Д1АГНОСТИКА, Л1КУВАННЯ ТА ПРОФ1ЛАКТИКА
ХВОРОБ ТВАРИН
DIAGNOSTICS, TREATMENT AND PROPHYLACTICS
OF ANIMAL DISEASES
УДК 612.128.618.019
Брошков M. M., к.вет.н. © E-mail: dolinavet@gmail.com
Одесъкий державный аграрный университет, м. Одеса
ПОКАЗНИКИ КЛ1ТИННОГО 1МУН1ТЕТУ У СОБАК Р13НИХ ПОР1Д
У cmammi представленi показныкы абсолютноï кыькост! лейкоцыт1в, л1мфоцыт1в та ïxnix субпопуляцт, iмунорегуляторного тдексу та тдексу навантаження а також фагоцытарна активность нейтрофшв та гхня здатмстъ до утворення розеток у собак pi3HUX nopid. Встановлено, що у собак декоративных nopid (йоркшырсъкый тер'ер та пекшее) ныжч1 показныкы абсолютноï кыькост! лейкоцыт1в та л1мфоцыт1в. Абсолютна млъюстъ лейкоцыт1в у представниюв досл1дженых nopid перебувае в межах выдовог нормы, але найбыъшым цей показнык буе у середньоаз1атськог в1вчаркы (CAB) 10,067±4,79 х 109 (р<0,01) г нгмецъкого боксера 9,033±1,95х109. Анализ абсолютноï к\лъкост\ субпопуляц^й лiмфoцыmiв у собак показав, що найбыъшою юлъюстъ субпопуляцИ' Т- та В-л1мфоцыт1в встановлена у CAO, проте у собак цгег породы нызъка абсолютна кшъюстъ НК-Kùepie. Оц1нка показныка тдексу навантаження (IH) показав, що у пеюнеса вт е самым нызъкым з досл1дных груп а у CAB встановлено найбыъшу велычыну цъого показныка. Результаты встановлення фагоцытарног актывност1 нейтрофшв та гхня здатмстъ до утворення розеток у собак р1зных nopid показалы, що быъш выражена здатмстъ до фагоцытозу нейтрофшв Kpoei у службовых nopid (CAB, ммецъка eienaprn та доберман), проте у декоративных nopid нызъка фагоцытарна активность нейтрофшв супроводжуваласъ i низъкою здатмстю цых клгтин до розеткоутворення.
Ключовг слова: лейкоциты, лiмфoцыmы, нейтрофты, тдекс навантаження, фагоцитоз нейтрофшв, Т-хелпери, Т-супресори, iмyнopeгyляmopнuй тдекс, В-лiмфoцumu, HK-mimuHU.
УДК 612.128.618.019
Брошков M. М.
Одесский государственный аграрныйуниверситет
ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА У СОБАК РАЗНЫХ ПОРОД
В статье представлены показатели абсолютного количества лейкоцитов, лимфоцитов и их субпопуляций, иммунорегуляторного индекса, индекса нагрузки а также фагоцитарной активности нейтрофилов и их способности к образованию розеток у собак разных пород. Установлено, что у собак декоративных пород (йоркширский терьер и пекинес) более низкие показатели абсолютного количества лейкоцитов и лимфоцитов. Абсолютное количество лейкоцитов у исследуемых
© Брошков M. М., 2015
3
пород находится в пределах видовой нормы, но более высоким этот показатель был у среднеазиатской овчарки10,067±4,79* 109 (р<0,01) и немецкого боксера 9,033±1,95*109. Анализ абсолютного количества лимфоцитов и их субпопуляций у собак показав, что наибольшее количество Т- и В-лимфоцитов отмеченау САО, но у собак этой породы низкое количество НК-киллеров. Оценка показателя индекса нагрузки (ИН) показал, что у пекинеса он является самым низким из опытных групп, а у САО установлено наибольшая величина этого показателя. Результаты установления фагоцитарной активности нейтрофилов и их способности к образованию розеток у собак разных пород показал, что более выраженная способность к фагоцитозу у нейтрофилов крови служебных собак (САО, немецкая овчарка и доберман). В то же время у собак декоративных пород отмечена низкая способность нейтрофилов к фагоцитозу также как и к образованиюрозеток.
