т.н. Пап-теста. Окраска по Папаниколау даёт препараты, удобные для скрининга, но технологически довольно сложна, при выполнении анализов в режиме скрининга, требует автоматизации, обеспечения готовыми реактивами и принадлежностями.

Какое состояние обеспечения необходимыми приборами, материалами, принадлежностями? Что нужно для материального обеспечения выполнения организованного цитологического скрининга в России?

На основе данных сайтов Росздравнадзора, Госзакупрок, литературных и собственных дан-

ных, проведен анализ номенклатуры и объёмов поставок изделий, которые могут использоваться при цитологическом скрининге, степень обеспеченности потенциальных потребностей ЛПУ России при широком внедрении организованного цитологического скрининга изделиями отечественного производства.

В России с 2012г. выпускается и успешно используется для окраски по Папаниколау автомат окраски мазков АФОМК-13-ПАП (ООО ЭМКО), с 2014г. выпускается автомат окраски АОМ-1 (ЗАО «ОРИОН МЕДИК»), с 2016г. выпускается автомат окраски АФОМК-16 (ООО МЛТ, ГК ЭМКО), заканчивается регистрация высокопроизводительного автомата АФОМК-16-25 (ООО МЛТ, ГК ЭМКО). Автоматы окраски производства ГК ЭМКО (http://www.emco.ru/), за счёт особенностей конструкции, в несколько раз дешевле автоматов других производителей, в т.ч., примерно в три раза дешевле автомата АОМ-1 российского производства. Эти бюджетные автоматы дают возможность закупки достаточного количества приборов для выполнения пробоподготовки децентрализовано - в местах забора клеточного материала, что может положительно повлиять и на качество препаратов и на охват контингента скрининга. В РФ производится набор реагентов для окраски по Папаниколау (ООО НПФ "АБРИС+"), регистрируется ещё один набор реагентов для окраски по Папаниколау с повышенной стабильностью в российских климатических

условиях (ООО МЛТ, ГК ЭМКО), с 2016г. выпускается набор реагентов для ЖЦ Цитоскрин (ООО «Хоспитекс Диагностикс»). ЗАО «Диа-клон» выпускает широкую номенклатуру одноразовых принадлежностей (щётки, зеркала и пр.) для проведения скрининга.

Проведены оценки осуществимости скрининга по разным технологиям.

По экономическим причинам при выборе технологии цитологического скрининга наи-

более вероятно использование традиционного ПАП-теста. Эта технология до недавнего времени мало использовалась в России, в связи с чем, необходимо не только материальное обеспечение скрининга, но и обучение лаборантов, гинекологов и цитологов.

Программа обучения технологиям пробо-подготовки при ПАП-тесте подготовлена в ГК ЭМКО.

CYTOLOGICAL SCREENING FROM THE POINT OF VIEW OF RUSSIAN MANUFACTURERS OF MEDICAL EQUIPMENT

Bezrukov A.V., Buharov S.G, Kuznezov D.A., Mishukova A.A.

Авторы:

Безруков А.В. - Ген. директор ООО МЛТ, к.т.н.; Бухаров С.Г. - Бизнес-аналитик ООО МЛТ; Кузнецов Д.А. - Стажёр ООО МЛТ; Мишукова А.А. - Ген. директор ООО ЭМКО.

ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ПЕРВИЧНОМ МЕДИАСТИНАЛЬНОЙ В-КРУПНОКЛЕТОЧНОЙ ЛИМФОМЫ

БОЛГОВА Л.С., АЛЕКСЕЕНКО О.И., ТУГАНОВА Т.Н.

Национальный институт рака МЗ Украины, г. Киев

Введение. Первичная медиастинальная В-крупноклеточная лимфома (ПМВКЛ) это особый тип диффузных В-крупноклеточных лим-фом, возникающих из тимических медуллярных В-клеток (В-клеток стромы медуллярной части тимуса) и представляет собой клон В-клеток, вышедших из герминативного центра с мутацией специфического антигена. При этом выявлен набор генетических хромосомных повреждений (2р,6р,7д, 9р,12,Х), частично сходных с таковыми при лимфоме Ходжкина (9р,Хд).

Частота обнаружения ПМВКЛ составляет 2-4% среди всех неходжкинских лимфом. Данный тип лимфом наблюдается преимущественно у женщин молодого возраста (30-40 лет). ПМВКЛ выявляется в передне-верхнем средостении без сопутствующей периферической лимфаденопа-тии, спленомегалии и поражения костного мозга. Опухоль обычно больших размеров и обладает местным инвазивным ростом, инфильтрируя легкое, плевру, грудную стенку и перикард. При прогрессии наиболее часто поражаются легкое,

почки, надпочечники и чрезвычайно редко -костный мозг.

Цель исследования - представить цитомор-фологические особенности ПМВКЛ.

Материал и методы исследования. Изучены цитологические препараты трансторакальных пунктатов опухолей у 5 больных с новообразованиями средостения. У 4 пациентов наблюдали опухоль переднего средостения без периферической лимфаденопатии, в двух наблюдениях клинически подозревали центральный рак легкого, в одном из них с развитием плеврита. Больные в возрасте от 29 до 43 лет. Среди них - 4 женщины и один мужчина. Во всех наблюдениях проведена гистологическая верификация с с использованием иммуногистохимических реакций. Цитологические препараты окрашены по методу Пап-пенгейма и исследованы с помощью микроскопа OLYMPUS CX21 при увеличениях: х100; х200; х400; х1000.

Результаты исследований. При обзорной микроскопии, обращает на себя внимание на-

личие базофильных некротических масс в виде тяжей, среди которых, определяются скопления резко полиморфных, от мелких до крупных (в 5 раз крупнее зрелого лимфоцита) ядер, лишенных цитоплазмы. Лишь в отдельных клетках можно было рассмотреть светлую небольшую отростча-тую цитоплазму. Клеток в препаратах мало, они с явными признаками распада. В мазках выявлены преимущественно «голые» светлые нормохром-ные или гипохромные полиморфные ядра с мелкозернистой, иногда неравномерной структурой хроматина. Встречались многолопастные мелкие и крупные светлые ядра, что свидетельствует об

их В-лимфоидном генезе. Типичные лимфоидные элементы почти не встречали. Изредка наблюдали мелкие светлые лимфоцитоподобные клетки, но без цитоплазмы и поэтому можно только догадываться об их лимфоидном генезе.

Заключение. Проведенные исследования позволили определить характерные цитоморфоло-гические признаки первичной медиастинальной (тимической) В-клеточной лимфомы, которая по клеточному составу, цитологическим признакам и по фоновому компоненту принципиально отличается от таковой при других неходжкинских лимфомах.

CYTOLOGICAL EXPESIALLY OF PRIMARU MEDIASTINUM B-LARGE CELL LYMPHOMA

Bolgova L.S.) Alekseenko O.I., Tuganova T.N.

Авторы:

Болгова Л.С. - зав. научно-иссл. лаб. клин. цитологии института, доктор мед. наук, проф.; Алексеенко О.И. - врач лаб. цитол. диагностики института, кандидат мед. наук;

Туганова Т.Н. - ведущий научн. сотр. научно-иссл. лаб. клин. цитологии института, кандидат мед наук.

ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА ТИМОМ

БУТЕНКО Г.Р., САВОСТИКОВА М.В.

РОНЦ им. Н.Н.Блохина» МЗ РФ, (г. Москва)

Тимома - органоспецифическая злокачественная опухоль вилочковой железы, которая в соответствии с классификацией ВОЗ (2015) разделяется на пять основных гистологических подтипов - А, АВ, В1, В2, В3. Точный цитологический диагноз тимомы довольно трудный. Выраженная вариабельность морфологического строения и сходство микроскопических признаков тимомы с другими новообразованиями средостения нередко вызывают затруднения при интерпретации материала аспирационной тонкоигольной биопсии (АТБ). Вопросы цитологической верификации этих опухолей до настоящего времени не изучены, не разработаны критерии их дифференциального диагноза.

Цель работы: выявить цитоморфологические критерии дифференциальной диагностики тимом.

Материалы и методы исследования: изучены клинико-морфологические данные 187 пациентов с опухолями средостения (тимомы - 45 больных, рак тимуса - 7, медиастинальная лимфома - 25,

лимфома Ходжкина - 22, герминогенные опухоли - 23, мезенхимальные и нейрогенные опухоли - 19, метастатический рак - 46). Исследовали материал АТБ (438 препарата), интраоперацион-ные отпечатки опухоли (287 препаратов).

Результаты исследования. Тимома А состоит преимущественно из веретенообразных эпителиальных клеток, формирующих плотные структуры и пучки. Цитологическая картина может иметь сходство с другими веретеноклеточными опухолями: карциноидом, мезенхимальными новообразованиями (в частности, с солитарной фиброзной опухолью). Характерным для соли-тарной фиброзной опухоли является наличие ан-гиоперицитомаподобных структур, ветвящихся сосудов. Основным цитологическим критерием всех тимом типа В является наличие эпителиальных клеток опухоли полигональной формы и лимфоцитов в различных пропорциях. Цито-грамма тимомы тип В1 состоит, в основном, из лимфоцитов, эпителиальные клетки - единич-

ные, и трудно различимы среди большого числа зрелых и незрелых лимфоцитов. Тимому В1 необходимо дифференцировать с лимфомами, лимфоидной гиперплазией. В большинстве случаев, при адекватном материале АТБ цитологические признаки первичной медиастинальной В-крупноклеточной лимфомы (ПМВЛ) довольно отчетливы. Цитограмма ПМВЛ может быть представлена несколькими вариантами: из относительно мономорфных клеток, из клеток с многодольчатыми, многолопастными ядрами, из полиморфных клеток. Труднее различить ти-мому В1 и Т-лимфобластную лимфому, при которой клетки опухоли преимущественно малых и средних размеров. Тимома В2 и, особенно В3 характеризуются выраженным эпителиальным компонентом. При тимоме В2 эпителиальные клетки располагаются небольшими группами, лимфоидных элементов довольно много, в ци-тограмме тимомы В3 - эпителиальные клетки опухоли преобладают, а лимфоциты единичные. Цитограмма тимомы В3 может имитировать гер-миногенные опухоли (семиному), карциноид, рак тимуса, метастатический рак. Цитоморфологи-ческие признаки разных типов рака вилочковой железы сходны с их аналогами из легких или других органов. Для диагностики рака тимического происхождения существенное значение имеют клинические и рентгенологические данные. Из метастатических новообразований в лимфатические узлы средостения наиболее часто наблюдали мелкоклеточный рак (около 50% случаев), реже -аденокарциному и плоскоклеточный рак легкого, медуллярный рак щитовидной железы, почечно-клеточный рак, лейомисаркому матки, рак яичника, желудка, эмбриональный рак яичка. Кисто-зный тип цитограммы может наблюдаться при тимоме с кистозной дегенерацией, а также и при других медиа-стинальных новообразованиях -тератоме, бронхогенной, перикардиальной кисте. В цитограмме зрелой тератомы на фоне кистоз-

ного компонента встречают и другие элементы тератомы - плоский, респираторный эпителий, жировую, хрящевую ткань, элементы придатков кожи, ацинарный эпителий поджелудочной железы и другие. Цитологический диагноз при ки-стозных образованиях в значительной степени зависит от качества материала, который должен быть получен из стенки или солидного участка кистозной опухоли

ВЫВОДЫ

Вследствие вариабельности клеточной картины разных типов тимом, дифференциальный диагноз рационально проводить по преобладающему типу цитограммы:

Веретеноклеточный

• Тимома тип А

• Веретеноклеточный карциноид

• Мезенхимальные опухоли (солитарная фиброзная опухоль)

Преимущественно лимфоцитарный

• Тимоматип В1

• Лимфома

• Гиперплазия лимфатического узла

Преимущественно эпителиоидный

• Тимома тип В2, В3

• Карциноид

• Герминогенные опухоли (семинома)

• Рак тимуса

• Рак метастатический

Кистозный

• Кистозная тимома

• Тератома

• Бронхогенная, перикардиальная киста

Выявленные цитоморфологические критерии дифференциальной диагностики тимом способствуют точной цитологической верификации в дооперационном периоде. Цитологическая диагностика тимом в амбулаторных условиях позволяет сократить сроки обследования больного и своевременно планировать лечебную тактику.

CYTOMORPHOLOGICAL DIFFERENTIAL DIAGNOSTICS OF Ш THYMOMS

Би1епко С.И., 5ауо8Икоуа М.У.

Авторы:

Бутенко Г.Р. -

Савостикова М.В. - зав. лаб. клинической цитологии РОНЦ, кандидат мед. наук.

ОШИБКИ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ В ГИНЕКОЛОГИИ

Н.Н. ВОЛЧЕНКО

МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России

Ошибки цитологической диагностики могут быть технические (62.5%), объективные (17.2%), субъективные (20.2%); гиподиагностика и гипердиагностика. Причины гиподиагностики: малое количество материала, выраженные дистрофические изменения в опухоли, замещение опухолевой ткани новообразованными сосудами, гистиоцитами, лимфоцитами, и фиброзом, что может быть неправильно истолковано как хроническое воспаление. Причины гипердиагностики: выраженная пролиферация и реактивные изменения клеточных элементов, воспалительные изменения с наличием крупных макрофагальных и гистио-цитарных элементов с пролиферацией эндотелия сосудов, объективные сложности оценки морфологической картины, отсутствие клинических данных. Может быть неправильно определена гистологическая форма опухоли, особенно при низ-кодифференцированных новообразованиях.

Наиболее типичные цитологические ошибки в гинекологии: дифференциальная диагностика между незрелой плоскоклеточной метаплазией и CIN, диагностика аденокарциномы шейки матки

и пограничных опухолей яичников, выявление микрометастазов в лимфатических узлах, особенно при срочной интраоперационной диагностике, дифференциальная диагностика между пограничной опухолью яичников и эндосаль-пингозом и эндометриозом брюшины и лимфатических узлов, дифференциальная диагностика высокодифференцированой мезотелиомы брюшины и опухолей яичников и другие.

Пути снижения морфологических ошибок: поиск наиболее информативных морфологических признаков определенных нозологических форм, разработка дифференциальных диагностических морфологических критериев, использование современных морфологических классификаций, унификация технических приемов, совершенствование методов забора материала, внедрение новых видов микроскопирования, применение высокотехнологичных методов уточняющей диагностики, повышение квалификации врачей-морфологов и лаборантов.

ERRORS OF CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS IN GYNECOLOGY

Volchenko N.N. Авторы:

Волченко Н.Н. - рук. отдела патологии института, доктор мед. наук, проф.

ПРОБЛЕМЫ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОМ ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКОИ ДИАГНОСТИКИ НОВООБРАЗОВАНИИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ВЛАДИМИРОВА А.В, НОВИК В.И.

НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова Минздрава России (г. Санкт-Петербург, РФ)

Актуальность. Наиболее часто встречающимися новообразованиями, в дифференциальной цитологической диагностике которых возникают затруднения, являются фиброаденома, простая и атипическая протоковая гиперплазия, внутри-протоковая папиллома, склерозирующий аденоз, высокодифференцированный протоковый рак, папиллярный, слизистый, криброформный рак, дольковый рак, а также высокодифференциро-ванный рак in situ, входящие в т.н. «серую зону». Критерии дифференциальной цитологической диагностики этих процессов изучены недостаточно, что нередко ведет к ошибочным диагнозам.

Цель. Проанализировать ошибки цитологической диагностики и уточнить диагностические критерии доброкачественных процессов и рака молочной железы (РМЖ).

Материалы и методы исследования. В период с 2009 по 2013 гг. выполнено 4091 цитологическое исследование у 3415 пациентов с новообразованиями молочной железы Проведены ретроспективные цитогистологические сопоставления у 1434 пациентов. Ошибочные диагнозы в отношении рака даны в 21 (1.5%) наблюдении (8 ложно-отрицательных и 13 ложноположительных).

Результаты исследования и их обсуждение. При пересмотре ложноотрицательных цитологических заключений в 6 из 8 случаев в мазках отмечена пролиферация эпителия железы. Признаки ядерной и клеточной атипии отсутствовали или были выражены слабо. При гистологическом исследовании выявлено 2 случая слизистого рака, 1 инкапсулированный папиллярный рак и 3 случая протокового рака, причем 2 из них - неин-вазивные формы. В 2 наблюдениях инвазивного протокового рака цитологические признаки злокачественности в мазках были недооценены.

Ложноположительные заключения даны в 13 наблюдениях. В 4 случаях при гистологическом

исследовании выявлена атипическая гиперплазия протокового эпителия, причем в 2-х из них -только при ретроспективном пересмотре гистологических препаратов. При цитологическом исследовании выявленные атипические изменения клеток ошибочно расценены как признаки злокачественности. В 3 случаях гистологически диагностирована фиброаденома, у 2 пациенток - внутрипротоковая папиллома, у 2 - простая протоковая гиперплазия. В цитологических препаратах отмечена выраженная пролиферация эпителия с укрупнением клеток и ядер и их слабым или умеренным полиморфизмом. У одной пациентки гистологически выявлена липограну-лема. Ложноположительное заключение в этом случае обусловлено выраженными дегенеративными изменениями клеток эпителия с укрупнением ядер, наличием некротического фона. В одном наблюдении ошибочное заключение о наличии рака обусловлено низким качеством окраски препарата (гистологически выявлены фиброзно-кистозные изменения).

Выводы. Наибольшее число ложноположи-тельных заключений выявлено при гиперплазии протокового эпителия, фиброаденоме и внутри-протоковой папилломе. Ложноотрицательные заключения чаще всего встречали при протоко-вом (неинвазивных формах) и слизистом раке. В ряде случаев цитологические признаки доброкачественных и злокачественных процессов перекрывают друг друга, и заключение может быть высказано лишь в предположительной форме. Минимальное число ошибочных заключений обусловлено переоценкой или недооценкой степени атипии клеток вследствие плохого качества цитологического препарата и недостаточной подготовленности специалиста, проводящего анализ.

PROBLEMS OF DIFFERENTIAL CYTOMORPHOLOGICAL DIAGNOSIS OF BREAST TUMORS

Vladimirova A.V., Novik V.I.

Авторы:

Владимирова А.В. - врач КЛД лаб. цитол. НИИ онкологии, кандидат мед. наук;

Новик В.И. - ведущий научн. сотр. отдела морфологии опухолей, врач КЛД НИИ онкологии, профессор.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ В ДИАГНОСТИКЕ ОПУХОЛЕЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ ИЛИ ЧТО ЖДАТЬ ОТ BETHESDA REPORTING SYSTEM FOR THYROID FNA CYTOLOGY II (2017)

ВОРОБЬЕВ С.Л., КУЛЯШ А.Г., ПАВЛОВА А.А., МАЛЕК А.В.

Национальный центр клинической морфологической диагностики; НИИ онкологии имени Н.Н. Петрова (г. Санкт-Петербург, РФ)

Совершенствование УЗИ-диагностики узлов щитовидной железы (ЩЖ), алгоритмов их оценки для последующего морфологического исследования посредством тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ) явилось несомненным достижением последних лет. Наряду с этим, повышению качества медицинской помощи пациентам с опухолевой патологией ЩЖ способствовали унифицированные системы морфологических исследований с оценкой рисков наличия злокачественных новообразований, определяющие тактику ведения пациентов, в частности, наибольшее распространение получила Bethesda Reporting System for Thyroid FNA Cytology (USA, 2009).

Несмотря на очевидные достоинства, эта классификационная система имеет и недостатки, обусловленные в первую очередь ограничениями метода традиционной цитологии. В первую очередь, это находит отражение в формировании так называемых групп «промежуточной/неопределенной цитологии»: «атипия неясного значения» (Bethesda III), «фолликулярная опухоль/подозрение на фолликулярную опухоль» (Bethesda IV), «подозрение на злокачественное новообразование» (Bethesda V). В этих групп характерны: низкая воспроизводимость результатов, неоднозначность интерпретации результатов цитологии клиницистами, повышаются риски неадекватного оперативного вмешательства.

Применение дополнительных молекуляр-но-генетических методов исследований, в частности исследования мутационного профиля и профиля экспрессии миРНК образований ЩЖ, открывает новые возможности в диагностике и поиске прогностических маркеров, т.ч. на цитологическом материале, полученном методом ТАБ. Действительно, выявление мутаций в так называемых «горячих» точках канцерогенеза коррелирует с риском наличия злокачественного новообразования. Однако отсутствие одной или нескольких часто выявляемых мутаций не гарантирует отсутствия более редких вариантов повреждений, а прогностическая значимость

позитивных результатов не всегда находит подтверждение при последующих проспективных наблюдениях. Это определяет тенденцию к постоянному поиску и расширению диагностических панелей и все более широкому внедрению методики массивного секвенирования (NGS), в первую очередь для отбора пациентов, не нуждающихся в оперативном вмешательстве. Представителями подобных решений являются MultiGene ThyroSeq vol.2 NGS Assay, включающий в себя исследование повреждений таких генов как BRAF, TP53, AKT1, CTNNB1, KRAS, PTEN, TSHR, EIF1AX, GNAS; классификатор 167 GEC; Afirma FNA Assay. Также остается актуальным поиск мутаций, коррелирующих с неблагоприятным прогнозом, например, сочетание мутаций генов BRAF и TERT, дополняющих такие наиболее эффективные критерии, как диаметр первичной опухоли и размер пораженных регионарных лимфатических узлов. Профиль экспрессии ряда «маркерных» миРНК при дифференциальной диагностике цитологически «неоднозначных» случаев также может расцениваться как дополнительный критерий. Пока внедрение оценки миРНК-профиля в клиническую практику требует специфических методов анализа и разработки алгоритмов интерпретации полученных данных.

В настоящее время в мировой практике для диагностики опухолей ЩЖ существует лишь один нормативный документ, рекомендующий применение молекулярно-генетических методов -2015 American Thyroid Association Management Guidelines for Adult Patients with Thyroid Nodules and Differentiated Thyroid Cancer. В ближайшее время ожидаются аналогичные отечественные рекомендации. Кроме того, в 2017г. будет опубликована Bethesda Reporting System for Thyroid FNA Cytology II (2017), содержащая обоснование и рекомендации применения молекулярно-генетиче-ских методов исследования в группах III, IV и V, результаты которых будут приниматься во внимание при определении хирургической тактики в ведении пациентов в этих группах.

MOLECULAR GENETIC ASPECTS IN THE DIAGNOSIS OF THYROID TUMORS OR WHAT TO EXPECT FROM THE BETHESDA REPORTING SYSTEM FOR THYROID FNA CYTOLOGY II (2017)

Vorobiev S.L., Kuliash A.G., Pavlova A.A., Maliek A.V.

Авторы:

Воробьев С.Л. - директор центра, кандидат мед. наук;

Куляш А.Г. - врач-генетик центра;

Павлова А.А. - биолог центра;

Малек А.В. - онколог центра, кандидат мед. наук.

ОПЫТ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ НЕДИФФЕРЕНЦИРОВАННОГО РАКА ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ВОРОБЬЕВ С.Л., КУЗНЕЦОВА И.В., КОРАБЛИНА И.М., КУЛЯШ А.Г., ТАМАЗЯН Н.В., ВАСИЛЕВА О.Л.

Национальный центр клинической морфологической диагностики г. Санкт-Петербруг, РФ

Анапластический (АР) щитовидной железы (ЩЖ) является причиной большинства смертельных исходов в группе пациентов со злокачественными заболеваниями этой локализации. Доля АР среди злокачественных новообразований ЩЖ составляет 1-2%; средняя продолжительность жизни пациентов составляет около 6 месяцев. Опухоль характеризуется крайне высоким потенциалом злокачественности, быстрым местным распространением с поражением органов шеи, интенсивным лимфогенным и гематогенным ме-тастазированием. Для пациентов с АР хирургическая резекция опухоли, как правило, не является лечебной. АР характеризуется геномной нестабильностью, которая сопровождается мутациям в генах RET, BRAF, RAS, PTEN, PIK3CA и TP53, причем RAS и TP53 являются наиболее частыми.

Диагностических трудностей АР у морфологов, как правило, не вызывает. Существуют четкие цитологические и гистологические критерии постановки диагноза; при АР иммуногистохими-ческий статус отличается полной утратой клетками опухоли специфических антигенных свойств (тироглобулин, TTF-1, PanCK), проявляя лишь экспрессию виментина, что нередко приводит к ошибочному диагнозу «саркомы». В зависимости от преобладающей культуры клеток в опухоли выделяют следующие варианты АР: плеоморфный (остеокластический), веретеноклеточный (сарко-матоидный), сквамоидный; редкими формами являются рабдоидный и малоклеточный варианты. В настоящее время остаются нерешенными во-

просы патогенетической связи высокодифферен-цированного рака и АР, сведения о роли предсу-ществующих неоплазий противоречивы.

Материалы и методы. Проанализированы результаты цитологических, гистологических, иммуногистохимических, молекулярно-генети-ческих исследований 27 случаев АР ЩЖ.

Результаты и их обсуждение. Женщины составили 74%, мужчины - 26%; средний возраст пациентов 64 года (от 40 до 85 лет), при среднем возрасте мужчин - 55 лет, женщин - 67 лет. Установлены следующие морфологические типы: пле-оморфный - в 11 случаях (40.9%); веретенокле-точный - в 9 случаях (33.3%); смешанный - в 5 случаях (18.5%); малоклеточный и рабдоидный -по 1 случаю (7.3%).

Цитологическая диагностика редко сопровождалась трудностями: материал, как правило, был многоклеточный, содержал обилие отдельных клеток или малоклеточных комплексов, клеточно-ядерные характеристики которых и определяли гистотип АР; высокая митотическая активность с атипическими митозами, воспалительный компонент встречали в большинстве случаев, феномен эмпериополеза выявлен в 3 случаях. Известные трудности возникли в 4 (или 14.6%) случаях и связаны с массивными некрозами опухоли и выраженной вторичной воспалительной реакцией. В 9 случаях (33.3%), наряду с анапластическими клетками, в аспиратах ТАБ были выявлены комплексы предшествовавших опухолей (папиллярный рак, фолликулярные

неоплазии, в основном В-клеточные). При гистологическом исследовании операционного материала в 74% случаев обнаружили массивные некрозы; примерно в половине случаев — выявлена сосудистая инвазия, лишь в 2 случаях — периневральный рост. Наибольший размер опухоли составил 15.0 см, наименьший — 2.0 см. В 11 случаях обнаружены метастазы рака в регионарных лимфатических узлах. В 2 наблюдениях в регионарных лимфатических узлах имели место и метастазы папиллярного В-клеточного рака. В 6 случаях методом компьютерной томографии были установлены метастазы во внутренних органах. В исследовании не встречены случаи

АР, развившегося de novo: в 41% случаев выявлен предсуществующий папиллярный рак, в 6 случаях (22.2%) — низкодифференцированный фолликулярный рак; в 7 случаях (25.9%) в материале были обнаружены комплексы фолликулярной неоплазии. В большинстве случаев предсу-ществующие фолликулярные неоплазии имели В-клеточную (онкоцитарную) дифференцировку.

Выводы: АР ЩЖ — быстро прогрессирующая опухоль, развивается из предшествовавших вы-сокодифференцированного рака или неоплазии, в большинстве случаев с В-клеточной дифферен-цировкой. Морфологический тип, вероятно, не отражает биологический потенциал опухоли.

EXPERIENCE MORPHOLOGICAL DIAGNOSIS OF UNDIFFERENTIATED THYROID CANCER

Vorobiev S.L., Kuznetsova I.V., Korablina I.M., Kuliash A.G., Tamazian N.V., Vasileva O.L.

Авторы:

Воробьев С.Л. - директор центра, кандидат мед. наук; Кузнецова И.В. - патологоанатом центра, кандидат мед. наук; Кораблина И.М. - супервайзер центра, врач-патологоанатом; Куляш А.Г. - врач-генетик центра Тамазян Н.В. - врач-цитолог центра; Василева О.Л. - врач-цитолог центра.

ПАРАЗИТАРНАЯ ПАТОЛОГИЯ В ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

ВОСТРИКОВА Ж.И.

Ростовский научно-исследовательский онкологический институт МЗ России, патологоанатомическое отделение (г. Ростов-на-Дону, РФ)

В практике клинической лабораторной диагностики, в т.ч. в цитологической диагностики, специализированных онкологических учреждений, нередко встречается паразитарная патология, не имеющая прямого отношения к онкологическому процессу. При этом паразитарные агенты могут играть большую роль в течении онкологического заболевания и состояния пациента.

Наиболее часто паразитозы встречаются в группе пациентов со скомпрометированным иммунологическим статусом: с онкологической патологией, с вирусными гепатитами и другими вирусными заболеваниями, являясь чаще вторичной инфекцией. Вместе с тем необходимо помнить, что и первичные паразитарные заболевания могут сопровождаться симптомами и клиническими проявлениями, сходными с опухолевыми процессами.

Наиболее важным для диагностики паразитарной патологии является мультидисциплинар-ная оценка клинико-лабораторных, микробиологических и морфологических дан-ных, взаимно дополняющих друг друга, что и позволяет полноценно выявлять и оценивать характеристики возбудителя. Необходимы специальные знания цитолога об особенностях цикла развития возбудителей паразитарных заболеваний, изменений их функциональных и структурных свойств, т.к. это определяет особенности тканевых и клеточных патологических изменений в цитологическом материале.

В биоматериале онкологических больных, наряду с бактериальной флорой, могут встречаться грибы, простейшие, гельминты, членистоногие. Для верификации возбудителя также необходимо иметь возможность использования дополнительных методик. Выявление и верификация са-

мого возбудителя и характера тканевой реакции позволяют принять правильное решение в тактике лечения пациентов.

В нашей практике у онкологических больных цитологическим методом были выявлены следу-

ющие паразитозы: пневмоцистоз, гистоплазмоз, амёбиаз, бабезиоз/пироплазмоз, эхиноккокоз, филяриоз, демодекоз.

PARASITIC DISEASES IN CYTOLOGICAL PRACTICE

Vostrikova Zh.I.

Авторы:

Вострикова Ж.И. - врач-лаборант высшей категории патологоанаомического отделения института.

ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ИЦХ ТЕСТА РМЕХ В ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ У ЖЕНЩИН С АТРОФИЧЕСКИМИ ИЗМЕНЕНИЯМИ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ

ВЫСОЦКАЯ В.Н., СИНИЦЫНА О.В., СИЗОВА И.И., ПОПОВА А.А.

ГК "Мать и Дитя" (г. Москва, РФ)

Иммуноцитохимический тест РгоЕх™С предназначен для качественной оценки наличия аберрантной индукции Б-фазы клеточного цикла в цервикальном цитологическом материале. Наличие аберрантной индукции Б-фазы клеточного цикла приводит к невозможности репарации клеткой поврежденной ДНК в одной из двух критических контрольных точек клеточного цикла.

Реагент РгоЕх™С связывается с протеинами: «белок, поддерживающий минихромосомы (МСМ2)» и «топоизомераза II а» (ТОР2а). Эти протеины, как показано, гиперэкспрессируются в аномальных цервикальных клетках, что проявляется положительной иммуноцитохимической окраской ядер и цитоплазмы.

Как известно, диагностика предраковых заболеваний шейки матки при помощи цитологического исследования у пациенток с атрофически-ми изменениями слизистой оболочки вызывает определенные трудности. ИЦХ тест proEx может использоваться для дифференциальной диагностики атрофических и диспластических изменений в клетках плоского эпителия. В работу включены препараты, в которых при скрининго-вом исследовании обнаружены клетки с признаками дисплазии различной степени (LSIL, HSIL), трудно дифференцируемые изменения (ASCUS, ASCH), а также реактивные изменения плоского эпителия.

THE EXPERIENCE OF USING THE IMMUNOCYTOCHEMICAL MARKER BD SUREDETECT PROEXC FOR CYTOLOGIC DETECTION OF CERVICAL DISEASES FOR WOMEN WITH ATROPHIC CHANGES OF SQUAMOUS EPITHELIUM

Vysotskaya V.N., Sinitsina O.V., Sizova I.I., Popova A.A. Авторы:

Высоцкая В.Н. - врач лаб. жидкостной цитологии КГ Лапино ГК «Мать и Дитя», врач КЛД первой квалификационной категории;

Синицына О.В. - зав. лаб. жидкостной цитологии КГ Лапино ГК «Мать и Дитя»;

Сизова И.И. - врач лаб. жидкостной цитологии КГ Лапино ГК «Мать и Дитя», врач КЛД высшй квалификационной категории;

Попова А.А. - врач лаб. жидкостной цитологии КГ Лапино ГК «Мать и Дитя».

ОЦЕНКА ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА У БОЛЬНЫХ С ОСЛОЖНЕННОЙ ТРАВМОЙ ШЕЙНОГО ОТДЕЛА ПОЗВОНОЧНИКА С ПОМОЩЬЮ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА

ГАЛАШИНА Е.А.1, УЛЬЯНОВ В.Ю.13, ЖАНДАРОВА Л.Ф.2, ГЛАДКОВА Е.В.1

НИИТОН Саратовского государственного медицинского университета им. В.И. Разумовского» МЗ РФ; 2кафедра хирургии и онкологии Саратовского государственного университета им. В.И. Разумовского» МЗ РФ; 3Филиал частного учреждения образовательной организации «Медицинский университет «Реавиз» (г. Саратов, РФ)

Введение. Неврологический дефицит в остром и раннем периодах осложненной травмы шейного отдела позвоночника способствует снижению локальной резистентности слизистой оболочки толстого кишечника (Полищук Н.Е., Корж Н.А., Фищенко В.Я., 2001; Котельников Г.П., 2009). По данным литературы, у 14-75% больных (Морган Д.Э., 2009) уже в течение первых суток с момента получения тяжелой травмы позвоночника и спинного мозга развиваются воспалительные изменения слизистой оболочки нижних отделов желудочно-кишечного тракта. Их диагностика основывается на данных комплексного обследования больных с применением колоноскопии и цитологического метода исследования. Изучение биоптатов позволяет качественно и количественно оценивать клеточный состав для определения наличия или отсутствия воспалительных изменений в слизистой оболочке толстого кишечника.

