CC BY
29
УДК 636.09:995.122
Куляба О. В., асистент, Стибель В. В., д.вет.н., професор ©
Льегеський нацгональний утеерситет еетеринарногмедицины та б1отехнологт 1мен1 С.З. Гжицького
СТАН IMyHHOÏ СИСТЕМИ КОР1В ЗА АСОЦГАЦП М1КОБАКТЕР1ОЗ1В ТА
ФАСЦЮЛЬОЗУ
У статтг наведено результати дослгджень еплиеу фасцгольозног теази та мжобактерюзу на стан клтинног, гуморальног та неспецифгчног ланок iмунног системи оргатзму коpie. 1мунна система оргатзму теарин забезпечуерезистенттсть оргатзму проти бактеpiальних i eipусних тфекцш. Осноеними iмунологiчними тестами, що характеризують стан iмунноï системи коpie, е показники гуморального iмунiтету (бактерицидна актиетсть сироеатки кpоei, лiзоцимна актиетсть сироеатки кpоei та циpкулюючi iмуннi комплекси). Встаноелено, що у хеорих коpie на фасцюльоз i мжобактерюз знижуеться бактерицидна i лiзоцимна актиетсть сироеатки кpоei, тодi як pieень циркулюючих iмунних комплексе зростае майже на 31 %. Також естаноелено, що за розеитку фасцюльозу та мжобактерюзу у кpоei коpie знижуеться юльюсть Т- i В-лiмфоциmie. Поряд з цим естаноелено зниження фагоцитарноï акmиeносmi лейкоциmie та фагоцитарного тдексу.
Ключое1 слова: фасцюльоз, мжобактерюз, короеи, iмунна система, Т- i В-лiмфоциmи, бактерицидна актиетсть сироеатки кpоei, лiзоцимна актиетсть сироеатки кpоei, фагоцитарна актиетсть, фагоцитарний тдекс.
УДК 636.09: 995.122
Куляба О. В., ассистент, Стибель В. В., д.вет.н., профессор
Льеоеский национальный униеерситет еетеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ КОРОВ ЗА АССОЦИАЦИИ МИКОБАКТЕРИОЗОВ И ФАСЦИОЛЕЗА
В статье приеедены результаты исследоеаний елияния фасциольозной инеазии и микобактериоза на состояние клеточного, гуморального и неспецифического зеена иммунной системы организма корое. Иммунная система организма жиеотных обеспечиеает резистентность организма протие бактериальных и еирусных инфекций. Осноеными иммунологическими тестами, характеризующие состояние иммунной системы корое, яеляются показатели гуморального иммунитета (бактерицидная актиеность сыеоротки кроеи, лизоцимная актиеность сыеоротки кроеи и циркулирующие иммунные комплексы). Устаноелено, что у больных корое на фасциольоз и микобактериоз снижается бактерицидная и лизоцимная актиеность сыеоротки кроеи, тогда как уроеень циркулирующих иммунных комплексое еозрастает почти на 31%. Также устаноелено, что при разеитии фасциолеза и микобактериоза е кроеи корое снижается количестео Т- и В-лимфоцитое. Наряду с этим устаноелено снижение фагоцитарной актиености лейкоцитое и фагоцитарного индекса.
Ключевые слова: фасциольоз, микобактериоз, короеы, иммунная система, Т- и В-лимфоциты, бактерицидная актиеность сыеоротки кроеи, лизоцимная актиеность сыеоротки кроеи, фагоцитарная актиеность, фагоцитарный индекс.
UDC 636.09: 995,122
Kulyaba O., assistant, Stybel V., d.vet.n., Professor Lviv National University of Veterinary Medicineand Biotechnology named after SZ Gzhytsky THE STATE OF IMMUNE SYSTEM OF COWS BY ASSOCIATION OF MYCOBACTERIOSIS AND FASCIOLOSIS
© Куляба О. В., Стибель В. В., 2015
309
The article deals with the results of research of the influence of fasciolosis invasion and mycobacteriosis on the state of cellular, humoral and nonspecific links of the immune system of cows. The immune system of animals body provides its resistance against bacterial and viral infections. The main immunological tests that characterize the immune system of cows is the indicator of humoral immunity (serum bactericidal activity, lysozyme activity of serum and circulating immune complexes). It was found out that in sick cows which have fasciolosis and mycobacteriosis bactericidal and lysozyme activity of serum is reduced, while the level of circulating of immune complexes is increased by almost 31 %. It was also found that at the development of fasciolosis and mycobacteriosis in cows blood, the number of T and B lymphocytes is reduced. Along with this it set he treduction of phagocytic activity of leukocytes and phagocytic index.
