CC BY
56
Рис. 18, 19. Збудник Р1ауоЬас1епит со1итпаге при зафарбуванш метиленовим сишм (зб. х 1000)
ВЛд хворих риб були iзольованi збудники Flavobacterium со1ишпаге - на МПА через 24 години культивування утворювалися маленьк круглi прозорi колони, що згодом мутнiли i набували кремово - бшого кольору, на кров'яному агарi - зони гемолiзу. Мжроскотчними досл1дженнями культури встановлено наявнiсть паличкоподiбних бакгерш, сформованих у конгломерати: довп окремi ланцюжки або скупчення куполоподiбноi форми.
Л1тература
1. Клаус Файт Домашний акварум. Советы и рекомендации М.: Книжный клуб семейного досуга, 2012. - 128 с.
2. Гаврилин К. В., Ершова Т. А., Мамыкина Г. А. Распространенность заразных заболеваний среди тропических рыб // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. - 2008. - № 3. - С. 18 - 20.
3. Гаврилин К. В. Вторичные бактериальные осложнения при протозоозах рыб // Материалы научной конференции Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. М.: Россельхозакадемия, 2008. - С. 118 - 120.
Стаття надшшла до редакцп 16.09.2015
УДК 619:616.2/.98-091:636.4
Лкова В. В., к. вет. н., доцент ©
Нацюналъний унгверситет б1оресурс1в г природокористування Украгни,
м. Кигв, Украгна Гавриленко О. С., к. вет. н.
Украгнсъкий державний науково-досл!дний шститут нанобютехнологш та ресурсозбереження, м. Кигв, Украгна
ПАТОМОРФОЛОГ1ЧНА Д1АГНОСТИКА ЕНЗООТИЧНО1 ПНЕВМОНП В
СВИНЕЙ
Показано, що основними критергями патоморфологгчно'г дгагностики ензоотичног пневмони у свиней е зм!ни, характеры для десквамативног пневмони з гемораггчним акцентом або Штерстищалъно'г пневмони I деструкцгя еттелгю 6ронх1в. Завершенням хвороби е пневмофЮроз як результат продуктивного запалення.
© Люова В. В., Гавриленко О. С., 2015
118
При патоморфологгчному дослгдженнг iмунокомпетентних оргатв выявляли: структуры е^валенти нормальноi iмунноí вiдповiдi; морфологiчнi ознаки порушень iмунноí вiдповiдi вна^док пригтчення функцп оргатв iмуногенезу nid час захворювання на ензоотичну пневмонт (вторинний iмунодефiцит). Таю змти можна iдентифiкувати як прояви декомпенсацп iмунноi вiдnовiдi, як суттево впливають на подальший nеребiг тфекцтного захворювання, осктьки вiдомо, що дефщит клтинного iмунiтету характеризуется рецидивами тфекцт рiзноi етiологii, а також генералiзацiею процесу.
Ключов1 слова: свит, ензоотична пневмотя, iмунний дефщит, nатоморфологiчна дiагностика, макроскотчт змти, мжроструктурт змти, легет, тимус, лiмфатичнi вузли, селезтка.
УДК 619:616.2/.98-091:636.4
Лисовая В.В., к. вет. н., доцент Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины,
г. Киев, Украина Гавриленко Е.С., к. вет. н.
Украинский государственный научно-исследовательский институт нанобиотехнологий и ресурсосохранения, г. Киев, Украина
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ЭНЗООТИЧЕСКОЙ ПНЕВМОНИИ У СВИНЕЙ
Показано, что основными критериями патоморфологической диагностики энзоотической пневмонии у свиней являются изменения характерные для десквамативной пневмонии с геморрагическим акцентом или интерстициальной пневмонии и деструкция эпителия бронхов. Завершением болезни является пневмофиброз, как результат продуктивного воспаления.
При патоморфологическом исследовании иммунокомпетентных органов выявляли: структурные эквиваленты нормального иммунного ответа; морфологические признаки нарушений иммунного ответа вследствие угнетения функции органов иммуногенеза во время заболевания энзоотической пневмонией (вторичный иммунодефицит). Такие изменения идентифицируются как проявления декомпенсации иммунного ответа, которые существенно влияют на дальнейшее течение инфекционного заболевания, поскольку известно, что дефицит клеточного иммунитета характеризуется рецидивами инфекций разной этиологии, а также генерализацией процесса.