Цель исследования. Оценить изменения слизистой оболочки ободочной кишки у пациентов с повреждениями шейного отдела позвоночника и спинного мозга с помощью цитологического метода.

Материалы и методы исследования. Анализ проведен у 20 больных с осложненной травмой шейного отдела позвоночника. Мужчин было -19, женщина - 1. Средний возраст составил 24±7.5 лет. Цитологическое исследование биоп-татов слизистой оболочки ободочной кишки проводили на 1-4-е, 7-е, 14-е, 21-е и 30-е сутки с момента получения травмы. Осуществляли фиксацию и окрашивание готовых цитологических препаратов с помощью набора фиксатора и красителей «Лейкодиф 200». Подсчитывали количество нейтрофильных лейкоцитов и эпи-телиоцитов, после чего вычисляли нейтрофиль-но-эпителиальный индекс (НЭИ). За исходный показатель принимали данные цитограмм и эндоскопическую картину на 1-4-е сутки с момента получения травмы. Статистическую обработ-

ку осуществляли при помощи пакета программ 31а1л81лса 6.0. Большинство полученных данных не соответствовало закону нормального распределения, поэтому для сравнения значений использовали непараметрический И-критерий Манна-Уитни и показатель достоверности (р). Результаты считали статистически достоверными при р<0.05.

Результаты исследования. При поступлении в стационар у всех пациентов на 1-4-е сутки после травмы эндоскопическая и цитологическая картины соответствовали физиологической норме, НЭИ составил 0.015-0.020. К 7-м суткам при нормальной эндоскопической картине в цитологических препаратах у всех больных отмечали увеличение количества нейтрофильных лейкоцитов и уменьшение эпителиоцитов относительно исходных данных, НЭИ составил 0.140.16 (р<0.001). К 14-м суткам цитологическая картина характеризовалась дальнейшим увеличением количества нейтрофильных лейкоцитов и уменьшением эпителиоцитов, НЭИ составил 0.85-0.93 (р<0.001). На 21-е сутки у 8 больных цитограмма была идентична 14-м, что давало основание констатировать прогрессирование воспалительных изменений, НЭИ составил 1.01.53 (р<0.001). Однако, у 12 пациентов отмечено уменьшение количества нейтрофильных лейкоцитов и увеличение эпителиоцитов, НЭИ составил 0.49-0.65 (р<0.05). На 30-е сутки после травмы у всех 20 больных по результатам эндоскопического и цитологического исследований отмечен регресс воспалительных изменений слизистой оболочки ободочной кишки.

Заключение. Таким образом, изменение количества нейтрофильных лейкоцитов и эпите-лиоцитов в цитограммах коррелирует со степенью выраженности воспалительных изменений слизистой оболочки толстого кишечника в разные периоды осложненной травмы шейного отдела позвоночника.

EVALUATION OF MUCOSAL MEMBRANE CHANGES OF THE LARGE INTESTINE IN PATIENTS WITH A COMPLICATED TRAUMA OF THE CERVICAL SPINE USING THE CYTOLOGICAL METHOD

Galashina E.A., Ulyanov V.Yu., Zhandarova L.F., Gladkova E.V. Авторы:

Галашина Е.А. - мл.научн.сотр. отдела фундаментальных и клинико-экспериментальных исследований НИИТОН СГМУ

им. В.И. Разумовского, кандидат биол. наук; Ульянов В.Ю. - ст. научн. сотр. отдела новых технологий в вертебрологии и нейрохирургии НИИТОН СГМУ им.

В.И. Разумовского»; доктор мед. наук, проф. каф. хирургии «Медицинский университет «Реавиз»; Жандарова Л.Ф. - доцент каф. хирургии и онкологии СГМУ им. В.И. Разумовского», кандидат мепд. наук; Гладкова Е.В. - зав. отделом фундаментальных и клинико-экспериментальных исследований НИИТОН СГМУ им. В.И. Разумовского.

ОЦЕНКА ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПЕРВИЧНОГО РАКА ПЕЧЕНИ

ГРИГОРУК О.Г.1-3, МОСКВИНА Т.А.2, СТЕПАНОВА А.С.2, ИЛИНСКИЙ В.К.2, МАМОНТОВ К.Г.1-3

Алтайский филиал РОНЦ им. Н.Н. Блохина,2 Алтайский краевой онкологический диспансер,3 Алтайский государственный медицинский университет (г. Барнаул, РФ)

Заболеваемость гепатоцеллюлярным раком (ГЦР) в России составляет 5.9 на 100 тысяч населения (Давыдов М.И, Аксель Е.М., 2014). ГЦР отличается крайне агрессивным течением с неблагоприятным прогнозом - 5-летняя выживаемость не превышает 15% (Siegel R., 2014). Среди причин онкологической смертности в мире ГЦР занимает 2-е место (Ferlay J., 2012).

В настоящее время диагностика первичного рака печени представляет определенные трудности. Клинические и инструментальные данные позволяют в большинстве случаев определить наличие опухоли и степень ее распространенности в печени. Однако окончательное заключение о природе процесса может быть основано только на данных морфологического исследования. Цитоморфологическая верификация опухолевой патологии печени имеет первостепенное значение для выработки правильной тактики лечения и прогноза течения заболевания.

В гистологической классификации опухолей ВОЗ (2010) первичные злокачественные опухоли печени представлены:

1. Гепатоцеллюлярным раком (8170/3). Наиболее часто развивается на фоне цирроза печени, вызванного гепатитом B, C, алкогольного цирроза, а также у больных с рядом других редких заболеваний. Заболевают чаще мужчины старше 50 лет.

Выделяется фиброламеллярный вариант печеночно-клеточного рака (8171/3). Фиброламеллярный вариант является разновидностью гепатоцеллюлярного рака с характерной морфологией злокачественно мутированных гепа-тоцитов, окруженных ламеллярной фиброзной тканью. Чаще обнаруживается у детей или молодых людей до 35 лет и не связан с предрасполагающими факторами рака печени (хроническими гепатитами, циррозом и пр.), а также не сопровождается повышением АФП и имеет более благоприятное течение.

2. Гепатобластомой (8970/3). Гепатобласто-ма наиболее часто диагностируется у детей, возникает из эмбриональных клеток печени и содержит незрелые гепатоциты, находящиеся на разных стадиях развития и неспособные к выполнению нормальных функций. Выделяют эпителиальный и смешанный (эпителиаль-но-мезенхимальный) морфологические типы гепатобластомы. Крайне редко выявляется у взрослых.

3. Недифференцированным раком печени (8020/3). Поражает как детей, так и взрослых. Развивается стремительно из эпителиальных клеток, с трудом поддается лечению, рано дает метастазы.

4. Холангиокарциномой (8160/3). Развитие холангиокарциномы происходит из эпителиальных клеток желчных протоков. Рак желч-

ных протоков является заболеванием, широко распространенным среди пожилых людей. Средний возраст заболевших от 50 и до 70 лет, подвержены болезни больше мужчины. Причины развития рака желчных протоков не установлены. К одной из причин относят заражение паразитарными инфекциями: Fasciola hepatica, Opisthorchis viverrini, Clonorchis sinensis, Ascaris lumbricoides.

Для проведения адекватного лечения необходимо точное определение типа первичного рака печени, которое осуществляют гистологическим и/или цитологическим методами.

Целью нашего исследования являлось изучение возможностей цитологической диагностики первичного рака печени на основании сопоставления с гистологическими данными.

Материалы и методы исследования. В данной работе проведен анализ результатов цитологических исследований аспирационно-го пункционного материала 40 больных первичным раком печени, находившихся на обследовании и лечении в Алтайском краевом онкологическом диспансере. Изучены данные наблюдений с установленным диагнозом первичного рака печени у 28 мужчин и 12 женщин за период с 2013 по 2017 гг. в возрасте от 45 до 80 лет. Исследовали материал, полученный способом пункционной биопсии образований печени, проводимой под контролем УЗИ, окрашивали по методу Паппенгейма и изучали при помощи световой микроскопии. Результаты исследования были ретроспективно сопоставлены с гистологическими данными и данными канцер-регистра диспансера.

Результаты исследования и их обсуждение. Сходство клеток опухоли с гепатоцитами в сочетании с явными признаками злокачественности клеток позволили установить правильный диагноз при цитологическом исследовании гепатоцеллюлярного рака в 8 (20%) случаях. В цитологических препаратах выявлены расположенные изолированно (и в скоплениях) клетки опухоли с увеличенным ядерно-цитоплазмати-ческим соотношением, полиморфными ядрами с крупными нуклеолами. Особенностью клеток опухоли была обильная пигментированная цитоплазма. Последующее гистологическое исследование констатировало наличие ГЦР, в одном случае отмечена высокая дифференцировка опухоли. В 12 наблюдениях (30%) при цитологическом исследовании был верифицирован

рак с предположительным указанием на принадлежность к ГЦР, что было подтверждено гистологическим исследованием. В 5 (12.5 %) наблюдениях цитологическая картина напоминала пролиферацию гепатоцитов без выраженных признаков злокачественности. В этих случаях цитологическое заключение в предположительной форме указывало на принадлежность к ГЦР. При гистологическом исследовании опухоли этих пациентов в 3 наблюдениях установлен высокодифференцированный ГЦР, в 2 - ГЦР без указания степени дифференци-ровки. Диагноз «рак (БДУ)» установлен в трех (7.5%) случаях без указания на принадлежность к ГЦР, который был установлен при гистологическом исследовании. В этих препаратах клетки опухоли без признаков пигмента в цитоплазме располагались преимущественно изолированно. В четырех (10%) наблюдениях клетки опухоли были больших размеров и отличались значительными признаками анаплазии, вследствие чего определить гистотип опухоли на све-тооптическом уровне не представлялось возможным. При гистологическом исследовании материала был установлен низкодифференци-рованный вариант ГЦР.

Аденокарцинома (БДУ) цитологически верифицирована в 8 (20%) случаях в связи с обнаружением железистых структур клеток опухоли с эксцентричным расположением ядер. В 2 случаях гистологическое исследование установило холангиоцеллюлярную карциному (ХЦР), а в 6 (15%) - ГЦР.

Другие формы первичного рака печени - ге-патобластому, недифференцированный рак, а также фиброламеллярный вариант печено-клеточного рака, в данном исследовании не наблюдали.

Таким образом, цитологически первичный рак печени, по нашим данным, был диагностирован в 87.5% всех наблюдений. В 55% случаях удалось установить злокачественный характер опухоли с указанием морфологического типа (ГЦР и ХЦР). В остальных случаях цитологическая диагностика первичного рака печени была затруднительна, что говорит о необходимости использования дополнительных методов исследования.

EVALUATION OF CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS OF PRIMARY LIVER CANCER

Grigoruk O.G. 1-3, Moskvina T.A 2., Stepanova A.S. 2, Ilinskiy V.K.2, Mamontov K.G. 1-3

Авторы:

Григорук О.Г. - зав. отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера, ст. научн. сотр.

Алтайского филиала РОНЦ им. Н.Н. Блохина, докт.биол.наук; Москвина Т.А. - врач отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера; Степанова А.С. - врач отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера; Илинский В.К. - врач отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера; Мамонтов К.Г. - зав. отд. рентгенорадиохирургии диспансера, ст. научн. сотр. Алтайского филиала РОНЦ им. Н.Н. Блохина, докт.мед.наук.

РАК ЛЕГКОГО: ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ, ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКАЯ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА

ГРИГОРУК О.Г.1-3, ПУПКОВА Е.Э.2, БАЗУЛИНА Л.М.2, ЛАЗАРЕВ А.Ф.1-2

Алтайский филиал РОНЦ им. Н. Н. Блохина,2 Алтайский краевой онкологический диспансер, 3Алтайский государственный медицинский университет (г. Барнаул, РФ)

Рак лёгких является наиболее значимой проблемой в онкологии. В Алтайском крае в структуре онкологической заболеваемости он занимает первое место. В 2016г. показатели заболеваемости рака легкого составили 61.0 на 100 тыс. населения, у мужчин - 112.3, у женщин - 17.0. Морфологическая (гистологическая и цитологическая) верификация составляет 78.6% (РФ 2016г. - 76.2%). Исходя из этого факта, следует отметить, что в практической работе цитологической лаборатории, диагностика рака легких является самым большим разделом диагностической цитологии.

Цель исследования: оценить информативность цитологического, иммуноцитохими-че-ского и молекулярно-генетического методов при диагностике рака лёгкого.

Материалы и методы исследования. В основе работы - данные обследования больных с диагнозом «рак лёгкого» (п=729), установленным цитологическим методом в Алтайском краевом онкологическом диспансере за 2016г. При диагностике использовали цитологический материал, полученный различными способами. Учитывали только пациентов, обратившихся в лечебное учреждение впервые. Окрашивали препараты по Паппен-гейму. При необходимости применяли иммуноцитохимический метод с использованием стандартного протокола.

Для визуализации реакции антиген/антитело применяли тест-систему REALTM EnVisionTM («ДАКО»). В качестве хромогена - DAB (3.3 -diaminobenzidine), после проведения реакции мазки докрашивали гематоксилином.

В части наблюдений были необходимы мо-лекулярно-генетические исследования, которые проводили на материале цитологических препаратов. Отобранные комплексы клеток опухоли отмечали маркером на цитологических препаратах и растворяли лизирующим раствором. При выделении ДНК использовали набор «QIAamp DNA Mini Kit» QIAGEN (Германия). Определение статуса гена EGFR осуществляли методом аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени с помощью набора EGFR RGQ PCR Kit (Германия) на приборе CFX-96 (США).

Еженедельно проводили сопоставление цитологических и гистологических данных диагностики рака легкого с информацией канцер-регистра диспансера. Оценивали полученные результаты с использованием методов медицинской статистики.

Результаты исследования и их обсуждение. Рак лёгкого в 2016г. цитологически установлен у 507 больных по материалу, полученному при бронхоскопии; в 34 случаях диагностирован по материалу трансторакальной пункции; в мокроте отмечен у 8 пациентов; метастазы в лимфати-

ческие узлы, мягкие ткани, печень, плевральную полость констатировали у 98, 27, 9 и 46 больных соответственно. Использование только метода световой микроскопии позволило в 649 (89%) наблюдениях определить гистологический тип опухоли, который соответствовал плоскоклеточному раку у 344 (53%) больных, мелкоклеточному - 162 (25%) и аденогенному в 143 (22%) наблюдениях. При бронхоскопии, а также в большинстве метастатических поражений, клеточные признаки опухоли позволяют определить гистотип опухоли. В случаях сопоставления с гистологическим исследованием (n=528), отмечено совпадение в 99,1%. Расхождение при немелкоклеточном раке легкого отмечено в 5 (0.9%) наблюдениях.

Без уточнения гистологического варианта опухоли диагностирован «рак (БДУ)» в связи с дистрофическими изменениями или недостаточным количеством клеточного состава у 80 (11%) пациентов. Наиболее сложно установить гистотип клеток опухоли при метастазе рака легкого в плевральной полости. Клеточный состав в жидкостной среде в зависимости от времени нахождения в плевральной полости значительно изменяется. Иммуноцитохимический метод был необходим при дифференциальной диагностике метастазов рака в плевральной полости у пациентов без установленного первичного очага.

По результатам проведенного дискрими-нантного анализа доли правильной классификации больных с плевральным выпотом при аденогенном раке лёгкого при световой микроскопии составляют только 38.0%. При иммуно-цитохимическом исследовании использование TTF-1 и Napsin A позволило установить принадлежность клеток опухоли к аденогенному раку легкого у 36 больных. Иммуноцитохими-ческие исследования повысили точность диагностики метастаза аденогенного рака легкого в плевральной жидкости (по данным дискри-минантного анализа) до 86.5%. Следует учитывать факт того, что 20-25% первичных адено-карцином лёгких негативны для TTF-1 (Dabbs, D.J., 2010; J. Ye, 2011), совместное использование антител TTF-1 и Napsin является высокоспецифичным для аденокарцином лёгкого. Уточняющие иммуноцитохимические реакции использовали при дифференциальной диагностике мелкоклеточного рака в плевральной жидкости в 3 наблюдениях и плоскоклеточного - в од-

ном. Для мелкоклеточного рака лёгкого наиболее значимы иммуноцитохимические реакции с ТТБ-1, СК 7, хромогранином А, нейрон-специфической энолазой. Иммуноцитохимические исследования позволили повысить точность диагностики мелкоклеточного рака легкого (по данным дискриминантного анализа) до 87.6%, которая при световой микроскопии составила 80%. Для плоскоклеточного рака лёгкого значимы иммуноцитохимические реакции на СК5/6 и р63. Точность диагностики плоскоклеточного рака легкого в плевральной жидкости при им-муноцитохимических исследованиях (по данным дискриминантного анализа) составила 96% (световая микроскопия - 86.1%).

Проведение молекулярно-генетических исследований необходимо для выделения группы пациентов, для которых вероятен клинический ответ на терапию ингибиторами тирозинкина-зы. Назначение таргетных препаратов эрлоти-ниб, афатиниб и гефитиниб показано только тем больным, у которых в клетках опухоли выявлена мишень действия этих препаратов. В данном исследовании изучен статус гена ЕвБК у пациентов с установленным цитологическим диагнозом «аденокарцинома лёгкого». Для молекуляр-но-генетических исследований использовали цитологические образцы, полученные при бронхоскопии (п=52), мокроте (п=1), из плевральной жидкости (п=7) и лимфатических узлов (п=2). Цитологический материал с наличием достаточного количества клеток опухоли (не менее 200) является полноценным материалом для моле-кулярно-генетических исследований. Мутации гена ЕвБИ обнаружены в 7 (11.3%) из 62 наблюдений, в числе которых выявлена точечная мутация Ь858И (3 наблюдения) и делеции 19 экзона (4 наблюдения).

Выводы: цитологическая верификация рака лёгкого является высокоинформативным методом, позволяющим с использованием различных способов забора материала на исследование со 100% вероятностью устанавливать диагноз рака, с достоверностью определения гистологического типа - 89%, расхождения в определении гистотипа составляют менее 1%. Необходимость применять иммуноцитохимические исследования возникает, прежде всего, при метастазах рака легкого в плевру, иммуноцитохимические исследования повышают точность диагностики метастазов рака легкого с указанием гистотипа опухоли до 86-96%.

Использование цитологического материала для поиска соматических мутаций оправдано для пациентов с местно-распространенным или диссеминированным процессом, у которых цитологический материал является единственно

доступным морфологическим материалом для исследования. Мутации гена ЕвБК обнаружены в 11.3% наблюдений, в числе которых выявлена точечная мутация Ь858И (3 наблюдения) и деле-ции в экзоне 19 (4 наблюдения).

LUNG CANCER: CYTOLOGICAL, IMMUNOCYTOCHEMICAL AND MOLECULO-GENETIC DIAGNOSTICS

Grigoruk O.G. 1-3, Pupkova E. I.2, Bazulina L.M.2., Lazarev A.F. 1-2

Авторы:

Григорук О.Г. - зав. отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера, ст. научн. сотр.

Алтайского филиала РОНЦ им. Н.Н. Блохина, докт.биол.наук; Пупкова Е.Э. - зав. отд. клин. лаб. диагностики (лаб. молекулярной диагностики) диспансера; Базулина Л.М. - врач отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера; Лазарев А.Ф. - гл. врач АКОД, директор Алтайского филиала РОНЦ им. Н.Н.Блохина, докт. мед. наук, проф.

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ОТПЕЧАТКОВ, ПОЛУЧЕННЫХ С ВНУТРИМАТОЧНОЙ СПИРАЛИ У ЖЕНЩИН

ГУСЕЛЬНИКОВА А.В.2, УТХОВА О.В.2, ГРИГОРУК О.Г.1-3

Алтайский филиал РОНЦ им. Н. Н. Блохина, 2Алтайский краевой онкологический диспансер, 3Алтайский государственный медицинский университет (г. Барнаул, РФ)

Во избежание нежелательной беременности в мировой практике в последние десятилетия широко применяются внутриматочные противозачаточные средства (ВМС). В связи с этим, изучение цитологических изменений слизистой оболочки шейки и тела матки при использовании данного метода предупреждения беременности, имеют определенную значимость. Постоянное присутствие ВМС, по сути инородного тела в полости матки, может способствовать в некоторых случаях повреждению слизистой оболочки тела матки. Срок контрацептивного действия ВМС обычно составляет от 3 до 5 лет, однако, в практическом здравоохранении имеют место наблюдения более длительных сроков использования внутриматочной спирали. После удаления спирали в обязательном порядке на исследование берут мазок-отпечаток, который позволяет оценить состояние эпителия шейки и тела матки у женщин, применяющих внутриматочную контрацепцию. Изучение клеточного состава цитологических препаратов, полученных при удалении внутриматочной спирали, необходимо для обнаружения возможных предраковых изменений и рака шейки и тела матки. Сообщения с оценкой цитологического материала, полученно-

го при удалении ВМС, в доступной литературе не обнаружены.

Цель работы: оценить особенности цитологических картин у женщин после удаления вну-триматочной контрацепции.

Материал и методы исследования. Клеточный состав материала, полученного при удалении внутриматочной спирали, изучали в отделении клинической лабораторной диаг-ностики онкологического диспансера в 2016г. без учета типа удалённого ВМС.

Препараты окрашивали по методу Паппен-гейма, изучали под микроскопом. Оценивали полученные типы цитограмм с уточнением характера патологического процесса.

Результаты исследования и их обсуждение.

Изучены цитологические препараты с отпечатками материала, полученным при удалении ВМС 134 женщин. В результате проведенного исследования установлено, что преобладали пациентки в возрасте 25-40 лет (п=91; 67.9%), пациентки в возрасте 40-50 (п=31; 23.2%) наблюдались реже. Отмечены пациентки старше 50 лет (п=12; 8.9%) с длительным сроком ношения ВМС в течение 6 - 17 лет.

После изучения цитологических препаратов были сделаны заключения о соответствии норме

эпителия слизистой шейки и тела матки у 26.1% (n=35) пациенток в возрасте 25-40 лет с указанием присутствия клеток плоского эпителия и клеточных скоплений неизмененного железистого эпителия.

Воспалительные элементы отмечены у 69.5% (n=93) наблюдений, в числе которых при воспалительных процессах отмечены скопления клеток железистого эпителия с реактивными изменениями у 15.7% (n=21) пациенток. Клеточные скопления эпителия эндометрия с признаками дистрофических изменений на фоне элементов хронического воспаления отмечены в 4.5% (n=6) наблюдений всех исследуемых препаратов. Эн-дометриальный эпителий, клеточные элементы хронического воспаления, в числе которых отмечены много-ядерные клетки, типа клеток инородного тела, отмечены в 4.5% (n=6) изучаемых цитограмм. При длительном ношении ВМС у одной из женщин старше 50 лет отмечены гнойно-некротические массы (0.7%).

Железистая гиперплазии эндометриально-го эпителия обнаружена у 3.7% (n=5) пациенток, применяющих внутриматочную контрацепцию, атипической железистой гиперплазии не наблюдали. Внутриэпителиальные клеточные изменения, соответствующие CIN II-III в клетках плоского эпителия отмечены у одной (0.7%) пациентки, железистый эпителий которой был без особенно-

стей. В последующем обследовании данной пациентки установлен плоскоклеточный рак.

Выводы:

1) Цитологическое исследование препаратов, приготовленных после удаления ВМС, являются достаточно информативным методом оценки состояния слизистой оболочки шейки и тела матки, при котором забор материала на исследование является технически простой медицинской процедурой.

2) Риск развития воспалительного процесса у пациенток, использующих внутриматочную контрацепцию, составляет 69.5%.

3) Риск развития гиперпластических процессов эндометрия у пациенток, применяющих вну-триматочную контрацепцию, отмечен в 3.7% всех наблюдений. Цитологических признаков развития атипической гиперплазии эндометрия отмечено не было.

4) При использовании ВМС развитие внутри-эпителиальной неоплазии шейки матки в связи с использованием внутриматочного контрацептива отмечено у 0.7% пациенток.

5) При длительном использовании внутрима-точных контрацептивов (5 и более лет) признаков развития неоплазий не отмечено.

CYTOLOGICAL RESEARCHES OF FEMALE SMEARS TAKEN FROM IUD

Guselnikova A.V.2, Utkhova O.V.2, Grigoruk O.G.1-3

Авторы:

Гусельникова А.В. - лаборант-цитолог; Утхова О.В. - лаборант-цитолог;

Григорук О.Г. - зав. отд. клин. лаб. диагностики (для проведения цитол. методов иссл.) диспансера, ст. научн. сотр. Алтайского филиала РОНЦ им. Н.Н. Блохина, докт.биол.наук.

ЦИТОЛОГИЧЕСКИЕ И ЭХОГРАФИЧЕСКИЕ ПАРАЛЛЕЛИ ПРИ ТАБ УЗЛОВЫХ ОБРАЗОВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ЕЛЕУБАЕВА Ж.Б., ТУРМУХАНОВ Т.Ж., САРСЕМБАЕВА С.А., КУСАИНОВА Б.Т.

Казахский институт Онкологии и Радиологии, лаб. патоморфологии, цитологии и молекулярной патологии опухолей, отдел лучевой и ультразвуковой диагностики (г. Алматы, Республика Казахстан).

Узловые образования щитовидной железы (ЩЖ) встречают в 50% случаев заболеваний ЩЖ у взрослых, из них около 5-7% малигини-зируются. В последнее время изменилась структура узловой патологии ЩЖ, с увеличением количества аутоиммуных тиреоидитов, аденом, злокачественных образований. В настоящее время новые технологии в развитии ультразвуковых систем позволяют провести качественную диагностику диффузных и узловых заболеваний ЩЖ. В связи с развитием технологий возможно выявление непальпируемых узлов, или узловых образований не дающих клиническую картину.

Цели и задачи: проследить различия и особенности структурных изменений паренхимы и узловых образований ЩЖ в сопоставлении с данными цитологического заключения для решения вопроса о тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ).

Материалы и методы исследования: исследовали данные 44 пациентов, проходивших исследование в условиях КазНИИОиР, из них 42 женщины и 2 мужчин, в возрасте от 20 до 65 лет. Ультразвуковое исследование проводили на аппарате «Logiq 7» фирмы General Electric, линейными датчиком с частотой 5-7.5мГц. Всем пациентам проводили стандартное исследование ЩЖ, с измерением объемов долей. Оценивали структуру ЩЖ, наличие или отсутствие диффузных изменений. При обнаружении узловых образований -указывали топическое расположение узла, проводили измерение размеров узла в 2 проекциях с расчетом объема, контуры, наличие капсулы или анэхогенных ободков, структура узла и наличием кистозного и солидного компонентов, наличием кальцинатов с указанием типов кальцинатов (грубых, в виде «скорлупы», микрокальцинатов), проводили цветовое допплеровское картирование и энергетическое картирование. Проводили осмотр шеи, надключичных областей с обеих сторон для оценки изменения регионарных лимфатических узлов. При обнаружении узловых

образований проводили тонкоигольную пунк-ционную аспирационную биопсию. При наличии солидно-кистозной структуры, брали материал отдельно из солидного и кистозного участка узла или из двух зон с различной структурой. В узлах с неоднородной структурой ТАБ проводили забор из участков с наличием кальцинатов и зон смешанной эхогенности. ТАБ проводили под контролем УЗИ, методом «свободной руки», иглой 2Ю, с использованием пистолета для ТАБ. Затем наносили аспират на предметное стекло. Использовали влажные и сухие методы фиксаци. После фиксации материала, проводили окраску по Па-паниколау и по Гимзе.

Результаты исследования: При сопоставлении ультразвуковых и цитологических данных узловые образования ЩЖ можно условно подразделить на несколько типов.

Тип 1: при обнаружении гипоэхогенных и изоэхогенных узлов, с четкими, ровными контурами, однородной солидной структуры размером от 10 до 40мм - цитологическая картина представлена фолликулярным эпителием без признаков дисплазии.

Тип 2: При наличии узловых образований, с четкими, неровными контурами, структура неоднородная с наличием участков повышенной эхогенности и анэхогенных зон с коллоидным содержимым, размером от 10 до 50мм - цитологическая картина соответствует фолликулярному эпителию с умеренной пролиферацией.

Тип 3: При формировании узлов на фоне аутоиммунного тиреоидита - узлы с нечеткими, неровными контурами, структура неоднородная с эхогенными участками и гиперэхогенны-ми включениями на фоне измененной паренхимы ЩЖ с участками смешанной эхогенности, эхогенными включениями и макрофолликулами с коллоидным содержимым - цитологически обнаруживается фолликулярный эпителий с выраженной гиперплазией и с умеренным полиморфизмом ядер.

Тип 4: Узел большого размера, занимающий весь объем доли, кистозно-солидного характера, с неровными контурами, с неоднородным солидным компонентом, с выраженной васкуляриза-цией в солидном компоненте при ЦДК и ЭДК -цитологическое заключение: фолликулярная неоплазия.

Тип 5: При наличии гипоэхогенных узлов, без четких контуров, неоднородной структуры, с наличием эхогенных участков и микрокальцина-тов, дающих акустические тени, с участками выраженной патологической васкуляризации при ЦДК и ЭДК, размером от 8 до 30 мм - цитологическая картина соответствовала папиллярному раку.

Выводы: При обнаружении узлов по ЭХО картине 1 и 2 типа, пациентам рекомендуется проводить ТАБ цитологию при первичном иссле-

довании и при получении цитологической картины соответствующей данным типам требуется динамическое наблюдение. При повторном осмотре оцениваются размеры, структура, появление внутриядерных цитоплазматических включений. При отсутствии изменений ТАБ проводить не рекомендуется.

При обнаружении узлов 3 типа, рекомендуется динамическое наблюдение и ТАБ с периодичностью 1 раз в 6 месяц.

При обнаружении узлов с эхогенной структурой, соответствующими 4 и 5 типу, проводят ТАБ цитологию. По результатам цитопатологического исследования, пациенты с диагнозом фолликулярной неоплазии или злокачественной опухоли направляются на специализированное лечение.

THE CYTOLOGICAL AND ECHOGRAPHIC PARALLELS IN THE TAB AT THE DIAGNOSTIC OF THYROID NODULES

Yeleubayeva Zh.B., Turmukhanov T.Zh., Sarsembayeva S.A., Kusainova BT.

Авторы:

Елеубаева Ж.Б.- цитолог-патологоанатом лаб. патоморфологии, цитологии и молекулярной патологии опухолей, врач

высшей категории, FIAC; Турмуханов Т.Ж. - врач лаб. патоморфологии, цитологии и молекулярной патологии опухолей; Сарсембаева С.А. - врач отдела лучевой и ультразвуковой диагностики; Кусаинова Б.Т. - врач лаб. патоморфологии, цитологии и молекулярной патологии опухолей.

ОСОБЕННОСТИ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПИЛОМАТРИКСОМЫ

ЕРОХИНА О.А., МАКЕЙЧИК Е.Е., ДРАГУН И.В., БОРТНИКОВА В.А.

РНПЦ онкологии и медицинской радиологии им. Н.Н. Александрова (г. Минск, Республика Беларусь)

Цель: Детально изучить состав цитограмм, полученных при пункции или в мазках-опечатках с биопсии пиломатриксомы (эпителиомы Малерба), с целью предотвращения ложнополо-жительного заключения о злокачественном характере процесса.

Материал и методы исследования: Полученные в учреждении здравоохранения онкологического профиля цитограммы 9 пациентов, окрашенные по Паппенгейму, и их гистологические препараты из опухоли.

Результаты исследования: В литературе перечислены характерные цитологические признаки пиломатриксомы: скопления клеток базалоид-ного типа, клетки с признаками плоскоклеточной дифференцировки с ядрами, гиперкератоз, клетки-тени или клетки-призраки, возможны мно-

гоядерные клетки, отложения кальция. Также не следует забывать о клинических данных: преимущественная локализация в области головы и шеи, верхних конечностей; более молодой возраст; как правило, неизмененная кожа над подкожным образованием; клинический диагноз доброкачественного процесса. Однако цитопатолог, не специализирующийся на патологии кожи, неверно представляет цитологические характеристики элементов опухоли.

По результатам нашего исследования клетки базалоидного типа можно разделить на 3 категории: а) с ядрами мелких или средних размеров, в тесных скоплениях, сильно напоминающих база-лиому (4 случая); б) с ядрами мелких или средних размеров, нередко с ядрышками, в рыхлых скоплениях без ассоциации со злокачественно-

стью (3 случая); в) клетки с ядрами недифференцированного типа, узким ободком цитоплазмы, с моделирующим расположением клеток, вызывающие ассоциацию с мелкоклеточным раком -цитологически явно злокачественные (4 случая).

Ороговение в пиломатриксоме представлено двумя типами: эпидермальное и пилоидное. При эпидермальном типе кератинизации в ци-тограмме обнаруживают изолированно лежащие роговые чешуйки (безъядерные клетки рогового (верхнего) слоя плоского эпителия) (3 случая) и в пластах разных размеров, при изучении на иммерсионном увеличении которых прослеживается полигональность составляющих его элементов (3 случая). Кератинизация по пилоидному типу цитологически проявляется скоплениями клеток с признаками ороговения в цитоплазме; с остатками ядер, просветлениями на их месте или без ядер и просветлений, нередко в пределах одной группы; при этом контуры клеток округлые, строение пласта ячеистое (5 случаев). Именно эти формирования и получены из участков клеток-теней или клеток-призраков в гистологических препаратах.

