CC BY
61
домонад. Произошло резкое снижение активности ниртана и фенола. Появились штаммы, устойчивые к 3—4 и даже к 5 дезинфектан-там. Препаратами выбора в исследованных нами средах остаются диконит и хлорамин.
4. Приведенные данные указывают на необходимость пересмотра ранее разработанных рекомендаций по дезинфекции различных объектов с учетом чувствительности находящихся на них популяций микроорганизмов и установления надзора за устойчивостью к дезинфектантам.
Литература
1. Влодавец В. В.// Всесоюзное о-во эпидемиологов, микробиологов и паразитологов: Съезд, 17-й: Тезисы докладов,—Алма-Ата, 1989,—С. 143—145.
2. Гудкова Е. И.// Актуальные вопросы клинической микробиологии в неинфекцнонной клинике. - Барнаул, 1988.— Ч. I,— С. 48—49.
3. Лошонци Д. Внутрибольничные инфекции: Пер. с венг-М., 1978.
4. Мороз А. Ф., Анциферова //. Г., Баскакова Н. В. и др. Синегнойная инфекция,— М., 1988.
5. Семина Н. А. // Всесоюзная конф. «Актуальные проблемы нозокомиальных инфекций и лекарственной устойчивости микроорганизмов, 1-я: Тезисы докладов.— М„ 1986,— С. 228 - 230.
6. Трухина Г. М., Соколова Н Ф , Иойриш 'А. М., Смирнова М. //.//Гиг. и сан,— 1985. - № 5,—С. 82—84.
7. Chulasiri М. U., Noonai A.. Sookkawi N. // Reistance of Microorganisms to Disinfectants and Antibiotics.— Poznan. 1984,— P. 21.
8. Hideoni N.. Hiroyuki K. //J. clin. Microbiol.—1982,-Vol. 15, N 1,— P. 166—168.
9. Krasilnikov A. P.. Adarchenko A. A. // Handbuch der Antiseptik.—Berlin, 1987.— Bd 2.-- S. 123-142.
10. Rutala W. A.. Cole E. C. //J. infect. Control. - 1984.— Vol. 5, N 5,- P. 215-218.
11. Yoshimichi N.. Asakatsu S.. Noboru Т., Nobuo R. // Nagoya J. rned. Sci.- 1985.— Vol. 47. N 3—4,— P. 101 — 112.
Поступила 30.01.92
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1993 УДК 615.917:547.477.11.015.4.07
Н. А. Сидоренко, С. Е. Хипко, Н. Г. Щербань', В. И. Карасев, В. Д. Черненко, О. М. Карабан
ОСОБЕННОСТИ ТОКСИКОДИНАМИКИ ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПУТЯХ
ПОСТУПЛЕНИЯ в ОРГАНИЗМ
Харьковский медицинский институт
Лимонная кислота— окситрикарбаллиловая кислота — находит широкое применение в пищевой промышленности [6], а также входит в состав ополаскивающих средств для посуды [3].
Известно, что лимонная кислота относится к малотоксичным соединениям, обладает слабо выраженными кумулятивными свойствами, не проявляет мутагенную активность в тесте Эймса [3, 7], обладает значительным антиокислительным потенциалом [4].
Задачей настоящей работы явилось изучение особенностей токсикодинамики лимонной кислоты в подостром эксперименте при пероральном, эпикутанном и эпибульбарном путях поступления.
Опыты поставлены на половозрелых нелинейных белых крысах массой 200—230 г, кроликах и морских свинках массой 250—300 г (преимущественно белой масти).
Характер токсического действия лимонной кислоты изучали в условиях 30-кратной перораль-ной затравки белых крыс (5 раз в неделю) в дозе '/.о Ю50 (0,62 г/кг).
В качестве интегральных показателей, помимо общего состояния и выживаемости, регистрировали динамику массы тела. О состоянии трофических процессов во внутренних органах судили по изменению коэффициентов их массы.