Ключевые слова: свиньи, энзоотическая пневмония, иммунный дефицит, патоморфологическая диагностика, макроскопические изменения, микроструктурные изменения, легкие, тимус, лимфатические узлы, селезенка.
UDC 619:616.2/.98-091:636.4
Lysova V.
National University of Life and Environnement Sciences of Ukraine, Kyiv, Ukraine
Gavrylenko O.
The Ukrainian State Scientific Research Institute of Nanobiotechnologies and Resource
Reservation, Kyiv, Ukraine
PATHOMORPHOLOGICAL DIAGNOSTICS OF ENZOOTIC PNEUMONIA OF
PIGS
It was shown that the basic criteria of pathomorphological diagnostics of enzootic pneumonia in pigs are changes, characteristic for desquamative pneumonia with a
119
hemorragic accent or interstitial pneumonia and destruction of epithelium of bronchial tubes. Completion of illness is pneumofibrosis, as a result ofproductive inflammation.
At pathomorphological investigation of immunological competent organs established: the structural equivalents of normal immune answer; morphological symptoms of violations of immune answer by suppressing of function of organs of immunogenesis during the disease of enzootic pneumonia (secondary immunodeficiency). Such changes can be identified as manifestations of decompensation of immune response, which affect importantly on the following development of infectious disease, because it is known, that deficit of cellular immunity is characterized by relapses of different infections and the generalization of the process as well.
Key words: pigs, enzootic pneumonia, immune deficit, pathomorphological diagnostics, macroscopic changes, microstructural changes, lungs, thymus, lymph nodes, spleen.
Вступ. Останшми роками у свгговш лiтературi з'являсться все бшьше повщомлень, в яких йдеться про те, що рГзш види мшоплазм можуть викликати самостшш хвороби свиней [1, 2]. Ензоотична пневмошя у свиней, викликана M. hyopneumoniae, широко розповсюджена i е одшею з економiчно важливих хвороб свиней.
За даними [2] при дослщженш на м'ясокомбшатах патологоанатомiчнi змши, характерш для ще! хвороби, встановлеш у 30-80% тварин. МГкоплазмозна пневмошя е ензоотичною хворобою, яка мае хрошчний перебГг i характеризуемся альвеолярним або штерстицшним запаленням легень.
Перша стадГя хвороби тривалютю до 14 дшв характеризуеться кашлем i лихоманкою з ремюею. За ще! стадп у тварин зберГгаеться апетит. У другу хрошчну стадiю тривалiстю до 20-25 дшв i бiльше з'являються ознаки пневмони. Кашель е основною i визначною клiнiчною ознакою та виявляеться у 50% хворих поросят [3].
Ниш загальноприйнято, що iмунна система новонароджених тварин (як i дорослих ссавщв i птахiв) полiморфологiчна i включае в себе цiлi системи (юсткову, лiмфатичну), окремi органи (тимус, селезшку), скупчення лГмфощно! тканини, а також клггин (лiмфоцити, макрофаги, моноцити, нейтрофши) i !х бiлковi утворення. Майже вс структури органiзму беруть участь у коопераци iмунного захисту [4, 5].
Комплекс дослщжень функцiонального стану гуморального й клггинного iмунiтету в 4-5-мiсячних поросят, хворих на ензоотичну пневмошю, викликану М. Hyopneumoniae, виявив зниження загально! кiлькостi В-лiмфоцитiв, Т-лiмфоцитiв, окремих фракцш iмуноглобулiнiв й окремих популяцiй РУК, зниження !х спiввiдношення, що, ймовiрно, вiдображае порушення лiмфопоезу, а також перерозподш клiтин i змiну регуляторного потенщалу лГмфощних тканин у тварин, якГ захворiли, повiдомляють автори [6].
З теори загально! Гмунологи [2], виразне зниження кiлькостi Т-лГмфоцитГв по вiдношенню до здорових тварин супроводжуеться зниженням клггинного iмунiтету, що тягне за собою падшня резистентности в першу чергу, до вГрусних iнфекцiй [3].