Обнаружение в цитограмме клеток базалоидного типа с различной морфологией и клеток с признаками ороговения, в первую очередь, пилоид-ного, должно сдерживать от постановки диагноза злокачественной опухоли. Многоядерные клетки не являются патогномоничным признаком пи-ломаткриксомы, а отражают наличие гранулема-тозного процесса в регрессивной стадии развития опухоли и встречаются в мазках при различных процессах: разрыв эпидермальной кисты, организованная гематома, специфическое гранулематоз-ное воспаление. Следовательно - многоядерные клетки, равно как и кальцинаты, которые в цитологических препаратах могут быть единичными или не попасть, дополняют диагностический набор характерных признаков, но их отсутствие не должно препятствовать установлению диагноза пиломатриксомы.

Выводы: Правильная оценка элементов ци-тограммы при пиломатриксоме с учетом клинических данных помогает установить диагноз и избежать гипердиагностики злокачественного характера процесса.

CHARACTERISTICS OF CYTOLOGIC DIAGNOSTIC OF THE PILOMATRIXOMA

O.A. Erokhina, A.E. Makeichyk, I.V. Drahun, V.A. Bortnikova

Авторы:

Ерохина О.А. - зав. цитол. лаб., канд. мед. наук; Макейчик Е.Е. - врач лаб. диагностики цитол. лаб.; Драгун И.В. - врач лаб. диагностики цитол. лаб.; Бортникова В.А. - врач лаб. диагностики цитол. лаб.

ПРОГНОЗ РАЗВИТИЯ ЦЕРВИКАЛЬНОЙ ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНОЙ НЕОПЛАЗИИ, АССОЦИИРОВАННОЙ С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО КАНЦЕРОГЕННОГО РИСКА

ЕРШОВ В.А.

Городской клинический онкологический диспансер (г. Санкт-Петербург, РФ)

Цервикальные интраэпителиальные неопла-зии (ЦИН) - многоэтапные изменения строения плоского эпителия, которые могут привести к формированию рака шейки матки или в большинстве случаев - получить самостоятельное обратное развитие. Однако в настоящий момент нет ни общепринятого клинического, ни морфологического, ни молекулярно-генетическо-го критериев, позволяющих определить исход

ЦИН. Наличие же достоверного признака прогрессии интраэпителиальной неоплазии в случае слабой дисплазии эпителия послужило бы показанием к оперативному удалению пораженного участка слизистой оболочки, не дожидаясь дальнейшего нарастания атипии. Отсутствие этого критерия в случаях ЦИН2+ определило бы вместо конизации, используемой в большинстве стран мира как метод профилактики цервикаль-

ного рака, консервативное лечение, сохраняющее целостность шейки матки и устраняющее у молодых женщин одну из причин истмико-цер-викальной недостаточности, способной негативно отразиться на их репродуктивной способности.

Открытие все новых аспектов взаимодействия вируса папилломы человека (ВПЧ) и пораженной им клетки предлагает в качестве маркеров прогноза дисплазии эпителия продукцию или, наоборот, ее отсутствие некоторых вирусных и/или клеточных генов. Наиболее информативным из всех известных в настоящий момент критериев зарекомендовал себя капсидный белок L1 - специфичный для ВПЧ-поражения фактор, связанный с вирусным производством, которое осуществляется только при сохранении неизмененной продукции генов папилломавируса в неизмененном эпителии. Еще одним специфичным фактором, отражающим клеточные изменения, ассоциированные с ВПЧ, можно считать экспрессию белка ядерного митотического аппарата - nuclear mitotic apparatus protein (NuMAl), которая в Gl, S, G2 фазах клеточного цикла характеризует организацию хроматина и продукцию ряда генов и в, первую очередь, семейства р53, что свидетельствует о сохранении контроля клеточного цикла.

Целью нашего исследования являлось изучение информативности экспрессии белков L1 и NuMAl в качестве маркеров прогноза ЦИН, ассоциированных с ВПЧ высокого канцерогенного риска, в т.ч. у беременных.

Проведен анализ результатов цитологического, иммуноцитохимического, гистологического и молекулярно-генетического методов исследования биопсий шейки матки 200 женщин 19-56 лет, находившихся на обследовании и/или лечении в Санкт-Петербургском городском клиническом онкологическом диспансере с октября 2014г. по март 2017г.

Всем пациенткам при первичном обращении осуществляли забор цервикальных биоптатов для цитологического, гистологического исследования и мультиплексной ПЦР в режиме реального времени. Цитологические препараты экто-и эндоцервикса готовили методом жидкостной цитологии и окрашивали по методу Папанико-лау. Для гистологического исследования материал щипцовой биопсии и/или электроэксцизии шейки матки фиксировали в 10% растворе формалина, обезвоживали в изопропиловых спиртах, заливали в парафиновые блоки, с помощью микротома готовили срезы толщиной 5-6 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином. Во всех

случаях проводили иммуноцитохимические исследования с использованием моноклональных антител к NuMAl (LS-B7380, 44529), LifeSpan-BioSciences Inc (США) и моноклональных антител к белку L1 вируса папилломы человека 16 (33) генотипа - HPV 16 (CAMVIR-1, Mob 394, P333), DBS (США). Положительной реакцию считали при экспрессии исследуемого белка в не менее чем 5% атипических клеток. Выявление антител к обоим протеинам или к одному из них расценивали как критерий низкого риска прогрессии интраэпителиального поражения. Отсутствие экспрессии обоих белков тракто-вали как высокий риск прогрессии ЦИН.

В результате морфологического исследования у 63 (31.5%) пациенток 19-48 лет диагностирована эндоцервикальная эктопия, у 62 (31%) 21-38 лет верифицирована слабая (ЦИН1), у 39 (19.5%) 23-32 лет - умеренная (ЦИН2), у 34 (17%) 26-56 лет - тяжелая форма дисплазии (ЦИН3), у 2 (1%) 32-42 лет - Ca in situ (ЦИН3).

Из них 11 (6.5%) женщин были беременны. Эндоцервикальная эктопия выявлена у пациентки в первом триместре, слабая дисплазия плоского эпителия - у одной женщины в первом, у другой - во 2 триместре. З случая умеренной дис-плазии диагностированы, соответственно, в первом, во втором и третьем триместре. У 5 больных тяжелая дисплазия эпителия выявлена в сроки от 6/7 до 30 недели беременности.

ВПЧ 16 генотипа обнаружен в 105 (52.5%) случаях, его сочетания с папилломавирусами филогенетической группы (ФГГ) а9 - в 42 (21%) и с ФГГ а7-в 21 (10.5%) исследованиях. ВПЧ 33 генотипа выявлен у 19 (9.5%) пациенток, его сочетания с ВПЧ 31 и 56 генотипов - у 13 (6.5%) женщин.

В результате иммуноморфологических исследований ядерную экспрессию L1 и NuMA1 наблюдали в 59 (44.5%) случаях, продукцию только L1 выявили в 32 (16%), NuMA1 - в 42 (21%) случаях, что свидетельствовало о способности пораженной клетки к дифференцированию и/ или сохранении механизма апоптоза. Всего положительные реакции на L1 и/или NuMA1 обнаружены у 142 (71%) женщин и были расценены как критерий низкого риска прогрессии ЦИН. Антитела к обоим белкам отсутствовали в биопта-тах 58 (29%) женщин, что предполагало высокий риск прогрессии ЦИН.

Положительные реакции на L1 и NuMA1 у 1 женщины с эктопией, у 2 - со слабой дисплазией, у 1-й - с умеренной и у 3 - с тяжелой дисплазией эпителия выявили при разных сроках беременности. У 2 беременных с умеренной и у 2 с тяже-

лой дисплазией эпителия реакции на исследуемые белки были отрицательными.

45 больным дисплазиями эпителия и 2 пациенткам с Ca in situ провели электроэксцизию шейки матки. Группу динамического наблюдения с контрольными осмотрами и забором материала для морфологического исследования составили 142 женщины с экспрессией L1 и NuMAl или одного из двух белков и 11 пациенток ЦИН с отрицательными реакциями на антитела к обоим ядерным протеинам, отказавшиеся от электро-эксцизии шейки матки, 4 из которых были беременные. Из них 36 женщин наблюдали в течение 24 месяцев, 54 - 12-14 месяцев, 25 - 9-11 месяцев, 49 - 6-8 месяцев и 36 - от 2 до 4 месяцев.

При продукции атипическими клетками L1 и NuMA1 или одного из этих белков регресс дис-плазии плоского эпителия шейки матки определили в 54.5%, персистенцию - в 42%, про-

грессирование - в 3.5 % исследований. Регресс дисплазии эпителия с экспрессией Ь1 и ЫиМЛ1 или одного из этих белков впервые обнаружен спустя 6 месяцев после выявления ЦИН и достигал максимальных значений спустя 12 месяцев наблюдения. Дисплазии эпителия с обоими отрицательными маркерами в срок до 14 месяцев сохраняли первично выявленную степень тяжести повреждения многослойного плоского эпителия шейки матки. При контрольном осмотре в дородовом периоде у 4 (66.7%) беременных с продукцией атипическими клетками Ь1 и ЫиМЛ1 отмечен регресс дисплазии, у всех беременных с отсутствием продукции атипическими клетками белков Ь1 и №КЛ1 наблюдали персистенцию ЦИН. У всех женщин после родов наблюдали восстановление типичного строения плоского эпителия шейки матки.

THE DEVELOPMENT OF CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA ASSOCIATED WITH HUMAN PAPILLOMA VIRUS HIGH CANCER RISK

Автор: Ершов В.А. - зав. цитол. лаб. диспансера, кандидат мед. наук.

МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА МАЛОГО РАКА НА ФОНЕ ДИСГОРМОНАЛЬНОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ЖАНДАРОВА Л.Ф., КАЛМЫКОВА О.А., МЕЩЕРЯКОВА Л.А., ВОЛОДИНА Н.Г.

Саратовский ГМУ им. В.И.Разумовского МЗ РФ, Дорожная клиническая больница ОАО «РЖД» на ст. Саратов-11 Г. (г. Саратов, РФ)

Актуальность. Под влиянием дисгормональ-ных изменений в организме в молочной железе развиваются очаги патологической пролиферации эпителия. Эта трансформация существует многие годы с последующим развитием легкой, умеренной, тяжелой дисплазии и инвазивной формы рака, длительно протекающего латентно. Момент перехода дисгормональной гиперплазии в рак клинически выявить невозможно.

Существенное значение в уточнении характера патологического процесса имеет морфологическая диагностика. За последние годы широкое распространение получил цитологический метод. Достоинством его является простота и быстрота приготовления препарата, дешевизна исследования, безопасность для больного и высокая достоверность результатов, особенно на ранних стадиях рака.

Цель. Показать возможности морфологической диагностики малого рака на фоне дисгормо-нальной гиперплазии молочной железы.

Материал и методы исследования. Клиника онкологии располагает многочисленным опытом диагностики и лечения больных раком молочной железы. Разработана и внедрена оригинальная система активного поиска дисгормональных ги-перплазий и рака молочной железы, включающая выявление ранних форм рака при узловых образованиях молочной железы с помощью многоэтапной морфологической диагностики.

Результаты исследования. В клинике онкологии в 2016г. обследовано 967 больных с новообразованиями молочной железы. Первичный диагноз рака до операции установлен у 290 (29.9%) женщин. Эксцизионная биопсия у пациенток с дисгормональными гиперплазиями молочной

железы произведена 667 больным. При этом у 29 из них при экспрессном интраоперационном цитологическом исследовании на фоне умеренной и тяжелой дисплазии установлен диагноз рака, что составило 8.9% к числу всех диагностированных раков. При этом у всех женщин опухоли были малых размеров (до 0.8 см) в неметастатической стадии заболевания. Следует отметить, что при выполнении секторальной резекции существенным является достоверная оценка макроскопи-

ческой картины и правильный выбор участка опухоли или ткани для морфологического изучения. При плановом гистологическом исследовании рак верифицирован еще у 7 (1.5%) женщин.

Выводы. Применение этапного морфологического исследования позволило диагностировать ранний рак у 36 (10.4%) больных и, тем самым, увеличить количество органосохраняющих операций.

MORPHOLOGICAL DIAGNOSIS ОF SMALL CANCER ON THE BACKGROUND OF BREAST DYSHORMONAL HYPERPLASIA

Zhandarova L.F., Kalmykova O.A., Mescheryakova L.A., Bolodina N.G.

Авторы:

Жандарова Людмила Федоровна - доцент кафедры хирургии и онкологии СГМУ им. В.И. Разумовского. Калмыкова Ольга Алексеевна, - зав.цитологической лабораторией НУЗ. ДКБ ОАО РЖД На ст. Саратов -2; Мещерякова Лилия Александровна - врач цитологической лаборатории НУЗ. ДКБ ОАО РЖД На ст. Саратов -2; Володина Наталия Геннадиевна - врач цитологической лабораторииНУЗ. ДКБ ОАО РЖД На ст. Саратов -2.

ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ И ПСЕВДООПУХОЛЕВЫХ ПОРАЖЕНИЙ ОРБИТЫ

ЖИЛЬЦОВА М.Г., СААКЯН С.В., ВАЛЬСКИЙ В.В., ШАТИНИНА Н.Н.

МНИИ ГБ им. Гельмгольца МЗ РФ, Российская детская клиническая больница (г.Москва, РФ)

Актуальность. Цитологическая дифференциальная диагностика злокачественных опухолей и псевдоопухолевых поражений орбиты является одной из наиболее трудных и мало изученных. Уточнение гистогенеза опухолевого процесса имеет большое практическое значение, т.к. обуславливает тактику лечения.

Цель. Определить диагностические признаки для дифференциальной диагностики злокачественных опухолей орбиты и эффективность проведения иммуноцитохимических (ИЦХ) реакций на цитологических препаратах, полученных методом тонкоигольной аспирационной биопсии (ТИАБ).

Материалы и методы исследования. Проведено цитологическое исследование у 73 больных с подозрением на злокачественную опухоль орбиты с 2010-2015гг; из них с подозрением на рабдомиосаркому (РМСА)-16, на лимфому ор-биты-39 и на метастатическое поражение-18. ИЦХ исследование выполнено у 27 пациентов. В группе РМСА преобладали дети в возрасте от 3 месяцев до 13 лет. Группа взрослых составила

68 больных, монолатеральная форма поражения отмечена у 58, билатеральная - 10. ТИАБ выполнена амбулаторно у (12) и интраоперационно (61) параллельно методом ТИАБ и отпечатка. Приготовление и окраску цитологических препаратов проводили по стандартной методике. Исследование образцов для ИЦХ проводили методом им-муноцитохимии на мазках (Глузман Д.Ф.и соавт., 2005) с оценкой результатов методом световой микроскопии с использованием реагентов фирм DAKO. Спектр используемых антител: CD3,CD5, CD19, CD20, CD23, CD45, bcl-1, bcl-2, Desmin, Myo- D1, Myf-4, Myogenin, vimentin, S 100, HMB-45, Ki -67, CD- 68, pan CK.

Результаты исследования. В группе лимфо-идных поражений у 84% больных выявлена лим-фоидная природа опухоли, у 16%-неопухолевая природа процесса без уточнения диагноза. Проведенное гистологическое исследование верифицировало лимфому лишь у 82%, а в остальных случаях неопухолевую патологию: 2-лимфоидная гиперплазия, 2 - псевдоопухоль, 1-саркоидоз, 1-болезнь Вегенера.

Цитологический диагноз лимфомы базировался на выявлении лимфоидных элементов разной степени зрелости с признаками атипии. Морфологический вариант опухоли определяли типом лимфоцитов, преобладающих в мазке, учитывая размер, форму ядра, строение хроматина и расположение клеток. У большинства (63%) больных цитограммы представлены мономор-фной или диморфной популяцией атипических лимфоцитов (лимфо-пролимфоцитарная). При ИЦХ анализе (17) у всех больных иммунофено-тип соответствовал диагнозу лимфома. Характерной была экспрессия СЭ19, СЭ20, СЭ45, СЭ5, СЭ3(-), ВСЬ2. ИЦХ подтверждена В - клеточная природа опухоли у 81% больных. Выраженная экспрессия СЭ5 была наиболее характерна для лимфом зоны мантии (7), СЭ 10 - фолликулярной лимфомы (2).

В группе злокачественных сарком орбиты преобладала РМСА у 87.5% больных. Цитологический диагноз РМСА подтвержден гистологическим у 14 больных и у 2-х больных гистологически установлены и 1 - злокачественная параганглиома и 1 злокачественная пилоцитар-ная астроцитома.

Общим для всех типов цитограмм в этой группе явилось наличие выраженных признаков злокачественности опухоли у всех больных. Характерные структурные признаки: своеобразное расположение клеток в виде «пучков» и хаотичных скоплений, а также вытянутая форма клеток позволили установить миогенную природу у 10 из 14 больных. По особенностям цитологического мазка: наличию межуточного вещества, форме, размеру клеток и их расположению уточнен морфологический тип РМСА (7-эмбриональный, 1-альвеолярный).

В трудных случаях для уточнения диагноза проведено ИЦХ реакций у 8 больных. При ИЦХ анализе РМСА у всех больных отмечена выраженная положительная экспрессия ёеэшт, утепйп в 80% клеток опухоли, Муо-Э1, Муogenin. Т.обр.,

на основании цитологических исследований диагноз РМСА установлен у 71.8%, а при использовании ИЦХ у 85.7%.

В группе больных с метастатическими поражениями преобладал метастатический рак (16); из них подтвержден рак молочной железы в орбиту (8), метастаз рака матки (1) и в оставшихся случаях подтверждена метастатическая опухоль эпителиального генеза без уточнения локализации. В цитограммах метастаза рака молочной железы наблюдали атипические железистопо-добные структуры и анаплазированные клетки эпителиального генеза. При ИЦХ (2) выявлена положительная окраска на цитокератины рапСК Ьс1-1. При метастатической меланоме (2) в цито-граммах визуализировали резко полиморфные клетки крупного размера, обилие «зеркальных» и многоядерных клеток с гипертрофированными ядрышками и присутствием пигмента в цитоплазме.

При саркоидозе в мазке преобладали многоядерные гигантские клетки.

При опухолеподобных процессах цито-грамма отличается скудностью клеточных элементов, что дает возможность в ряде случаев, исключить лишь диагноз лимфомы и дать описательный ответ.

Выводы. Сформулированы основные диагностические признаки для дифференциальной диагностики лимфом и сарком орбиты. Подтверждена высокая достоверность ИЦХ реакций в цитологических препаратах. У 81% больных ИЦХ подтвердило В-клеточную природу лим-фоидных опухолей. Использование ИЦХ при РМСА повышает эффективность до 85.7%. У 61% больных с метастатическими опухолями ТИАБ явилась достаточной для морфологической верификации диагноза и позволила избежать диагностической биопсии.

При опухолеподобных процессах цитологическое заключение носит предварительный характер.

CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS OF MALIGNANT AND PSEUDOTUMORS LESIONS OF THE ORBIT

Ziltsova M.G., Saakian S.V., Valskiy V.V., Shatinina N.N.

Авторы:

Жильцова М.Г. - ст. научн. сотр. отдела офтальмоонкологии и радиологии института, кандидат мед наук; Саакян С.В. - рук. отдела офтальмоонкологии и радиологии института, доктор мед. наук, проф.; Вальский В.В. - главн. научн. сотр. отдела офтальмоонкологии и радиологии института, доктор мед. наук; Шатинина Н.Н. - Российская детская клиническая больница, доктор мед. наук.

ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКОГО МЕТОДА МАЗКОВ С ШЕЙКИ МАТКИ С СИСТЕМОЙ PROEXC

ИВАНЧЕНКО О.Г., ВЕЛЕГЖАНИНОВА Е.Е., ГУСЕВА М.Н.

Новгородский окружной онкологический диспансер (г. Великий Новгород, РФ)

Рак шейки матки (РШМ) уверенно занимает второе место среди всех онкологических заболеваний и пятое место в смертности женской популяции по всему миру. Одной из основных причин развития РШМ является персистенция в эпителии шейки матки(ШМ) вируса папилломы человека (ВПЧ), прежде всего штаммов 16 и 18, которые обнаруживают в 70-90% предраковых заболеваний ШМ и в 99% случаев инвазивных форм. Вирус относится к семейству Papoviridae и обладает структурой, типичной для данного таксона: три типа капсидных белков и кольцевая двуцепочечная ДНК с клеточными гистона-ми. Морфологическим проявлением активной репликации ВПЧ в эпителии шейки матки является интраэпителиальная неоплазия ШМ (CIN) различной степени выраженности. В последние десятилетия был достигнут значительный прогресс в выяснении молекулярных механизмов канцерогенеза и сформулировано представление о стадийности канцерогенеза, как процесса накопления в клетке генетических дефектов, вызывающих дискретные и необратимые изменения ее генотипа. Совершенствуются методы диагностики предопухолевых и опухолевых поражений, основанные на определении опухолевых антигенов и онкофетальных белков.

Клетки организма находятся в одном из трех возможных состояний: в клеточном цикле, в стадии покоя с сохранением возможности деления, и в стадии терминальной дифференцировки, при которой способность делиться полностью утрачена. В норме, стимуляция клеточного роста и последующее вхождение клетки в клеточный цикл инициируется факторами роста, которые воспринимаются с помощью соответствующих рецепторов. Передача сигнала от активированного рецептора до клеточного ядра осуществляется с участием многих других белков-трансдукторов. Это своего рода клеточное "реле". Такая передача часто идет путем фосфорилирования одним белком второго, вторым - третьего и т.д. Цепи передачи сигналов заканчиваются в клеточном ядре. Там происходит

активация так называемых факторов транскрипции, т.е. белков, связывающихся с регуляторными участками определенных элементов ДНК и регулирующих транскрипцию целевых генов. В частности, под действием факторов транскрипции на соответствующих генах происходит синтез матричных РНК, а на матрице последних - белков, необходимых для роста и размножения клеток. Наиболее драматическими периодами цикла являются митоз (фаза М) и синтез ДНК (фаза S), между которыми находятся два промежуточных периода (gap) - G1 и G2. На протяжении фазы G1существует ответственный момент, так называемая точка рестрикции (R), когда клетка решает, войдет ли она в следующий цикл деления или в стадию покоя (G0), в которой она может находиться неопределенно долго. Пролиферация клеток опухоли связана с нарушением регуляции этих механизмов, основные изменения наблюдаются при прохождении ключевых точек клеточного цикла. Онкобелки ВПЧ Е6 и Е7 обходят критические контрольные точки клеточного цикла, что приводит к длительному и аберрантному циклу индукции фазы S. Во время транскрипционной активации аберрантного клеточного цикла в пролифериру-ющих клетках увеличиваются уровни протеинов MCM2 (Mini chromosome maintenance protein 2) и TOP2A (DNAtopoisomerase 2-alpha). Первый участвует в пререпликационном комплексе, т.е. необходим для стадии инициации репликации ДНК и, соответственно, является одним из маркеров пролиферации при цервикальной интраэпители-альной неоплазии, плоскоклеточных РШМ, раке кожи, легких, пищевода, переходноклеточном раке мочевого пузыря, аденокарциномах эндометрия и простаты, муцинозной аденокарциноме яичников, почечноклеточном раке и лимфомах. Величина экспрессии MCM2 коррелирует со степенью дифференцировки опухолей. Увеличение уровня экспрессии TOP2A в участках CIN и РШМ, по сравнению с клетками нормального эктоцер-викса, также позволяет использовать белок в качестве онкомаркера.

Патологические изменения, выявленные при цитологическом скрининге РШМ, нуждаются в гистологическом подтверждении. Прицельная биопсия не обеспечивает достаточной надёжности верификации, и лишь качественно проведенная конизация ШМ сближает цитологические и гистологические заключения. Однако конизация ШМ имеет ряд противопоказаний и ограничений: к примеру молодой возраст, беременность, ранний послеродовый период, атрофия шейки матки со сглаживанием боковых сводов. Кроме этого, некоторые типы цитограмм сложны для интерпретации (атрофический тип мазка, выраженная пролиферация клеток цилиндрического эпителия) и в таких случаях необходима дифференциальная диагностика с использованием дополнительных методов.

Цель исследования

Выявление надежных методов диагностики, уточняющих результаты цитологических скри-нинговых исследований с целью увеличить специфичность диагностики и выбрать оптимальный объем лечебных мероприятий.

Материал и методы исследования

Соскобы из эндо- и эктоцервикса получены с помощью цитотщетки Rovers Cervex Brush (Нидерланды) в среду для жидкостной цитологии (Shure Path, BD). Собранный материал использовали для приготовления цитологического мазка с помощью системы (TriPath Imaging, Prep Stain), с последующим окрашиванием по Папаниколау. Из остаточного образца для определения про-лиферативной активности клеток использовано иммуноцитохимическое (ИЦХ) выявление MCM2 и TOP2A, с использованием реагентов SureDetect, которые входят в систему ProEх С и

позволяет определить наличие аберрантной индукции S фазы.

Авторы провели ИЦХ у 74 пациенток в возрасте от 20 до 74 лет с цитологической патологией разной степени выраженности. У 50 пациенток в последующем были произведены биопсия шейки матки, а у части из них конизация шейки матки, как диагностическая и лечебная процедура. У 32 пациенток (из 50) выявлена позитивная ИЦХ по определению аберрантной индукции S фазы. У 23 пациенток в последующем цитологический и гистологический диагноз совпали (у 8 пациенток после биопсии, был установлен диагноз с более низкой степенью дисплазии, после конизации зафиксировано совпадение диагнозов). У 9 пациенток патология не выявлена. У 6 из них пока произведена только биопсия. У 3 (из 9) после ко-низации при гистологическом исследовании плоский эпителий без атипии ( возможно неадекватно проведенная эксци-зия)

Использование системы ProEx С позволило установить выраженную экспрессию в ядрах более половины клеток при CIN высокой степени и наличие одиночных позитивных клеток при CIN 1. При атрофическом типе мазка экспрессия MCM2 и TOP2A не выявлялась.

Выводы

Таким образом, иммуноцитохимические исследования клеточных маркеров пролифератив-ных процессов при предопухолевых и опухолевых поражениях в дополнение к цитологическим исследованиям увеличивают специфичность диагностики, позволяют прогнозировать заболевание и выбрать необходимый объем лечебных мероприятий.

APPLICATION EXPERIENCE OF IMMUNOHISTOCHEMICAL METHOD FOR CERVICAL SMEARS WITH PROEXC

Ivanchenko O.G., Velegzhaninova E.E., Guseva M.N.

Авторы:

Иванченко О.Г. - зав. цитол. лаб. диспансера; Велегжанинова Е.Е. - врач цитол. лаб. диспансера; Гусева М.Н. - врач цитол. лаб. диспансера.

ОПЫТ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СИСТЕМЫ CYTO VISION В КЛИНИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

ИМЕЛЬБАЕВА Э.А., ГИЛЬМАНОВ А.Ж.

Башкирский государственный медицинский университет, г.Уфа

В настоящее время развитие клинической цитологии характеризуется внедрением компьютерных технологий, автоматизации, стремительным совершенствованием микроскопической техники, оборудования, разработкой новых алгоритмов и критериев дифференциальной диагностики патологических процессов. Отмечаются существенные изменения, связанные как с совершенствованием самих микроскопов, так и с применением компьютерных методов визуализации, регистрации и учета микроскопических препаратов, возможностями проведения морфо-метрических исследований. Надежность получаемых результатов при этом зависит от качества применяемых в лаборатории методов, оборудования, квалификацией сотрудников. В связи с этим особо важное значение имеет подготовка и совершенствование знаний и умений врачей, занимающихся цитологическими исследованиями в клинике.

На кафедре лабораторной диагностики Института дополнительного профессионального образования Башкирского государственного медицинского университета проводится первичная профессиональная переподготовка и циклы повышения квалификации врачей и специалистов с высшим немедицинским образованием по всем основным направлениям специальности, включая цитологию. Основной целью преподавания клинической цитологии в настоящее время является подготовка специалиста, способного и готового действовать в различных проблемных ситуациях. Для этого используется практикоо-риентированный подход, который требует наличия определенной материально-технической базы: достаточного количества оборудования (микроскопы, компьютеры, мультимедийная аппаратура), демонстрационного материала. Для повышения качества подготовки специалистов в соответствии с современными практическими требованиями нами внедрены новые технологии обучения, приобретена современная микроскопическая техника. В связи с появлением новой техники в процессе подготовки курсантов, особенно начинающих, уделяется большое внимание особенностям работы с микроскопом,

современной техникой, от качества которой во многом зависит результат работы специалиста в повседневной деятельности. Кроме того, в соответствии с требованиями времени, необходимо формировать (или совершенствовать имеющиеся) у обучающихся навыки работы с информацией, компьютерной техникой, письменного изложения мыслей, умение презентировать результаты работы и разнообразный спектр умений, которыми необходимы и в повседневной жизни, и на работе. Важным разделом курсов повышения квалификации врачей является закрепление навыков по ведению учетной документации согласно нормативным документам. Для учета результатов собственной работы и деятельности лаборатории в целом в настоящее время с большой пользой необходимо использовать персональный компьютер, системы фото- и видеорегистрации, создавая собственный виртуальный цитологический архив. Все эти требования возможно выполнить при наличии специальных компьютерных систем. В течение 2016-2017гг. на базе кафедры в процессе преподавания используются компьютерные системы Cyto Vision, Vision Heme, Vision QC производства West Medica (Австрия). Использование данных систем значительно повышает уровень приобретаемых знаний у обучающихся, предоставляя возможности в режиме реального времени совместно с преподавателем рассматривать препараты под микроскопом и на экране компьютера, детально изучая морфологические особенности клеток и тканей при патологических процессах, сравнивая выявленные особенности с рисунками из атласа, проводя исследования в соответствии с рекомендуемыми алгоритмами, формируя заключения по препаратам. Наряду с этим данные системы позволяют также обучить курсантов работе по формированию архивов изображений, сравнительным исследованиям патологических процессов в динамике их развития, морфометри-ческим методам. В процессе подготовки клинических ординаторов, врачей-интернов с применением системы Cyto Vision проводятся научные исследования с защитой курсовых работ, что позволяет им освоить принципы работы с данной

технологией, которые в дальнейшем могут быть востребованными в клинической практике.

Таким образом, несмотря на интенсивное развитие современной науки и техники, главным действующим лицом в клинической цитологии остается человек - врач, специалист КЛД, лаборант. С внедрением новых технологий практическая деятельность клинического цитолога

становится все более разнообразной, сложной и качественно более высокой по уровню развития, поэтому вопросы цитологической диагностики, контроля их качества, обучения на современном этапе развития требуют всестороннего внимания и использования новых методов исследования, компьютерных технологий в процессе преподавания.

THE EXPERIENCE OF USING THE CYTO VISION SYSTEM IN CLINICAL PRACTICE

Imelbaeva E. A., Gilmanov A. J.

Авторы:

Э.А. Имельбаева - проф. каф. лаб. диагностики, доктор. мед. наук; А.Ж. Гильманов - зав.каф. лаб. диагностики, доктор мед. наук, проф.

О ПРЕПОДАВАНИИ КЛИНИЧЕСКОЙ ЦИТОЛОГИИ В СИСТЕМЕ НЕПРЕРЫВНОГО МЕДИЦИНСКОГО ОБРАЗОВАНИЯ

ИМЕЛЬБАЕВА Э.А., ГИЛЬМАНОВ А.Ж., САЛИМЬЯНОВА Р.Р.

Башкирский государственный медицинский университет (г. Уфа, Республика Башкортастан,РФ)

В последние годы особое внимание в системе образования и здравоохранения уделяется вопросам качества медицинской помощи. Качество оказания медицинской помощи населению страны, оптимальное использование ресурсов системы здравоохранения, повышение эффективности здравоохранения субъектов РФ определяются уровнем подготовки медицинских специалистов, владеющих современными методами диагностики и лечения заболеваний, способных применять новейшие достижения медицинской науки, обеспечить профилактическую направленность ведения пациента. Для обеспечения качества меди-цинской помощи врач должен постоянно совершенствоваться. Он обязан быть в курсе но-вейших достижений медицинской науки и поддерживать на современном уровне свои знания и навыки. Для этих целей в системе образования осуществляется переход на непрерывное медицинское образование (НМО).

В последние годы в Республике Башкортостан (РБ) также происходят значительные реорганизации в системе медицинского образования, включая и подготовку специалистов клинической лабораторной диагностики. На базе нашей кафедры в настоящее время проводятся как традиционные циклы подготовки специалистов, так и циклы в системе НМО.

Традиционные циклы проводятся для специалистов, прошедших сертификационный экзамен до 1 января 2016г. В соответствии с Законом РФ «Об основах охраны здоровья граждан в РФ» № 323-ф3 от 21 ноября 2011г. им после окончания цикла из 144 часов (1 месяц обучения) выдается сертификат специалиста - документ единого образца, подтверждающий соответствие подготовки специалиста государственным образовательным стандартам. Сертификат свидетельствует о достижении специалистом уровня теоретических знаний и умений, достаточного для самостоятельной профессиональной (медицинской и фармацевтической) деятельности. В дальнейшем эти специалисты должны вступить в систему НМО: пройти регистрацию на сайте ЬИр^/птогозттгдгау.га в течение месяца после сертификации в 2016-2020гг., где в личном кабинете составляется индивидуальный план обучения (портфолио) медицинским работником путем добавления зарегистрированных на портале непрерывного медицинского образования МЗ России образовательных программ вузов, электронных материалов для самостоятельного обучения, образовательных мероприятий, организованных некоммерческими профессиональными медицинскими организациями.