Key words: fasciolosis, mycobacteriosis, cows, immune system, T- and B -lymphocytes, serum bactericidal activity, lysozymeactivity of blood serum, phagocytic activity, phagocytic index.
Беручи до уваги напружену етзоотичну ситуащю щодо фасцюльозу велико! рогато! худоби на територп Укра!ни та значну економiчну й сощальну проблему [1, 3-5], необхщне подальше поглиблене вивчення особливостей розповсюдження швазп, визначення патогенного впливу гельмшпв на оргашзм тварин, удосконалення зажиттево! дiагностики та розробки ефективно! схеми лшування тварин. Дана проблема залишаеться актуальною на сучасному етат й мае важливе народногосподарське значення.
Повщомлення у вггчизнянш та зарубiжнiй лiтературi вказують про те, що поряд з трематодозними захворюваннями велико! рогато! худоби, яю рееструються у господарствах, найбшьшого розповсюдження також набули - мшобактерюзи [2,
7].
Збудниками мшобактерюзу тварин е так зваш потенцшно патогенш мшобактери («атиповЬ>, аношмш або некласифшоваш), що характеризуются широким спектром природно! лшарсько! стшкосп [7].
Мшобактерюз зазвичай розвиваеться тшьки в ослабленому органiзмi тварин, рашше ушкодженому будь-яким несприятливим впливом навколишнього середовища чи розвитком рiзних захворювань, в тому чи^ паразитарних [6].
Незважаючи на велику кшьюсть дослщжень, присвячених вивченню фасцюльозу та мшобактерюзу велико! рогато! худоби, таю питання як етзоотолопя, бюлопя, тератя, профшактика потребують нових пiдходiв. Бшьша частина робгг з вивчення бюлогп фасцiол та мшобактерш мають однобiчний характер, не враховують впливу на iмунний статус, обмш речовин.
Метою роботи було дослщити стан iмунно! системи за асощацп мiкобактерiозiв та фасцiольозу.
Матерiали i методи. Для дослiдiв було вобрано 10 корiв чорно-рябо! породи, з яких сформовано 2 групи, по п'ять тварин у кожнш.
Корови контрольно! групи були клшчно здоровими. Тварини дослщно! групи були ураженш мiкобактерiозом та фасцiольозною iнвазiею.
Кров для аналiзу брали з яремно! вени до зараження та на 7-, 14-, 21- i 28-у добу дослщу.
Клiтинний фактор резистентносп визначали за показниками фагоцитарно! активносп (ФА), iнтенсивностi (iндексу) фагоцитозу (Ф1) за допомогою загальновизнаних методiв у модифiкацi! (Чумаченко В.Е. и др.), загальну кшьюсть Т-лiмфоцитiв (Е-РУК) - методом спонтанного розеткоутворення з еритроцитами барана за M. Jondal et al., загальну кiлькiсть В-лiмфоцитiв - за N.F. Mendes et al.
310
1з гуморальних показниюв резистентносп дослщжували бактерицидну активнiсть сироватки кровi за методом О.В. Смирново!, Т.А. Кузьмшо!, лiзоцимну активнiсть сироватки кровi (ЛАСК) — фотоелектроколориметричним методом; циркулюючi iмуннi комплекси визначали за методом Гриневича i Альферова.
Результати дослщжень. 1мунна система тварин включае центральш органи -мозок i тимус - i периферичнi - селезшку, лiмфатичнi вузли, лiмфо!дну тканину. Ц органи виробляють кiлька типiв клггин, якi i здiйснюють нагляд за сталютю клiтинного i антигенного складу внутршнього середовища. Основнi клiтини iмунноl системи - фагоцити i лiмфоцити (В- i Т-лiмфоцити). Вони циркулюють кровоносною i лiмфатичною системами, деяю з них можуть проникати в тканини.
У корiв, уражених асощащею мiкобактерiозiв та фасцiольозу, встановлено зниження рiвня Т-лiмфоцитiв. Так на 7 добу дослщу рiвень Т-лiмфоцитiв у кровi корiв уражених фасцiольозною iнвазiею i мiкобактерiозом становив 40,14±1,20%, а на 14 добу дослщу - 38,43±1,22 %. Найнижчим рiвень Т^мфоципв у кровi хворих корiв був на 21 добу дослщу, де вщносно ктшчно здорових корiв вш знизився на 17%.
