CC BY
7
Л итература
1. Асатиани В. С. Ферментные методы анализа. М.. 1969.— С. 492—494.
2. Колб В. Г., Камышников В. С. Справочник по клинической биохимии,—Минск, 1982. С 147—152.
3. Кравченко Е. Г., Дерзкая А. С. // Новые методы гигиенического контроля за применением полимеров в народном хозяйстве,—Киев, 1981,—С. 168—169.
4. Кривоносое М. В., Халанский А. А. // Фармакология: состояние и перспективы исследований. Харьков, 1990. С. 168-169.
5. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике,—М„ 1987,—С. 192-194.
6. Смирнов В. Л. Пищевые кислоты,— М.. 1983.
7. Al-Ani Farouk V.. Altami Satah /(.//Mutai. Res, 1988,- Vol. 206, N 4,— P. 467-470.
Поступила 28.11.91
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 993 УДК 615,285,7.015.4:612.6631.07
Н. Р. Шепельская, В. П. Данилюк,, Н. В. Толстова
ОЦЕНКА КОМБИНИРОВАННОГО ДЕЙСТВИЯ КОМПОНЕНТОВ ПРЕПАРАТА ХАРЭЛЛИ НА РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
НИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров и пластических масс, Киев
Изучение комбинированного действия пестицидов на гонады и репродуктивную функцию является одним из важнейших аспектов в проблеме репродуктивной токсичности. Хлорсульфурон и эллипс входят в состав комбинированного пестицида харэлли. Исследования, проведенные нами ранее, показали, что препаративная форма хлорсульфурона (препарат 1) в дозах на уровне порога хронического действия, установленного по интегральным показателям (Limch intCgr). и на порядок ниже оказывает гонадотоксическое действие на самок и самцов белых беспородных крыс; препарат эллипс не дает гонадотоксического эффекта в дозах, близких к Limch.mtegr., и на порядок выше. Учитывая вышеизложенное, представлялось интересным как с практической, так и с теоретической точки зрения установить тип и характер комбинированного действия этих двух препаратов на гонады экспериментальных животных, определить качественные и количественные переходы в реакции репродуктивной системы на химические раздражители различной интенсивности при изолированном и комбинированном воздействии.
В эксперименте использовано 80 белых беспородных крыс обоего пола, разделенных на 8 групп по 10 животных в каждой. 3 группы самцов и 3 группы самок получали хлорсульфурон, эллипс и их комбинацию в дозах 3,0; 1,5 и 3,0± ±1,5 мг/кг соответственно. 2 группы животных (10 самцов и 10 самок) служили контролем.
Исследуемые дозы выбраны с учетом количественного соотношения хлорсульфурона и эллипса в препаративной форме, а также результатов предыдущего изучения гонадо- и обшетоксиче-
ского действия хлорсульфурона и эллипса. Препараты вводили ежедневно внутрижелудочно с помощью зонда в течение 2,5 мес.
Критериями оценки гонадотоксического эффекта были выбраны наиболее чувствительные и информативные показатели, оказавшиеся лимитирующими при воздействии препарата 1, характеризующие гормональный статус самок, а также результаты морфометрическогс исследования семенников.
По окончании затравки у самок изучали функциональные показатели состояния гонад. Оценивали состояние эстрального цикла, продолжительность и частоту отдельйых его стадий. У самцов изучали коэффициенты относительной массы семенников и их придатков, а также состояние сперматогенеза.
Полученные результаты обрабатывали с помощью множественного регрессионного анализа [4] и описывали изучаемый процесс в виде многочлена первой степени [1) в виде: у=Ь0-\--\-Ь\Х\-{-Ь2Х2-\-Ь\2Х\Х2. При изучении взаимодействия компонентов смесевого препарата рассчитывали коэффициент комбинированного действия эллипса и хлорсульфурона [3).
Результаты представлены в табл. 1,2.