Циклы по системе НМО на кафедре организуются для специалистов, прошедших сертификацию после 1 января 2016г. Для этого в текущем году разработаны, утверждены и представлены на сайте портала НМО рабочие программы планируемых циклов и сроки их проведения. Краткосрочные циклы (36 часов) проводятся по очно-заочной форме с включением дистанционных образовательных технологий и стажировки. При зачислении на цикл и в конце обучения проводится исходное и заключительное тестирование. Кроме того, в процессе обучения каждый из обучающихся должен выполнить выпускную аттестационную работу и защитить ее. Особенностью этих циклов является упор на самостоятельную работу обучающихся, заключающуюся в самостоятельном изучении иллюстративного материала, предоставленного преподавателем, и ответах на вопросы тестового контроля с применением компьютерной техники в удаленном режиме (на рабочем месте, в домашних условиях). Главной целью преподавания в настоящее время

является результат образования, т.е. совершенствование имеющихся компетенций, повышение профессионального уровня в рамках имеющейся квалификации, получение систематизированных теоретических знаний, умений и необходимых профессиональных навыков для своевременного выявления, диагностики, лечения и профилактики заболеваний. По итогам обучения при успешном освоении задач цикла обучающимся выдается удостоверение и выставляются полученные баллы в личном кабинете на портале НМО.

Таким образом, в процессе проведения циклов НМО авторы соблюдают основные принципы НМО, к которым относятся: 1) непрерывность процесса, 2) разнообразие образовательных активностей, т.е. мероприятий, проводимых в режиме реального времени в виде аудиторных занятий, конференций, семинаров, а также электронного обучения в форме самостоятельного обучения с последующим тестовым контролем (электронные модули), 3) обеспечение качества материалов и мероприятий, 4 присвоение кредитов.

THE TEACHING OF CLINICAL CYTOLOGY IN THE SYSTEM OF CONTINUOUS MEDICAL EDUCATION

Imelbaeva E.A., Gilmanov A.Zh., Salimyanova R.R.

Авторы:

Имельбаева Э.А. - проф. каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук; Гильманов А.Ж. - зав.каф. лаб. диагностики университета, доктор мед. наук, проф.; Салимьянова Р.Р. - доц. каф. гистологии с курсом цитологии университета.

АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ, ПРОВОДИМЫХ В ИШИМБАЙСКОЙ ЦРБ

ИШМУХАМЕТОВА Г.Т., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А., ГИЛЬМАНОВ А.Ж.

Ишимбайская ЦРБ (г. Ишимбай); Башкирский государственный медицинский университет, (г.Уфа), Республика Башкортастан, РФ

Население Ишимбайского района и г. Ишимбай обслуживается Ишимбайской ЦРБ, в структуре которой имеется одно хирургическое, педиатрическое, родильное подразделения, психоневрологическое, наркологическое диспансерное отделения, стоматологическая поликлиника, врачебно-физкультурный диспансер, отделение скорой медицинской помощи; Петровская участковая больница, Кулгу-нинская СУБ, Макаровская СВА, Иткуловская СВА, Ново-Аптиковская СВА, Верхоторская

СВА, Ахмеровская ВА, 37 ФАПов. Клинико-диагностическая лаборатория Ишимбайской ЦРБ функционирует на правах отделения и является лабораторией общего типа, обслуживает многопрофильную больницу на 581 коек круглосуточного пребывания, 60 коек дневного пребывания, 92 койки дневного стационара при поликлинике и поликлиники, обеспечивая общеклиническими, гематологическими, биохимическими, иммунологическими исследованиями. Лаборатория в своей структуре имеет 6 подразделений:

терапевтическое, хрургическое, педиатрическое, родовспоможения, кожно - венерологическое, цитологическое. Цитологические исследования проводят с 1981 г., обслуживаются все лечебно-профилактические учреждения Ишимбай-ской ЦРБ, с 2010 г. цитологическая лаборатория входит в состав КДЛ Ишимбайской ЦРБ. В лаборатории имеется необходимое оборудование и расходные материалы для изготовления препаратов для цитологических исследований. При цитологическом исследовании проводится микроскопия препаратов, окрашенных по Паппенгейму. Объектом цитологических исследований являются материалы, полученные при профосмотрах женщин, пункции новообразований различной локализации (кожа, молочная железа, печень, щитовидная железа, предстательная, яичко, лимфатические узлы, мягкие ткани, кость и др.), эндоскопический материал (бронхо-, эзофаго-, гастро-, дуодено-, лапаро-, ректоромано-, цистоскопии); эксфолиативный материал; соскобы с шейки матки, цервикаль-ного канала, взятые с диагностической целью, аспираты из полости матки, пункции серозных полостей (плевральная, асцитическая жидкости), соскобы и отделяемое с поверхности эрозий, язв, ран, свищей, отделяемое молочных желёз, мокрота и мазки-отпечатки операционного материала. При соблюдении правил получения, доставки, фиксации и окраски материала цитологическое исследование эффективно при всех локализациях предопухолевых процессов и опухолей. При диагностическом цитологическом исследовании результат выдаётся в виде описательной картины с последующим заключением на основе морфологической классификации опухолей и предопухолевых процессов.

За 2014-2016гг. в лаборатории проведено 93432 цитологических анализа. За последние 3 года отмечается рост числа цитологических исследований на 14%, в основном за счет диагностических случаев (на 19.0% против 10.3% в скрининговых исследованиях). В рамках национального проекта «Здоровье» в клинике были приобретены эндоскопические аппараты, в связи с чем количество анализов по материалам, полученным при эндоскопическом исследовании желудочно-кишечного тракта и легких возросло в 2 и в 2.3 раза, соответственно. Наблюдается также увеличение количества анализов, полученных с пораженных участков кожи (соскобы, отпечатки, пунктаты).

Всего за 2014-2016гг. проведено 44840 диагностических исследований (среднегодовой показатель - 14946 в год). Из них 83% диагностических исследований составляет гинекологический материал. В 2016г. исследованы также препараты печени и почек, полученные путем пунктирова-ния или интраоперационно. По остальным локализациям сохраняются среднегодовые показатели (молочная железа - 247, лимфатические узлы - 77, мочевой пузырь - 15, мокрота - 229, мягкие ткани - 50 случаев).

По результатам исследований наблюдается рост числа злокачественных процессов, выявленных цитологическим методом - в 2016г. выявлено на 60.1% случаев больше, чем в 2014г. За последние 3 года чаще выявляются опухоли кожи (94 случая, 16.9% общего числа выявленных опухолей), желудка (70 случаев, 12.6%), молочной железы (69 случаев, 12.4%), кишечника (61 случай, 10.9%).

За 2014-2016гг. проведены исследования 48592 мазков, полученных при профосмотрах женщин. Всего за эти годы цитологически по результатам гинекологических исследований был диагностирован 41 (0.08%) случай инвазивного рака и 153 (0.3%) случая тяжелой и умеренной степени дис-плазии эпителия шейки матки. Ежегодно выявляется в среднем 654 (1.3%) случая трихомониаза. За три года в 28 (0.06%) случаях в гинекологических препаратах выявлены признаки вирусного поражения, в 21 (0.04%) случае - хламидийной инфекции. Достаточно часто по препаратам выявляется бактериальный вагиноз (889 женщин, 1.8%). Выявление бактериального вагиноза в сочетании с данными клиники имеет особое значение у беременных женщин в профилактике самопроизвольных выкидышей и преждевременных родов.

Таким образом, цитологический метод является простым, быстрым, информативным, достаточно достоверным видом исследования и занимает прочное место в комплексном обследовании больных в условиях центральной районной больницы. Результат цитологического исследования часто является первым и необходимым звеном в своевременной и ранней диагностике опухолей различных локализаций, сокращает сроки обследования больных в условиях поликлиники и стационара, уменьшает число случаев нераспознанного рака и ошибочных диагнозов, что значительно повышает качество медицинского обслуживания и эффективность лечения.

THE ANALYSIS OF THE RESULTS OF THE CYTOLOGICAL STUDIES CONDUCTED IN ISHIMBAYSKIY CRB

Ishmukhametova T. G., Imelbaeva E.A., Gilmanov A. J.

Авторы:

Г.Т. Ишмухаметова - врач-лаборант КЛД Ишимбайск ой ЦРБ

Имельбаева Э.А. - проф. каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук;

Гильманов А.Ж. - зав.каф. лаб. диагностики университета, доктор мед. наук, проф.

АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В ДЕТСКОЙ ГИНЕКОЛОГИИ

КАМАЛОВА А.А., БЕЛОВА Т.А., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А., ГИЛЬМАНОВ А.Ж., ИМЕЛЬБАЕВ А.И.

Республиканская детская клиническая больница, Башкирский государственный медицинский университет, г.Уфа; Санкт-Петербургский государственный педиатрический медицинский университет, г. Санкт-Петербург (РФ)

В последние годы в связи с неблагоприятными демографическими тенденциями усилился интерес к изучению репродуктивного здоровья детей и подростков, поскольку с ними связана надежда на улучшение качества жизни ближайших поколений. При этом, на фоне резкого снижения рождаемости, стремительного роста общей смертности населения, сокращения средней продолжительности предстоящей жизни в стране отмечается прогрессивное ухудшение здоровья девушек: у 75.0% старшеклассниц обнаруживаются различные хронические соматические заболевания и 30.0% девочек переходят в III группу здоровья [Румянцева А.Г. 2002; Баранов А.А., 2003]. Ухудшение демографической ситуации в республике Башкортостан и снижение количества нормальных родов с 32% до 16% за последние 5 лет требуют от врачей развития гинекологической помощи девочкам и девушкам-подросткам.

Воспаление наружных половых органов в сочетании с воспалением влагалища (вульвова-гинит) занимает первое место в структуре гинекологических заболеваний девочек и девушек [Гоман Д.Н., 1996]. За последние годы наблюдается увеличение частоты и тяжести течения воспалительных заболеваний влагалища, что очевидно связано с широким распространением дисбиотических состояний, которые являются следствием часто неоправданного использования антибактериальных средств. До настоящего времени нет единой, общепринятой классификации вульвовагинитов у детей. Классификация вульвовагинитов по МКБ-10 опирается в основ-

ном на клинические проявления заболевания. Эта классификация является для практикующих врачей более удобной, однако в ней не приняты во внимание возрастные периоды жизни девочек. М.Л. Коршунов [1990] разработал классификацию микроскопической картины мазка у девочек различных возрастных групп, но в ней отсутствует характеристика морфотипов микроорганизмов, что крайне важно для определения тактики лечении с учетом биологических особенностей возбудителей вульвовагинитов.

С учетом вышеизложенного целью исследования явилась оценка показателей вагинальных цитограмм у детей в возрасте 0-8лет, выявление их особенностей у девочек с вульвовагинитами.

Материал для гинекологических мазков у детей в возрасте до 17 лет получали в общеклиническом отделе клинико-диагностической лаборатории Республиканской детской клинической больницы (РДКБ). В исследование были включены 118 пациенток, в т.ч. 18 (15.3%) детей до 1 года, 13 (11.0%) - 1 года, 17 (14.4%) - 2-х лет, 14 (11.9%) - 3-х лет, 14 (11.9%) - 4-х лет, 16 (13.6%) - 5-ти лет, 9 (7.6%) - 6-ти лет, 4 (4.4%) -7-ми лет, 13 (11.0%) - 8-ми лет. На момент обследования средний возраст пациенток составил 4.0 года (максимальный - 8 лет, минимальный -2 месяца). Из общего числа обследованных детей выделена группа детей с вульвовагинитами (37 девочек). Материал для цитологического исследования мазков из влагалища получали врачи-гинекологи смотрового кабинета РДКБ с помощью желобоватого зонда. Полученные

препараты доставлялись в клинико-диагностическую лабораторию РДКБ, где после фиксации в растворе Май-Грюнвальда окрашивали по Ро-мановскому-Гимзе (Диахим-ГемиСтейн-Р, НПФ ООО Абрис+, г. Москва). Препараты исследовали под малым (х100, х200) и большим (х1000) увеличением микроскопа Carl Zeiss Axio Lab.Al (Германия). При исследовании определяли количество клеток эпителия, лейкоцитов в одном поле зрения, оценивали состояние микробиоценоза по морфотипам выявляемой микрофлоры (кокки, бациллы, мелкие палочки, диплококки, нитчатые, дрожжеподобные грибы, простейшие). Исследование вагинальных цитограмм у детей проводили в каждой возрастной группе (до 1 года, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 лет). Всего анализировали 5 полей зрения, в каждом из которых определяли показатели, затем высчитывали средние значения для каждого показателя в 1 поле зрения. Полученные данные подвергали статистической обработке, определяя частоту выявления клеток, микроорганизмов, лейкоцитов в каждой группе детей, а также средние показатели их количества в 1 поле зрения (M+m). Статистические данные получали с применением пакета прикладных программ MS Excel 2010.

Проведенные исследования позволили определить особенности вагинальных цитограмм у девочек до 8 лет, обследованных у гинекологов РДКБ. Установлено, что в обследованной группе преобладали дети в возрасте до 1 года, 2-х и 5-ти лет, минимальный удельный вес составили дети в возрасте 6 и 7 лет. По результатам исследования, у всех детей до 8 лет выявлялся только базально-парабазальный тип цитограмм, что свидетельствует об их соответствии возрасту, отсутствии гормональных нарушений. Количество клеток эпителия в 1 поле зрения с возрастом у детей имеет тенденцию к снижению, содержание лейкоцитов в 1 поле зрения в вагинальных мазках у детей до 10 в поле зрения выявляется в 55.3%, от 10 до 20 - в 25.1%, более 20 - 25.1% случаев. Частота обнаружения минимального количества лейкоцитов (до 10 ед. в поле зрения) с возрастом повышается, что согласуется с результатами исследований содержания эпителиальных клеток и отражает постепенное становление защитных систем организма.

Изучение микробной флоры у детей показало, что в большинстве случаев (62.5%) у детей обнаруживается монофлора, представленная кокками. Микроорганизмы одного морфотипа (кокки

или палочки) выявялются в 68.6%, двух - в 28.8% и трех - только в 1 случае (0.8%). С возрастом у девочек отмечается тенденция к увеличению частоты выявления кокковой флоры. Аналогичная закономерность выявляется и по частоте выявления только одного морфотипа микроорганизмов. Эти данные также отражают повышение эффективности механизмов защиты слизистых оболочек.

Анализ цитограмм в группе детей с вульвова-гинитами (37 человек) показал, что содержание лейкоцитов в их мазках достоверно превышает значения показателя в целом по обследованной группе (р<0.05). Обнаружение монофлоры составило 17.8% против 68.8%, кокков - 14.8% против 62.5%, двух морфотипов микроорганизмов -43.2% против 28.8% в целом по обследованной группе детей. Полученные данные совпадают с показателями для неспецифических вульвоваги-нитов у детей в возрасте до 8 лет, представленными М.Л.Коршуновым (1990). В результате анализа заболеваемости по возрастам было выявлено, что максимальная доля вульвовагинитов приходится на возраст 3 и 7 лет, что согласуется с данными литературы и объясняется тем, что первый подъём объясняется уменьшением внимания родителей к туалету наружных гениталий у детей, наиболее выраженной аллергизацией детей 2-3 лет. Второй подъем связан с недостаточными гигиеническими навыками девочек, увеличением количества простудных заболеваний и энтероби-оза в возрасте 7 лет. Полученные данные в целом позволяют выявить особенности вагинальных цитограмм у детей в возрасте от рождения до 8 лет, которые характеризуются уменьшением показателей десквамации эпителия, снижением напряженности защитных факторов по мере взросления детей, что приводит в конечном счете к снижению микробной колонизации слизистой оболочки. Воспалительные процессы характеризуются выраженными сдвигами показателей цитограмм: усилением десквамации эпителия, повышением содержания лейкоцитов, увеличением количества морфотипов микроорганизмов. Высокая распространенность вульвовагинитов и других заболеваний половой сферы диктует необходимость проведения дальнейших исследований вагинальных цитограмм у детей и подростков, разработки возрастных показателей нормы и патологических состояний, что крайне необходимо для адекватной оценки получаемых результатов и назначения соответствующего лечения.

ACTUAL PROBLEMS OF CYTOLOGICAL STUDIES IN PEDIATRIC GYNECOLOGY

Kamalova A. A., Belova T.A., Imelbaeva E. A., Gilmanov A. Zh., Imelbaev A. I.

Авторы:

Камалова А.А. - врач клин. лаб. диагностики больницы; Белова Т.А. - врач клин. лаб. диагностики больницы;

Имельбаева Э.А. - проф. каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук; Гильманов А.З. - зав.каф. лаб. диагностики университета, доктор мед. наук, проф.;

Имельбаев А.И. - ассистент каф. лучевой диагностики и биомедицинской визуализации Санкт-Петербургского гос. педиатрического мед. университета.

ЧАСТОТА ИНТРАЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ПОРАЖЕНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ, АССОЦИИРОВАННЫХ С НОСИТЕЛЬСТВОМ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА ВЫСОКОГО ОНКОГЕННОГО РИСКА СРЕДИ ЖЕНСКОГО НАСЕЛЕНИЯ ПО Г. НЕФТЕКАМСКУ РЕСПУБЛИКИ БАШКОРТОСТАН

КЛЮЧНИКОВА Н.Г., НУРЕТДИНОВА Л.Х., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А.

ООО «Лаборатория медицинских анализов К'Lab» (г. Нефтекамск); Башкирский государственный медицинский университет (г.Уфа), РФ

Реальной профилактикой рака шейки матки (РШМ) является своевременное выявление и лечение облигатных предраковых заболеваний. Основным фактором цервикального канцерогенеза считается экзогенное влияние персистирующей папилломавирусной инфекции. Среди эндогенных модифицирующих факторов в генезе малиг-низации эпителия шейки матки наиболее важной представляется роль иммунной системы. Иммунодефицит является обязательным компонентом прогрессирования любой вирусной инфекции, что ведет к признанию необходимости сочетания этиотропного лечения с корректировкой ассоциированных с ними иммунологических дефектов.

Целью исследования явился анализ частоты и глубины интраэпителиальных поражений у носительниц вируса папилломы человека (ВПЧ) высокого риска в различных возрастных категориях.

Исследования проводили на базе ГБ г. Нефтекамск, ООО «Лаборатория медицинских анализов K'Lab» г. Нефтекамск. Методы включали цитологическое исследование материала, полученного при профилактическом гинекологическом осмотре и приготовленного традиционным методом окраски по Паппенгейму на аппарате с автоматической фиксацией и окраской мазков «Эмкостейнер-Авто» (ООО"ЭМКО", Москва, РФ) с последующим изучением цитологических препаратов на микроскопе Leika DM 2000 (фирма Leica, Германия) с возможностью съемки, со-

хранения и архивирования отснятого материала. ВПЧ-тестирование проводили методом ПЦР с использованием наборов РеалБест ВКР генотип (16, 18, 31, 33, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 типы) (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, Россия), РеалБест ДНК ВПЧ 6/11 (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, Россия) на термоциклере вБХ96 (ВюКаё, США) в режиме реального времени. Для анализа данных лабораторных исследований использовалась лабораторная информационная система дМС ООО «Лаборатория медицинских анализов К'ЬаЬ». У женщин с выраженными цитологическими изменениями шейки матки и при патологической кольпоскопической картине проводили гистологические исследования.

На первом этапе был проведен анализ но-сительства ВПЧ среди женщин в возрасте 16-70 лет - всего 160 человек. По полученным данным, наибольший процент носительства отмечен в возрастной категории 26-35 лет - 50% (80 чел.), далее по убывающей 16-25 лет - 27.5% (44 чел.), на третьем месте женщины 36-45 лет -15.6% (25 чел.), далее женщины 46-55 лет - 5.6% (9 чел.), 56-70 лет - 1.3% (2 чел.). По верификации вируса по типам чаще всего выявлялся 16 тип -76.3% (122 чел.), на втором месте 18 тип 15.0% (24 чел.), сочетание 16,18 типов было выявлено у 3.1% (5 чел.), сочетание 16 и 31 типов - у 1.3% (2 чел.), 31 тип обнаруживался у 0.6% (1 чел.), 31 и 33 типы - у 1.3% (2 чел.), 33 тип - у 0.5% (1 чел.),

45 тип - у 0.6% (1 чел.), в одном случае выявлено сочетание 11 и 16 типа (0.6%) и по одному случаю выявлено наличие 45 и 51 типа (по 0.6%).

На втором этапе анализированы результаты цитологических и гистологических исследований. Цервикальные интраэпителиальные изменения наблюдали у 28.8% носительниц ВПЧ (46 чел.), из них - состояние ASCUS выявлено у 3.8% (6 чел.), LSIL - у 13.1% (21 чел.), HSIL - у 8.8% (14 чел.), carcinoma in situ - у 3.1% обследованных лиц (5 чел.). Совпадение результатов цитологических и гистологических исследований составило 95.7%. В одном случае ASCUS гистологически установлен диагноз carcinoma in situ и в одном случае LSIL была верифицирована CIN II. Эти случаи, возможно, были связаны с тем, что небольшие участки ткани с наиболее выраженной патологией не попали в материал для цитологического исследования.

Carcinoma in situ диагностирована у 5 женщин в возрасте 25, 28, 32, 38, 50 лет (все женщины-носительницы ВПЧ 16 типа), в т.ч. в двух случаях (у женщин 28 и 32 лет) отмечено ускоренное развитие патологии от LSIL до carcinoma in situ менее, чем за 12 месяцев.

Наибольшее количество случаев с HSIL (9 чел. из 14, т.е. 64.3%) отмечено в возрастной категории женщин 36-45 лет, затем 26-35 лет - 28.5% (4 чел. из 14), далее 16-25 лет 7.2% (1 чел. из 14). С LSIL на первом месте возрастная категория 26-35 лет -38.1% (8 человек из 21), на втором месте женщины 16-25 и 36-45 лет (5 чел. из 21; 19.0%), на третьем - женщины 46-55 лет - 14.3% (3 чел. из 21). Все женщины получили адекватное лечение, сейчас результаты цитологических анализов в норме.

Провоцирующим фактором для прогресси-рования интраэпителиальных неоплазий у женщин-носительниц ВПЧ может быть наступление беременности. Так, у молодой женщины 22 лет, носительницы ВПЧ 31 типа при наступлении беременности развивалась HSIL, после прерывания беременности (одна внематочная, одна- замершая) цитограмма возвращалась в норму, в настоящее время женщина взята на учет онкогинеколога по месту жительства в женской консультации.

Следует отметить, что проблема ВПЧ-инфек-ции в гинекологии далека от своего решения, и многие вопросы составляют предмет проводимых в настоящее время исследований. Остаются открытыми вопросы по тактике ведения беременных с ВПЧ-инфекцией. Инфицированная ВПЧ женщина может не знать о заболевании, т.к. не видит пораженные участки, не чувствует боли, а заболевание не имеет специфических симптомов. Диагностировать папилломавирусную инфекцию может только врач. Многое зависит от социально-поведенческих установок женщины, ее мотивации, позитивного настроя на сотрудничество с врачом, в осознании необходимости лечения. Необходимо совершенствовать скри-нинговые программы с увеличением охвата женского населения, чтобы снизить возможность «проскальзывания» пациенток через сеть цитологического скрининга.

Выводы:

1. Среди женщин-носительниц ВПЧ высокого риска цервикальные интраэпителиальные поражения встречают с частотой 28.8%.

2. Наиболее тяжелые интраэпителиальные цервикальные поражения связаны с носитель-ством ВПЧ 16 типа - все случаи carcinoma in citu были ассоциированы с ВПЧ 16 типа; случаи LSIL,HSIL - с ВПЧ 16 типа или ВПЧ 16 в сочетании с другими типами ВПЧ, или ВПЧ 31 типа. Случаи тяжелых интраэпителиальных поражений чаще отмечены у женщин репродуктивного и трудоспособного возраста, в т.ч. ускоренные - в течение 12 месяцев - случаи развития патологии шейки матки от LSIL до carcinoma in situ.

3. Создание единой информационной базы данных и интеграция информационных систем лабораторной службы и лечебных учреждений совершенствует учет и ведение пациенток с патологией шейки матки. Необходимо совершенствование скрининговых программ с увеличением процента охвата женского населения. Не последнюю роль играет санитарно-просветительская работа, особенно среди подрастающего поколения, т.к. инфицирование происходит в дебюте половой жизни.

THE FREQUENCY OF INTRAEPITHELIAL LESIONS OF THE CERVIX ASSOCIATED WITH CARRIAGE OF HUMAN PAPILLOMAVIRUS HIGH-RISK TYPES AMONG WOMEN OF NEFTEKAMSK RB

Klyuchnikova N.G., Nuretdinova L.H., Imelbaeva E.A. Авторы:

Ключникова Н.Г. - зав. лаб. ООО «Лаб. мед. анализов K'Lab»;

Нуретдинова Л.Х. - биолог ООО "Лаб. мед. K'Lab»;

Э.А. Имельбаева - проф. каф. лаб. диагностики университета.

ОПЫТ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ МОЧЕВОГО ПУЗЫРЯ

КОЗОРЕЗОВА Е.С.1, АГЕЕВА Т.А.2, ПЕТРОВ В.Б.1, СТРЕЛЬЧЕНКО О.В.1, КУНИН И.С.1, ЗАРИПОВ М.М.1, ЮРОВ М.А.1

1 Сибирский Окружной Медицинский Центр ФМБА России,

2 Новосибирский государственный медицинский университет МЗ России (г. Новосибирск, РФ)

Актуальность. Уротелиальный рак мочевого пузыря (РМП) занимает 4 место по распространённости. Неинвазивный РМП (Tis, Ta, T1) в соответствии с WHO Classification of Tumors: Tumours of the Urothelial Tract, 2016г. подразделяется на уротелиальный рак in situ, папиллярный уротелиальный РМП с низким потенциалом злокачественности и папиллярный уротелиальный РМП с высоким потенциалом злокачественности. В последней классификации уротелиаль-ных неоплазий добавлены дисплазия уротелия, уротелиальная пролиферация с неопределенным потенциалом злокачественности (гиперплазия). Папиллярный уротелиальный РМП с низким потенциалом злокачественности составляет около 70% от всех впервые выявленных случаев рака, характеризуется неагрессивным течением, низкой смертностью пациентов, но высокой частотой возникновения рецидивов (около 70%). Прогноз, как правило, благоприятный, но примерно в 10-15% случаев наблюдается прогрессирование до рака с высоким потенциалом злокачественности или инвазивного рака.

Этот тип опухолей представляет определенные сложности при цитологической диагностике. По данным литературы, чувствительность цитологического метода зависит от степени клеточной дифференцировки и достигает при G1 -28%, G2 - 77%, G3 - 90%, составляя в среднем около 40%.

Остальные 30% РМП - мышечно-инвазивный уротелиальный рак (>T2) - ассоциированы с худшим прогнозом, низкими показателями выживаемости. По данным ряда авторов, чувствительность цитологического метода при исследовании уротелиальных неоплазий с высоким потенциалом злокачественности достигает 90-100%.

Стандартные методы диагностики РМП: цитологическое исследование мочи, спиртовых смывов с мочевого пузыря, визуализирующие методы диагностики, цистоскопия, гистологическое исследование биоптатов.

Цель исследования: оценить возможности применения полуколичественного метода оценки клеточных изменений и степени клеточной дифференцировки при диагностике поражений мочевого пузыря.

Материал и методы исследования. В исследование включено 59 пациентов, проходивших обследование в урологическом отд. СОМЦ ФМБА России. В исследование включены пациенты с рецидивирующим РМП (32 из 59 человек) и пациенты с впервые выявленными изменениями слизистой оболочки мочевого пузыря (27 пациентов). Количество и размеры папиллярных образований, визуализируемых при уретроци-стоскопии - от единичных, размером 0.2 см, до множественных, размером до 7 см в диаметре. Во всех случаях было выполнено цитологическое и гистологическое исследование опухолевых образований, проведено сопоставление морфологических результатов. На первом этапе исследовали рутинные цитологические препараты, приготовленные из спиртовых смывов из мочевого пузыря по методу В.Т. Кузьмина, полученных в ходе цистоскопии. Полученные смывы центрифугировали, из осадка готовили традиционные мазки. Фиксацию и окраску цитологических препаратов проводили по методу Май-Грюнвальд-Гимза, оценку клеточного состава - с использованием полуколичественного метода и измеряли в баллах (от 0 до 2б). Степень дифференцировки клеток при цитологическом исследовании оценивали по следующим критериям: выраженность когезии (преобладание клеточных комплексов или разрозненно расположенных клеток опухоли), форма и размер клеток опухоли, выраженность атипии ядер (оценка степени атипии ядер по R.de May (2008), включающая оценку ядер-но-цитоплазматического соотношения, наличия и размера ядрышек, структуру хроматина, контуры ядерной мембраны), выраженность некро-биотических изменений.

При формулировании заключения учитывали клинические, лабораторные и инструментальные данные. На втором этапе изучали гистологиче-

ские препараты данных больных, приготовленные стандартным методом из фиксированного в формалине биопсийного цистоскопического материала.

Результаты исследования. Показатели совпадения результатов цитологического и гистологического методов диагностики:

- Доброкачественные опухолевые и неопухолевые изменения слизистой оболочки и не-оплазии с неопределенным потенциалом злокачественности (воспалительные изменения слизистой оболочки, лейкоплакия, дисплазия и гиперплазия уротелия, уротелиальная папиллома) ~ 90 % (28 случаев из 30),

- неинвазивный папиллярный уротелиаль-ный РМП с низким потенциалом злокачественности в1 (Бигтапп) - 75% (в 6 случаях из 8),

- неинвазивный папиллярный уротелиаль-ный РМП с низким потенциалом злокачественности в2 (Бигтапп) - 62.5% (в 5 случаях из 8),

- неинвазивный папиллярный уротелиаль-ный рак с высоким потенциалом злокачественности в3 (Бигтапп) - 100% (в 4 случаях из 4),

- уротелиальный РМП (вероятнее всего, МИРМП) - 90% (в 8 случаях из 9).

Заключение: диагностическая ценность рутинного цитологического метода при диагностике РМП значительно повышается, в среднем достигая 79%, при использовании полуколичественного метода оценки клеточных изменений и степени клеточной дифференцировки опухолевого субстрата. Повышение эффективности цитологического метода диагностики, а значит более точная морфологическая верификация опухоли на дооперационном этапе, напрямую влияет на определение клиницистами тактики лечения, объем хирургического вмешательства, выбор терапевтических методов лечения.

EXPERIENCE OF CYTOLOGICAL DIAGNOSIS OF LESIONS OF THE BLADDER

Kozorezova E.S., Ageeva T.A., Petrov V.B., Strelchenko O.V., Kunin I.S.

Авторы:

Козорезова Е.С. - врач клин. лаб. диагностики патологоанатомического отделения СОМЦ;

Агеева Т.А. - проф. каф. патол. анатомии ВПО НГМУ, доктор мед. наук;

Петров В.Б. - зав. патологоанатомическим отделением СОМЦ;

Стрельченко О.В. - директор СОМЦ, кандидат мед. наук;

Кунин И.С. - зав. урол. отд., врач-уролог-онколог, кандидат мед. наук .

О ПРЕПОДАВАНИИ КЛИНИЧЕСКОЙ ЦИТОЛОГИИ: УСПЕХИ, ПРОБЛЕМЫ, ПЕРСПЕКТИВЫ

КОТОВ В.А.

ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова МЗ РФ (г. Санкт-Петербург, РФ)

Клиническая цитология является общепризнанным методом морфологической диагностики. Одним из важнейших условий качественной цитологической диагностики является качественная подготовка сотрудников цитологических лабораторий: лаборантов и врачей. Хочу поделиться собственным многолетним опытом преподавания клинической цитологии разным контингентам слушателей: студентам медицинского колледжа и ВУЗа, а также последипломной подготовки лаборантов и врачей цитологических лабораторий.

Успехи. Первые сведения о цитологической диагностике студенты СЗГМУ им. И.И. Мечнико-

ва получают во время вводных лекций «Методологические основы цитологической диагностики патологических процессов» на всех факультетах (обычно это 5 и 6 курс), а также в студенческом научном обществе на кафедре патологической анатомии (руководитель СНО профессор Н.М. Хмельницкая). У нас есть положительный опыт преподавания клинической цитологии врачам клиническим ординаторам хирургического и акушерско-гинекологического профиля. В Медицинском колледже № 3 г. Санкт-Петербурга преподавание основ клинической цитологии проводится на последнем курсе по специальности «Лабораторного диагностика». Слушатели зна-

комятся с введением в метод, основными методиками, современными классификациями, организацией работы цитологической лаборатории, основами микроскопии, пишут рефераты и сдают зачет. Важным этапом преподавания цитологии является последипломное образование. В настоящее время происходит постепенный переход к непрерывному медицинскому образованию. На курсе цитологии кафедры патологической анатомии СЗГМУ им. И.И. Мечникова в течении 35 лет проводятся циклы общего усовершенствования «Клиническая (цитологическая) лабораторная диагностика» (216 учебных часов). Состав слушателей представлен не только врачами КЛД, но и врачами-патологоанатомами, а также врачами клинических специальностей. По мере комплектования учебных групп проводились также циклы усовершенствования для лаборантов-цитологов г. Санкт-Петербурга, Ленинградской области и других регионов России «Современные методы цитологической диагностики» (144 учебных часа).