Отже, з одного боку - клшчна дГагностика складна за вщсутносп специфГчних симптомГв хвороби й наявносп численних асоцшованих з бактерГями й вГрусами форм шфекци, а з шшого - в лгтературних джерелах шформацп щодо морфолопчних особливостей хвороби вельми недостатньо, що i визначило мету наших дослщжень - визначити шформативш патоморфолопчш критери щентифшацп мГкоплазмозно! пневмони у свиней.
120
MaTepian i методи. Спостереження за динамшою патоморфолопчних змш за рiзних ступешв виразностi хвороби у свиней проводились протягом 2008 -2015 рр. у прозекторп i патопстолопчнш лабораторп кафедри патолопчно! анатоми НУБiП Укра1'ни. Матерiалом дослiджень слугували трупи поросят з рiзних промислових комплекшв i господарств, якi загинули з ознаками ресшраторних iнфекцiй, i, в яких лабораторними методами було виявлено M. hyopneumoniae i виключено наявнють бактерiальних, вiрусних i асоцшованих респiраторних iнфекцiй.
Для гiстологiчних дослщжень вiдбирали шматочки легень з рiзних дiлянок ураження (пневмонiй та склерозу, шших патологiчних вогнищ), а також макроскотчно незмiненi дiлянки, шматочки тимуса, селезшки, а також поверхневi привушш, нижньощелепнi, медiальнi й латеральнi заглотков^ поверхневi й глибокi шийнi, пахвов^ середостiннi й бiфуркацiйнi лiмфатичнi вузли, яю фiксували у 10%-му водному нейтральному розчиш формалiну i заливали у парафш. Виготовленi гiстозрiзи товщиною 5 ± 2 мкм фарбували гематоксилшом Карацi й еозином за стандартним прописом. Отримаш гiстопрепарати вивчали тд свiтловим мiкроскопом MC 100LED (Micros Austria) з фотонасадкою NDPL - 1(2x) i цифровою фотокамерою Canon EOS 550 D, з'еднаними з комп'ютером при збiльшеннях 70 - 1000 х.
Результати дослщження. Макроскотчна картина уражених легень рiзнилася залежно вiд ступеня ураження, стадшносп морфогенезу i характеру запально! реакци. У одних випадках ураженi дшянки легень були чiтко вiдмежованi, щшьно! консистенци, мали колiр вiд шрого до сiро-червоного. У iнших випадках консистенщя була щiльною, але колiр майже незмiнений. У випадках пневмосклерозу тд плеврою й на розрiзi паренхiми в уражених дiлянках спостертали виразно розширену у виглядi шрувато-бших щiльних тяжiв строму легень i салоподiбнi фiбрознi вогнища. У одних випадках уражеш дiлянки займали вщ десятка до декiлькох десяткiв сумiжних часточок i локалiзувались переважно в гострих краях передшх, серцевих, додаткових i дiафрагмальних часток, в шших випадках ураженою була майже третина i бшьше паренхiми легень (субтотальна пневмошя). У просвiтi бронхiв виявляли слизовi пробки, середостiннi й бронхiальнi лiмфатичнi вузли були збiльшенi, шрого кольору, на розрiзi соковитi.
Щц час патологоанатомiчного розтину в органах iмуногенезу постiйно виявляли наступну картину: тимус значно зменшений в розмiрах - особливо це простежувалось у шийному вiддiлi, де парнi шийш частини перетворились на вузькi бш горбистi смужки, на вiдмiну вщ широких рiвних соковитих пластинок фiзiологiчно розвинутого тимуса; селезiнка дещо в'яло! консистенц^', кра! витонченi, майже прозорц середостiннi й бiфуркацiйнi лiмфатичнi вузли значно збшьшеш, рожевого кольору, набрякт, на розрiзi соковитi, а в деяких випадках мали темно-вишневий колiр; усi iншi дослiдженi лiмфовузли дещо збшьшеш, мали блщо-рожевий колiр, суху поверхню розрiзу.