На основании проведенных исследований констатировано, что в изученных условиях хлорсульфурон при изолированном воздействии оказывает гонадотоксическое влияние на самок крыс. Наблюдаются выраженные сдвиги гормонального статуса, проявляющиеся значительным увеличением продолжительности эстрального цикла, и нарушением соотношения величин отдельных его стадий, что коррелирует с изменениями, индуцированными препаратом 1, хотя ка-
Таблица 1
Состояние эстрального цикла самок крыс, подвергавшихся воздействию хлорсульфурона, эллипса и их комбинации (/И±т)
Препарат Продолжительность Длительность стадии, сут
цикла, сут эструс метаэструс диэструс проэструс
Контроль 5,7±0,7 1,82±0,46 1,06 it 0,2 2,48±0,86 0,34 ±0,1
Хлорсульфурон 10,53±1,2* 1,58±0,22 2,65±0,65* 5,25±1,03* 0,45±0,22
Эллипс 6,94 ±0,93 1,38±0,14 1,17±0,28 4,04±1,02 0,38±0,12
Харэлли 6,46± 0,92 1,84±0,38 1,23±0,33 2,99±0,78 0,39±0,09
Примечание. * достоверные различия с контролем (р<0,05).
Таблица 2
Морфометрические показатели состояния семенников и придатков крыс, подвергавшихся воздействию хлорсульфурона, эллипса и их
комбинации (М±т)
Показатель Препарат
хлорсульфурон эллипс харэлли контроль
Масса тела, г 343,13±23,87 356,4± 12,86 327,22± 10,71 333,75± 12,6
Масса семенников, г 3,64 ±0.15 3,3±0,19 3,29±0,1 3,62±0,12
Коэффициенты массы семенников 5,36±0.22 4.72±0,34 5,07±0,19 5,25±0,13
Масса придатков, г 1,15±0.05 1,15±0,04 1,12±0,03 1,15±0,04
Коэффициенты массы придатков 1,71 ±0.08 1,64±0,08 1,73±0,07 1,79 ±0,07
Индекс сперматогенеза 3,5±0.02 3,5±0,014 3,49±0,03 3,49±0,03
Количество канальцев со слущенным
эпителием, % 2,5±0.33 2,17±0,88 1,5±0,53 1,67 ±0,35
Количество канальцев с 12-й стадией
мейоза, % 2,17±0,53 2,33±0,53 2,83±0,35 2,33±0,71
Примечание. Во всех случаях р>0,05.
чественныи спектр нарушении несколько отличается при воздействии этих двух препаратов.
Вопреки предположениям, основанным на результатах предыдущего изучения препарата 1, хлорсульфурон в настоящих условиях не оказывал токсического влияния на гонады самцов. Этот факт нуждается в дальнейшем изучении, поскольку может свидетельствовать о том, что токсическое действие на гонады самцов оказывает не действующее вещество (хлорсульфурон), а другие компоненты, входящие в состав препаративной формы, или их взаимодействие. Что касается эллипса, то в подтверждение ранее полученных результатов в условиях настоящего эксперимента он также не обнаружил гонадотокси-ческой активности.
Совместное введение двух препаратов также не оказывало гонадотоксического влияния ни на самок, ни на самцов. При этом наблюдался довольно редко встречающийся тип комбинированного действия — явление полной интерференции [2[, когда эффект одного из компонентов смеси, не проявляющийся изолированно, вызывает достоверное ослабление эффекта другого компонента при совместном их воздействии.
После обработки результатов эксперимента с использованием корреляционного и регрессионного анализа получены полиномиальные зависимости, аппроксимирующие комбинированное действие эллипса и хардина на длительность эстрального цикла (1) и длительность стадии метаэструса (2): ¿/=7,41 —0,7лг|1, 1л-2— 1,34x^2 (1), 0=1,53—0,33*1+0,413*2—0,38*1*2 (2).
В первом случае (при р=0,05) незначимым
оказался коэффициент 0,71, описывающий влияние эллипса на изучаемый процесс, но эффект взаимодействия статистически значим. Он приводит к нормализации длительности эстрального цикла у животных, подвергавшихся воздей-. ствию харэлли. Разноименные знаки при коэффициентах ¿>| и Ь2 регрессии 1, а также рассчитанный коэффициент комбинированного действия (0,106) указывают на разнонаправленное действие ксенобиотиков. Изолированное введение хлорсульфурона вызывает повышение длительности цикла на 2,2 сут. Поверхность регрессии, определяемая уравнением 1, представлена на рис. 1.