Ключевые слова: лейкоциты, лимфоциты, иммунорегулятоный индекс, индекс нагрузки, фагоцитоз нейтрофилов, Т-хелперы, Т-супресоры, НК-клетки, нейтрофилы, В-лимфоциты.
UDC 612.128.618.019
Broshkov M.
Odessa State Agrarian University, Odessa
CELLULAR IMMUNITY INDICATORS OF THE DIFFERENT BREEDS OF
DOGS
The indicators of the absolute number of leukocytes, lymphocytes and their subpopulations, immunoregulatory index and load index and also phagocytic activity of neutrophils and their ability to form rosettes of the different breeds of dogs are shown in the article. It s found that the decorative breeds of dogs (Yorkshire terrier and Pekingese) have lower rates of absolute number of leukocytes and lymphocytes. All members of the investigated breeds have the absolute number of leukocytes, that satisfy with species rates, but the biggest one have Central Asian Shepherd Dog (CASD) - 10,067± 4,79*109 and German boxer - 9,033±1,95*109. Analysis of the absolute number of subpopulations of lymphocytes of dogs shows that the greatest number of subpopulations of T and B lymphocytes is found in CASD, but dogs of this breed have low absolute number of NK-cells. Assessment of load index (LI) has shown that the Pekingese have the lowest load index and the CASD have the highest value of this indicator. The results of the setting phagocytic activity of neutrophils and their ability to form rosettes in different breeds of dogs have shown that the official breeds (Central Asian Shepherd Dog, German Shepherd and Doberman) have more expressed capacity for phagocytosis , but the low phagocytic activity of neutrophils of decorative breeds accompanied by the low ability of these cells to rosette.
Key words: white blood cells, lymphocytes, neutrophils, load index, phagocytosis of neutrophils, T-helper and T-suppressor, immunoregulatory index, B-lymphocytes, NK-cells.
Головним компонентом ¿мунно! системи е л1мфоцити [1, 2]. Патогенш агенти так само, як i будь-яю генетично чужорщш тша, надшеш вщповщними антигенами, взаемоддать з кттинами ¿мунно! системи оргашзму, шдукуючи при цьому pi3Hi форми ¿мунно! вщповда, яю визначаються участю вщповщних субпопуляцш ¿мунокомпетентних клггин Т- та В-л1мфоцит1в [3, 4]. Вроджеш та набуп дефекти ¿мунно! системи приводять до розвитку ¿мунопатолопчних сташв i супроводжуеться формуванням шдвищено! чутливосп до шфекцшних агента. Окр1м впливу зовшшшх фактор1в на ¿муноф1зюлоопчний стан оргашзму собак, важливим е також i внутршш, генетично детермшоваш фактори, до яких, в тому
4
числ1 вщносять i породну належнють тварин. Породш особливосп ¿муноф1зюлопсного стану собак важлив1 при розгляданш кров1 як одше! з штер'ерних ознак тварин з метою встановлення бшьш стшких порщ i взаемод1ю на ¿мунну систему у слабших порщ [5, 6]. Дослщження проведен! Лопатиною М. Ю. [6], встановлили певш особливосп ¿муноф1зюлопчного стану собак р1зних порщ, але враховуючи величезну юльюсть порщ цього виду тварин, охопити одночасно Bcix представниюв кожно! породи достатньо складно.
Метою наших дослщжень було встановити наявнють вщмшностей у показниках кл1тинного ¿муштету собак р1зних порщ.
Матер1али та методи дослщжень. В дослщ1 брали клшчно здорових собак (n=184) ш1стьох р1зних порщ. Для дослщження використовували перифершну стабшзовану кров, яку вщбирали вранщ натщесерце. В пробах кров1 визначали показники кттинного ¿муштету (абсолютну юльюсть лейкоцита, абсолютну та вщносну л1мфоцита та ixHix субпопуляцш, фагоцитарну актившсть нейтрофшв, юльюсть розеткоутворюючих нейтрофш та шдекс навантаження). Кшьюсть лейкоцита визначали в камер1 Горяева, загальну кшьюсть л1мфоцита визначали в пофарбованому за Романовським-Лмзою мазку кровь У кров1 визначали абсолютний та вщносний вмют л1мфоцита та ix субпопуляцп в реакцп розеткоутворення з еритроцитами барана (Е тф. р.-РУЛ, Етф.ч-РУЛ), а штенсившсть фагоцитозу нейтрофшв за здатшстю фагоцитувати пекарсью др1ждж1 в перерахунку на 50 клггин [7]. За розеткоутворюючу вважали кл1тину, яка приеднала три i бшьше еритроцити. За фагоцитуючий вважався нейтрофш, який поглинув одну i бшьше др1жджову кл1тину. 1ндекс навантаження - це сшввщношення розеткоутворюючих л1мфоцита до розеткоутворюючих нейтрофшв, що вщображае напружешсть ¿мунно! системи.