Патогiстологiчним дослiдженням в легенях виявляли рiзнi мiкроструктурнi змши залежно вiд ступеня ураження. Перша мшроскошчна картина характеризувалася переважанням змш в епггелп бронхiв, перибронхiальному просторi й альвеолярному епiтелil. Виявляли масове руйнування рестраторного епiтелiю бронхiв: цитоплазма i ядра епiтелiальних клiтин стають пiнистими, ядерця не диференцiюються, клггини набувають кубiчноl або пласко! форми. Частина еттелюцш!в втрачае зв'язок з базальною мембраною i з сусщшми клггинами i десквамуеться, iнодi навггь цiлими пластами. У ядрах деяких клггин
121
спостертаеться маргшащя хроматину. Щцслизова основа багатьох середшх бронхiв i бронхiол розрихлена, набрякла. У просвт альвеол - серозний ексудат i незначна кiлькiсть десквамованих альвеолоцитiв. Така морфолопчна картина демонструе початкову стадда хвороби з переважанням альтеративного й ексудативного компонента запально! реакци.
Друга мшроскошчна картина характеризувалася пiком ексудативних явищ. Кровоноснi судини всiх дiаметрiв сильно розширенi й кровонаповненi. Навколо судин периваскулярш лiмфо!доцитарш муфти. 1нтерстицш густо iнфiльтрований моноцитами, лiмфоцитами й пстюцитами. Альвеолярнi перегородки потовщенi за рахунок !х набряку й шфшьтрацп. Просвiти альвеол в уражених дшянках заповненi великою кiлькiстю десквамованих алвеолоципв на рiзних стадiях лiзису з домшкою поодиноких макрофагiв i гранулоципв i великою кiлькiстю еритроцитiв, що надае картину суцiльного клiтинного поля. Навколо бронхiв - скупчення лiмфо!до-riстюцитарних елементiв, якi, зливаючись з активними лiмфо!дними вузликами, утворюють перибронхiальнi муфти. Такий запальний процес визначаеться як десквамативна пневмошя.
Третя мшроскошчна картина була найбшьш численною i проявлялася виразною iнфiльтрацiею мiжальвеолярних перегородок клггинними елементами без помiтного !х виходу в просвгги альвеол. 1з наростанням ступеня потовщення сумiжнi перегородки зливаються, альвеоли на тлi шфшьтрацп втрачають контури, утворюючи, таким чином, суцшьш поля з бiльш-менш рiвномiрного клггинного матерiалу, серед якого виявляються фiбробласти, моноцити, гiстiоцити, плазмоцити, а з часом - волокнист компоненти сполучно! тканини. Мiжчасточкова сполучна тканина виразно набрякла, у виглядi широких тяжiв, дифузно просочена запальним iнфiльтратом i сполучнотканинним пролiфератом. У бронхах вшх генерацiй виявляли одночасно як масове руйнування, десквамащю респiраторного епiтелiю, так i регенераторнi процеси у виглядi пролiферацil епiтелiю з появою великих клггин кубiчно! форми, якi формували декшька шарiв слизово! оболонки. Така морфолопчна картина е ознакою штерстищально! пневмонп.
Четверта мiкроскопiчна картина характеризувалася переважанням продуктивного компонента запально! реакци, що е морфолопчним еквiвалентом хрошзацп процесу. Пролiферацiя волокнисто! сполучно! тканини за рахунок фiбробластичних i пстюцитарних елементiв вiдбувалася перибронхiально, периваскулярно, в мiжальвеолярних перегородках й частково оргашзованому ексудатi й клiтинному детритi в просвггах альвеол, за ходом вщтоку лiмфи i вздовж мiжлобулярних перегородок. Сполучна тканина замщувала структурнi елементи бронхiально! стiнки, лише мiсцями спостертали збереженi серед фiброзно! тканини осередки запальноклггинно! iнфiльтрацi!. Такий стан легень щентифшуеться як пневмофiброз.