Таблиця 1
Показники клггинного iмунiтету кор1в за асощацп мiкобактерiозiв та
Показник Групи тварин До зараження Термш дослщжень (доби)
7 14 21 28
Т-л1мфоцити, % К 44,10± 1,35 44,20± 1,25 44,14± 1,24 44,30± 1,25 44,18± 1,30
Д 44,20± 1,25 40,14± 1,20* 38,43± 1,22* 36,75± 1,24* 39,52± 1,26*
В-л1мфоцити, % К 18,05± 0,70 18,10± 0,50 18,06± 0,62 18,05± 0,58 18,08± 0,60
Д 18,07± 0,60 16,52± 0,50* 15,41± 0,55* 14,15± 0,55* 14,75± 0,50*
Примтка: Стушнь в1ропдносп пор1вняно з даними контрольно! групи -р<0,05-*, р<0,001-**
Поряд iз зменшенням Т- лiмфоцитiв встановлено зменшення кiлькостi i В-лiмфоцитiв, де у кровi хворих корiв на 21 добу дослщу вш становив 14,15±0,55 %, що на 22% е нижчою за показники кровi взято! у клiнiчно здорових корiв.
Зменшення кiлькостi Т- i В^мфоципв у кровi корiв, що ураженш мiкобактерiозом i фасцiольозом вказуе про пригшчення лiмфо!дно! системи iмунiтету i зниження резистентностi органiзму.
При вивченш неспецифiчно! ланки iмунно! системи, встановлено, що за розвитку фасцюльозу i мiкобактерiозу у корiв знижуеться фагоцитарна активнють лейкоцитiв та зменшуеться фагоцитарний шдекс, так у кровi хворих корiв данi показники вiдповiдно на 14 добу дослщу становили 50,4±1,60 % i 8,35±0,26 од. тодi як у клiнiчно здорових - 54,5±1,81 % i 9,62±0,28 од. (табл. 2).
На 21 добу дослщу фагоцитарна активнють лейкоцита кровi дослщно! групи корiв знизилася на 10%, а фагоцитарний шдекс на 18% вщносно контрольно! групи тварин.
Наступним етапом дослщження iмунно! системи за фасцюльозу i мшобактерюзу корiв було вивчення гуморального iмунiтету, за такими
311
показниками як: бактерицидна актившсть сироватки кров^ лiзоцимна актившсть сироватки кровi та циркулюючi iмуннi комплекси.
Таблиця 2
Показники неспецифiчного iмунiтету кор1в за асощацп мiкобактерiозiв
та фасцюльозу (М±т;п=5)
Показник Групи тварин До зараження Термш дослщжень (доби)
7 14 21 28
Фагоцитарна актившсть, % К 54,4± 1,90 54,6± 1,92 54,5± 1,81 54,6± 1,80 54,2± 1,90
Д 54,3± 1,72 51,3± 1,95 50,4± 1,60 49,2± 1,65* 49,9± 1,80
Фагоцитарний вдекс, од. К 9,63± 0,35 9,60± 0,25 9,62± 0,28 9,61± 0,30 9,63± 0,25
Д 9,61± 0,30 8,66± 0,23* 8,35± 0,26* 7,85± 0,25* 8,06± 0,20*
Примтка: Стутнь в1ропдносп пор1вняно з даними контрольно! групи -р<0,05-*, р<0,001-**
При дослiдженнi антимшробно! активностi сироватки кровi на 14 добу дослщу встановлено пригнiчення бактерицидно! активносп (БАСК) на 9 % i лiзоцимноl активностi (ЛАСК) на 12%, що вiдображаe пригнiчення фiзiологiчного стану гуморально! ланки iмунiтету (табл. 3). На 21 добу дослщу бактерицидна i лiзоцимна активнiсть сироватки дослщних корiв була найнижчою, де вщповщно складала 55,1±0,52 i 19,5±0,50%.