О реакции системы крови в ответ на воздействие лимонной кислоты (после 15 и 30 затравок) судили по содержанию эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина и ретикулоцитов. Учитывая тот факт, что измененне активности некоторых ферментов характерно для патологии определенных органов или тканей, мы сочли необходимым исследовать ферменты, адекватно отражающие функциональное состояние печени и почек. Активность у-глутамилтранспептидазы (ГТП) в сыворотке крови исследовали фотометрическим
методом [5], активность сывороточной холин-эстеразы (ХЭ)—рН-метрическим методом [1], а для определения активности щелочной фос-фатазы (ЩФ), АСТ и АЛТ применяли метод, описанный В. Г. Колбом и В. С. Камышнико-вым [2]. Оценка раздражающего действия проведена в соответствии с требованиями методических указаний «К постановке исследований по изучению раздражающих свойств веществ и обоснованию ПДК избирательно действующих веществ в воздухе рабочей зоны».
Для изучения кожно-резорбтивного действия лимонной кислоты применяли методы и приемы, описанные в соответствующих методических рекомендациях «Оценка воздействия вредных химических соединений на кожные покровы и обоснование предельно допустимых уровней загрязнения кожи». С этой целью Д хвоста белых крыс опускали в 10 % водный раствор лимонной кислоты. Аппликации осуществляли 20-крат-но при ежедневной 4-часовой экспозиции.
Определение сенсибилизирующих свойств лимонной кислоты проводили методом комплексной сенсибилизации. Для этого в наружную поверхность уха морских свинок вводили 50 мкг лимонной кислоты, спустя 10 дней на кожу, предварительно освобожденную от волосяного покрова, в течение 7 дней наносили 50 % раствор испытуемого препарата. После 7 аппликаций в область спины внутрикожно вводили разрешающую дозу в объеме 0,2 мл, которая была в 10 раз больше сенсибилизирующей дозы. Контрольные животные получали соответственно растворитель (физиологический раствор).
Для изучения степени напряженности иммунитета к дифтерии и столбняку использовали сыворотку крови белых крыс. Кровь у контрольных животных брали на 28-й и 45-й дни после
Активность некоторых ферментов в сыворотке крови белых крыс при лодострой пероральной затравке лимонной кислоты
Фермент, усл. ед 1S затравок 30 затравок
контроль опыт контроль опыт
ACT 0.05±0.001 0.12±0,001* 0,08±0.001 0,23±0.0И
АЛТ 0,11 ±0,01 0.27±0,0Г 0,14 ±0,001 0.22±0.01'
1ЦФ 11.4 ±0,9 12,3±0,4 11.0±0.8 21,4 ±0,1 •
ГТП 0.12±0.01 0,16±0.001 0.12±0.008 0,41 ±0.01*
ХЭ
Примечание. Звездочка — достоверные различия с
контролем (р<0,05).
вакцинации АДС-М-анатоксином. Все животные были иммунизированы 2-кратно. Подопытные животные, вакцинированные АДС-М-анатоксином, получали лимонную кислоту перораль-но в дозе 0,6 г/кг в течение 3 нед. Подопытных животных забивали на 28-й и 45-й дни после иммунизации. Для определения специфических антител к дифтерии и столбняку применяли реакцию пассивной гемагглютинации со стандартными диагностикумами. Уровень 0-лизи-нов и лизоцима определяли до проведения опыта (фоновые показатели) и на 21—25-й день после второй иммунизации АДС-М-анатоксином на фоне затравки лимонной кислотой.
При изучении характера токсического действия лимонной кислоты в условиях 30-кратно-го перорального введения выявлено, что исследуемое вещество не оказывает гемотоксического действия и не вызывает изменений динамики массы тела и значений коэффициентов массы внутренних органов.
При исследовании активности ферментов в сыворотке крови крыс выявлено увеличение активности АЛТ, ACT, ГТП после 15 и 30 затравок (см. таблицу). Активность ГТП увеличивается параллельно росту активности 1ДФ, активность сывороточной холинэстеразы оставалась в пределах физиологических колебаний.
Выявленные изменения активности некоторых ферментов в сыворотке крови, вероятно, свидетельствуют о напряжении компенсаторно-приспособительных процессов в печени, подтверждением чего являются гистоморфологические исследования. Так, в печени крыс выявлено повышение полиплоидии гепатоцитов, появление двуядерных гепатоцитов и клеток с крупными светлыми ядрами со множеством ядрышек. Возможным отражением усиления компенсаторно-приспособительных процессов в почках у животных этой же группы является набухание ба-зальных мембран, сужение мезангиума.