Першочергове значення для оцшки iмунного статусу належить морфологiчнiй оцiнцi структурних змiн тимуса, як можуть проявлятися, як вщомо, у двох варiантах: 1) змши, зумовленi природженими iмунодефiцитними станами, що передують розвитку шфекцшно! хвороби; 2) змши, що виникають внаслiдок шфекцшно! хвороби (вториннi iмунодефiцити). Для позначення вторинних iмунодефiцитних станiв використовуеться термш «акцидентальна (випадкова) шволющя» (А1). Морфолопчним проявом А1 тимуса в бшьшост випадкiв захворювання на ензоотичну пневмошю було зменшення кiлькостi тимоцитш в субкапсулярнш зонi кiрково! речовини й збшьшення бластних форм, внаслiдок чого добре диференщюеться ретикулярна строма. Межа м1ж юрковою i мозковою речовинами стерта.
122
Поряд з цим в юрковш речовиш виявляли вогнищев1 скупчення л1мфоцит1в i фол1кулопод1бн1 структури. Пропорцшно зменшенню кшькосп л1мфоцит1в збшьшувались кшьюсть i розм1ри тшець Гассаля. Строма тимуса набрякла, спостер^аеться пом1рна ш'екщя судин. Часточкова будова органа збережена, проте розм1р часточок значно зменшений.
У селезшщ спостер1галися чггю ознаки iмунноi вщповда, яка морфолопчно проявлялася появою великоi кiлькостi лiмфобластiв у червонш пульпi, а також наявнютю гiперплазованих лiмфоiдних вузликiв з свгглими центрами. Переважно в свiтлих центрах вузлиюв, рiдше - в мантшнш зонi виявляли значну кiлькiсть лiмфобластiв, карiорексис у свiтлих центрах з наступним 'х повним спустошенням. Лiмфоiднi вузлики без центрiв розмноження виявляються переважно по перифери селезiнки у виглядi ледь помiтних округлих контурiв.
У лiмфовузлах, насамперед, середостiнних i бiфуркацiйних типовими були повнокров'я i набряк сполучнотканинноi строми, спостерiгали множинш дифузнi дiапедезнi крововиливи на фош серозного просочення. У всiх дослщжених лiмфатичних вузлах спостерiгали вiдсутнiсть меж мiж мозковою i кiрковою речовинами; в останнш виявляли помiрну кшьюсть малих лiмфоцитiв, якi iнколи утворювали слабю фолiкулоподiбнi скупчення без реактивних центрiв. Такi змiни можна щентифшувати як прояви декомпенсацii iмунноi вщповщ, якi суттево впливають на подальший перебiг iнфекцiйного захворювання. Адже вщомо, що дефiцит клiтинного iмунiтету характеризуеться рецидивами шфекцш рiзноi етiологii, а також генералiзацiею процесу.
У частиш випадкiв спостерiгали неадекватну вiдповiдь iмунноi системи на хворобу. При цьому незалежно вщ тривалостi й ступеня виразносп захворювання А1 тимуса була виражена незначно або ж взагат була вiдсутня. У периферичних органах iмуногенезу В-залежнi зони були сформоваш, але кiлькiсть плазмоцитiв була незначною, в свгглих центрах виявляли морфолопчш ознаки карiорексису.
Як iмунопатологiчний процес можна розглядати i вторинну гшерплазда тимуса, яка виникала на тлi добре виражено1' мiкоплазмозноi пневмонii. Маса тимуса при цьому збшьшувалась, хоча й помiрно (до 130%), в той час як розмiри й маса периферичних оргашв iмуногенезу залишалися звичайними. При пстолопчному дослiдженнi типовими були повнокрiв'я i набряк тимуса, вщсутшсть меж мiж мозковою i кiрковою речовинами, поява детриту в тимусних тшьцях i велико!' кшькосп макрофагiв у стромальних елементах тимуса. Ознак А1 при цьому практично не вiдмiчали.
Висновки. 1. Основними критерiями патоморфологiчноi дiагностики респiраторних захворювань, викликаних мшоплазмами, е змiни, характерш для десквамативноi пневмонii з геморапчним акцентом або iнтерстицiальноi пневмонii ^ обов'язково, глибоке ураження епiтелiю бронхiв (особливо бронхiол), що пояснюеться цитопатичною дiею збудника захворювання.
2. Хрошзащя запального процесу морфологiчно проявляеться ознаками продуктивно! пневмони, а саме: дифузною або вогнищевою лiмфоiдо-гiстiоцитарною шфшьтращею в дiлянках запалення, утворенням перибронхiальних, периваскулярних лiмфоiдо-гiстiоцитарних муфт i пролiферацiею мезенхiмальних елементiв з розвитком пневмофiброзу.