Результати дослщжень. Абсолютна юльюсть лейкоцита а також абсолютна та вщносна юльюсть л1мфоцита та i'x субпопуляцш представлен! в таблиц!. Абсолютна кшьюсть лейкоцита у представниюв дослщжених порщ перебувае в межах видово1 норми, але найбшьшим цей показник був у середньоаз1атсько! в1вчарки (CAB) 10,067±4,79*109 i шмецького боксера 9,033±1,95*109 найменшим цей показник вщм1чений у йоркширського тер'ера (6,66±3,365* 109) та пеюнеса (6,6±1,652 х109).
Останн1 дв1 породи е представниками декоративних пор ¡д. Бшьшють часу таю тварини проводять в обмеженому npocTopi (квартири) i антигенне навантаження на них е меншим. Можливо, з цим i пов'язана нижча юльюсть лейкоцита в кров1 цих порщ собак.
При анал1з1 абсолютно! юлькосп л1мфоцита встановлено, що юльюсть цих кттин у собак декоративних порщ е найнижчою, так у йоркширського тер'ера -2,82±0,635*10 пеюнесу 1,777±0,817х109. Також низька юльюсть л1мфоцита спостер1галася у собак пород1 доберман 2,1±0,852*109, найбшьш високим цей показник встановлений у шмецько! в1вчарки 6,057±7,079* 109 та CAB 5,033±4,738*109 . Анал1з абсолютно! юлькосп субпопуляцш л1мфоцита у собак показав, що найбшьшою юльюсть субпопуляцп Т- та В-л1мфоцита встановлена у CAB, проте у собак ще! породи низька абсолютна юльюсть НК-юлер1в.
5
Таблиця
Абсолютна кшьккть лейкоцитов, л1мфощтв та Тхшх субпопуляцш __у собак р1зних порщ (M±m)_
Показники Породи собак
Шмецька в1вчарка (n= 32) Йоркшир ський тер'ер (n= 29) Пекшее (n= 22) Середньо-аз1атська в1вчарка (n= 31) Шмецький боксер (n= 20) Доберман (n= 30)
Лейкоцити, 7,33± 6,66± 6,6± 10,067± 9,033± 7,2±
х109 2,479 3,365 1,652 4,796* 1,95 1,706
Л1мфоцити, х 109 6,057± 2,82± 1,777± 4,06± 5,033± 2,1±
7,079 0,635 0,817 2,809* 4,738 0,852
Т-л1мфоцити, 1149± 1609± 936± 2948± 1193± 1487±
кл / мкл 442,0 815,0 406,0 2053,0 214,0 771,0
Т-хелпери, 816± 1193± 1007± 2322± 888± 1174±
кл / мкл 331,0 572,0 296,0 841,0 83,0 625,0
Т-супресори, кл / мкл 333± 117,0 416± 245,0 235± 112,0 626± 221,0 305± 132,0 313± 148,0
В-л1мфоцитити 259± 384± 352± 650± 446± 271±
кл / мкл 186,0 145,0 52,0 475,0 214,0 45,0
Натуральш 44± 155± 451± 181± 467± 395±
л1мфоцити, кл / мкл 335,0 116,0 333,0 97,0 ** 166,0 396,0
У цш таблиц! статистично в1ропдш р1знищ м1ж собаками породи CAO та йоркширський тер'ер : * - р<0,01; ** - р<0,001
Вщомо, що основна функщя ще! субпопуляцп л1мфоципв - це против1русний та протипухлинний захист. Найнижча кшьюсть субпопуляцп НК-л1мфоципв встановлена у шмецько! в1вчарки, йоркширського тер'ера та САВ, це може вказувати на те, що щ породи найбшьш сприятлив1 до розвитку пухлинних процес1в, особливо теля 6-го року життя, коли починаеться шволющя тимусу.