При эпикутанном поступлении лимонной кислоты изменений исследованных показателей не выявлено.
Местное раздражающее действие лимонной кислоты исследовали путем внесения вещества в конъюнктивальный мешок глаз кроликов. Результаты экспериментов показали, что лнмонная кислота вызывает слабую гиперемию слизистой оболочки, сохранявшуюся в течение первых 2 ч после внесения вещества. В течение последующих 2 нед патологических изменений слизистой оболочки и роговицы не отмечено.
Таким образом, на основании полученных данных можно сделать вывод, что лимонная кислота не оказывает кожно-резорбтивного и раздра-
жающего действия на экспериментальных животных.
Наряду с оценкой особенностей токсикодина-мики лимонной кислоты изучали ее сенсибилизирующие свойства. Критерием сенсибилизации служили кожные проявления, которые оценивали в баллах, а также диагностические тесты, такие, как реакция специфической агломерации лейкоцитов и тест непрямой дегрануляции базо-филов. Проведенные исследования не выявили сенсибилизирующего действия лимонной кислоты.
Анализ результатов, полученных при сравнении титров гемагглютининов к дифтерии у животных, получавших лимонную кислоту (забой животных на 28-й день), показал, что титр в опытной группе был равен 1:150, а в контрольной— 1:640. На 45-й день наблюдений средние титры в опытной группе составляли 1:213, в контрольной—1:720, что свидетельствует об ингибирующем влиянии лимонной кислоты на индуктивную фазу формирования антитоксического иммунитета к дифтерии.
При изучении влияния лимонной кислоты на антитоксический противостолбнячный иммунитет было выявлено, что уже на 28-й день после иммунизации на фоне введения изучаемого препарата титр в опытной группе был равен 1:240 (контроль 1:880). На 45-й день после вакцинации титр в опытной группе составлял 1:1066 (контроль 1:720). Таким образом, лимонная кислота может оказывать определенное воздействие на формирование антитоксического иммунитета к дифтерии и столбняку.
Пероральная затравка подопытных животных лимонной кислотой сопровождалась повышением уровня р-лизинов при одновременном угнетении выработки лизоцима. При 2-кратной иммунизации животных АДС-М-анатоксином с интервалом 45 дней и затравке их лимонной кислотой после иммунизации значительно угнеталась выработка лизоцима по сравнению с фоновыми показателями и показателями у животных, иммунизированных АДС-М-анатоксином.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что лимонная кислота угнетает выработку неспецифических гуморальных защитных факторов организма.
Выводы. 1. Изучение особенностей токсико-динамики лимонной кислоты при разных путях поступления ее в организм свидетельствует, что в наибольшей мере биологическое действие лимонной кислоты проявляется при пероральном поступлении.
2. В условиях подострого перорального поступления в дозе 1 /ю LD50 лимонная кислота вызывает повышение активности ряда ферментов в сыворотке крови, что может свидетельствовать о напряжении компенсаторно-приспособительных процессов в печени.
3. Лимонная кислота не оказывает кожно-резорбтивного, раздражающего и сенсибилизирующего действия.
4. При пероральном поступлении лимонная кислота оказывает ингибирующее влияние на индуктивную фазу иммуногенеза при формировании иммунитета к дифтерии и столбняку.
Л итература
1. Асатиани В. С. Ферментные методы анализа. М.. 1969.— С. 492—494.
2. Колб В. Г., Камышников В. С. Справочник по клинической биохимии,—Минск, 1982. С 147—152.
3. Кравченко Е. Г., Дерзкая А. С. // Новые методы гигиенического контроля за применением полимеров в народном хозяйстве,—Киев, 1981,—С. 168—169.
4. Кривоносое М. В., Халанский А. А. // Фармакология: состояние и перспективы исследований. Харьков, 1990. С. 168-169.
5. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике,—М„ 1987,—С. 192-194.
6. Смирнов В. Л. Пищевые кислоты,— М.. 1983.