3. Порушення iмунологiчного гомеостазу, спричинене збудником хвороби, в легеневш тканиш морфологiчно проявляеться посиленням мiграцii лiмфоiдних клiтин з перибронхiальних лiмфоiдних вузлиюв через базальну мембрану в епiтелiальний шар бронхiв.
123
4. У iмунокомпетентних органах виявляли як структурш е^валенти нормальноi iмунноi вщповда, так i морфолопчш ознаки пригнiчення функцii органiв лiмфоцитопоезу, спричиненi захворюванням на пневмонiю iнфекцiйноi етiологii (вторинний iмунодефiцит).
5. Морфолопчш ознаки активацп тимуса пропорцiйнi тривалосп й ступеню виразностi захворювання i проявляються делiмфатизацiею кiрковоi речовини, збшьшенням у розмiрах тимусних тiлець i появою в них детриту, а також збшьшенням кiлькостi макрофагiв.
6. Ус дослiдженi лiмфатичнi вузли набувають морфолопчних ознак декомпенсацii iмунноi вщповщ, яка визначае подальший перебiг шфекцшного захворювання.
7. Мiкроскопiчна структура селезiнки вщповщае чiтким ознакам активацii iмунноi вщповда, що морфологiчно проявляеться гiперплазiею 6шо! пульпи i утворенням свiтлих центрiв.
Перспективи подальших дослiджень. З метою всебiчного вивчення патоморфологiчноi картини хвороби в подальшому доцiльно провести гiстохiмiчне дослiдження органiв i тканин за ензоотичноi пневмонii.
Лiтература
1. Сорокин М. В. Энзоотическая пневмония свиней и ее специфическая профилактика [текст] / М. В. Сорокин // Российский ветеринарный журнал. Сельскохозяйственные животные. - 2006. - N° 3. - С. 35-37.
2. Орлянкин Б. Г. Инфекционные респираторные болезни свиней [текст] / Б. Г. Орлянкин, Т. И. Алипер, Е. А. Непоклонов // Ветеринария. - 2005. - №11. - С. 3-6.
3. Кукушкин С. А. Пролиферативно-некротизирующая пневмония свиней [текст] / С. А. Кукушкин, Т. З. Байбиков, В. Ф. Ковалишин, А. М. Тимина, А. С. Яковлева // Ветеринария. - 2005. - №9. - С. 17-20.
4. Механизмы иммунопатологии: Перев. с англ. под ред. О.Коэна. - М.: Медицина, 1983. - 400 с.
5. Криштофорова Б. В. Бюлопчт основи ветеринарноi неонатологп / Б. В. Криштофорова, В. В. Лемещенко, Ж. Г. Стегней - Омферополь : Редакщя газети «Терра Таврика», 2007. - 368 с.
6. Бутенков А. И. Иммунологический статус у свиней при инфекции М. hyopneumoniae [текст] / А. И. Бутенков, С. Н. Карташов, А. Г. Ключников, А. Н. Тазаян. Джерело: http://www.kubanvet.ru/journal3-09-04.html.
Стаття надшшла до редакцИ 16.09.2015
УДК 619:639.309
Лобойко Ю. В., к. с.-г. н., доцент © Лъвгвсъкий нацгоналъний ушверситет ветеринарног медицини та
бготехнологШ гменг С.З. Гжицъкого Данко М. М., к. вет. н., молодший науковий ствробггник
Державний науково-досл1дний контролъний ¡нститут ветпрепарат1в та
кормових добавок
ТЕРАПЕВТИЧНА ТА ЕКОНОМ1ЧНА ЕФЕКТИВН1СТЬ ЗАСТОСУВАННЯ БРОВЕРМЕКТИН-ГРАНУЛЯТУ ЗА ЕКТОПАРАЗИТОЗ1В
КОРОПА
У виробничих умовах рибницъкого господарства проведено дослгдження з вивчення терапевтичног та економгчног ефективностг застосування
© Лобойко Ю. В., Данко М. М., 2015
124