4
3,5
3
2,5
2
1,5
1
0,5 0
Рис.1. Показник ¡мунорегуляторного шдексу (Tx/Ts) , у р1зних порщ собак
Показник ¿мунорегуляторного шдексу вщображае сшввщношеиня Т-хелпер1в до Т-супресор1в (ТЬ/Т8). Вщомо, що шдвищений 1Р1 свщчить про дисбаланс м1ж ¿мунорегуляторними субпопулящями л1мфоципв (перевагою Т-хелперно! активносп над Т-супресорною) \ може бути одним з фактор1в ризику ¿муиопатолопчних реакцш. Анал1з цього показника в нашому дослщ1 (Рис. 1) показав, що найменшим вш е у шмецько! в1вчарки - це свщчить про переважання
6
супресорно! активносп Т-л1мфоцита, а найбшьший у добермашв - вказуе на переважання Т-хелперно! активносп л1мфоцита.
Природна ел1мшащя умовно-патогених збудниюв значною м1рою залежить вщ фагоцитарно! активносп нейтрофшв. Останш, в свою чергу, визначаються станом р1зномаштних рецептор1в, лейкоцита яю беруть участь не тшьки в безпосередньому зв'язуванш збудника, але й у взаемодп м1ж р1зномаштними типами лейкоцита, що забезпечуе взаемну активацда при шфекцшному процесс
Результата оцшки здатносп нейтрофшв до фагоцитозу (рис. 2) у собак залежно вщ породи показуе, що у службових порщ фагоцитарна актившсть в 1,2 раза вища, шж у декоративних порщ.
3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 0
*5
¿Г
л*
л"
ж
^оЧ
Рис. 2. Фагоцитоз иейтрофьшв (кл/мкл ) у р1зиих порщ собак
1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2
Рис. 3. 1ндекс навантаження ( Е-РОЛ / Е-РОН) у р1зиих порщ собак
Оцшка показника шдексу навантаження (1Н) (рис. 3) показала, що у пекшеса вш найнижчий з дослщних груп, а у САВ встановлено найбшьшу величину цього показника. 1Н мае вщ'емну корелящю з величиною зв'язування компонента ¿мунно! системи \ змшюеться залежно вщ штенсивносп ¿1 роботи, тобто по суп вщображае напружешсть функцюнування ¿мунно! системи. 1Н е повшстю неспециф1чним стосовно конкретних дисфункцш ¿мунно! системи, але вш специф1чно вщображае напружешсть, штенсившсть роботи ¿мунно! системи.
7
60 50 40 30 20 10 0
Рис. 4. Вщносна кшьккть розеткоутворюючих нейтрофьшв (%)
у р1зних порщ собак
Попередш наш1 дослщження кшьюсного показника розеткоутворюючих нейтрофшв показали, що у бшьшосп собак вш е в межах 50-70 %, вщ загально! кшькосп нейтрофшв. Вщомо, що нейтрофши грають важливу роль при шфекцшних захворюваннях. Функщя нейтрофшв багатограниа, не обмежуеться лише фагоцитозом. Так, вони здатш до утворення \ видшення л1зосомальних ензим1в, завдяки цьому проявляеться бактерицидна актившсть. Оц1ика в1дсотку розетко утворюючих иейтроф1л1в у собак р1зних порщ (рис. 4) показала зниження цього показника у собак декоративних порщ (йорк, пек1нес)
Висновки. 1. Встановлено, що у декоративних пор1д собак (йоркширський тер'ер та пек1нес) показники кл1тииного ¿муи1тету, а саме: абсолютна кшьюсть лейкоцит1в, л1мфоцит1в та фагоцитарна актившсть нейтрофшв нижч1, и1ж у представниюв службових пор1д.
2. У собак породи шмецька та середньоаз1атська в1вчарки а також йоркширський тер'ер встановлено низьку абсолютиу к1льк1сть субпопуляцп НК-к1лер1в, що знижуе 1хн1й против1русний та протипухлииний захист.
Перспективи подальших досл1джень. Вивчения показник1в ¿муноф1з1олог1чиого стану у собак залежно в1д сезошв року та з врахуванням вшу та породи.