Таблиця 3
Гуморальнi фактори захисту кров1 дослiджуваних кор1в за асощацп
мiкобактерiозiв та фасцiольозу (М±т;п=5)
Показник Групи тварин До зараження Термш дослщжень (доби)
7 14 21 28
Бактерицидна актившсть (НБА), % К 62,3± 0,71 62,4± 0,60 62,2± 0,65 62,3± 0,70 62,5± 0,62
Д 62,2± 0,55 58,3± 0,55* 56,6± 0,50** 55,1± 0,52** 56,8± 0,60**
Л1зоцимна актившсть, % К 23,3± 0,50 23,5± 0,55 23,4± 0,52 23,5± 0,53 23,2± 0,55
Д 23,5± 0,45 21,1± 0,50* 20,6± 0,50* 19,5± 0,50** 20,5± 0,51*
Ц1К, моль/л К 64,75± 4,2 64,71± 4,0 64,75± 3,1 64,73± 4,2 64,70± 4,0
Д 64,74± 4,0 70,67± 3,5 73,21± 4,0* 84,51± 4,0** 80,45± 3,5*
Примтка: Стутнь в1ропдносп пор1вняно з даними контрольно! групи -р<0,05-*, р<0,001-**
За фiзiологiчних умов, утворення та присутнють циркулюючих iмунних комплексiв (Ц1К) в бюлопчних рiдинах е одним з проявiв iмунноl вiдповiдi органiзму тварин на надходження антигешв та важливим чинником, що забезпечуе iмунiтет. Також, Ц1К можуть запускати ланцюги патолопчних змiн, оскiльки тривала циркуляцiя !х навiть при незначному пiдвищеннi в рiдинах органiзму призводить до нагромадження у тканинах, що призводить до посилено! агрегацп та адгезп тромбоцита. А це веде до порушення мшроциркуляцп кровi, пошкодження i некрозу тканин. Сформоваш циркулюючi iмуннi комплекси взаемоддать практично
312
зi вшма клггинами кровг Взаемодiя Ц1К з iмунокомпетентними клггинами призводить до модуляцi! iмунно! вщповщг
При дослiдженнi величин показникiв гуморального iмунiтету встановлено, що у хворих корiв у кровi рiвень циркулюючих iмунних комплексiв (Ц1К) на 21 добу дослщу складае 84,51±4,0 моль/л проти 64,73±4,2 моль/л у клшчно здорових (р<0,001), тобто зрю вщповщно на 31%
Високий рiвень Ц1К у сироватцi кровi вказуе на пригшчення iмуннореактивно! системи оргашзму внаслiдок приеднання специфiчних антитiл до продукпв метаболiзму збудникiв захворювань.
Висновок. За клшчного проявлення фасцiольозно! швазп та мiкобактерiозу у корiв пригшчуеться клiтинний, гуморальний та неспецифiчний iмунiтет та настае так званий вторинний iмунодефiцит. Це може бути причиною ураження тварин вторинною бактерiальною, або вiрусною iнфекцiею.
Л1тература
1. Березовський А., Мандигра М., Кисельов В. Вивчення дп бровальзену на клггинний [ гуморальний 1мунггет та його ефективнють при фасцюльоз1 овець // Вет. медицина Укра!ни. - 1999. - №12. - С. 35-36.
2. Вейсфеллер Д. Биология и изменчивость микобактерий туберкулеза и атипичные микобактерии: экспериментальные и теоретические исследования. Изд-во АН Венгрии, Будапешт. — 1975. — 335 с.
3. Галат В. Ф., Чумаченко В. Ю., Довгш Ю. Ю. Ефективний зааб проти фасцюльозу овець // Матер, доп. наук. конф. професорсько-викладацького складу та астранпв НАУ. - К., 1994. - С. 140-144.
4. Дахно I. С. Етзоотолопя, патогенез, етютропна та 1мунокоригуюча тератя при фасцюльоз1 I дикроцелюз1 жуйних тварин. Автореф. дис. ... д-ра вет. наук: 03.00.18. - Харьков, 2001.-36 с.
5. Довгш Ю. Ю., Ваховський I. Л., Семененко Р. Д. Захворювання велико! рогато! худоби, викликане паразитуванням фасцюл в асоц1ац1! з бактер1ями [ грибами // Вюник Держ. агроекол. акад. Укра!ни: Наук.- теор. зб. -Житомир, 2000. - Випуск 2. -С. 115-118.
6. Литвинов В. И., Дорожкова И. Р., Макарова М. В., Краснова М. А., Фрейман Г. Е. Выделение и идентификация нетуберкулезных микобактерий // Вестник РАМН. — 2010. — № 3. — С.7-11.
7. Литвинов В.И., Макарова Н.В., Краснова М.А. Нетуберкулезные микобактерии. — М.: МНПЦБТ. — 2008. — 256 с.
Стаття надшшла до редакцИ 12.10.2015
313