Проблемы. Отсутствие специальности «клиническая цитология» в Номенклатуре медицинских специальностей МЗ РФ приводит к тому, что отсутствует как предмет, так и соответственно программа по проведению занятий для студентов ВУЗов. По моим данным, специальные занятия по цитологии проводились только в Сибирском государственном медицинском университете г. Томска. Хотя на лабораторном отделении Медицинского колледжа № 3 есть программа «Основы цитологии», но ее явно недостаточно, чтобы подготовить специалистов среднего звена для практической работы в цитологической лаборатории, в частности, для участия в прове-

дении первого этапа цитологического скрининга рака шейки матки. Последипломное образование врачей проводится в Российской Федерации на разных кафедрах: клинической лабораторной диагностики, онкологии, патологической анатомии. Однако, отсутствует унифицированная национальная программа первичной профессиональной подготовки. Наличие сертификата по КЛД и прохождение цикла по цитологии (144-216час.) позволяет в настоящее время заниматься цитологической практикой. Во многих случаях это, к сожалению, дискредитирует наш метод диагностики.

Перспективы. Необходимо ввести «Клиническую цитологию» в перечень изучаемых дисциплин как в высших, так и в средних образовательных медицинских учреждениях. В Проектах профессиональных стандартов специалистов в области патологической анатомии и клинической лабораторной диагностики определённый раздел занимает клиническая цитология. Поэтому является перспективным ее преподавание на кафедрах патологической анатомии ВУЗов, с возможным с формированием в будущем врача-патолога общего профиля с дальнейшей узкой специализацией (в частности, врача патоцитолога). Переход к непрерывному медицинскому образованию как врачей, так и лаборантов-цитологов, ставит перед преподавателями качественно новые задачи по проведению краткосрочных ежегодных тематических циклов.

Назрела необходимость системного и унифицированного подхода к преподаванию клинической цитологии в России на всех уровнях: от студента медицинского колледжа до врача-цитолога.

ABOUT TEACHING CLINICAL CYTOLOGY: SUCCESS, PROBLEMS, PROSPECTS

Kotov V.A.

Авторы:

Котов В.А. - доцент каф., кандидат мед. наук

ОБНАРУЖЕНИЕ ПРОСТЕЙШИХ И КЛЕЩЕЙ ПРИ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ НА АМБУЛАТОРНО-ПОЛИКЛИНИЧЕСКОМ ЭТАПЕ И ПРИ ПРОВЕДЕНИИ ОБУЧЕНИЯ

КУЛЕШОВА С.В.12, МИНУШКИНА Л.О.13

1 «Поликлиника №2» УДПРФ, 2 ВПО РНИМУ им. Н.И. Пирогова МЗ России, каф. клин. лаб. диагностики факультета усовершенствования врачей, 3 ДПО ЦГМА УДПРФ (г. Москва, РФ)

Клинико-диагностическая лаборатория (КДЛ) Поликлиники №2 УДПРФ выполняет общеклинические, гематологические, коагулологические, биохимические, иммунологические и цитологические исследования в режиме двухсменной работы. На долю цитологических анализов в прейскуранте приходится 18 услуг. Поликлиника №2 при выборе наименований лабораторных услуг ориентировалась на справочники-кодификаторы системы обязательного медицинского страхования. С 2015 по 2017гг. КДЛ выполнила только лабораторных исследований, без учета взятий крови 978335. Цитологических исследований было выполнено 17292, что составило 1.7% общего количества. Учет выполненной работы, нагрузки и, в случае выявления, патологии - проводился по заказанной услуге. Таким образом, анализ деятельности с 2015 по 2017гг. выглядит следующим образом: обследовано 6847 пациентов, для них выполнено 9424 услуг, что составило 17292 исследования. Патологические результаты обнаруживались в 38% случаев. На исследование направлялся материал как с опухолевых, так и неопухолевых поражений. Часть поражений сопровождалась выраженным воспалением, часть поражений сопровождалась реактивными клеточными изменениями. При исследовании обнаруживали представителей клещей (Demodex spp), гельминтов (Dirofilaria repens), патогенных жгутиковых простейших (Trichomonas vaginalis ) и непатогенных амёб.

Целью работы было проанализировать частоту обнаружения и возможные ошибки трактовки данных находок на амбулаторно-поликлиниче-ском этапе в рутинной практике и в процессе проведения подготовки специалистов-цитологов.

Пациенты и методы исследования

Цитологический анализ проводился на бинокулярном микроскопе AXIOLAB (Австрия). Контроль качества цитологических исследований организован и проводился на преаналити-

ческом, аналитическом и постаналитическом этапах. Материал окрашивали азуром-эозином по Романовскому, с фиксацией препаратов по Май-Грюнвальду (НПФ «Абрис +»). Проведено 17292 цитологических исследования биологического материала различной локализации для 6847 пациентов в возрасте от 18 до 92 лет.

Результаты исследования и их обсуждение

Патологические результаты выявлены у 2829 пациентов и распределялись следующим образом: образования кожи и молочной железы 119 случаев, исследование транссудатов - 19 случаев, исследования соскобов с поверхности эрозий - 81 и при исследовании пунктатов опухолей и предопухолевых образований (кроме кожи и молочной железы) - 11 случаев. Цитологический анализ отделяемого женских половых органов выявил патологию у 2480 пациентов в 3315 случаев, что составило 35.5% всех выполненных анализов группы «цитологические исследования». Обнаружение нематоды (Э11^1апа герепэ) хоть и произошло при исследовании материала, присланного для цитологического анализа, но проводилось отдельно от описания клеточного материала пациента. Диагностика проводилась макроскопически и микроскопически после извлечения. Данные по гельминтозу в обсуждение не вошли.

Среди поражений неопухолевой природы чаще всего обнаруживался Эешоёех эрр. Обнаружение клеща было в 5 случаях в соскобах кожи и в 1 случае при исследовании отделяемого из соска молочной железы (атипичная локализация). Пациенты были направлены дерматологом в трех случаях, онкологом в 2 случаях и гинекологом в 1 случае. В двух случаях при исследовании материала отделяемого женских половых органов в материале, направленном врачами-гинекологами были обнаружены трихомонады. И в трех случаях были обнаружены трофозоиты непатогенных амёб. Один случай от врачей-гинекологов, два

случая от стоматологов. Во всех случаях морфология и размеры находок позволяли без труда проводить дифференциальную диагностику и классифицировать обнаруженных простейших и клещей. Наличие Trichomonas vaginalis во всех случаях было подтверждено методами ПЦР. В 9 из 11 описываемых случаев пациенты предъявляли различные жалобы во время осмотра. В двух -обнаружение демодекса в отделяемом из соска и в соскобе с кожи - у пациентов жалоб не было.

Препараты с обнаруженными простейшими и клещами были предложены для самостоятельных занятий курсантам кафедры клинической лаб. диагностики факультета усовершенствования врачей РНИМУ им. Н.И. Пирогова на цикле профессиональной переподготовки и повышения квалификации. Курсанты профессиональной подготовки (100%) не увидели в препаратах Trichomonas vaginalis, трофозоиты непатогенной амёбы и клеща в четырех из 6 случаев. В двух препаратах курсанты обратили внимание на клеща (80%), но правильного названия дать не смогли. В группе курсантов цикла повышения квалифи-

кации при первом ознакомлении с препаратами клещ был правильно увиден и назван (90% ) в 5 случаях из 6. Trichomonas vaginalis были определены всеми курсантами (100%) в имеющихся двух препаратах. Однако, при цитологическом исследовании препаратов с трофозоитами непатогенной амёбы в 75% ответов по одному из препаратов был дан ответ «найдены трихомонады», а по другому препарату кроме элементов воспаления ничего указано не было всеми курсантами. Таким образом, возможность столкнуться при цитологическом исследовании любого диагностического материала не только с клетками человеческого организма велика. На наш взгляд, знания о возможных «находках» при цитологических исследованиях должны входить в программы повышения квалификации и переподготовки специалистов. Умение видеть и называть представителей простейших и членистоногих не менее важно в практике на амбулаторно-поли-клиническом этапе, как и клеток с атипией или возбудителей заболеваний передающихся половым путем.

DETECTION OF PROTOZOA AND TICKS IN CYTOLOGICAL STUDIES IN THE OUTPATIENT STAGE AND DURING THE TRAINING

Kuleshova S.V., Minushkina L.O.

Авторы:

Кулешова С.В. - зав. лаб., ассистент каф. клин. лаб. диагностики факультета усовершенст-вования врачей РНИМУ им. Н.И. Пирогова;

Минушкина Л.О. - проф. каф. терапии, кардиологии и функциональной диагностики с курсом нефрологии ЦГМА УДПРФ доктор мед. наук.

МЕТОД МОРФОМЕТРИИ В ДИАГНОСТИКЕ ВПЧ-АССОЦИРОВАННОЙ ПАТОЛОГИИ ШЕЙКИ МАТКИ ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ

ЛЁШКИНА Г.В., ШИПУЛИНА О.Ю., ГРАЧЁВА О.М., БОРИСОВА Э.В., ШАБАЛОВА И.П., НАЗАРОВ А.

ЦНИИ эпидемиологии, кафедра лабораторной диагностики РМАНПО МЗ РФ (г. Москва, РФ)

Цель исследования

Провести морфометрическое исследование цитологических препаратов пациенток с ВПЧ-ас-социированной патологией шейки матки тяжелой степени и оценить использование этого метода в сложных для диагностики наблюдениях.

Материалы и методы

Проведен ретроспективный анализ результатов исследования у 18 пациенток. Для приго-

товления препаратов использовали жидкостную цитологию (SP BD). Цитологическое заключение формулировали согласно системе (классификации) Бетесда (2014 г.). Заключение NILM (в пределах нормы) установлено 4 женщинам, NILM (реактивные изменения)-5, HSIL (CIN II)-5, HSIL (CIN III)-2, HSIL (CIS)-1, SCC-1. Наличие и титр вируса ВПЧ высокого онкогенного риска определяли методом ПЦР RT ("Амплисенс", РФ)

Работу с изображениями проводили с помощью следующих инструментов: маски (выделение объекта на изображении), углы (создание углов), точки (создание точек подсчёта, используемых для подсчёта объектов). Определяли следующие морфометрические параметры: площадь и периметр ядра, площадь и периметр цитоплазмы, площадь клетки, ядерно-цитоплазмен-ное соотношение, оптическая плотность ядра и цитоплазмы. Морфометрические исследования проведены на 557 клетках: NILM (норма) - 100 клеток, NILM (реактивные изменения) - 107, HSIL (CIN II) - 104, HSIL (CIN III) - 107, dS - 40, SCC - 99, Морфометрические исследования проводили с помощью системы анализа изображения СуШ-"^юп (West-Medica, РФ).

Результаты исследования

Тест на HPV высокого риска был положительным во всех наблюдениях HSIL и рака, отрицательным у женщин с NILM. Обнаружена значимая разница по основным сравниваемым морфометрическим параметрам между нормой, реактивными изменениями и тяжелой патологией CIN II+ (P<0.05). Основным параметром для распознавания патологических клеток по их морфометрическим характеристикам был показатель общей площади клетки; значения именно этого признака для группы с тяжелой патологией CIN III, CIS и SCC было наиболее значимо. Общая площадь клеток в этой группе находилась в диапазоне 170-250 мкм2, что в десятки раз меньше, чем у клеток которые вошли в условную вторую группу - NILM, реактивные (NILM) и CIN II, площадь которых колебалась от 2000 до 135000 мкм2).

Дальнейшая, более точная дифференциация клеток внутри обеих условных групп (группа NILM, реактивные (NILM) и CIN II, с одной стороны, и группа CIN III, CIS и SCC, с другой стороны, возможна с использованием таких параметров как площадь ядра и площадь цитоплазмы. Так, в первой из названных групп в клетках с CIN II площадь ядра (2947.9±429.6 мкм2) была в 18-20 раз больше, чем в клетках NILM (29.9±47.6 мкм2) и в 6-22 раза больше, чем в клетках с реактивными изменениями (283.2±131.5 мкм2). Во второй условной группе клетки с CIN III, CIS и SCC так же достаточно существенно отличались друг от друга как по параметру площади ядра (соответственно 58.2±3.2; 68.28±5.0; 59.6±4.0 мкм2), так и по параметру площади цитоплазмы (127.1±8.8; 140.0±8.6; 173.4±14.8).

Выводы

1. Установлена принципиальная возможность автоматизировать и объективизировать диагностику поражений шейки матки с помощью мор-фометрии клеток с использованием таких основных параметров, как площадь клетки, ядра и цитоплазмы.

2. Выбор используемых морфометрических параметров обоснован и может быть рекомендован для создания как учебных программ, так и формирования на их основе массива данных для глубокого статистического анализа, способного разрешить затруднения в сложных диагностических наблюдениях.

THE POTENTIAL OF THE MORPHOMETRIC METHOD IN DIAGNOSIS OF HPV ASSOCIATED WITH SEVERE CERVICAL PATOLOGY

Lioshkina G.V., Shipulina O.Yu., Gracheva O.M., Borisova T.V., Shabalova I.P., Nazarov A. Авторы:

Лешкина Г.В. - врач КЛД ЦНИИ эпидемиологии;

Шипулина О.Ю. - рук. лаб. молекулярных методов Центра молекулярной диагностики ЦНИИ эпидемиологии,

кандидат мед. наук; Грачева О.М. - врач КЛД ЦНИИ эпидемиологии; Борисова Э.В. - врач КЛД ЦНИИ эпидемиологии;

Шабалова И.П. - проф. каф. лаб. диагностики РМАНПО, доктор мед. наук; Назаров А. - West-Medica (г. Москва)

ДИАГНОСТИКА ЛИМФОМЫ ЦНС С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СРОЧНОГО ИНТРАОПЕРАЦИОННОГО ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

ЛИСИЧНИКОВА И.В., БАТОРОЕВ Ю.К., ГАЛИАКБЕРОВА О.Н., КИСЛИЦЫНА Л.Ю., КОМИССАРОВА Э.К. , САМАРСКАЯ О.С., СОСОВА Л.Л.

Иркутская государственная академия последипломного образования, Иркутский областной онкологический диспансер (г. Иркутск, РФ)

Первичная лимфома ЦНС в классификации ВОЗ выделена в самостоятельную нозологическую форму, это крайне редко встречающееся заболевание составляет 1-2% всех лимфом и 1-5% опухолей ЦНС. В связи с применением в настоящее время схем специфической полихимиотерапии первичной лимфомы ЦНС препаратами, проникающими через гематоэнцефалический барьер и улучшения прогноза при этом заболевании, актуальным становится вопрос о его своевременной диагностике. Морфологическая верификация объемных образований головного мозга путем стереотаксической биопсии позволяет отказаться от ненужного оперативного вмешательства. Несмотря на то, что гистологическое исследование столбиков ткани опухоли, полученных во время стереотаксической биопсии является стандартом в диагностике первичных лимфом ЦНС, некоторые отечественные и зарубежные исследователи указывают на возможность применения цитологического исследования мазков-отпечатков из биоптатов. В нашем учреждении цитологическое исследование проводится наряду с гистологическим.

В этом сообщении авторы предлагают ретроспективный анализ 11 случаев диагностики лимфом головного мозга, в которых диагноз был установлен в результате стереотаксической биопсии с использованием срочного цитологического исследования.

Цель исследования: оценить эффективность цитологического исследования в комплексной диагностике лимфом ЦНС и сравнить с данными литературы.

Задачи исследования:

1. Сравнить результаты цитологического и гистологического исследований в диагностике лимфом ЦНС.

2. Оценить диагностическую ценность цитологического метода в морфологической верификации лимфом ЦНС: вычислить показатели диагностической чувствительности, специфичности.

Материалы и методы исследования:

За период с 01.01.2016 по 30.04.2017гг. в централизованной цитологической лаборатории Иркутского областного онкологического диспансера проведено 26 исследований отпечатков из биоптатов объемных образований головного мозга, полученных при проведении стереотакси-ческой биопсии, у 25 пациентов в возрасте от 30 до 76 лет (средний возраст составил 53 года) у 12 женщин и 13 мужчин.

Цитологические препараты высушивали на воздухе и окрашивали азуром-эозином по Рома-новскому-Гимзе, исследования проводили в режиме срочной интраоперационной диагностики. В дальнейшем в 6 случаях проводили иммуноци-тохимическое исследование на фиксированных в холодном ацетоне мазках пероксидазным методом с использованием моноклональных антител к СЭ45, вБАР, СЭ99, ЫБЕ, СЭ20, СЭ79 альфа, СЭ3 фирмы Эако и системы визуализации ЕпУМоп БЬЕХ/ЫКР фирмы Эако .

Результаты исследования: У 17 (68%) из 25 обследованных пациентов были диагностированы глиальные опухоли и неопухолевые поражения головного мозга. 11 (44%) пациентам в возрасте от 30 до 70 лет (средний возраст 54 года, 7 женщин:4 мужчины) был поставлен диагноз лимфомы. В 9 случаях из 11 это были первичные лимфомы ЦНС, и в 2-х - имело место вторичное поражение головного мозга при прогрессирова-нии диффузной В-крупноклеточной лимфомы.

В результате цитологического исследования в 4 случаях установлен уверенный диагноз неходж-кинской лимфомы, в 1 случае - плазмоцитомы, в 2 случаях - высказались о лимфоме в предположительной форме. У 3 пациентов было сделано заключение о злокачественной круглоклеточной опухоли и у 1 пациента проводили дифференциальный диагноз лимфомы и олигодендроглиомы.

В 6 наблюдениях было проведено иммуноци-тохимическое исследование. При гистологическом и иммуногистохимическом исследованиях

диагноз лимфомы был подтвержден в 9 случаях. В 2 случаях, в которых цитологически был поставлен диагноз лимфомы, полноценный биоп-тат получить не удалось.

Таким образом, в 9 случаях из 11 мы поставили правильный цитологический диагноз лим-фомы, ложноположительных диагнозов не было. Показатель диагностической чувствительности составил 81%, показатель диагностической специфичности - 100%.

Выводы: Цитологическое исследование мазков-отпечатков из биоптатов опухолей, полученных во время стереотаксической биопсии, показало высокую диагностическую точность.

Срочное цитологическое исследование мазков-отпечатков биоптатов опухолей головного мозга позволяет контролировать получение информативного материала во время процедуры биопсии, в большинстве случаев поставить правильный диагноз и в дальнейшем избежать ненужного оперативного вмешательства. Ретроспективный анализ описанных случаев лимфом ЦНС показал, что эти результаты коррелируют с данными литературы.

DIAGNOSIS OF CNS LYMPHOMA WITH THE USE OF TIME INTRAOPERATIVE CYTOLOGY

Lisichnikova I.V., Batoroev U.K., Galikberova O.N., Kislicina L.U., Komissarova E. K., Samarskaya O.S., Sosova L.L.

Автор:

Лисичникова И.В. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Батороев Ю.К. - проф. каф. онкологии ИГМАПО, доктор мед. наук; Галиакберова О.Н. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Кислицына Л.Ю. - зав. ЦЦЛ онкодиспансера;

Комиссарова Э.К. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Самарская О.С. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера; Сосова Л.Л. - врач клин.лаб. диагностики ЦЦЛ онкологического диспансера.

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ПЕРВИЧНЫХ И ВТОРИЧНЫХ ОПУХОЛЕЙ ГОЛОВНОГО МОЗГА

О.В. МАТВЕЕВА1, Л.Ф. ЖАНДАРОВА2, С.П. БАЖАНОВ1, В.В. ОСТРОВСКИЙ1, ДАВЫДОВА Е.А.3

ВО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского «НИИТОН» Минздрава России1.

ВО Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского Минздрава России2. ММУ 1-я Городская Клиническая больница им. Ю.Я. Гордеева3.

Введение. Частота первичных опухолей головного мозга составляет в среднем от 5 до 14 случаев на 100 000 населения. Несмотря на свою относительную редкость, опухоли ЦНС среди новообразований других локализаций занимают 2-е место у детей и 12-е место у взрослых. Доля опухолей головного мозга среди всех новообразований у человека колеблется в пределах 0.7-1.5%, а частота метастатических опухолей составляет 11 случаев на 100 000 населения.

Вопросы своевременности и правильности диагностики опухолей головного мозга, а также

выбора тактики лечения заслуживают самого серьезного внимания. В настоящее время достигнуты значительные успехи в современной нейроон-кологии с помощью рентгеновской компьютерной и магнитно-резонансной томографии. Однако рутинный метод морфологической верификации опухолей по-прежнему остается и, по-видимому, долгое время будет оставаться едва ли не решающим для определения как тактики (объем оперативного вмешательства), стратегии (прогноз, лучевая и иная терапия, повторное вмешательство и т.д.), так и лечения этой группы больных.

Патогистологический метод позволяет подтвердить и уточнить клинический диагноз, определить гистотип опухоли, определить степень злокачественности, выявить изменения в тканях при проведении лечебных мероприятий (лечебный патоморфоз).

В последнее время на этапе диагностики опухолей широко используется цитологическое исследование. Достоинством его являются быстрота обработки и приготовления препарата, небольшие материальные затраты, малый объём клеточного материала, а главное, возможность использования его во время операции.

Цель исследования. Показать возможности морфологических методов исследования в диагностике первичных и вторичных опухолей головного мозга.

Материалы и методы исследования. Авторы проанализировали результаты цитологического и гистологического исследования операционного материала 136 больных, находящихся на стационарном лечении в НИИТОН СГМУ за период 2009-2016 гг. Пациенты с первичными опухолями головного мозга составили 124 (91%). Возраст обследуемых от 6 до 66 лет, и 12 (9%) - больных с метастатическим поражением в возрасте от 54 до 71 года, из них женщин было 8, а мужчин 4.

Материал архивировали с помощью микроскопа с видео насадкой (Olympus CX 31), позволяющей получить цифровой вариант микроскопического изображения, системы архивирования PACS (Picture Archiving and Communication System). Преимуществом данного метода является возможность осуществления

дистанционной консультации, когда необходимо высокое качество изображения.

Результаты исследования. При гистологическом исследовании первичных опухолей головного мозга: менингиома верифицирована у 72 (58%) пациентов, преобладал вариант менинготелиома-тозной менингиомы, астроцитома выявлена у 24 (19%) больных, (преобладал протоплазматический вариант. Шваномма диагностирована у 12 (10%) и глиобластома - у 12 (10%) больных. Эпендимома, субэпендимома, аденома гипофиза и гемангиоб-ластома верифицированы по одному случаю, на их долю пришлось по 3%. Медуллобластома выявлена у одного пациента - ребенок 6 лет.

В группе больных с метастатическим поражением головного мозга у женщин преобладал метастаз рака из молочной железы, у мужчин -метастаз меланомы и плоскоклеточного неорого-вевающего рака.

Заключение. По нашим данным менингиомы составили больше половины случаев среди опухолей головного мозга. На втором месте - астро-цитарные опухоли. У пациентов молодого возраста чаще диагностировали глиобластому.

В группе больных с вторичными поражениями у женщин преобладал метастаз рака из молочной железы, у мужчин - метастаз меланомы и плоскоклеточного неороговевающего рака.

Таким образом, для точной верификации опухолей головного мозга необходимо комплексное применение рентгенологического (КТ, МРТ), цитологического и гистологического методов исследования.

USING MORPHOLOGICAL METHODS OF RESEARCH IN THE DIAGNOSIS OF PRIMARY AND SECONDARY BRAIN TUMORS

Matveeva O.V., Zandarova L.F., Bazhanov S.P., Ostrovskiy V.V., Davydova E.A.

Автор:

Матвеева О.В. - врач КДЛ отделения лаб. диагностики «НИИТОН», кандидат мед. наук; Жандарова Л.Ф. - доцент каф. хирургии и онкологии СГМУ, кандидат мед. наук; Бажанов С.П. - ст. научн. сотр. «НИИТОН» отделения нейрохирургии, кандидат мед. наук; Островский В.В. - зав. нейрохирург. отд.«НИИТОН», ст. научн. сотр.,кандидат мед. наук; Давыдова Е.А. - зав. ПАО, 1-ой ГКБ им. Ю.Я. Гордеева.

ВОЗМОЖНОСТИ ЦИТОЛОГИЧЕСКОГО МЕТОДА ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ НОВООБРАЗОВАНИЙ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

МИХЕТЬКО А.А.1, ЗАХАРОВ Д.А.2, ПЕРОВ В.В.2, БЕЛОВА И.В2, МИХЕТЬКО А.А3

1 НИИ Онкологии им. Н.Н.Петрова, Санкт-Петербург.

2 Онкологический диспансер Республики Карелия, Петрозаводск.

3. Медицинский институт Петрозаводского Государственного университета.

Актуальность проблемы. Злокачественные опухоли поджелудочной железы (ПЖ) являются пятой по частоте причиной смерти среди всех злокачественных новообразований как в Республике Карелия (РК), так и в целом по России. В РК наблюдается прирост заболеваемости раком ПЖ с 1995 по 2013гг. на 70.6% у мужчин и на 200% у женщин. Морфологическая верификация характера процесса необходима для выбора тактики лечения. Цитологический метод наряду с гистологическим может применяться для решения данной задачи. Авторы имеют опыт выполнения чрескожных пункционных биопсий солидных и кистозных образований ПЖ в условиях онкологического диспансера и проводят тонкоигольные аспирационные биопсии (ТАБ) с последующим цитологическим исследованием и мультифокальные троакар биопсии (МФБ) под контролем ультразвука (УЗ) с взятием материала на цитологическое и гистологическое исследование (2015г.).

Цель. Определение эффективности цитологического метода диагностики новообразований ПЖ.

Материалы и методы исследования. Проанализированы 205 пункций под контролем УЗ, выполненные за 7 лет (2009-2015гг.) у 202 больных. Контроль ультразвуком при выполнении пункционных биопсий осуществлялся при помощи УЗ аппарата Мтёгеу М5 с конвексным датчиком 3.5 Мгц. Манипуляция проводили методом «свободной руки», под местной анестезией 0.5% новокаином в асептических условиях, при этом использовали два варианта пункции: 1. Мульти-фокальная биопсия (МФБ), с последующим гистологическим и цитологическим исследованием. 2. Тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ) с последующим цитологическим исследованием материала. Доступ осуществлялся через переднюю брюшную стенку: в 47 случаях транспечёночный, в 56 - трансгастральный, в 102 - прямой доступ к образованию. Всего выполнено 144 ТАБ (27 кистозных и 117 солидных образований) и 61 МФБ. При хорошей визуализации, солидном

характере и размерах образования более 30 мм выполняли МФБ, как правило, не менее чем 3-х участков опухоли при помощи биопсийного пистолета MAGNUM 9 (толщина иглы 18G). При небольших размерах образования, затруднённом доступе или кистозном характере поражения выполняли ТАБ одного, наиболее подозрительного участка ПЖ иглой для спинальной анестезии с мандреном 22G, при этом делали несколько пассажей иглой до попадания материала на поршень шприца. При попадании в кисту содержимое эвакуировали целиком и помещали в пробирку. Приготовление препаратов для цитологического исследования производили на цитоцентрифуге Cytospin-4. Цитологический материал исследовали в цитологической лаборатории, гистологическое исследование производили в патологоанато-мическом отделении онкологического диспансера РК. Произведены цитогистологические сопоставления результатов информативного материала МФБ у 56 пациентов с солидными образованиями поджелудочной железы. Для определения эффективности цитологического метода исследования в диагностике солидных новообразований ПЖ были рассчитаны показатели чувствительности, специфичности и эффективности. Случаи, в которых устанавливался цитологический диагноз «предположение о раке», либо в которых материал был признан неинформативным, не включали в определение этих показателей.

Результаты исследования. Среди пациентов оказалось 112 мужчин и 90 женщин в возрасте от 24 до 84 лет. Распределение больных по полу и возрастным группам показало, что 125 (61.9%) из 202 пациентов были в возрасте от 50 до 69 лет. В этой же возрастной категории наиболее часто обнаруживали рак ПЖ (у мужчин в 38 из 49 (77.6%), у женщин в 27 из 42 наблюдений (64.3%). Доброкачественные процессы у женщин чаще обнаруживали в возрасте 50-69 лет - 23 (58.9%) из 39 наблюдений, у мужчин в возрасте 40-59 лет - 32 (61.5%) из 52 случаев. Неинформативный материал был получен в 16 (8.5%) случаях из 144, при выполнении ТАБ. При выполнении

МФБ материал для цитологического исследования был признан информативным во всех 61 наблюдениях, для гистологического исследования в 56 (93.3%). Таким образом, морфологическое исследование оказалось возможным в 189 (92.2%) из 205 пункций. При этом у 91 пациентов были диагностированы доброкачественные образования, у 93 процесс был определен как злокачественный, у 5 больных после ТАБ при цитологическом исследовании было высказано предположение о раке, что потребовало дальнейшего уточнения диагноза. Впоследствии у всех этих пациентов подтвердился рак ПЖ: в 1 случае при повторной ТАБ, в 2-х - интраопера-ционно, в 2-х - при дальнейшем клиническом наблюдении.

Результаты цитологического исследования удалось сопоставить с гистологическим диагнозом у 56 больных. Правильно определить характер процесса как доброкачественный или злокачественный при цитологическом исследовании материала оказалось возможным у 48 (85.7%) пациентов. В одном случае цитологическое предположение о злокачественной опухоли мезен-химальной природы не подтвердилось. Гистоло-

гически была диагностирована лейомиома. У 5 больных даны ошибочно отрицательные цитологические заключения, в 3-х случаях в связи со скудностью клеточного состава, в 2-х имела место недооценка клеточных изменений при ВАК.

В 4 случаях после проведения МФБ у пациентов наблюдался выраженный болевой синдром, который был успешно купирован выполнением блокады круглой связки печени. Постпункци-онная гематома небольших размеров была выявлена у 16 пациентов. Других осложнений не наблюдали. При трансгастральной МФБ устанавливался трансназальный желудочный зонд на 3-4 часа, для контроля за желудочным содержимым. Таким образом осложнения манипуляции были прогнозируемы, связаны в большей степени с проведением МФБ и были успешно купированы консервативно.

Выводы. Чувствительность цитологического метода в диагностике новообразований ПЖ составила 87.8%, специфичность - 100%, эффективность - 90.6%. Диагностировать гистологическую форму опухоли при цитологическом исследовании материала ПЖ удалось в 82.1% случаев.

OPPORTUNITIES IN DIAGNOSTICS OF PANCREATIC NEOPLASMS BY CYTOLOGICAL METHOD

Mikchetko A.A., Zakcharov D.A., Perov V.V., Belova I.V.

Авторы:

Михетько А.А. - зав. лаб. цитологии НИИ онкологии им.Н.Н.Петрова, кандидат мед. наук;

Захаров Д.А. - врач ультразвуковой диагностики, хирург Республиканского онкологического диспансера

г. Петрозаводска; Перов В.В. - зав. цитол. лаб. диспансера; Белова И.В. - врач цитол. лаб. Диспансера.

Михетько А.А. - студентка 6 курса медицинского института Петрозаводского Государственного университета.

ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЮВЕНИЛЬНЫХ, ДИСПЛАСТИЧЕСКИХ НЕВУСОВ И МЕЛАНОМЫ IN SITU КОЖИ

НОВИК В. И.1, ДРЕВАЛЬ Д. А.2

НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова Минздрава России, 2ООО "Дженерал Медикал Центр" (г. Санкт-Петербург, РФ)

Для достижения хороших результатов лечения меланомы кожи необходимо проводить его на ранних стадиях развития меланомы. Большое значение имеет морфологическая диагностика предзлокачественных состояний - ювенильных и диспластических невусов, а также минимальных форм меланомы - минимальной меланомы и

поверхностно-распространяющейся меланомы. Задачей настоящего исследования является определение возможностей цитологического метода исследования в диагностике этих заболеваний.

Материал и методы исследования. Произведены цито-гистологические сопоставления с учетом клинических данных и пересмотром

цитологических и гистологических препаратов на материале, полученном у 16 пациентов, проходивших обследование и лечение в НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова и некоторых дерматологических центрах г. Санкт-Петербурга. У 3 пациентов установлен окончательный кли-нико-морфологический диагноз Спиц-невус, у

1 - невус Рида, у 10 - диспластический невус, у

2 - меланома in situ.

Результаты исследования. Спиц-невус диагностировали на основании клинических данных: пациенты молодого возраста (11, 18, 25 лет), макроскопически - узелки розового или темного цвета диаметром 3-4 мм, - и характерной цитологической картины с наличием в мазках вере-теновидной формы невусных клеток с длинными тонкими отростками. При гистологическом исследовании веретеновидной формы невусные клетки расположены вертикально под слоем эпидермиса в виде «падающего дождя». Невус Рида является разновидностью Спиц-невуса и отличается наличием большого количества пигмента в цитоплазме невусных клеток. Диспласти-ческие невусы гистологически характеризуются структурными изменениями - наличием в срезах гнездно расположенных под эпидермисом скоплений атипических меланоцитов с укрупненными ядрами и наличием пигмента. В цитологических препаратах среди скоплений обычных округлых невусных клеток с однородными ядрами видны клетки с более крупными гиперхром-ными ядрами, иногда с единичными ядрышками. В 2-х наблюдениях как в гистологических, так и цитологических препаратах диспластические не-вусы имели спицуоидные черты: атипические не-

вусные клетки имели веретеновидную или округлую форму с крупными полиморфными ядрами и укрупненными ядрышками. Диагноз меланомы in situ установлен при анализе расхождений цитологического и гистологического исследований. В мазках были видны скопления атипических не-вусных клеток с очень крупными полиморфными ядрами, единичные гигантские многоядерные клетки с крупными ядрами различной величины. При гистологическом исследовании диагностирован невус. При пересмотре гистологических препаратов в пласте эпидермиса обнаружены гнездные скопления крупных светлых атипических меланобластов с увеличенными ядрами и ядрышками, соответствующие картине мелано-мы in situ.