7. Al-Ani Farouk V.. Altami Satah /(.//Mutai. Res, 1988,- Vol. 206, N 4,— P. 467-470.
Поступила 28.11.91
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 993 УДК 615.285.7.015.4:612.6631.07
Н. Р. Шепельская, В. П. Данилюк,, Н. В. Толстова
ОЦЕНКА КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ КОМПОНЕНТОВ ПРЕПАРАТА ХАРЭЛЛИ НА РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
НИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров и пластических масс, Киев
Изучение комбинированного действия пестицидов на гонады и репродуктивную функцию является одним из важнейших аспектов в проблеме репродуктивной токсичности. Хлорсульфурон и эллипс входят в состав комбинированного пестицида харэлли. Исследования, проведенные нами ранее, показали, что препаративная форма хлорсульфурона (препарат 1) в дозах на уровне порога хронического действия, установленного по интегральным показателям (Limch intCgr). и на порядок ниже оказывает гонадотоксическое действие на самок и самцов белых беспородных крыс; препарат эллипс не дает гонадотоксического эффекта в дозах, близких к Limch. ¡ntegr.. и на порядок выше. Учитывая вышеизложенное, представлялось интересным как с практической, так и с теоретической точки зрения установить тип и характер комбинированного действия этих двух препаратов на гонады экспериментальных животных, определить качественные и количественные переходы в реакции репродуктивной системы на химические раздражители различной интенсивности при изолированном и комбинированном воздействии.
В эксперименте использовано 80 белых беспородных крыс обоего пола, разделенных на 8 групп по 10 животных в каждой. 3 группы самцов и 3 группы самок получали хлорсульфурон, эллипс и их комбинацию в дозах 3,0; 1,5 и 3,0± ±1,5 мг/кг соответственно. 2 группы животных (10 самцов и 10 самок) служили контролем.
Исследуемые дозы выбраны с учетом количественного соотношения хлорсульфурона и эллипса в препаративной форме, а также результатов предыдущего изучения гонадо- и общетоксиче-
ского действия хлорсульфурона и эллипса. Препараты вводили ежедневно внутрижелудочно с помощью зонда в течение 2,5 мес.
Критериями оценки гонадотоксического эффекта были выбраны наиболее чувствительные и информативные показатели, оказавшиеся лимитирующими при воздействии препарата 1, характеризующие гормональный статус самок, а также результаты морфометрическогс исследования семенников.
По окончании затравки у самок изучали функциональные показатели состояния гонад. Оценивали состояние эстрального цикла, продолжительность и частоту отдельйых его стадий. У самцов изучали коэффициенты относительной массы семенников и их придатков, а также состояние сперматогенеза.
Полученные результаты обрабатывали с помощью множественного регрессионного анализа [4] и описывали изучаемый процесс в виде многочлена первой степени [1) в виде: у=Ь0-\--(-¿> 1X1-1-¿>2*212* 1*2. При изучении взаимодействия компонентов смесевого препарата рассчитывали коэффициент комбинированного действия эллипса и хлорсульфурона [3).
Результаты представлены в табл. 1,2.
На основании проведенных исследований констатировано, что в изученных условиях хлорсульфурон при изолированном воздействии оказывает гонадотоксическое влияние на самок крыс. Наблюдаются выраженные сдвиги гормонального статуса, проявляющиеся значительным увеличением продолжительности эстрального цикла, и нарушением соотношения величин отдельных его стадий, что коррелирует с изменениями, индуцированными препаратом 1, хотя ка-
Таблица 1
Состояние эстрального цикла самок крыс, подвергавшихся воздействию хлорсульфурона, эллипса и их комбинации (/И±т)
Препарат Продолжительность Длительность стадии, сут
цикла, сут эструс метаэструс диэструс проэструс
Контроль 5,7±0,7 1,82±0,46 1,06 it 0,2 2,48±0,86 0,34 ±0,1
Хлорсульфурон 10,53±1,2* 1,58±0,22 2,65±0,65* 5,25±1,03* 0,45±0,22
Эллипс 6,94 ±0,93 1,38±0,14 1,17±0,28 4,04±1,02 0,38±0,12
Харэлли 6,46± 0,92 1,84±0,38 1,23±0,33 2,99±0,78 0,39±0,09
Примечание. * достоверные различия с контролем (р<0,05).
