CC BY
15ежемесячный научно-практическии медицинским журнал
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ влияния КОЛЛАЛИЗИНА НА ФОРМИРОВАНИЕ НОРМОТРОФИЧЕСКОГО РУБЦА РОГОВИЦЫ КРОЛИКОВ
Жылкичиева Ч. С., Омурова Н. С.
мвшм, нг
Резюме. В статье представлен этиопатогенетический анализ морфологических изменений посттравматических рубцовых дефектов роговицы глаза кролика при воздействии протеолитического фермента коллализина. Кроликтердин кезунун тунук чел кабыгынын нормотрофикалык бYTYYcYн тYЗYYге коллализиндин таасиринин патогенетикалык езгечелYГY. Корутунду: Макалада травмадан кийин кроликтердин кeзYHYн сыртын-дагы тунук чел кабыгынын бYTYYCYнe протеолитикалык фермент коллализиндин таасириндеги морфология-лык eзгeрYYлeрдYH этиопатогенети-калык анализи келтирилген. Pathogenetic features of influence of kollalizin on formation of the normotrofichesky hem of the cornea of rabbits. Zhylkichiyeva Ch. S. Omurova N. S. Abstract: In this article it was presented pathogenesis of morphological changes during corneal scaring in rabbits after effect of proteolytic enzyme kollalizinum.
Ключевые слова: патогенез, роговица, рубцы, интрастромальные инъекции, коллализин. Негизги сездер: патогенез, кeздYH сыртындагы тунук чел кабыгы, травма болгон жердин бYTYШY, интраст-ромалдык инъекция, коллализин. Key words: pathogenesis, cornea, scar, intrastromal injections, kollalizinum
В настоящее время в мире патология роговицы составляет около- 48-55% всех заболеваний органа зрения. Поражения роговицы в большинстве случаев являются причиной потери трудоспособности и инвалидизации. Посттравматические рубцы роговицы являются осложнением большинства проникающих ранений [2]. Даже абсолютно успешно проведенные комбинированные реконструктивные вмешательства, включающие в себя реконструкцию передней камеры, иридопластику, экстракцию травматической катаракты с имплантацией интра-окулярной линзы не всегда позволяют добиться достаточно полного восстановления зрительных функций вследствие остающихся на роговице помутнений [1,3].
Цель исследования: обосновать патогенез морфологических особенностей посттравматических рубцовых изменений роговицы глаза при воздействии протеолитического фермента колла-лизина.
Материал и методы исследования
Материалом исследования служили роговицы глаз экспериментальных животных - кроликов, были смоделированы рубцовые изменения путем нанесения проникающих ранений роговицы. Повреждение роговицы воспроизводили в условиях операционной, скальпелем, наносили проникающие разрезы роговицы в верхнем квадранте размером 3-3.5 мм. После получения проникающего ранения роговицы, рану ушивали нейлоном 10,0,узловыми швами. Для морфологических исследований забирались роговица глаза диаметром 1х1 см, фиксировали в 10% нейтральном растворе формалина, после дегидратации
заливали в парафин. На санном микротоме готовились срезы толщиной 6-7 мкм. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилин - эозином и по Ван Гизону.
Результаты исследования
После нанесения проникающих ранений на роговицу глаза на 45 день происходит эпителизация раны, хотя эпителий утолщен, наблюдаются зрелые соединительнотканные клетки фиброциты и волокна. Признаков воспаления нет, имеются единичные круглые клетки лимфоциты, в зоне лимба. Сосуды, вросшие в роговицу, редуцированы, так как в зоне рубца их нет. Волокна соединительной ткани в зоне рубца расположены по ходу шовного материала циркулярно, за пределами дефекта отмечается более упорядоченное расположение волокон, по структуре схожей на роговицу.
Нами было отслежено эпителизация и образование рубца в поврежденном участке роговицы. Повреждения роговицы приводит к развитию воспалительной процесса в ней, по времени несколько позднему по сравнению с тканями любой другой топографии. Запоздалое развитие воспалительной реакции мы связываем с особенностями строения роговицы, а именно отсутствием в ней кровеносных сосудов. В дальнейшем по мере проникновения в зону повреждения сосудов со стороны склеры, в роговице развертывается воспалительная реакция. По нашим наблюдениям полная картина воспаления развивалась к 3-у дню и носила ограниченный характер. Первые признаки репаративных процессов были заметны уже к 7 дню развития процесса в виде богатой васкуляризации зоны повреждения и активации мезенхимальных клеток. На 21 день
ПАТОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ВЛИЯНИЯ КОЛЛАЛИЗИНА НА ФОРМИРОВАНИЕ..
опытов замечен значительный спад воспалительных явлений и ярко выражены процессы репарации. Значительно спадает отек и полнокровие, единичные лейкоциты в зоне повреждения практически полностью элиминированы поврежденные ткани, имеет место множество вновь образованных волокон, как колагенновых, так и эластических. В дальнейшем к 45 дню полностью формируется рубцовая ткань.
Убедившись, что к 45 дню образовалась в роговице рубцовая ткань, в дальнейшем мы воздействовали на нее интрастромальным введением коллализина, известного как мощного коллаген-нолитического фермента. Препарат вводился непосредственно в рубцовую ткань с интервалом в 7 дней - I группа получила первую инъекцию коллализина, II группа - через 14 дней получила вторую инъекцию, и так по нарастающей, V группа получила 5 интрастромальных инъекций препарата.
Макроскопическая картина рубца через 7 дней после однократного введения коллализина практически не изменилась. Микроскопическое исследование рубца также не выявила, каких либо выраженных изменений. Отмечается некоторое увеличение числа молодых соединительнотканных клеток-фибробластов в зоне рубца, чего не наблюдалось до начала введения препарата. В структуре волокон зоны рубца, заметных изменений нет. Волокна зоны рубца хаотичны, определенной упорядоченности нет, превалируют в основном волокна типа коллагеновых.