Лггература
1. Булатова С. В. Сезонная и возрастная динамика функции щитовидной железы у животных и человека на Среднем Урале: дис.канд. биол.наук. / С. В. Булатова // Екатеринбург, 2001. - 134 с.
2. Иммунология / [Е. С. Воронин, А. М. Петров, М. М. Серых, Д. А. Дервишев]. - М.: Колос-Пресс, 2002. - 408с.
3. Долгушин И. И. Нейтрофилы и гомеостаз / И. И. Долгушин, О. В. Бухарин - Екатеринбург: УрОРАН, 2001. - 425 с.
4.Донник И. М. Иммунограмма животных в клинической практике. / И. М. Донник // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных . - 1997 . - № 2
5. Донник И. М. Комплексная оценка клинико-иммунологического статуса животных-необходимое звено в проведении диагностических и лечебных мероприятий / И. М. Донник // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных. - 1996. - 5-13 с.
8
6. Лопатина М. Ю. Показатели иммунной системы и эффективность иммунокоррекции у собак с хроническими заболеваниями кожи: автореф. на соиск. уч. ст. к.вет. наук / М. Ю. Лопатина. - Екатиренбург. - 2004.
7. Вл1зло В. В. Лабораторш методи дослщжень у бюлогп, твариннищш та ветеринарнш медицин!: довщник / В. В. Вл1зло, Р. С. Федорук, I. Б. Ратич та ш.; за редакщею В. В. Вл1зла. - Л.: СПОЛОМ, 2012. — 764 с.
Стаття надшшла доредакци 17.03.2015
УДК 619:616.99:619:616-08:636.2
Висоцький А. О., к. вет. н., доцент © Льегеський нацгональнийушеерситет ветеринарног медицины та б1отехнологт 1мет С. 3. Гжицъкого, Льв1в, Украгна Висоцька К. О., к. вет. н., Т1шин О. Л., к. вет. н.
Держаений науково-досл1дний контролъний /нститут еетеринарних препарат1в та кормоеих добавок, м. Льв1в, Украгна
ВПЛИВ ПРЕПАРАТУ «КЛОЗАВЕРМ-А» НА ДЕЯК1 ГЕМАТОЛОГ1ЧН1 ПОКАЗНИКИ КРОВ1У КОР1В 3 АСОЦ1АТИВНОЮ 1НВА31еЮ
У статт1 на основ/ гематолог1чних показнишв кров1 кор1в показаний вплив препарату «Клозаверм А» на функц1ональний стан важливих систем та оргатв оргамзму (кровотворног та ¡мунног). Доведено, що одноразова внутр1шньом'язова т'екщя препарату «Клозаверм А» коровам з зм1шаною тваз1ею в терапевтичтй доз/ не викликала в основному вгроггдних змт (пор!вняно з тваринами контрольног групи) в досл1джених гематолог1чних показниках кров1, проте тенденщйш зм1ни цих показниюв вказували на можливе напряжения макрофагалъног та виснаження мiкpoфaгaлънoí ланок тмуштету, анем1ю. Одночасно, на 21 добу теля застосування коровам препарату «Клозаверм-А» на тл1 загибел! гельм1нт1в в1дбулась нормал1зац1я в1дсотковогкыъкост1 еозинофтв кров1.
Ключовг слова: «Клозаверм-А», корови, зм1шаш /нвазп, гематолог1чш досл1дження кров1, морфолог1чт показники кров1
УДК 619:616.99:619:616-08:636.2
Высоцкий А. А.
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С. 3. Гжицкого, г. Львов, Украина Высоцкая К. А., Тишин А. Л.
Государственный научно-исследовательский контрольный институт ветеринарных препаратов и кормовых добавок, г. Львов, Украина
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА «КЛОЗАВЕРМ-А» НА НЕКОТОРЫЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ У КОРОВ С АССОЦИАТИВНОЙ ИНВАЗИЕЙ
В статье на основе гематологических показателей крови коров показано влияние препарата «КлозавермА» на функциональное состояние важных систем и органов организма (кроветворной и иммунной). Доказано, что однократная внутримышечная инъекция препарата «Клозаверм А» коровам со смешанной инвазией в терапевтической дозе не вызывало в основном вероятных изменений (по сравнению с животными контрольной группы) в исследованных гематологических
© Висоцький А. О., Висоцька К. О., Тшин О. Л., 2015
9