Заключение. Цитологическое исследование материала соскоба с поверхности поражения может служить методом первичной морфологической диагностики, методом скрининга атипических невусов и меланомы кожи. Одной из организационных форм такого скрининга может быть использование цитологического исследования у пациентов, обращающихся в лазерные центры и салоны красоты с целью лазерного удаления доброкачественных новообразований кожи. Отсутствие при цитологическом исследовании атипических клеток с учетом клинических данных может служить основанием для выполнения лазерной деструкции доброкачественных новообразований кожи. При выявлении атипических изменений пациенты должны быть направлены в онкологические учреждения для углубленного обследования и адекватного лечения.

CYTOMORPHOLOGICAL DIAGNOSIS OF JUVENILE NEVI, DYSPLASTIC NEVI AND SKIN MELANOMA IN SITU

Novik V.I., Dreval D.A.

Авторы:

Новик В.И. - вед. научн. сотр. научн. лаб. морфологии опухолей, врач лаборатории цитологии НИИ онкологии им. Н.Н.Петрова, доктор мед. наук, проф.;

Древаль Д.А. - зав. дерматологическим отд., врач дерматолог-онколог ООО «Дженерал Медикал Центр», кандидат мед. наук.

ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА НОВООБРАЗОВАНИЙ ЛЕГКИХ

К.С. ПАВЛЮК, Е.Н. СЛАВНОВА

Научно-исследовательский институт - Краевая Клиническая Больница №1 им. С. В. Очаповского, Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А.Герцена - филиал Национального медицинского радиологического исследовательского центра Минздрава России (г. Краснодар - г. Москва, РФ).

Актуальность: Сопоставление результатов цитологического и гистологического исследования биоматериала, полученного у одного и того же пациента, является одним из важнейших этапов в оценке контроля качества диагностического процесса при оказании медицинской помощи. Успехи современной онкологии, в т.ч. рост органосохраняющих операций, во многом связаны с точностью цитологического и гистологического диагнозов. Высокая результативность данных исследований достигается прежде всего с помощью совместной работы цитолога и патологоанатома.

Цель исследования: усовершенствование цитологической диагностики первичных и метастатических образований легкого с использованием жидкостной цитологии и иммуноцитохимиче-ского метода.

Для достижения поставленной цели были решены следующие задачи:

1. Определены возможности цитологического и ИЦХ - методов в диагностике первичных и метастатических образований легкого.

2. Проведено сопоставление результатов ИЦХ и ИГХ исследований при первичных и метастатических образованиях легкого.

3. Определена последовательность цитологического и ИЦХ методов в подборке оптимальной панели антител при установлении гистогенеза опухолей легкого.

4. Определены условия применения жидкостной цитологии при ИЦХ исследовании.

5. Проанализированы ошибки цитологической и ИЦХ диагностики в определении гистогенеза опухолей легкого.

Материалы и методы исследования:

На базе НИИ-ККБ №1 в КДЛ проводили исследование цитологического материала - мокроты и скарификатов слизистой оболочки бронхов, полученные при бронховидеоскопии и метастатических поражений лимфатических узлов (EBUS, EUS) больных, проходивших лечение в Центре

Грудной Хирургии в период с 2012г. по 2015г., не получавших до момента забора материала противоопухолевого лечения по поводу первичного процесса или возникшего прогрессирования заболевания.

На материале, полученном у 232 больных выполнено 1288 иммуноцитохимических исследований, приготовленных двумя методами: «жидкостная цитология» (1138 препаратов) и обычным (стандартным) способом (150 препаратов).

Иммуноцитохимические исследования проводили на материале, полученном при трансбронхиальной (EBUS) и чреспищеводной (EUS) тонкоигольной аспирационной биопсии, а также, в мокроте и выпотных жидкостях с целью определения гистологической формы и органной принадлежности опухоли.

Для оценки распространенности опухолевого процесса выполняли комплексное обследование, включающее: рентгенотомографию грудной клетки, фибробронхоскопию, УЗИ печени, почек и забрюшинного пространства, при необходимости - рентгеновскую компьютерную томографию легких, средостения, брюшной полости, головного мозга, сканирование скелета, а также другие методы диагностики.

Гистологическая структура опухоли определялась на основе общепринятой классификации, рекомендованной Всемирной Организацией Здравоохранения (Pathology and Genetics of Tumor of the Lung, Pleura, ttymus and Heart» World Health organization Classification of Tumors 2015г.). Исследования проводили на эксфолиа-тивном, пункционном и биопсийном материале, для получения которого использовали следующие инструментальные и лабораторные методы исследования:

1. НД ССТ грудной клетки; 2. Цитологическое исследование мокроты (ЦИM); 3. ЦИ и ИЦХ исследования при трансбронхиальной (EBUS) и чреспищеводной (EUS) тонкоигольной аспира-ционной биопсии.

Результаты исследования. На цитологическом материале, полученном из опухолей легкого, лимфатических узлов средостения и плевры сопоставлены данные рутинного цитологического материала и имунноцитохимического исследования (ИЦХ) с результатами гистологии и иммуногистохимических исследований (ИГХ), что позволило оценить точность цитологического и имунноцитохимических исследований при опухолях различного гистогенеза. Адаптированы методы жидкостной цитологии для проведения имунноцитохимических исследований при опухолях легкого. Внедрены цитологические исследования с использованием имунноцитохи-мических методов с учетом новых подходов и рекомендаций ВОЗ (2015г.) в диагностике опухолей легкого в условиях развития персонифицированной медицины, в т.ч., и таргентной терапии.

Выводы:

1. При рутинном цитологическом исследовании материала из опухолей уверенный диагноз с указанием гистологической формы опухоли устанавливают лишь в 56% случаев.

Заключения, в которых о гистологической форме опухоли указано в предположительной форме, или она не указывается, составляют 44%. Уверенный диагноз с указанием органной принад-

лежности опухоли установлен в 48% заключений.

2. В диагностике первичных опухолей вну-тригрудной локализации, в группе больных раком легкого цитологический и ИЦХ метод демонстрирует при определении гистогенеза и органоспецифичности опухоли диагностическую точность 97.3%.

3. В группе больных с метастатическим поражением легких, внутригрудных лимфатических узлов и плевры цитологический и ИЦХ метод демонстрирует диагностическую точность при определении гистогенеза и органоспецифично-сти опухоли - 98.9%.

4. Разработанный алгоритм проведения ИЦХ исследований для подтверждения гистологической формы опухоли, или её органной принадлежности позволяет в ряде случаев ограничиться двумя - тремя МКАТ и не требует развертывания широкой (дорогостоящей) панели антител.

5. Использование метода жидкостной цитологии позволяет повысить качество и информативность препаратов с 79% при обычном способе приготовления материала до 99%; исключить неоправданные расходы дорогостоящих реактивов и времени медицинского персонала на обработку, просмотр и интерпретацию препаратов; стандартизировать препараты для исследования.

IMMUNOCYTOCHEMICAL DIAGNOSIS OF TUMORS OF THE LUNG

Pavljuk K.S., Slavnova E.N.

Авторы:

Павлюк К.С. - биолог КДЛ больницы №1, ведущий специалист иммуноцитохимического отдела. Славнова Е.Н. - ст. научн. сотр. отд. онкоцитологии МНИОИ им. П.А.Герцена, кандидат мед. наук.

НЕОПРЕДЕЛЕННЫЕ ЗАКЛЮЧЕНИЯ В СИСТЕМЕ BETHESDA ДЛЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ПАТОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ: ПРОБЛЕМЫ ДИАГНОСТИКИ И ВОЗМОЖНЫЕ ПУТИ РЕШЕНИЯ

ПОЛОЗ Т.Л. \ ТИТОВ С.Е.23, МАЛАХИНА Е.С.2, ИВАНОВ М.К.3 , ВЕРЯСКИНА Ю.А. , ШЕВЧЕНКО С.П. 5, КОЛЕСНИКОВ Н.Н.2

Дорожная клиническая больница на станции Новосибирск-Главный ОАО «РЖД», 2Институт Молекулярной и Клеточной биологии СО РАН,

3ЗАО «Вектор-Бест» (г. Кольцово), 4Городская клиническая больница №1 (г. Кольцово- г. Новосибирск, РФ)

Для цитологической диагностики узловых образований щитовидной железы (ЩЖ) методом тонкоигольной аспирационной биопсии (ТАБ), система Бетесда (ББИТБ) рекомендует использование шести диагностических категорий, каждой из которых соответствует определенный риск злокачественности. В зависимости от этих рисков, каждая категория связана с дальнейшим клиническим руководством, основанным на фактических данных. При этом 3 из 6 категорий являются неопределенными: атипия неясного значения, подозрение на фолликулярную опухоль и подозрение на зокачественность. Таким образом, в тех случаях (10-30%), когда цитологические признаки являются неопределенными, окончательный диагноз возможно установить лишь при гистологическим исследовании после операции, а часть подобных хирургических вмешательств оказывается неоправданной. С целью получения дополнительной характеристики узловых образований разработана оригинальная методика экстракции нуклеиновых кислот (ДНК

и РНК с цитологических окрашенных препаратов (Колесниеков др., 2016г.) с последующим молеку-лярно-генетическим анализом - профиля ряда онкогенных микроРНК, определении наличия мутации БИЛБ У600 Е и определения уровня экспрессии онкогена НМвЛ2. Более 800 цитологических препаратов всех 6 категорий были подвергнуты ретроспективному анализу. Из них 231 случай относился к категории 3-5. Из первой категории проанализировано 96 препаратов. В 4 из них была выявлена мутация БИЛБ У600 Е и еще один препарат отнесен к злокачественным на основании профиля онкогенных миРНК. Наличие мутации БИЛБ У600 Е, по общепринятым на сегодня данным, со 100% вероятностью свидетельствует о папиллярном раке. В 231 препарате категорий 3-5 наличие мутации установлено в 37 случаях. В целом полученные результаты подтверждают практическую необходимотсь МГА для улучшения диагностической точности в дополнении к цитологическому заключению.

UNCERTAIN CONCLUSIONS IN THE BETHESDA SYSTEM FOR REPORTING THYROID CYTOPTHOLOGY: DIAGNOSTIC PROBLEMS AND POSSIBLE SOLUTIONS

Poloz T.L., Titov S.E., Malakchina E.S., Ivanov M.K., Veriaskina Yu.A., Shevchenko S.P., Kolesnikov N.N. Авторы:

Полоз Т.Л. - зав. цитол. лаб. Дорожной клинической больницы, доктор мед. наук.;

Титов С.Е. - старш. научн. сотр. Института молекулярной и клеточной биологии СО РАН, кандидат биол. наук; Малахина Е.С. - научн. сотр. Института молекулярной и клеточной биологии СО РАН, кандидат мед. наук; Иванов М.К. - зав. лаб. ЗАО «Вектор-Бест», кандидат биол. наук;

Веряскина Ю.А. - старший лаб.-исследователь молекулярной и клеточной биологии СО РАН; Шевченко С.П. - зав. отд. Городской клинической больницы № 1, доктор мед. наук.;

Колесников Н.Н. - ведущий научн. сотр. Института молекулярной и клеточной биологии СО РАН, доктор биол. наук;

ЗНАЧИМОСТЬ ЦИТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ В УСЛОВИЯХ САЛАВАТСКОГО ГОРОДСКОГО РОДИЛЬНОГО ДОМА

ПРОКУДИНА Н.А., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А., ХАБИБУЛИН Р.А., ГИЛЬМАНОВ А.Ж.

Башкирский государственный медицинский университет, Городская больница (г. Уфа - г. Салават, Республика Башкортастан, РФ)

Население города Салават составляет 154593 человек, женское население - 82368, из них фер-тильного возраста - 38853. Неблагоприятная экологическая обстановка в городе предъявляет повышенные требования к организации здравоохранения, в связи с чем особую значимость приобретают вопросы профилактики и раннего выявления заболеваний репродуктивной системы, пренатальной диагностики.

Государственное автономное учреждение здравоохранения «Салаватский городской родильный дом» был открыт в 1965 г. Родильный дом оказывает специализированную акушер-ско-гинекологическую, неонатологическую помощь населению города и прилегающих районов. В соответствии с приказом МЗ РФ от 1 ноября 2012г. № 572н «Об утверждении Порядка оказания медицинской помощи по профилю «акушерство и гинекология», в целях развития и реформирования системы здравоохранения Республики Башкортостан, оптимизации организации работы службы родовспоможения Республики Башкортостан, во исполнение приказа МЗ РБ от 08 июля 2013г. № 1783 - Д «Об организации работы межрайонных перинатальных центров в Республике Башкортостан», на базе Салаватско-го городского родильного дома организован и функционирует межрайонный перинатальный центр (МПЦ) с прикрепленными территориями: г. Салават, г. Мелеуз и Мелеузовский район, г. Ишимбай и Ишимбайский район. МПЦ специализируется на оказании лечебно-диагностической и реабилитационной помощи беременным, роженицам, супружеским парам репродуктивного возраста и новорожденным детям. В состав Салаватского городского родильного дома входит акушерское отделение №1 на 30 коек; акушерское отделение № 2 на 60 коек; гинекологические отделения № 1 и №2 на 63 койки; отделение патологии новорожденных - 15 коек; дневной стационар -37 коек, женская консультация - на 150 посещений в смену. Роддом оказывает кру-

глосуточную плановую и неотложную помощь: дежурят врачи гинекологи, анестезиологи и нео-натологи. Все отделения полностью обеспечены врачами, средним и младшим медперсоналом и всем необходимым для оказания экстренной помощи оборудованием. С 1 января 2016 г. роддом входит в состав Городской больницы г. Салават.

Клинико-диагностическая лаборатория больницы г. Салават обслуживает родильное отделение, гинекологическое отделение, женскую консультацию, дневной стационар при женской консультации. В лаборатории выполняются гематологические, общеклинические, коагулологи-ческие, биохимические, иммунологические, изо-серологические и цитологические исследования. Количество проводимых исследований увеличивается по всем направлениям на протяжении последних 12 лет, что связано с внедрением новых видов исследований, оснащением современным оборудованием, расширяющимся спектром проводимых исследований. В связи с наличием в структуре больницы женской консультации значительная доля проводимых лабораторных исследований приходится на обследование амбулаторных больных.

В лаборатории клиники с 2014г. проводятся цитологические исследования материала шейки матки, полученного при проведении ежегодных профилактических осмотров, обследовании женщин при постановке на учет по беременности, при обращении за медицинской помощью к участковым гинекологам, кольпоскопии и т.д. При исследовании цитограмм за последние 3 года было выявлено 22 новых случая тяжелой патологии шейки матки, что составило в среднем 0.029% общего числа обследованных женщин. Из общего числа выявленных ранняя диагностика (c-a in situ, I стадия) составила 15.0%, своевременная (2 стадия) - 35.0%, поздняя (3 и 4 стадии) - 45.0%. Снизилось число впервые выявленных случаев рака шейки матки. Это связано с тем, что про-фосмотры женщин стали проводиться регуляр-

но, более качественно производится забор биоматериала, повысилась его информативность.

Таким образом, в 2014-2016гг. в клинико-диагностической лаборатории Городской больницы

г. Салават отмечаются значительные изменения, связанные с внедрением цитологических исследований, что позволяет оказывать населению высокотехнологичную медицинскую помощь.

THE RESULTS OF THE INTRODUCTION TO THE WORK OF THE CLINICAL LABORATORY OF THE SALAVAT HOSPITAL

Prokudina N. A., Imelbaeva E.A., Khabibulin R.A., Gilmanov А.1.Ж

Авторы:

Прокудина Н.А. - врач-лаборант КЛД Салаватской ЦРБ;

Имельбаева Э.А. - проф. каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук; Хабибулин Р.А. - гл. врач ЦРБ г. Салават;

Гильманов А.Ж. - зав.каф. лаб. диагностики университета, доктор мед. наук, проф.

ЖИДКОСТНАЯ ТЕХНОЛОГИЯ CLEAR PREP В ЦИТОЛОГИЧЕСКОМ ДИАГНОСТИКЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ ШЕЙКИ МАТКИ

РОДИОНОВА О.М., 1 НАЗАРОВА И.В.,2 ТИХОНОВ Я.Н. 23

Владивостокская поликлиника №8, Приморское краевое патологоанатомическое бюро, ТГМУ (г. Владивосток, РФ)

В последние годы метод жидкостной цитологии (ЖЦ) широко внедряется в лабораторную практику для улучшения диагностики заболеваний шейки матки.

Целью работы явилось исследование диагностических возможностей относительно новой лабораторной технологии ClearPrep, основанной на ЖЦ, но не требующей специальных процессоров для приготовления препаратов.

Материалом для исследования послужили мазки из шейки матки и цервикального канала, полученные во время профилактического осмотра у 100 женщин в разные фазы цикла, кроме менструации.

Полученные образцы были исследованы рутинным цитологическим методом (группа А) и методом ЖЦ по технологии системы ClearPrep (группа В). Для получения осадка использовали центрифугу Elmi СМ-6М. Подсчет клеточно-сти проводили по методике, предложенной Г.У Гиллом. Традиционные мазки окрашивались по методу Паппенгейма. Жидкостный материал обрабатывали и окрашивали как по Папаниколау, согласно протоколу технологии ClearPrep, так и по Паппенгейму, для исследования возможностей системы. Дополнительно в ЖЦ препаратах с реактивом ClearPrep Cytology Solution проводили иммуноцитохимические реакции на HPV типы 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35, 45, 51, 52 и др.

Жидкостная технология ClearPrep является преимущественно ручным методом с обяза-

тельным использованием любой лабораторной центрифуги. Особенность метода заключается в использовании специального цитологического реактива ClearPrep Cytology Solution, который за счет специфического химического состава, основанного на агаре, формирует монослойный препарат. Четко ограниченная зона визуализации слайда составляет 20 мм и локализует материал с последующим образованием монослоя, что улучшает объективную оценку клеток.

При постановке диагноза учитывались признаки атипии, которые можно определить как по жидкостным, так и традиционным препаратам. В отечественной литературе морфологические критерии для жидкостных препаратов недостаточно представлены, поэтому до тех пор, пока не будет накоплен соответствующий опыт, жидкостные препараты необходимо анализировать совместно с традиционными препаратами. В нашем исследовании эти критерии были идентичны как в жидкостных, так и в традиционных препаратах. Отсутствие прохождения материала сквозь фильтры и особый состав ClearPrep Cytology Solution позволяет получить хорошего качества, не измененные по форме и объему клетки как плоского, так и железистого эпителия. По сравнению с ранее тестируемыми нами и другими авторами консервирующими реактивами, ядра клеток железистого эпителия в данном методе практически не подвергаются пикнозу.

Результаты представлены в табл. 1, 2.

Табл. 1 - Характеристика адекватности материала, полученного различными методами

Метод получения материала

Рутинный цитологический мазок Система ClearPrep

Количество пациентов(п) n=100 n=100

с; та Адекватный 78 99

Q. Со недостаточно адекватный 17 1

та 2 неадекватный 5 0

Табл. 2 - Частота выявления цервикальной патологии в зависимости от метода получения материала

Группа A Группа B

Методы получения материала Рутинный цитологический мазок Система ClearPrep

Количество пациентов(п) n=100 n=100

Цитограмма без особенностей 79 81

Неопухолевые изменения (воспаление, реактивно-репаративные изменения, гиперплазия, метаплазия, атрофия, кератоз и др.) 19 14

■ а Легкая (LSIL) 1 4

1спл зии Умеренная (HSIL) 1 1

и Тяжелая (HSIL) 0 0

Рак 0 0

Выводы:

1. Система ClearPrep позволяет получить более адекватный материал с присутствием диагностически значимых клеток плоского, железистого и/или метаплазированного эпителия (табл. 1).

2. Частота выявления слабых атипических изменений эпителия шейки матки несколько выше при использовании технологии ClearPrep -4%, по сравнению с традиционным методом -1% (табл. 2), что согласуется с исследованиями других авторов (J. Guo, M. Cremer et all, 2014; Lisa Rahangdale, Debra Budwit et all., 2014).

3. Отмечается сохранение числа лейкоцитов и количества микрофлоры, что не отмечено в других жидкостных системах.

4. Ядра клеток железистого эпителия в данном методе практически не подвергаются пикнозу.

Таким образом, комбинированное применение традиционного цитологического мазка и жидкостной технологии С1еагРгер повышает эффективность диагностики заболеваний шейки матки за счет уменьшения количества неадекватных мазков, а также может способствовать более частому выявлению атипических изменений эпителия шейки матки легкой степени.

LIQUID BASED CLEAR PREP TECHNOLOGY IN THE CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS OF CERVICAL DISEASES

Rodionova O.M., Nazarova I.V., Tikchonov Ya.N.

Авторы:

Родионова О.М. - зав. лаб. ЦЦЛ Владивостокской поликлиники № 8, кандидат биол. наук; Назарова И.В. - врач Приморского краевого патологоанатомического бюро, кандидат мед. наук; Тихонов Я.Н. - врач высшей категории Приморского краевого патологоанатомического бюро, ассистент каф. патол. анатомии, судебной медицины и права университета.

СОВРЕМЕННАЯ ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА УРИНАРНОЙ ПАТОЛОГИИ

САВОСТИКОВА М.В., КУДАЙБЕРГЕНОВА А.Г., ФЕДОСЕЕВА Е.С., ХАЧАТУРЯН А.В. РОНЦ им. Н.Н. Блохина (г. Москва, РФ)

Трудности цитологической диагностики в современной уринарной патологии диктуют необходимость поиска новых тест-систем с целью повышения чувствительности цитологического исследования в выявлении уротелиального рака (УР). В настоящее время предложено немало вариантов дополнительных исследований, и лишь единичные из них одобрены к применению международными научными сообществами. Все эти тесты разрабатывают с целью диагностики УР у пациентов с гематурией и наблюдения за рецидивирующими опухолями у пациентов с УР в анамнезе, и в настоящее время выделяют две основные группы тестов.

К так называемым «клеточным тестам», основанным на использовании цитологического материала, относятся: UraVision (U-FISH) и ImmunoCyt/UCyt + (оба теста одобрены FDA). На данный момент U-FISH считается наиболее перспективным из дополнительных методов. Он основан на детекции количественных и структурных хромосомных аномалий, которые сигнализируют о наличии опухоли и очень редко встречаются в нормальных (доброкачественных) клетках. Иммунофлюоресцентный метод UCyt базируется на детекции трех белков, преимущественно экспрессируемых в клетках УР.

К наиболее известным «жидкостным тестам», основанным на анализе неморфологических параметров мочи, относятся иммунохимические BTAтм- и NMP22тм-тесты (также одобренные FDA), доступные в качественном и количественном вариантах оценки. BTA - антиген рака мочевого пузыря (ассоциированный с фактором комплемента Н), концентрация которого повышается в образцах мочи у пациентов с УР. Чувствительность качественного ВТА-теста составляет 57-83%. NMP22 - белок ядерного матрикса, отражающий уровень митотической активности опухоли. Чувствительность качественного NMP22-теста варьирует от 47% до 100%.

Для перспективных поисков экономически оптимальных комбинаций цитологического и дополнительных методов, которые позволяют улучшить качество диагностики и лечения УР, в качестве базы используется Парижская система

интерпретации уринарной цитологии, принятая в 2016 г. Эта классификация позволяет определить и конкретизировать те диагностические категории, для которых применение дополнительных тестов наиболее оправдано, и избежать их там, где они диагностически незначимы.

По данным одного из крупнейших мета-анализов средняя чувствительность цитологической диагностики с использованием жидкостных технологий составляет 58% (51-65%), специфичность - 96% (93-98%), при этом достоверной разницы, по сравнению с традиционной цитологией, (цитоспиновые препараты) не выявлено. Такая невысокая чувствительность метода обычно объясняется рядом «объективных» причин: способом получения материала и окраски препаратов, степенью злокачественности опухоли и т.д. Однако важно отметить, что наибольшее значение в уринарной цитологии имеет этап пробопод-готовки, а именно метод концентрации осадка мочи.

Наименее благоприятными с точки зрения прогноза являются НвИС, которые относятся к генетически нестабильным опухолям, развиваются по диспластическому пути, характеризуются полисомией 3, 7, 17 хромосом и делецией локуса 9р21. Этот патогенетический путь ассоциирован с большим количеством мутаций - наиболее значимыми являются мутации, связанные с инактивацией гена ТР53, которая наблюдается приблизительно в 60% случаев. Поскольку поли-сомия 17 хромосомы вызывает амплификацию гена, кодирующего Нег2/пеи, появляется возможность оценить его гиперэкспрессию иммуно-цитохимически.

Материалы и методы: Исследовано: смывов мочевого пузыря - 25, материала свободно выпущенной мочи - 15 у 30 пациентов. У всех пациентов в анамнезе диагностирован УР. После сбора материала клеточные элементы концентрировали на обычной цитоцентрифуге в режиме 2000 об/мин в течение 10 мин (использовался метод максимальной концентрации клеток методом двойного центрифугирования), затем готовили серию монослойных жидкостных препаратов с использованием цитоцентрифуги Су1108рт-3 в

режиме 5 мин при 1500 об/мин. Все цитологические заключения формулировали в соответствии с Парижской системой интерпретации уринар-ной цитологии 2016г. Проведено 80 ИЦХ исследований (40 - р53 и 40 - ЫЕИ2).

Результаты исследований: В 19 наблюдениях дано заключение ЫНвиС, при ИЦХ исследовании в 1 из 19 выявлена выраженная экспрессия Ыег2 в единичной мелкой группе клеток, в 4 из 19 отмечена слабая экспрессия р53 в 1-10% клеток. Гистологически в дальнейшем выявлена уротелиальная папиллома в 2 наблюдениях, во всех остальных случаях опухолевой патологии не выявлено. В группу цитологических заключений ЛИС попало 2 наблюдения: ни в одном из них экспрессия ЫЕИ2 не выявлена, в одном отмечена слабая экспрессия р53 в 5% клеток (гистологически в одном случае была диагностирована ЬвИС, в другом - ЫвиС). В категории «атипические уротелиальные клетки, нельзя исключить УР высокой степени злокачественности (ЛИС-Ы)» - 2

наблюдения: в обоих случаях отмечалась выраженная экспрессия ЫЕИ2 и умеренная экспрессия р53 в 20% клеток (гистологически в этих случаях - ЫвИС). Категория ЬвИС установлена в 9 случаях: в 5 из 9 выявлена умеренная и выраженная экспрессия ЫЕИ2 и в 4 - умеренная р53 (от 5 до 20%) в клетках рака. Заключение о ЫвИС дано в 8 наблюдениях: во всех случаях определена выраженная и умеренная экспрессия ЫЕИ2 и р53 (в 10-90% клеток рака).

Выводы: Цитологический метод, несмотря на сравнительно невысокую чувствительность, остается единственным малоинвазивным морфологическим методом. Уверенно констатировать принадлежность атипических клеток к опухоли помогает ряд дополнительных методов - моле-кулярно-генетических, иммунохимических. Перспективным является и иммуноцитохимический метод: выраженная экспрессия р53 и Ыег2/иеи в атипических уротелиальных клетках значительно повышает вероятность обнаружения ЫвИС.

MODERN CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS IN UROPATHOLOGY

Savostikova M.V., Kudaybergenova A.G., Fedoseeva E.S., Khachaturyan A.V.

Авторы:

Савостикова М.В. - зав. лаб. клин. цитол. Центра; кандидат мед. наук; Кудайбергенова А.Г. - ст. научн. сотр. лаб. клин. цитол., кандидат мед. наук; Е.С. Федосеева - мл. научн. сотр. лаб. клин. цитол.;

А.В. Хачатурян - научн. сотр. отделения онкоурологии Центра, кандидат мед. наук.

НОВЫЙ ВЗГЛЯД НА ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКУЮ ДИАГНОСТИКУ ДИССЕМИНИРОВАННОГО РАКА ЖЕЛУДКА

САВОСТИКОВА М.В., ФЕДОСЕЕВА Е.С., НАРИМАНОВ М.Н. РОНЦ им. Н.Н. Блохина (г. Москва, РФ)

В структуре онкологической заболеваемости и смертности рак желудка занимает одну из лидирующих позиций. Распространенность данного заболевания диктует необходимость применения современных технологий в морфологическом исследовании.

Цель исследования: оценить возможности современных методов цитологии в диагностике диссеминированного рака желудка.

Материалы и методы исследования: проведено 33 цитологических и 99 иммуноцито-химических (ИЦХ) исследований на материале

отпечатков гастробиоптатов, полученных при эндоскопическом исследовании у пациентов с клиническим диагнозом «рак желудка». Также проведено 55 цитологических и 165 ИЦХ исследований на материале выпотных жидкостей и смывов брюшной полости у пациентов с распространенным опухолевым процессом. ИЦХ анализ проводили на препаратах, приготовленных с помощью Cytospin-технологии, исследовали реакции с МКАТ к р53, Ki67, HER2/neu, Ber-EP4. ИЦХ исследования проводили на иммуногисто-стейнере Вентана (BenchMark ULTRA). Также

на материале выпотных жидкостей и смывов проводили флюоресцентное ИЦХ исследование (п=55) с МКАТ к Бег-ЕР, конъюгированном с Б1ТС (прямой метод), и на биочипах с флюо-рохромом Су3. Все ИЦХ исследования сопоставлены с ИГХ реакциями на операционном материале после гастрэктомии и на клеточных блоках, приготовленных из материала выпот-ных жидкостей и смывов.

Результаты исследования: ИЦХ анализ показал выраженную и умеренную экспрессию белка р53 в 60% наблюдений, выраженную и умеренную экспрессию Ю67 в 75% наблюдений, выраженная экспрессия Нег2/пеи (3+) отмечена в 32% исследований. При исследовании выпотных жидкостей и смывов (п=55) уверенное цитологическое заключение о наличии/отсутствии клеток опухоли дано в 94.5% наблюдений, применение ФИЦХ позволило избежать гипердиагностики в одном случае и гиподиагностики - в двух случаях.

Выводы: цитологический метод наравне с гистологическим можно использовать для первичной диагностики рака желудка - чувствительность метода составила 93.8%. Использование ИЦХ анализа для оценки основных прогностических и предиктивных маркеров при распространенном раке желудка позволит оценивать биологическое поведение опухоли, факторы выживаемости и отдаленные результаты лечения. При неуверенном цитологическом заключении и даже при уверенности об отсутствии клеток опухоли в выпотных жидкостях рекомендуется проводить ИЦХ исследование с BerEp4, либо ФИЦХ прямым методом при необходимости срочного исследования. Технология Cell-block может с успехом применяться для проспективного и ретроспективного ИГХ анализа - в сравнении с традиционной ИЦХ реакции ярче, четче, нет фонового окрашивания, чаще сохраняется структурное расположение клеток опухоли.

A NEW LOOK AT DISSEMINATED GASTRIC CANCER CYTOLOGY

Savostikova M.V., Fedoseeva E.S., Narimanov M.N.

Авторы:

Савостикова М.В. - зав. лаб. клин. цитол. Центра; кандидат мед. наук; Федосеева Е.С. - мл. научн. сотр. лаб. клин. цитол.;

Нариманов М.Н. - ст. научн. сотр. отд. клин. фармакологии и химиотерапии Центра, кандидат мед. наук.

СКРИНИНГ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА У ЖЕНЩИН С ВПЧ-АССОЦИИРОВАННОЙ ПАТОЛОГИЕЙ ШЕЙКИ МАТКИ

СИНИЦЫНА О.В., КОВАЛЕНКО В.В., ПОПОВА А.А.

Группа компаний «Мать и дитя» (г. Москва, РФ)

Введение. В последние годы в мире по данным Международного агентства по изучению рака (МАИР-1ЛИС) наблюдается увеличение заболеваемости колоректальным раком. В мире выявляют более 1.3 млн случаев колоректального рака в год. Колоректальный рак занимает третье место в структуре общей онкологической заболеваемости и третье место в структуре женской онкологической заболеваемости, уступая только раку молочной железы. В настоящее время рак прямой и ободочной кишки трактуется совместо и наиболее часто используется термин колорек-

тальный рак. Около 90% случаев рака прямой кишки связаны с персистированием папилло-мавирусной инфекции. Около 79% случаев рака прямой кишки вызваны ВПЧ 16 и 18 типа, около 8% процентов случаев наиболее вероятно связаны с персистированием вируса 31, 33, 45, 52 и 58 типа. Персистирование ВПЧ-инфекции является необходимым шагом между инфицированием, развитием поражения плоского эпителия прямой кишки и развитием рака. В среднем для развития рака требуется от 1 до 3 десятилетий. Женщины, имеющие в анамнезе заболевания шейки матки

или вульвы имеют почти в 10 раз более высокий риск развития рака прямой кишки, по сравнению с остальной популяцией. Иназивный рак прямой кишки так же, как в случае рака шейки матки имеет несколько стадий развития, включающих преинвазивное поражение и дисплазию плоского эпителия - AIL (anal introephithelial lesion).

Цитологическое исследование материала из прямой кишки - это скрининговое исследование с использованием PAP-теста для выявления поражения плоского эпителия прямой кишки (ASIL -anal squamous intriephithelial lesion), оно является наиболее предпочтительным и первичным при скрининге колоректального рака. Для оценки инфицированности пациентов ВПЧ высокого и низкого онкогенного типов рекомендовано проведение исследования на ВПЧ.

Цель исследования. Оценить пораженность колоректальным раком и дисплазией плоского эпителия анального канала в группе женщин высокого риска с ранее диагностированной ВПЧ-ас-социированной патологией шейки матки.

Материалы и методы. В исследовании приняли участие 37 женщин в возрасте от 31-56 лет, проходившие обследование в различных клиниках. Пациентки были разделены на две группы -высокого и низкого риска развития ВПЧ-ассо-циированного поражения плоского эпителия прямой кишки. В группу низкого риска включены пациентки, проходившие профилактический осмотр и не имевшие в анамнезе ВПЧ-ассоции-рованных заболеваний шейки матки. В группу высокого риска — пациентки с дисплазиями эпителия шейки матки в анамнезе.