На 14-й день после введения коллализина, картина рубца несколько иная, чем в предыдущий срок введения.Хотя зона рубца макроскопически, еще заметна, размеры ее уменьшились, контуры рубца более четко выражены от окружающей ткани роговицы. При гистологическом исследовании также заметны четко выраженные контуры зоны рубца. При хаотичности локализации волокон, в толще рубца уменьшились количество коллагенновых волокон, их неравномерная толщина, и местами структура волокон просматривается не совсем отчетливо - местами волокна однородны, исчерченность их смазана. В отличие от предыдущего срока наблюдения заметна некоторая упорядоченность волокон, направления части их параллельны друг другу, местами между ними сохраняются щели и более молодые формы соединительнотканных клеток. В целом в зоне рубца превалируют более зрелые соединительнотканные клетки-фиброциты с уплощенными вытянутыми ядрами (рис 1б).
На 21-й день после введения коллализина картина рубца изменилась значительно. Прежде всего, это внешний макроскопический вид рубца. Он заметен только при очень внимательном осмотре, резко очерчен и заметно уменьшен в размерах. При микроскопическом исследовании зоны рубца отмечается значительная, по сравнению с
предыдущими наблюдениями, упорядоченность и уплотнение волокнистых структур рубца, которые большей частью расположены параллельно к поверхности роговицы. Местами волокна в зоне рубца образуют прослойки соединительной ткани в нормальной роговице. Из клеточных элементов превалируют фиброциты с уплощенными и вытянутыми ядрами, которые расположены также в большинстве своем параллельно к поверхности роговицы (рис. 2а).
Гистологическая картина зоны рубца также значительно отличалась от предыдущих наблюдений. Прежде всего, это упорядоченность расположения соединительнотканных волокон в виде параллельных к поверхности роговицы пластинок, по структуре схожие со структурой с нормальной роговицы. От нормы, данный участок отличался, наличием отдельных волокон, расположение которых никак не упорядочены, хаотичны и толщина их не равномерна. В зоне рубца число молодых соединительнотканных клеток несколько больше, чем в нормальной роговице, кровеносных сосудов, которые имели местов период формирования грануляционной ткани. Прилегающая, в зоне рубца нормальная роговица и склера, имели обычное строение. Венозные синусы области лимба свободны. Эпителий над рубцом и за его пределами одинаковой толщины, с хорошо выраженной ба-зальной мембраной (рис. 2б).
Картина рубца на 35 день введения коллали-зина существенно отличалась от предыдущих наблюдений. Во время осмотра зона рубца едва заметна, границы ее нечетко очерчены, размеры значительно уменьшены. Роговица зоны рубца практически прозрачна, хотя от нормы все же отличается.
Гистологическая картина зоны рубца также значительно отличается от рубцов в предыдущие сроки наблюдений. Прежде всего границы рубца, они практически не выражены, провести грань между нормальной роговицей и зоной рубца не удается, т.е структура их практически не отличается. Зону рубца мы могли идентифицировать по толщине роговицы, фибробластов и фиброцитов (рис. 3).
Роговица на данном участке несколько толще нормы, покрыта многослойным плоским эпителием обычной толщины, расположение пластинок в зоне рубца параллельное к поверхности. Между пластинками соединительнотканных волокон в зоне содержатся несколько больше количество фибробластов, чем в нормальной роговице, что и отличает рубец от других участков роговицы. В целом зону рубца можно считать, практически схожей с нормальной роговицей, за исключением некоторой ее утолщенности и большого количества молодых форм соединительнотканных клеток. Прилегающая к зоне рубца часть роговицы, склеры и радужной оболочки по структуре от нормы не отличается.
ежемесячный научно-практический медицинский журнал
Рис. 1. А - Рубец роговицы после 1-го введения коллализина. Видна гиперплазия эпителия. Активация кератоцитов в участке дефекта стромы. Б - Рубец роговицы после 2-го введения коллализина-14 день. Окраска гематоксилин и эозином. Ув Х 230.
Рис. 2. А - Роговица на 21 день введения коллализина. Нормализация структуры стромы роговицы. Формирование уплотнение эластичных волокон. Б - Роговица на 28-й день введения коллализина рубец в роговице. Окраска гематоксилин и эозином. Ув Х 230.
Рис 3. 35-й день введения коллализина в зону дефекта в роговице. Окраска гематоксилин и эозином. Ув Х 230.
Выводы:
Таким образом, введение в зону рубца про-теолитического фермента коллализина в наших экспериментах по нашим данным способствовало формированию нормотрофического рубца. Плотность и упорядоченность волокон в зоне рубца происходило ускоренными темпами, к 35 дню отмечается уменьшение соединительнотканных волокон, характеризующих повреждения роговицы.
Список литературы:
1. Мороз З.И., Калинников Ю.Ю., Ковшун Е.В и др. Достижения школы С.Н.Федорова в области кератопластики
и кератопротезирования // Вестн. офтальмол 2007. №1-.С.22-25
2. Либман Е.В.Шахова Е.В. Слепота и инвалидность вследс-
твие патологии органа зрения в России //Вестн. Офтальмол. — 2006.- №1. — С.35-37
3. Джумагулов О.Д// Сборник научн ых трудов IV Всероссий-
ского школы офтальмологов. — Москва, 2008.
Сведения об авторах: Чинара Сапарбековна Жылкичиева - кафедра патологии МВШМ, ,
Омурова Н.С. - врач отделения микрохирургии глаза национального госпиталя.