Группа высокого риска также была разбита по тяжести поражния плоского эпителия (LSIL, HSIL, cancer in situ). Средний возраст пациенток в группе высокого риска составил 37 лет, в группе низкого риска - 33 года. Все женщины в группе высокого риска имели в анамнезе дисплазию эпителия шейки матки: 44% - LSIL, 40% - HSIL, 16% - cancer in situ. Материал был получен путем взятия соскоба эпителия прямой кишки с использованием щетки Роверс и помещением ее в транспортную виалу (BD SurePath). Цитологическое исследование проводили методом жидкостной цитологии BD Shure Path с использованием системы автоматизированного просмотра препаратов BD FocalPoint. Выявление генотипов ВПЧ высокого онкогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) проводили методом гибридного захвата (HPV digene-test hybrid capture II).

Основные результаты. У 24% пациенток из группы высокого риска при цитологическом исследовании соскоба из прямой кишки выявлено интраэпителиальное поражение эпителия прямой кишки, наиболее вероятно ассоциированное с ВПЧ-инфекцией: в 8% процентах - атипия плоского эпителия неясного значения (ASCUS), в 20% - легкая дисплазия плоского эпителия (LSIL), в то время как в группе низкого риска ВПЧ-ас-социированное поражение эпителия прямой кишки не выявлено ни у одной пациентки. При проведении ВПЧ-тестирования на ДНК высоко-онкогенных типов (наиболее часто 16 типа) вируса папилломы человека выявлена у 36% женщин в группе высокого риска и 24% женщин в группе низкого риска. У 16% женщин в группе высокого риска выявлены одновременно цитологические признаки атипии плоского эпителия прямой кишки и присутствие ДНК одного или нескольких генотипов ВПЧ высокого онкогенного риска в клинически значимой концентрации.

Клинический случай 1. Пациентка 1991 г.р. Диагноз LSIL, CIN I-II, в соскобах на ПЦР были выявлены ВПЧ 16 и 18 типов. Анализ на онко-протеин p16ink4a - негативный сигнал в диспла-стических клетках. Лечение не проводилось. При исследовании материала прямой кишки: обнаружены клетки плоского эпителия с явлениями сла-бовыраженного дискариоза (ядра увеличены в размерах, контур ядерной мембраны неровный) без образования групп и скоплений. Косвенные цитологические признаки папилломавирусной инфекции в части клеток. Специфические изменения в ядре и цитоплазме (амфофилия цитоплазмы с участками просветления и уплотнения по периферии). Лейкоциты: 6-8, микрофлора: смешанная. ВПЧ digene-тест, Hybrid Capture II. Генотипы высокого онкогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) - 15,89 Отн. Ед. (Положительно).

Клинический случай 2. Пациентка, 1974г. р. Диагноз LSIL, CIN I-II, в соскобах на ПЦР - ВПЧ 16 типа. Анализ на онкопротеин p16ink4a - негативный сигнал в диспластических клетках. Лечение - аллокин, виферон, промисан, эпиген. При исследовании материала прямой кишки: В препарате обнаружены клетки многослойного плоского эпителия поверхностных и промежуточных слоев, значительное количество безъядерных чешуек плоского эпителия в скоплениях и разрозненно. Определяется небольшое количество клеток плоского эпителия с атипией неясного

значения - укрупненными ядрами неправильной формы. Ввиду дегенеративных изменений части клеток, судить о процессе уверенно не предоставляется возможным. Косвенные цитологические признаки папилломавирусной инфекции в части клеток. Специфические изменения в ядре и цитоплазме (амфофилия цитоплазмы с участками просветления и уплотнения по периферии). Лейкоциты: 6-8. Микрофлора: смешанная с преобладанием кокков. Генотипы высокого онкогенного риска (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68) - 2.03 Отн. Ед. (Положительно).

Выводы. Авторы обнаружили, что вероятность возникновения интраэпителиального поражения прямой кишки значительно выше у женщин с ВПЧ-ассоциированной патологией шейки матки, такие пациентки находятся в группе высо-

кого риска развития рака прямой кишки и должны подвергаться регулярному обследованию. В этой группе ДНК ВПЧ высокого онкогенного типа определяется в 36% случаев. В то же время обнаружение генотипов ВПЧ высокого онкоген-ного типа в 24% случаев в группе пациенток низкого риска говорит о необходимости проведения скрининга рака прямой кишки с использованием метода жидкостной цитологии BD ShurePath Pap-test и определение генотипов ВПЧ высокого онкогенного риска методом гибридного захвата ВПЧ digene-тест, Hybrid Capture II Technology вне зависимости от наличия у пациентки в анамнезе ВПЧ-асоциированного поражения эпителия шейки матки.

THE RISK TO START DEVELOPING COLORECTAL CANCER FOR HPV POSITIVE WOMEN WITH CERVICAL INTRAEPITHELIAL NEOPLASIA

Sinitsina O.V., Kovalenko V.V., Popova A.A. Авторы:

Синицына О.В. - рук. лаб. службы группы компаний «Мать и дитя», зав. лаб. жидкостной цитологии клин. госпиталия «Лапино».

Коваленко В.В. - врач КЛД лаб. жидкостной цитологии клин. госпиталия «Лапино»; Попова А.А. - врач КЛД лаб. жидкостной цитологии клин. госпиталия «Лапино»;

ЦИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПЕРВИЧНОГО И МЕТАСТАТИЧЕСКОГО РАКА ПЕЧЕНИ

С.В. СМЕТАНИНА1, М.В. САВОСТИКОВА2, Е.В. ПУРЯЕВА1, С.Б. КОРОЛЬКОВА1

1 - НОКОД (г. Нижний Новгород), 2 - РОНЦ им. Н.Н.Блохина» МЗ РФ (г. Москва)

Метастазы злокачественных опухолей относятся к наиболее распространенным очаговым поражениям печени (55%). Цитологическое исследование пунктатов очаговых образований печени как более простое и быстрое обычно предваряет биопсию и часто является связующим звеном между клиницистом и патоморфо-логом. В повседневной практике раздельное и последовательное изучение гистологических и цитологических препаратов зачастую вызывает определенные трудности, и только одновременное параллельное их исследование может разрешить ряд возникающих сомнений у морфологов.

Цель исследования - сопоставить и проанализировать результаты цитологического исследования злокачественных новообразований печени в практической работе онкологического учреждения.

Материалы и методы исследования: сопоставлены и проанализированы результаты цитологических исследований и гистологических Соге-биопсий у 76 пациентов с объемными образованиями печени, а также 15 тонкоигольных аспирационных биопсий (ТИАБ), взятых только для цитологического исследования и приготовленных методом жидкостной цитологии. При Соге-биопсии материалом для цитологиче-

ского исследования служили мазки-отпечатки биопсийного материала. Цитологические препараты считались адекватными, если в материале каждого препарата содержалось более 6 скоплений, в каждом из которых было не менее 8-10 эпителиальных клеток.

Результаты: Проведено 76 сопоставлений данных гистологического и цитологического исследований материала Соге-биопсий. С учетом клинических данных все пациенты были разделены на 4 группы:

• у больных 1-й гр. по результатам совместного исследования материала по Соге-биопсии полное совпадение отмечено в 54 наблюдениях (71.1 %).

• 2-ю гр. составили 15 случаев (19.7%) лож-ноотрицательных цитологических результатов, однако при повторном их изучении материал по критериям адекватности был расценен как неинформативный.

• 3-я гр.: 1 случай (1.3%) с ложноположи-тельным цитологическим заключением о наличии злокачественного новообразования в печени. При пересмотре препарата, отмеченная ранее клеточная атипия соответствовала дистрофическим и регенеративным процессам в паренхиме печени при циррозе.

• В 4-ю группу вошли 6 наблюдений (7.9%) с ложноотрицательным гистологическим результатом: в 3-х случаях по клиническим данным сомнений о наличии метастатического процесса не было, поэтому повторное взятие материала для гистологического исследования было нецелесообразным. В других 3-х случаях -при повторной Соге-биопсии результат гистологического исследования показал наличие высо-кодифференцированного гепатоцеллюлярного рака. Во всех 6-ти вариантах цитологически уверенно был установлен диагноз рака.

Таким образом, общее количество совпадений с учетом клинических данных и данных гистологического и цитологического исследования составил 79% (п=60).

При оценке 15 ТИАБ в 4 наблюдениях (26.7%) по критериям адекватности материал оказался неинформативным. В 11 цитологических исследований (73.3%) утвердительно был поставлен диагноз рака, в т.ч. 4 случая с метастазом при невыявленном первичном очаге.

Исследования показали:

1. неадекватный материал для цитологического исследования составил 20.9% (п=19);

2. большие возможности цитологического метода в исследовании образований печени при условии адекватности клеточного материала: в 71 из 72 (98.6%) цитологических исследований диагноз рака установлен утвердительно;

3.неоспоримые преимущества совместной параллельной цитологической и гистологической диагностики;

4. высокую зависимость информативности цитологического материала от профессионального уровня врача, который производит ТИАБ, а также от топографо-анатомических особенностей расположения рака в печени.

Выводы: Цитологический метод — информативный метод диагностики опухолей печени при условии получения адекватного материала. Отрицательные результаты цитологического исследования не исключают злокачественный характер процесса. Консолидация цитологов, патологов и клиницистов позволяет своевременно и правильно верифицировать диагноз больным как с метастазами рака в печень, так и первичным раком.

CYTOLOGICAL DIAGNOSIS OF PRIMARY AND METASTATIC CARCINOMAS OF THE LIVER

Smetanina S.V., Savostikova M.V., Puryaeva E.V., Korolkova S.B.

Авторы:

Сметанина С.В. - зав. цитол. лаб. онкологического диспансера; Савостикова М.В. - зав. лаб. клин. цитологии Центра, кандидат мед. наук; Пуряева Е-А. В. - врач цитол. лаб. онкологического диспансера; Королькова С. Б. - врач цитол. лаб. онкологического диспансера.

ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ ЖИДКОСТЕЙ - ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ТЕСТ РАСПРОСТРАНЕННОСТИ ОПУХОЛЕВОГО ПРОЦЕССА

ТУГАНОВА Т.Н., БОЛГОВА Л.С., МАХОРТОВА М.Г., МАРИНЕНКО С.В.

Национальный институт рака МЗ Украины (г.Киев, Республика Украина)

Введение. Цитологическая диагностика распространенности опухолевого процесса предполагает исследование накопленной в брюшной полости жидкости (выпота, асцита) или пред-, интраоперационного лаважа (смыва с органов брюшной полости), позволяющей выявить признаки местно распространенного опухолевого процесса или перитонеальной диссеминации. В клинической практике это необходимо для определения распространенности опухолевого процесса и установления стадии его развития, а также для выбора дальнейшей тактики лечения больного.

Цель исследования - провести анализ возможностей цитологической диагностики опухолей по выпотам и интраоперационным смывам из органов брюшной полости для определения степени распространенности опухолевого процесса.

Материал и методы исследования. Проведен анализ материала 361 больного. С выпотами (асцитической жидкостью) в брюшной полости 140 больных: мужчин - 10 (7.0%), женщин - 130 (93.0%). Смывы с органов брюшной полости изучены у 221 больного: мужчин - 105 (47.5%), женщин - 116 (52.5%). Препараты, приготовленные из осадка центрифугата, окрашивали по методу Паппенгейма и исследовали при световой микроскопии с помощью микроскопа OLYMPUS CX41 при различных увеличениях: х100; х200; х400; х1000.

Результаты исследования. В наблюдениях с выпотами в брюшную полость преобладали больные с клиническим диагнозом опухоли яичника - 79 (56.4%). Среди них при срочном исследовании злокачественный процесс с верифицированным гистологическим типом опухоли установлен у 18 (22.8%), предположение о раке - у 4 (5.1%), злокачественный процесс без уточнения гистологического типа - у 2 (2.5%) больных. Заключения с указанием на атипию отдельных клеток были у 3 (3.8%) и описательного типа - у 52 (65.8%) больных.

Еще одну большую группу пациенток с клиническими диагнозами опухоли шейки и тела матки составили 35 (25%) больных. Наличие клеток с признаками атипии, исходящих из злокачественной опухоли установлено по материалу 15 (43 %), при сочетанном поражении опухолью шейки и тела матки - 5 (3.6%) больных. Среди результатов исследования преобладали заключения описательного типа с указанием на определенную степень пролиферации и явлений дистрофии клеток мезотелия.

У больных со смывами брюшной полости самая большая группа была с клиническим диагнозом опухоли желудка - 125 (56.6%) наблюдений. В данной группе больных клетки злокачественной опухоли обнаружены у 22 (17.6%) больных, из них с определением гистологического типа опухоли - в 20 (16%) исследованиях. Заключения описательного типа с указанием на пролиферацию и дистрофию мезотелия, без наличия клеток с признаками атипии по материалу смывов с органов брюшной полости отмечены в 98 (44.3%) наблюдениях. В единичных случаях клеточные элементы в смывах отсутствовали.

В группе больных с одновременным поражением пищевода и желудка, что наблюдалось у 35 (15.8%) пациентов, заключения носили описательный характер в 30 (85.7%). Клетки опухоли с определением гистологического типа найдены в 5 (14.3%) исследованиях.

В группе больных с опухолями и кистами яичников 30 (13.6%) также преобладали заключения описательного типа без наличия клеток с явлениями атипии, а в материале 17 (56.7%) больных, с признаками атипии - найдены у 2 (6.7%) больных. Злокачественный процесс в данной группе пациентов установлен в 10 (33.3%) наблюдениях.

Заключение. Таким образом, цитологическое исследование выпотов и перитонеальных смывов с органов брюшной полости является объективным морфологическим тестом на на-

личие или отсутствие клеток опухоли. Результаты проведенного исследования позволяют клиницистам провести стадирование опухолевого процесса и принять решение о дальнейшей так-

тике лечения больных с онкологическими заболеваниями органов брюшной полости и малого таза.

CYTOLOGICAL INVESTIGATION OF PERITONEAL LIQUID - DIAGNOSTIC TEST OF PREVALENCE OF TUMOURS PROCESS

Tuganova T.N., Bolgova L.S., Machortova M.G., Marinenko S.V.

Авторы:

Туганова Т.Н. - вед. научн. сотр. научно-исслед. лаб. клин. цитол., кандидат мед. наук; Болгова Л.С. - заведующая научно-исслед. лаб. клин. цитологии, доктор мед. наук, проф.; Махортова М.Г. - научн. сотр. научно-исслед. лаб. клин. цитологии; Мариненко С.В. - врач лаб. цитол. диагностики.

ВОЗМОЖНОСТИ ЦИТОМОРФОЛОГИЧЕСКОИ И ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКОИ ДИАГНОСТИКИ В ИССЛЕДОВАНИИ ЛИКВОРА ПРИ ПЕРВИЧНЫХ И МЕТАСТАТИЧЕСКИХ ПОРАЖЕНИЯХ ГОЛОВНОГО МОЗГА

ФОМИНА Л.Я., САВОСТИКОВА М.В., ФЕДОСЕЕВА Е.С., ФУРМИНСКАЯ Е.Ю. РОНЦ им. Н.Н. Блохина (г. Москва, РФ)

Одной из существенных проблем в клинической онкологии является верификация опухолевых поражений головного мозга, в особенности потому, что морфологическая оценка, как правило, ограничена труднодоступностью опухоли. Цитологическое исследование ликвора является «золотым стандартом» диагностики и, наряду с другими современными методами, позволяет повысить выявляемость первичных и метастатических поражений головного мозга. Однако цитологический метод имеет ряд ограничений ввиду малого объема материала спинномозговой жидкости (СМЖ) или ее скудной клеточно-сти. Относительно невысокая чувствительность цитологической диагностики может объясняться удаленностью опухолевого очага от места пункции, а также зависимостью от степени распространения опухоли по мозговым оболочкам. При цитологическом исследовании СМЖ наиболее часто выявляются именно метастатические поражения головного мозга, хотя статистически они встречаются реже, чем первичные опухоли. Для обнаружения зачастую немногочисленных клеток злокачественного новообразования в ликворе и уточнения их гистогенеза в работе авторы прибегли к иммуноцитохимиче-скому исследованию.

Цель исследования. Оценить возможности цитоморфологической и иммуноцитохимиче-ской диагностики в исследовании ликвора при первичных и метастатических поражениях головного мозга.

Материал и методы. Проведено 60 цитологических исследований ликвора, полученного посредством люмбальной или вентрикулярной пункции, а также пункции объемных образований головного мозга, у 27 пациентов (10 мужчин, 17 женщин). Возраст больных варьировал от 21 года до 68 лет. У женщин подавляющее большинство вторичных поражений ЦНС (12 случаев) было представлено метастазами рака молочной железы, в одном случае диагностирована метастатическая меланома; у мужчин в трех случаях были выявлены метастазы рака легкого и в одном - метастаз плеоморфной липосаркомы. У 7 пациентов были верифицированы первичные опухоли головного мозга (медуллобластомы -2, глиобластомы - 3, лимфома - 1, тератоидная рабдоидная опухоль - 1). Еще у трех пациентов по данным МРТ имели место доброкачественные, либо неопухолевые изменения головного мозга (аденома гипофиза - 1, очаг ишемии - 1, очаг атрофии - 1).

Весь объем СМЖ был использован для приготовления серии монослойных препаратов с помощью системы Cytospin-3. С целью уточнения цитологического диагноза 7 пациентам были проведены иммуноцитохимические реакции с использованием моноклональных антител к общим цитокератинам (panCK), СК7, CD3, CD20, CD45, ER, ki67, S100, HMB45, melan A, десмину, ЭМА, Ber-EP4, p63, TTF-1, синаптофизину (Dako) на иммуногистостейнере Ventana.

Результаты исследования. У 13 из 17 пациентов метастатические поражения головного мозга подтвердились цитологически. У 7 обследованных по поводу первичных опухолей ЦНС клетки опухоли в СМЖ были обнаружены в трех случаях. В трех наблюдениях с доброкачественными и неопухолевыми образованиями головного мозга клетки опухоли обнаружены не были. Из 60 цитологических исследований СМЖ в 29 случаях удалось выявить клетки опухоли. Таким образом, чувствительность цито-

логического исследования составила 51%, что согласуется с данными мировой литературы. Иммуноцитохимическое исследование позволило определить гистогенез метастатической опухоли в 4 наблюдениях, в 2 - первичной опухоли головного мозга (лимфома, медуллобластома), в 1 доказать отсутствие опухоли.

Выводы. Цитологическое исследование СМЖ является одним из первичных методов морфологической диагностики опухолей ЦНС. Сравнительно невысокая чувствительность метода во многом обусловлена анатомическими особенностями расположения новообразования и степенью его лептоменингеального распространения. Иммуноцитохимические исследования расширяют возможности цитоморфологии в выявлении клеток опухоли и определении их гистогенеза, однако традиционно малый объем ликвора и его низкая клеточность иногда ограничивает применение данного метода.

OPPORTUNITIES OF CEREBRO-SPINAL FLUID CYTOLOGY AND IMMUNOCYTOCHEMISTRY IN PATIENTS WITH PRIMARY AND METASTATIC BRAIN TUMORS

Fomina L.Ya., Savostikova M.V., Fedoseeva E.S., Furminskaya E.Yu. Авторы:

Фомина Л.Я. - научн. сотр. лаб. клин. цитологии Центра; Савостикова М.В. - зав. лаб. клин. цитологии Центра, кандидат мед. наук; Федосеева Е.С. - мл. научн. сотр. лаб. клин. цитологии Центра; Фурминская Е.Ю. - научн. сотр. лаб. клин. цитологии Центра

35 ЛЕТ КУРСУ КЛИНИЧЕСКОЙ ЦИТОЛОГИИ НА КАФЕДРЕ ПАТОЛОГИЧЕСКОЙ АНАТОМИИ ЛЕНГИДУВА - СПБМАПО -СЗГМУ ИМ. И.И. МЕЧНИКОВА

ХМЕЛЬНИЦКАЯ Н.М., КОТОВ В.А.

СЗГМУ им. И.И. Мечникова МЗ РФ (г. Санкт-Петербург РФ)

В 1982 г. на кафедре патологической анатомии ЛенГУДУВа, зав. кафедрой чл.-корр. РАН, проф. Олег Константинович Хмельницкий создал первый в России курс клинической цитологии в рамках последипломного образования. Основную работу по организации цикла в то время проводили доценты Ермолова Татьяна Петровна и Черемных Анатолий Аркадьевич. Т.П. Ермолова возглавляла курс цитологии в течение 20 лет, до 2002 г. За эти годы на кафедре патологической анатомии

была создана Санкт-Петербургская школа последипломного преподавания клинической цитологии. В 1984г. в качестве преподавателя была приглашена Валентина Александровна Липова -опытный специалист цитолог, сотрудник Ленинградского НИИ онкологии им. Н.Н. Петрова.

С 2002г. курс цитологии возглавляет В.А. Котов. В течение последних 12 лет преподавателями курса являются известные в стране ци-

тологи - профессор Виктор Иванович Новик и доцент Лариса Анваровна Красильникова.

Многие врачи - патологоанатомы и преподаватели кафедры освоили новый для них морфологический метод - цитологию и с успехом используют его в прижизненной морфологической диагностике заболеваний.

Таким образом, созданный в рамках кафедры патологической анатомии педагогический коллектив, сочетающий как научные знания, так и многолетний практический опыт, обладает не только высоким профессиональным уровнем, но и возможностями организации и проведения циклов усовершенствования для врачей -слушателей и лаборантов. В профессиональном стандарте патологоанатомов с учетом современных клинических рекомендаций по диагностике целого ряда заболеваний включены и цитологические методы исследования.

За годы существования курса клинической цитологии, сложились основные принципы преподавания предмета, необходимые для формирования практических навыков у врачей - слушателей цитологических циклов:

1. В преподавании используются нормативные документы, как для клиницистов, так и

для патологов и цитологов, участвующих в диагностическом процессе.

2. Необходимо применять дифференцированный подход в формировании групп врачей -слушателей с учетом уровня их подготовки.

3. Формирование базисных знаний по нормальной и патологической, как анатомии, так и гистологии, осуществлять с учетом клинических проявлений различных патологических процессов, опираясь на принцип - «без знания, нет умения»

4. Создание и использование алгоритмов для описания морфологических изменений в цитологических препаратах и постановки диагноза.

5. Использование информационных технологий в преподавании клинической цитологии: мультимедийные презентации лекций, включающих иллюстративный материал (цитологические препараты), дистанционные лекции, веби-нары, электронные учебники, атласы и т.д.

6. Организация контроля знаний, создание тестовых заданий и ситуационных задач с учетом клинических данных, позволяющее повышать уровень профессиональной подготовки.

35 YEARS OF COURSE OF CLINICAL CYTOLOGY AT THE CHAIR OF PATHOLOGICAL ANATOMY LENGIDUV - SPBMAPS -NWSMU N.A. I.I. MECHNIKOV

Khmelnitskaya N.M., Kotov V.A. Авторы:

Хмельницкая Н.М. - зав. кафедрой, заслуженный врач РФ, доктор мед. наук, проф. Котов В.А. - доцент каф., кандидат мед. наук.

ОБ ОПЫТЕ РАБОТЫ КЛИНИЧЕСКОГО ЦИТОЛОГА В ПОЛИКЛИНИКЕ МЕТРОПОЛИТЕНА

ЮЛДАШЕВА Л.Р., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А.

Поликлиника метрополитена г. Санкт-Петербург, Башкирский государственный медицинский университет (г. Уфа, Республика башкортастан, РФ)

Цитологический скрининг наиболее эффективен в ранней диагностике рака шейки матки (РШМ), т. к. позволяет обнаружить злокачественное поражение на клеточном уровне.

В поликлинике Петербургского метрополитена в соответствии с Приказом Минздравсоцраз-

вития России от 12.04.2011 № 302н регулярно проводятся профилактические осмотры, в т.ч. и цитологические исследования шейки матки у работающих женщин. Результаты цитологического исследования вносятся в электронный цитологический лабораторный журнал в формате Excel

со всплывающими окнами, разработанный авторами доклада, что позволяет осуществлять быстрый поиск, сравнивать полученные результаты при повторном изучении и анализировать патологический процесс в динамике.

По данным авторов, за последние 3 года наблюдается увеличение числа проводимых цитологических исследований с 8056 в 2014 г. до 8904 в 2016 г. При проведении цитологических исследований особое внимание уделяется полноценности полученного биоматериала - адекватности мазка. По результатам исследований, в 73.67% цитологические препараты были адекватны, в 26.20% - недостаточно адекватны, в 0.12% случаев - неадекватны.

Диагностика предопухолевых состояний шейки матки имеет важное значение для профилактики злокачественных новообразований. Цитологу важно диагностировать плоскоклеточные интраэпителиальные поражения низкой и высокой степени злокачественности (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade - LSIL и HSIL) и инвазивный рак. За 2014-2016гг. плоскоклеточные интраэпители-альные поражения низкой и высокой степени (squamous intraepithelial lesions of low grade and high grade - LSIL и HSIL) эпителия шейки матки выявлены в 482 случаях (1.86%), инвазивный рак шейки матки - у 9 (0.03%) женщин. В проведенных исследованиях неопухолевые (фоновые) заболевания шейки матки диагностированы в 6506 (25.21%) случаях, которые чаще представлены гиперплазией железистого эпителия

(псевдоэрозия), гиперкератозом многослойного плоского эпителия, атипической гиперплазией железистого эпителия и хроническим цервици-том.

В графу «Другие заболевания» включены описательные цитологические заключения, которые относятся к 2646 (10.25%) случаям, где рекомендуется повторить исследование. Это случаи, при которых не всегда соблюдаются рекомендуемые сроки получения биоматериала и в цитограмме отмечаются изменения эпителия, обусловленные как функциональными, так и дисгормональными причинами.

Таким образом, профилактические осмотры работающего женского населения с включением цитологического скрининга позволяют выявлять и своевременно проводить лечение и профилактику воспалительных, фоновых, пре-допухолевых и опухолевых процессов женской половой сферы. Для совершенствования цитологической диагностики в условиях поликлиники Петербургского метрополитена считаем необходимым участие лаборатории в Федеральной системе внешней оценки качества клинических лабораторных исследований (ФСВОК) по разделу «Цитология»; тесное взаимодействие врача-цитолога с гинекологами и акушерками смотровых кабинетов; постоянное сопоставление результатов цитологического и гистологического исследования; сравнение данных по диагностике различных поражений шейки матки с информацией, полученной из периодической специальной литературы.

ABOUT THE EXPERIENCE OF CLINICAL CYTOLOGIST IN THE CLINIC UNDERGROUND. SAINT PETERSBURG METRO "METRO CLINIC"

Yuldasheva, L. R., Iimelbaeva E. A. Авторы:

Юлдашева Л.Р. - врач клин. лаб. диагностики Поликлиники метрополитена; Имельбаева Э.А. - профессор каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук.

ЗНАЧЕНИЕ, ОСОБЕННОСТИ, ВОЗМОЖНОСТИ СРОЧНОЙ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ

ШАБАЛОВА И.П.

Кафедра клинической лабораторной диагностики РМАНПО (г. Москва, РФ)

В настоящее время в связи в некоторых странах Европы и Америки меняется методология морфологических исследований. Благодаря ВПЧ тестированию, использованию автоматизированных методов и других современных технологий в скрининге, снижается необходимость в просмотре больших объемов рутинных препаратов, освобождается время у опытных цитотехнологов (медицинских технологов, биологов, выполняющих цитологические исследования). Существует область, где можно использовать опыт цитотех-нологов и цитопатологов в других целях. За рубежом для обозначения этого вида исследований появился термин ROSE - Rapid On Site Evaluation. В отечественной клинической цитологии срочное цитологическое исследование начали выполнять еще в 70-х годах прошлого века, что было связано с работами К.А. Агамовой, Г.Н. Хайрутдино-вой, И.П.Шабаловой, Н.А. Шапиро, Л. М. Горбачевой и других цитологов. Благодаря внедрению результатов в клиническую практику в России

начали проводить срочное цитологическое исследование во время операций, тонкоигольной пункции, при использовании эндоскопических, ультразвуковых, лучевых методов визуализации патологического очага. По-прежнему актуально выполнение срочного бактериоскопического, а при наличии специалистов и срочное цитологическое исследование в гинекологии и урологии. Срочное цитологическое исследование позволяет установить характер патологического процесса, степень его распространенности, решить вопрос о необходимости повторного получения материала. Проблемы уточняющей диагностики в основном лежат на плечах врачей (патоморфо-логов, клинических цитологов). Использование жидкостной цитологии при выполнении ROSE позволяет сохранить материал и при необходимости провести как повторное цитологическое, так и гистологическое (на клеточных блоках) и/ или молекулярное исследование.

THE VALUE, FEATURES AND OPPORTUNITIES OF ROSE

Shabalova I.P.

Авторы:

Шабалова И.П. - проф. каф. клин. лаб. диагностики РМАНПО, доктор мед. наук.

СОВРЕМЕННЫЙ ПОДХОД В ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ ОПУХОЛЕВЫХ ЭКССУДАТОВ

ШАЛИНА Е.С., НОВИК В.И., МИХЕТЬКО А.А.

Поликлиника метрополитена г. Санкт-Петербург, Башкирский государственный медицинский университет (г. Уфа, Республика башкортастан, РФ)

Актуальность проблемы. Правильное определение природы асцита или плеврита у онкологических пациентов является крайне актуальной задачей на этапе первичной диагностики про-

цесса, стадирования, выбора тактики лечения и мониторинга заболевания. При этом ключевая роль в решении данных вопросов в онкологической практике отводится цитологическому мето-

ду исследования. Более того, для морфологической диагностики опухолевого экссудата метод практически не имеет альтернативы. Однако при традиционном цитологическом исследовании существует ряд трудностей при дифференциальной диагностике опухолевых и реактивных процессов. Так, клетки пролиферирующего ме-зотелия зачастую имеют большое сходство со злокачественными клетками и наоборот, что значительно затрудняет работу врача-цитолога. Кроме того, нередко, первичный опухолевый очаг у больных с метастатическими экссудатами неизвестен, а состояние пациента и регламент лечебного учреждения не всегда позволяют немедленно провести необходимые инструментальные и гистологические исследования. В таких случаях возможно применение дополнительных цитологических методик, расширяющих возможности для точного и быстрого определения характера процесса, а также установления гистогенеза и гистотипа первичной злокачественной опухоли. При этом не во всех цитологических лабораториях применяются такие методы как иммуно-цитохимия (ИЦХ), «клеточный блок», иммуно-флуоресценция. Причиной являются отсутствие необходимого оборудования, высокая стоимость реактивов, трудоемкость процесса и разночтения в вопросах пробоподготовки материала для проведения ИЦХ исследований. Авторы имеют опыт проведения таких исследований на материале клиники института НИИ онкологии им.Н.Н.Пе-трова у пациентов с асцитами и плевритами.

Цель исследования. Определение роли им-муноцитохимического исследования для расширения возможностей цитологического исследования выпотных жидкостей.

Материалы и методы исследования. За период с 2016г. до середины 2017г. в НИИ онкологии им Н.Н. Петрова проведено 907 цитологических исследований выпотных жидкостей у 774 пациентов. После доставки в лабораторию жидкость отстаивалась в течение часа, после чего применялся метод двойного центрифугирования осадка с изготовлением цитоспиновых препаратов. Мазки окрашивали гематоксилином-эозином и азуром-эозином. При наличии подозрительных на опухоль клеток, а также клеток опухоли и необходимости их фенотипирования использовали дополнительные методы исследования. При плановой диагностике материала применяли метод ИЦХ. Для этого изготавливали дополнительные цитоспиновые препараты на полилизиновых

стеклах, фиксировали мазки в 96% спирте 5 мин., в ацетоне 2 мин. Постановку иммуноцитохими-ческих реакций осуществляли с помощью системы Novolink Polymer Detection System (Leica, Великобритания) или прибора Ventana Benchmark GX (Ventana Medical Systems, USA) согласно стандартному протоколу. Выбор антител в каждом случае определялся индивидуально, наиболее часто используемыми были следующие: калрети-нин, BerEP4, цитокератин 7, 20, CEAm, TTF-1, ER, Ca125, WT-1, CDX-2. В ряде случаев, из осадка вы-потной жидкости изготавливали клеточный блок и проводили постановку дополнительных ИЦХ реакций. При необходимости срочного цитологического заключения и затруднениях в определении характера экссудата использовали имму-нофлюоресцентный анализ материала. Для этого к осадку жидкости добавляли антитело Ber-EP4, конъюгированное с флуорохромом FITC. Далее материал центрифугировали с получением цито-спиновых препаратов, проводили контрокрашивание ядер красителем DAPI и микроскопирова-ли с помощью флуоресцентного микроскопа. На основе полученных результатов, сопоставленных с клиническими данными и результатами инструментальной диагностики, устанавливали цитологический диагноз.

Результаты исследования. За 18 месяцев в лаборатории проведено 907 цитологических исследований выпотных жидкостей (315 плевральных и 592 асцитических жидкостей) у 774 пациентов. В 434 (58%) случаях процесс был расценен как реактивный, в 325 (42%) - как опухолевый. У 112 больных характер экссудатов был определен с помощью современных методик, таких как иммуноцитохимическое исследование (ИЦХ) на цитоспиновых препаратах, ИЦХ на клеточных блоках, иммунофлюоресцентный анализ. У 75 пациентов дополнительные методы применялись для дифференциальной диагностики реактивных и опухолевых выпотов, у 60 больных - для определения гистогенеза злокачественных клеток в экссудатах при опухолях неясной первичной локализации.

Выводы: Современные методы исследования значительно повышают процент утвердительных цитологических заключений при затруднениях определения злокачественной или доброкачественной природы выпотных жидкостей, а также являются быстрым, точным и относительно доступным способом определения локализации первичного очага.

THE MODERN APPROACH TO MALIGNANT EFFUSION CYTOLOGY

Shalina E.S., Novik V.I., Mikhetko A.A.

Авторы:

Шалина Е.С. - врач клин. лаб. диагностики, лаборант-исследователь;

Новик В.И. - вед. научн. сотр. научной лаб. морфологии опухолей, врач клин. лаб. диагностики, доктор мед. наук, проф. Михетько А.А. - зав. лаб. цитологии, кандидат мед. наук.

ИССЛЕДОВАНИЯ КАНЦЕРОМАТОЗНЫХ ВЫПОТОВ БЕЗ ПЕРВИЧНО ВЫЯВЛЕННОГО ОПУХОЛЕВОГО ОЧАГА С ПРИМЕНЕНИЕМ ИММУНОЦИТОХИМИЧЕСКОГО МЕТОДА

ШТАН Л.В., ИМЕЛЬБАЕВА Э.А.

Санкт-Петербургский научно-практический клинический центр специализированных видов медицинской помощи (онкологический), г. Санкт-Петербург, Башкирский государственный медицинский университет (г. Уфа, Республика Башкортастан, РФ)

Злокачественные новообразования достаточно часто сопровождаются выпотом в плевральную и брюшную полости. Частота случаев, когда заболевание манифестировалось метастазами, а локализация первичной опухоли на момент морфологического (патолого-анатомического) исследования оставалась неизвестной, составляет 3-15% всех онкологических заболеваний. При этом цитологическая диагностика по материалам серозных жидкостей из плевральной и брюшной полостей при различных опухолевых и неопухолевых заболеваниях является первым и зачастую единственным методом морфологической верификации, предопределяющим дальнейшую тактику обследования и лечения пациента.

За 10 месяцев 2016г. проведены исследования цитологического материала, полученного у 4587 пациентов, в т.ч. в 380 случаях были получены выпотные жидкости (8.2%). Из этого количества число образцов асцитической жидкости составило 255 (67.1%), пунктатов заднего свода - 90 (23.7%), плевритов - 35 (9.2%). В 23 (6%) случаях были проведены иммуноцитохимические исследования осадка жидкостей, в т.ч. в 16 (4.2%) случаях в материале без выявленного первичного очага. Из 16 материалов без выявленного первичного очага 11 (68.75%) случаев были представлены асцитической жидкостью, 3 (18.75%) - пун-ктатами заднего свода и 2 (12.5%) - плевральной жидкостью.

Следовательно, в большинстве случаев им-муноцитохимическим методом исследуется ас-цитическая жидкость, что требует применения более широкого спектра антител для определения гистогенеза обнаруженных клеток опухоли, т.к. брюшная полость граничит с большим количеством органов, чем плевральная полость или Дугласово пространство малого таза при пункции заднего свода влагалища.

Все 16 пациентов, у которых был получен материал без выявленного первичного очага, были женского пола в возрасте 49-87 лет, впервые обратившимися к врачу-онкологу с жалобами на увеличение размеров живота или накопление жидкости в плевральной полости по результатам ультразвукового исследования, слабость, небольшой субфебрилитет, похудание, без осложнённого онкологического анамнеза.

Традиционное цитологическое исследование выпотных жидкостей выявило у 3 (18.75%) из 16 пациенток подозрение на злокачественность, диагноз был затруднен между реактивным мезотелием и клетками рака. У остальных 13 (81.25%) в цитологических препаратах выявлялись многочисленные комплексы и одиночно лежащие клетки аденокарциномы.

Дальнейшие исследования были проведены с применением иммуноцитохимического метода и панелей антител для определения гистогенеза опухолей. Использовали маркеры опухолей

легких, яичника, молочной железы, верхних отделов желудочно-кишечного тракта. Были дополнительно получены центрифугированные клеточные осадки на необходимое количество антител, которые в дальнейшем были окрашены на иммуностейнере Ventana Bench Mark XT IHC/ iSH (La Roche, USA) с применением монокло-нальных антител к цитокератину 7 (СК7), TTF1, ER(SP1) (эстроген) WT1, CDX2, PAX8, CK20, GATA3, GCDFP-15, CA 125 и систем детекции Optiview Universal DAB Detection Kit (La Roche, USA). Контроль осуществляли параллельным гистологическим исследованием.

По полученным данным, в 8 случаях из 13 (61.5%) обнаружена серозная аденокарци-но-ма яичника, а в 3 (23.1%) получены негативные реакции, в связи с чем было принято решение расширить поиск добавлением новых панелей антител, т.к. в 2 (15.4%) случаях была получена позитивная реакция с СК20, что послужило поводом для использования маркеров опухолей желудочно-кишечного тракта. В результате им-мунофенотипирования в этих 2 случаях были обнаружены метастазы рака из желудочно-кишечного тракта. В одном из случаев негативной реакции на маркеры аденокарциномы яичника и рака желудочно-кишечного тракта дополнительно был определен маркер рака легкого (TTF1): в препаратах наблюдалось четкое позитивное окрашивание с этим маркером.

Материал, полученный из заднего свода влагалища (90 случаев) путем пункционной биопсии, так же иммунофенотипировали с панелью антител на серозную аденокарциному

яичника, что позволило дифференцировать метастазы серозной аденокарциномы яичника (2 случая) в жидкости малого таза, а также избежать случая гипердиагностики при цитологическом заключении о предположении наличия клеток опухоли при реактивно-дегенеративных изменениях клеток мезотелия.

В материале из плевральной жидкости (35 случаев) было проведено иммунофенотипиро-вание клеток в 2 случаях. Главными при выборе антител в этих жидкостях, являлись морфологические признаки обнаруженных клеток. В обоих случаях обнаруживались обильные шарообразные клеточные структуры аденокарциномы с небольшим размером самих клеток, что чаще всего встречается при метастазе рака молочной железы. Но у данных пациентов не наблюдалось клиники рака молочной железы, и это не указывалось в анамнезе. Поэтому задачей для им-муноцитохимической диагностики ставилось дифференцировать данные клетки между аде-нокарциномой легкого и раком молочной железы. Представленные случаи удалось дифференцировать в пользу аденокарциномы легкого.

В асцитической жидкости (255 случаев) выявлено 8 случаев метастаза серозной аденокар-циномы яичника, 2 - рака желудочно-кишечного такта, 1 - рака легкого.

Таким образом, применение иммуноцитохи-мического исследования позволяет определить гистогенез клеток опухоли, обнаруженных в вы-потных жидкостях без первично выявленного опухолевого очага.

RESEARCH KANZEROMATOSY EFFUSIONS WITHOUT IDENTIFIED PRIMARY TUMOR FOCUS WITH THE USE OF IMMUNOCYTOKINEIC METHOD

Shtan L.V., Imelbaeva E.A. Авторы:

Штан Л.В. - врач клинической лабораторной диагностики (цитолог) цитоло. лаб. при ПАО Санкт-Петербургского

Научно-практического клин. центра специализированных видов медицинской помощи (онкологический); ассистент каф. патологической анатомии Санкт-Петербургского Медико-Социального Института (г. Санкт-Петербург). Имельбаева Э.А.- проф. каф. лаб. диагностики университета, доктор биол. наук.

XIX МЕЖДУНАРОДНЫЙ ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

( 28 мая - 1 июня 2016 г., г. Йокогама, Япония)

И.П. ШАБАЛОВА1, И.В. НАЗАРОВА2, Н.Э. ЛОМОНОСОВА3

1. Кафедра клинической лабораторной диагностики РМАПО Минздрава, г. Москва

2. ГБУЗ «Приморское краевое патологоанатомическое бюро», г. Владивосток.

3. ООО ДЦ «Лабораторная диагностика - Асклепий», г. Владивосток.

Впечатления о 19-ом Международном Конгрессе Цитологов, проходившем в 2016 году в Йо-когаме, в прекрасном архитектурном комплексе Pacifico Yokohama (рис.1), остались незабываемые. Некоторые специалисты из русской делегации впервые участвовали в конгрессе такого уровня, многие - впервые посетили Японию. Четко отлаженная организация мероприятия прослеживалась с первого момента регистрации. Каждому участнику предварительно по электронной почте выслали индивидуальный QR-код. Во время регистрации на конгрессе в течение нескольких секунд, при прикладывании этого кода к компьютеру, принтер распечатывал всю информацию: сертификат и бейджик участника, входные билеты в залы по оплаченным дополнительным опциям, приглашение на банкет и пр. Все организационные моменты оставались на таком же высоком уровне до закрытия Конгресса. С 28 мая по 1июня, включая все выходные дни, как правило, с 7:00-8:00 и до 19:00 участники напряженно работали. Пленарные лекции, симпозиумы, слайд-семинары, ланч-семинары, научные доклады (proffered papers), заседания цитологических обществ разных стран (companion meetings) - са-теллитные симпозиумы, обсуждения стендовых докладов - эти разнообразные виды информации были представлены на Конгрессе в свободном доступе. Кроме того предоставлялись дополнительные (платные) опции - рабочие семинары, видео туториалы, встречи с экспертами. В программе Конгресса также значились экзамены цитопатоло-гов и цитотехнологов, отдельная сессия цитотех-нологов, проходили церемонии награждения (рис. 2) активных членов Международной Академии Цитологов (IAC).

Пленарные лекции, ключевые лекции и доклады на симпозиумах представляли известные цитологи мирового уровня - Daisuke Aoki (Japan);

David V. Kaminsky, Steven G.Silverberg, R. Marshall Austin, David C.Wilbur, Ritu Nayar (США); Olli Kallionemi (Финляндия); Fernando Schmitt и Phillippe Velh (Люксембург), Volker Schneider (Германия), а также многие другие. Это была замечательная теоретическая школа, живое общение с авторами классических мировых трудов по цитологии для рядовых цитологов из разных стран, которые, в свою очередь, также могли представить свои доклады, поделиться опытом и собственными проблемами на заседаниях цитологических обществ разных стран, на секциях представленных докладов и стендовых докладов. Практическая школа состояла из слайд-семинаров, рабочих семинаров, видео туториалов, встреч с экспертами мирового уровня.

Слайд-семинары представляли собой интересный вид практической работы. После предварительной электронной регистрации участника, к нему в электронном виде поступали клинические данные и микрофотографии цитологических случаев в виде задач, которые необходимо было решить, выбрав верный цитологический диагноз из нескольких представленных. Задачи нужно было решить заранее, отослав в электронном виде результаты. Затем, на слайд-семинаре, можно было проверить себя и чему-то поучиться: каждый случай подробно разбирали. Пожалуй, это был самый интересный вид работы, в точности повторяющий обычный диагностический процесс, вот только клинические наблюдения были подобраны необычные.

Рабочий семинар (Workshop) - это работа с цитологическими препаратами в классах, прекрасно оборудованных современными микроскопами. Опция платная, но на рабочем семинаре «Формат описательного ответа для цитологии эндометрия, клиническое применение», видя наш

активный интерес к проблемам цитологии эндометрия (рис. 3), в качестве бонуса японские коллеги выдали участникам первого семинара из России по одному бесплатному повторному посещению. Этот семинар курировали: Kenji Yanoh, Yasuo Hirai, Yoshiaki Norimatsu, TomohikoYamaguchi, Azusa Hanada, Yoshinobu Maeda. В содержательных докладах были представлены разработки «Осака-группы» (OSG) описательных картин для различных физиологических и патологических состояний эндометрия. В основу этих картин были положены простые и понятные визуальные критерии и предложен четкий алгоритм цитологической диагностики. Например, в основу первого этапа для сортировки материала на нормальный (пролиферативный, секреторный и атрофиче-ский) и патологически измененный эндометрий были положены следующие критерии, характеризующие норму: наличие тубулярных структур правильной формы или широких пространных пластов эндометрия без перекрывания слоями друг друга, либо количество перекрывающих слоев должно быть не больше трех. В противоположность выше сказанному, измененный эндометрий характеризуется наличием железистых структур неправильной формы с выступами (протрузия-ми) по краям клеточных групп и перекрывающимися слоями эндометрия, которые насчитываются в количестве более трех. Число слоев в пластах эндометрия можно подсчитать в цитологическом препарате путем смены фокуса, медленно последовательно поворачивая микровинт. Конечно подсчет слоев эндометрия, одного из главных критериев, возможен только при стандартизованном приготовлении цитологических препаратов методом жидкостной цитологии (ЖЦ), который, как принято считать, готовит «монослойные» цитологические препараты. Практика показывает, что препараты ЖЦ лишь условно можно назвать монослойными, скорее это тонкослойные препараты. Однако только использование метода ЖЦ позволяет проводить оценку таких тонких критериев, как количество слоев в железистых пластах. Вся работа «Осака-группы» (OSG), все представленные на данном рабочем семинаре стекла и микрофотографии осуществлялись на системе BD SurePath TM. Для дальнейшей дифференциальной диагностики в группе патологических процессов эндометрия использовали следующие критерии: характер расположения эндометриальных стро-мальных элементов по отношению к железистым пластам эндометрия, наличие и характер сосудов, атипию ядер и многие другие. Материал этого се-

минара представляет большой интерес для цитологов.

Содержательными и полезными также были рабочие семинары «Использование предложенного алгоритма упрощает цитологическую диагностику материала из поджелудочной железы» (рис. 4) под руководством Nirag C. Jhala и Darshana Jhala (США), «ТАБ молочной железы с акцентом на папиллярные изменения», который проводила Torill Sauer (Норвегия) и «Цервикальная цитология - сложности диагностики плоскоклеточных и железистых поражений», курировали: Ritu Nayar, David C. Wilbur и Donna K. Russell (США).

Видеомикроскопический туториал - это обучение с использованием видеомикроскопии. Опция также была платной. На туториале «Тонкоигольная аспирационная биопсия лимфатических узлов: диагностика лимфом, роль стержневой биопсии и вспомогательных тестов» присутствовали цитопатологи из разных стран. Проводил туториал Andrew S.Field (Австралия). Вначале были представлены микрофотографии различных вариантов нормального лимфатического узла (ЛУ), затем - ЛУ при реактивных состояниях и лимфо-ме. Были даны алгоритмы диагностики при разных видах цитограмм, после чего представлены клинические случаи, совместно проходил разбор материала, постановка диагноза и оценка возможностей использования дополнительных диагностических тестов.

Доктор A.S. Field, для предотвращения загрязнения материала большим количеством крови, рекомендует использовать только режущее действие иглы, тонкоигольную биопсию (ТБ) без использования аспирации. Если материал адекватный, необходимо сделать предварительное цитологическое заключение, определиться с набором дополнительных диагностических тестов и, в отдельных случаях, произвести отбор пациентов для немедленной стержневой биопсии или для повторной ТБ с последующим приготовлением клеточных блоков для дополнительных исследований, таких как: культуральные, иммуногистохимические; цитогенетические. ТБ позволяет выбрать узлы для биопсии и проточной цитометрии когда это требуется, например при лимфоме. Точность диагностики лимфомы повышается до 82-93% при использовании совместно стержневой биопсии и ТБ, и практически аналогична точности при использовании проточной цитометрии. По мнению A.S. Field жидкостная цитология не подходит для приготовления препаратов из ЛУ Окрашивание

мазков из ЛУ лучше производить по Гимзе или Паппаниколау.

Нам очень понравилась форма подачи материала, когда в сжатые временные рамки (продолжительность обучения 1,5 часа) удалось полностью осветить проблемы, включая обзор современных методов диагностики.

Встреча с экспертом - Philippe Vielh из Люксембурга проводил встречу «Тиреоидная цито-патология: преимущества, ограничения и подводные камни» в 7 часов утра в виде беседы, без микроскопов и видеотехники, в академической непринуждённой обстановке (рис. 5). Для объяснения материала использовались доска и маркер. Всем собравшимся был предложен завтрак и кофе. Присутствовало несколько цитопатологов и цитотехнологов. Обсуждали способы получения материала из щитовидной железы, так как в Люксембурге и некоторых других странах пункцию щитовидной железы проводят цитопатологи. Было определено, что лучше использовать иглы 25 G диаметром 0,5-1 мм. Рекомендовано вначале использовать красители Дифф-Квик или Гимза на 1-2 мин, чтобы определить клеточность препарата. Затем материал окрашивают гематоксилин -эозином и по Паппаниколау.

Заслуживает внимания тот факт, что во всём мире усилия врачей направлены на то, чтобы диагноз человеку поставить как можно раньше, лучше в день обращения с назначением ему соответствующего лечения. При этом используют комплексный подход. Эту тактику хотелось бы взять на вооружение и нам.

Сателлитные симпозиумы были организованы цитологическими обществами разных стран. Таких заседаний было 16. Глобальный азиатский форум с докладами из Монголии, Тайбэя, Индонезии, Филиппин, Сингапура -был посвящен проблемам диагностики рака шейки матки, эндометрия, легких, печени. Тайское общество цитологов с приглашенными докладами из Австралии, Японии, Гонконга обсуждало проблемы скрининга рака шейки матки у вакцинированных и невакцинированных пациенток. На Корейском обществе цитопа-тологов был представлен доклад из Японии о новом прогностическом маркере аберрантного ДНК метилирования (AbMet) для DLX4 и SIM1 генов при выявлении слабой дисплазии, вызванной вирусом папилломы человека (ВПЧ). Австралийское цитологическое общество обсуждало успехи 20 летней истории правитель-

ственной программы скрининга в Австралии. Эта программа, ранее включающая первичный Пап-тест в качестве скрининга, в настоящее время изменена с целью предложить в качестве первичного скрининга ВПЧ тест, который с 2017 года будет проводиться с 25 летнего возраста с периодичностью в 5 лет, до достижения возраста 70-74 лет. Правительственная программа также предусматривает вакцинацию против ВПЧ 16-18 типов. Сингапурское общество цитологов, с ярким названием «Горы и ямы-ловушки в цитопатологии - мистерии и мифы» также привлекло множество цитологов. Обсуждали такие важные темы, как: контаминация диагностического материала «путевым» эпителием, использование терминологии «атипические клетки», необходимость расширять возможности цитологии путем внедрения современных методов. На Тайваньском обществе клинической цитологии обсуждали различные темы от цервикального скрининга до эндоскопической цитологии опухолей поджелудочной железы, присутствовали докладчики из США. Хочется отметить работу цитологов из госпиталя Национального Тайваньского Университета. Авторы предложили дополнить традиционную гематологическую окраску ультрабыстрой окраской Папаниколау (Ultrafast Papanicolau - UFP) при диагностике опухолей поджелудочной железы. Особенно показательными при таком окрашивании были ядра нейроэндокринных опухолевых клеток. Индийская академия цитологии посвятила свое заседание вопросам цитологической диагностики опухолей головы и шеи. Эта секция была самой объемной, состояла из 15 докладов, все докладчики из Индии. Большое внимание было уделено дифференциальной диагностике процессов этой локализации (опухолей щитовидной и слюной железы, лим-фом, круглоклеточных опухолей мягких тканей, придатков кожи, синоназальных, опухолей век, орбиты глаза, метастазов с неясной первичной локализацией). Подчеркивалась важность анализа цитологом данных вспомогательных методов исследования, таких, как МРТ, КТ, ПЭТ и исследования опухолевых маркеров. Американское общество цитопатологов на симпозиуме по вопросам цервикальной цитологии, номенклатуры классификации Бетесда 2014 года, цитологического веб-сайта и атласа цитопато-логии, представило только один доклад, но это была объемная двухчасовая презентация. Ученый Гарвардской Медицинской школы - David

C. Wilbur представил совместный доклад с Ritu Nayar. Эти авторы известны нам по книге «The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology». Американское общество цитопатологов провело также отдельный симпозиум о комплексном исследовании узловых образований щитовидной железы, важности оценки клинических, радиологических и цитологических данных, персональной трактовке данных молекулярных исследований. На Китайской цитологической ассоциации доклады были самые разнообразные, все китайских авторов. Интересный доклад был представлен из Института Рака/Госпиталя Китайской Академии Наук автором Wen Chen. В докладе были освещены результаты работы Национальной программы скрининга рака шейки матки в Китае, которая прогрессивно развивается. Если на первом этапе, в 2009-2012 гг., скринингом были охвачены 10 млн. сельских жительниц, то на втором этапе, 2013-2016г. - уже 30 млн. Для такой большой страны, как Китай, дорогостоящие методы скрининга неприемлемы, однако признано, что ДНК тесты на ВПЧ более чувствительны, чем цитология. Поэтому Институт Рака и Госпиталь Китайской Академии Наук развили новые технологии: careHPV и E6 онкопротеин тесты. Подтверждено, что careHPV - это простая, быстрая, дешевая и портативная технология, которая прошла квалификационные тесты ВОЗ и адаптирована в таких слаборазвитых странах, как Никарагуа, Уганда, Индия и Лаос. Таким образом, Китай также находится в состоянии перехода от Пап-теста к более чувствительным технологиям. Европейская Федерация Цитологических Наук (EFCS) и Турецкое общество цитопатологов провели совместный сателлитный симпозиум, на котором выступали докладчики из Турции, Казахстана, Азербайджана. Доклады были в основном исторические и отражали становление и развитие цитопатологии в этих странах. Турецкое общество цитопатологов собиралось также и на отдельном симпозиуме по цитологической диагностике узловых поражений щитовидной железы. Среди докладов был один из США по цитологическим вариантам папиллярного рака. Интересный доклад из Турции был посвящен метастазам в щитовидной железе. Хотя эти метастазы встречаются редко: от 0,19% и выше у пациентов с распространенными экстратирео-идными злокачественными опухолями, но представляют большую проблему для диагностики. Метастазы из отдаленных органов чаще всего

бывают мультифокальными и различного размера. Метастазы из близлежащих органов имеют тенденцию к вовлечению одной доли и выглядят как большая опухолевая масса. Редко метастазы могут маскироваться под рак щитовидной железы и сочетаться с симптомами гипертиреои-дизма. Наиболее частыми источниками метас-тазирования являются: почки, легкие, молочная железа, злокачественная меланома (особенно из ободочной кишки), злокачественные опухоли женских половых органов, уротелий, слюнные железы, нейроэндокринные опухоли, злокачественная лимфома, мягкотканная саркома. При прямом распространении из соседних органов -пищевода, глотки, гортани чаще развивается плоскоклеточный рак. Информация о наличии экстра-тиреоидных злокачественных опухолей и иммуногистохимические методы исследования помогают цитологу в дифференциальной диагностике. Немецкое цитологическое общество было посвящено в основном эндоскопической цитологии под контролем УЗИ (EUS-FNB, endosonography-guided fine-needle biopsy) в диагностике опухолей легкого и поджелудочной железы. Большое внимание в докладах уделялось необходимости цитологического исследования «на месте» - ROSE (Rapid on-site evaluation). По литературным данным, более 20% цитологического материала является недиагностическим. При условии выполнения цитологического исследования «на месте», этого можно избежать, получая материал повторно.

Ассоциация Клинических Цитологов России представила шесть презентаций на сателлитном симпозиуме (рис 6 - коллаж) и четыре стендовых доклада на постерной секции.

Презентации цитологов России на сателлит-ном симпозиуме Конгресса в Йокогаме:

1. Nadezda Volchenko, Elena Slavnova "The Possibilities of Cytological Diagnistics in Breast Carcinoma" (Moscow Research Institute of Oncology by Herzen P.A.)

2. Nina Tamazyan, S. Vorobyev, I.Kostyuchek, D.Protasov, A.Petrunkin "Effectiveness of the cell block technique in the diagnosis of metastatic effusions" (National Center of Clinical Morphology, St.Peterburg)

3. Nadezhda Melnikova, Natalia Yarovaya "The increasing role of immunocytochemistry techniques in determining the histogenesis of primary tumours and metastases in aspirates and effusions in liquid-

based cytology specimens" (Russian Scientific Center of Roentgenoradiology, Moscow)

4. Irina P. Shabalova "Serous effusions - past, present, fUture" (Russian Medical Academy of Postgraduate Education, Moscow )

5. Zhanna Sapozhkova "Vision Cyto® Sperm Sediment: Diagnostoc Possibilities of Cytology of Urogenital Infections in Sperm Sediment" (Russian Medical Academy of Postgraduate Education, Moscow)

6. I.V. Nazarova, Y. N. Tychonov, V.V. Zdor "Optimization of the cytological diagnostics by the liquid-based cytology, cell block technique, and immunocytochemistry in the thyroid cytopathology" (Primorye Regional Pathology Bureau and Pacific State Medical University (PSMU), Vladivostok)

Стендовые доклады цитологов России на по-стерной секции Конгресса в Йокогаме:

1. Nadezda Volchenko, Olesya Borisova "Immunocytochemical Testing of Exudate from Serous Cavity with BER-EP-4 Epithelial Marker" (Moscow Research Institute of Oncology by Herzen P.A.)

2. Nadezhda Tevrykova, Vladimir Bogatyrev, Nicolai Cheban "Opportunities of Cytological Diagnosis and Prognosis of Prostate Cancer" (Skandinavsky Center Zdorovia and Blokhin Russian Cancer Research Center of RAMS, Moscow)

3. Natalia G. Plekhova, Yana V. Strogaya "Morphometric Study to Establish Criteria of Diagnosis of Chlamydial Infection in the Pap-smear Samples" (Pacific State Medical University (PSMU), Vladivostok)

4. Natalia G. Plekhova, Yana V. Strogaya "The Diagnostic Relevance of Neutrophils in Reactive Cellular Changes Associated with Cervical Inflammation" (Pacific State Medical University (PSMU), Vladivostok)

Презентации были содержательными, интересными и доказательными, соответствовали за-

явленной теме симпозиума «Классические и современные методики в клинической цитологии». Доклады вызвали интерес у слушателей, были заданы вопросы, в том числе цитологами из Германии и Китая, и получены детальные ответы. После докладов состоялась небольшая дискуссия на тему: как же правильно называть исследования маркеров в цитоблоках - иммуноцитохимией или иммуногистохимией? Материал для цитоблока получают теми же методами, что и для цитологии (ТАБ, браш-биопсия и пр.), помещают в среду для жидкостной цитологии, а после приготовления цитоблока обрабатывают как гистологический материал. Были высказаны различные мнения, но в итоге выступил профессор Volker Schneider из Германии и убедительно доказал, что правильно называть этот вид исследования иммуноцитохи-мией, учитывая истоки - способ взятия материала и конечный результат - цитоблок, который хотя и значительно приближает нас к гистологической картине, но не всегда ею является. Но главное, что мы - цитологи - и поэтому должны бороться за развитие и обогащение цитологического метода, даже за терминологию - за иммуноцитохимию!

Как всегда была сделана фотография «на память» (рис.7). В дружелюбной обстановке прошла неформальная часть Конгресса - прекрасный прощальный ужин с традиционной японской кухней, лазерным шоу (рис. 8) и общением, обсуждением волнующих всех вопросов развития любимой специальности в разных странах (рис. 9-10).

В заключение хочется сказать, что 19-ый Международный Цитологический Конгресс в Японии - это глобальный конгресс, с первостепенно необходимыми секциями и темами. Остается только сожалеть о том, что не удалось использовать все представленные возможности, увидеть и услышать все, так глубоко нас интересующее, так как разные значимые секции проходили одновременно.

THE 19th INTERNATIONAL CONGRESS OF CYTOLOGY (2016, may 28-junei, Yokohama, japan)

I. P. Shabalova I.V. Nazarova2, N.E. Lomonosova3

1. Russian Medical Academy of Postgraduate Education, Moscow; 2. Primorye Regional Pathology Bureau, Vladivostok; 3. Diagnostic Centre "Laboratory diagnostic - Asklepyi", Vladivostok

Авторы:

И.П. Шабалова - д.м.н., профессор кафедры клинической лабораторной диагностики РМАПО Минздрава, г. Москва. И.В. Назарова - к.м.н., врач-цитолог ГБУЗ «Приморское краевое патологоанатомическое бюро», г. Владивосток. Н.Э. Ломоносова - к.м.н., врач-цитолог ООО ДЦ «Лабораторная диагностика - Асклепий», г. Владивосток.

Центральный Исполнительный Совет АКЦ и редакция журнала поздравляют нашу коллегу

ЖАНАР БОЛАТОВНУ ЕЛЕУБАЕВУ,

главного цитолога МЗ Казахстана, с получением диплома Международной Академии Цитологии (IAC) после успешной сдачи экзамена во время международного цитологического конгресса в Иокагаме в 2016 г. Претенденты из Австралии, Швеции, Ирана, Японии и Казахстана сдавали 3-этапный экзамен в течение 5 часов.

Принимали экзамен известные специалисты: председатель комиссии Президент IAC Филлип Вельх, секретарь IAC Фернандо Шмитт, Волкер Шнайдер, Роберт Осамура, профессора Саид Али и Ацухико Сакамото. Жанар Болатовна является членом и Российской Ассоциации цитологов, она первая сдавшая экзамен на столь почетное звание. Желаем также успешно подготовить и провести в 2017 г. в Республике Казахстан IAC Tutorial, одним из организаторов которого является Жанар Болатовна Елеубаева.

1 Ноше

- Executive Council 2016 - 2019 Active Members UPrir,t:erf™nd(v

- Membership Fee/Апши! dues

- Latest Membership Admissions The following list shows the active membership of the IAC according to

- Committees 2016 - 2019 country of residence.

- Examination ScheduJe Last Update: August 2017.

- Artwp TLtoruhpn

Kazakhstan Republic tog

Kazakhstan Republic Azat Stilbanova MEAC

Kazakhstan Republic Zhanar Bolatovna Yeleubayeva FIAC

Илл. к статье Юрасова И.В., Соколова Н.В., Нажимов В.П. ЦИТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ АСПИРАТОВ ЭНДОМЕТРИЯ ПРИ АНОМАЛЬНЫХ МАТОЧНЫХ КРОВОТЕЧЕНИЯХ ПОСЛЕ ГОРМОНАЛЬНОГО ЛЕЧЕНИЯ.

Рис. 1 Гистологический препарат. Окраска гематоксилин - эозин. Об. 10х.

Рис. 4 Аспират эндометрия.

Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. 0б.10х. Полиморфизм клеток покровного эпителия.

Рис. 7 ЛНГ-ВМС «Мирена»

Гистологический препарат. Окраска гематоксилин - эозин. Об. 10х. Многоядерные клетки инородных тел (1), децидуоподобная реакция стромы (2).

Рис. 2 Атрофия эндометрия.

Гистологический препарат. Окраска гематоксилин - эозин. Об.10х.

Рис. 5 Аспират эндометрия.

Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.20х. Скопление децидуоподобных клеток

Рис. 8 Мазок отпечаток с ЛНГ-ВМС «Мирена». Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.20х. Реактивно измененные клетки покровного эпителия, децидуоподобные клетки, многоядерные гистиоидные элементы.

Рис. 3 Аспират эндометрия.

Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.10х Децидуоподобная реакция стромы.

Рис. 6 Аспират эндометрия.

Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.40х. Скопление децидуоподобных клеток

Рис. 9 Мазок отпечаток с ЛНГ-ВМС «Мирена». Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.20х. Децидуоподобные клетки, многоядерные гистиоидные элементы.

Рис. 10 Маточная беременность.

Гистологический препарат. Окраска гематоксилин - эозин. Об.20х. Клетки цитотрофобласта и синцитиотрофобласта

Рис. 11 Маточная беременность. Аспират эндометрия. Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.40х. Клетки цитотрофобласта

Рис. 12 Маточная беременность. Аспират эндометрия. Цитологический препарат. Окраска по Лейшману. Об.40х. Клетки синцитиотрофобласта.

Илл. к статье О.В.Агафонова, С.Н.Блинничев, О.С.Золотовицкая, О.Ю. Козлова, Л.В.Калиник, Н.А.Томашевская ОСОБЕННОСТИ ПАТОЛОГИИ ШЕЙКИ МАТКИ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОКПО МАТЕРИАЛАМ САМАРСКОГО ОБЛАСТНОГО ЦЕНТРА ПО ПРОФИЛАКТИКЕ И БОРЬБЕ СО СПИД И ИНФЕКЦИОННЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

Самарский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями -СПИД центр

Диаграмма 1

Патология шейки матки в четырёх группах ВИЧ-инфицированных пациенток по стадиям основного заболевания

Диаграмма 2

Распределение нарушений биоценоза влагалища

Диаграмма 3

Распределение фоновых и предраковых заболеваний шейки матки

Илл. к статье И.П. Шабалова, И.В. Назарова, Н.Э. Ломоносова XIX МЕЖДУНАРОДНЫЙ ЦИТОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

Рис. 1 Архитектурный комплекс РасШсоУокоЬаша, место проведения Конгресса

Рис. 2 Церемония награждения профессора ^^УиДЮт (Ю.Корея), активного члена Международной академии цитологии, за обучение цитологов

Рис. 3 ЦитологиИ.В.Назарова (г.Владивосток) и Г.В.Лешкина (г. Москва) и доктор Y.Maeda (Япония) на рабочем семинаре по цитологии эндометрия

Рис. 4 Паг8Ьапа}Ьа1а (США) проводит рабочий семинар цитологической диагностики заболеваний поджелудочной железы

Рис. 5 Цитолог Н.Э. Ломоносова (г. Владивосток) и эксперт РЫ11рреУ1еШ (г. Люксембург) на заседании по цитопатологии щитовидной железы.

лг-

6И

Л

Рис. 6 Лазерное шоу

Рис. 7 Коллаж -Доклады российских цитологов на 19 Международном Цитологическом Конгрессе в Йокогаме