Во втором случае (длительность стадии метаэструса) все коэффициенты оказались значимыми. Действие двух ксенобиотиков разнонаправленно, при совместном введении время стадии метаэструса не изменяется. При изолированном введении хлорсульфурона продолжительность исследованной фазы эстрального цикла удлиняется на 0,8 сут, при одновременном введении эллипса наблюдается укорочение времени метаэструса до нормы. Об этом свидетельствуют знак и величина коэффициента Ь\2. Коэффициент комбинированного действия составил 0,09 и был статистически значим. Поверхность функции отклика, отображающей комбинированное действие компонентов препарата харэлли на длительность стадии метаэструса, представлена на рис. 2.
Интерпретация коэффициентов комбинированного действия, анализ уравнений регрессии позволяют констатировать, что взаимодействие эллипса и хлорсульфурона менее аддитивного.
Рис. I. Поверхность функции отклика, описывающая влияние компонентов смесевого препарата харэлли на длительность эстрального цикла лабораторных животных.
По оси X) — интервел варьирования доз эллипса в кодированном виде; по оси Хз — интервал варьирования доз хлорсульфурона в кодированном виде; по оси у — длительность эстрального цикла (в сут).
Рис. 2. Поверхность функции отклика, описывающая влияние компонентов смесевого препарата харэлли на длительность стадии метаэструса лабораторных животных.
По оси Х\ — интервал варьнро вания доз эллипса в кодирован ном виде; по оси Хг — интервал варьирования доз хлорсульфурона в кодированном внде; по оси у длительность стадии метаэструса (в сут).
Выводы. 1. Препарат хлорсульфурон оказывает токсическое влияние на гонады самок крыс, а препарат эллипс не оказывает гонадо-токсического действия ни на самок, ни на самцов.
2. При комбинированном воздействии хлор-сульфурона и эллипса гонадотоксического эффекта не обнаружено. Характер взаимодействия компонентов препарата харэлли менее аддитивный (полная интерференция).
Литература
1. Благуш П. Факторный анализ с обобщениями: Пер. с чеш — М„ 1989.
2. Машковский Ш. Д. // Исследования по количественной химиотерапии.—М., 1943,—Вып. 12,—С. 30—42.
3. Нагорный П. А. Комбинированное действие химических веществ и методы его гигиенического изучения.— М., 1984.
4. Себер Дж. Линейный регрессионный анализ: Пер. с англ.— М„ 1980.
Поступила 24.10.91
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ. 1993 УДК 614.7:1615.31:546.281.099^07
Г. Б. Барсельянц, А. Э. Татевосян, Н. А. Мовсесян, Ю. М. Варежкин, А. Н. Михайлова
ТОКСИКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА НЕКОТОРЫХ КРЕМНИЙОРГАНИЧЕСКИХ
СОЕДИНЕНИЙ
Филиал НИИ гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров н пластических масс, Ереван; НИИ химии и технологии
кремнийорганических соединений, Москва
Кремнийорганические соединения (КОС) благодаря своим уникальным техническим свойствам (термостойкость, гидрофобность, антиадгезион-ность) широко используются в медицинской, микробиологической, пищевой промышленности, при производстве косметических средств и др. [3J. Вместе с тем, токсичность и биологические свойства новых КОС до настоящего времени не исследовались.
Целью настоящей работы явилось изучение токсиколого-гигиенических свойств 3 кремнийорганических соединений: 1,3-бис диметил (третбу-тиламино) силил - 2,2,4,4 - тетраметилцнклодисил-азана (D-TBA), 1,3-бис (диметилэтоксисилил)-2,2,4,4-тетраметилциклодисилазана (D-Et) и поли-оксиалкиленового блоксополимера (КЭП-8), получаемых путем высокотемпературной конденсации органоциклотрисилазанов с диорганодихлор-силанами с последующей обработкой целевого продукта органическими аминами, спиртами или эфирами в среде полярных растворителей.
D-TBA — новое отечественное КОС, исходный продукт для получения высокомолекулярных блок-сополимеров со специфическими свойствами.
D-TBA — бесцветная прозрачная жидкость, хорошо растворимая в органических растворителях (бензол, толуол, гексан, гептан и др.), растворимость в воде 60 мг/л. Температура кипения 299—300 °С, мол. масса 404,9, плотность 0,905 г/см3, показатель преломления 1,4529. Содержание основного вещества 99 %.
D-Et — кремнийорганическое соединение, предназначаемое для получения новых блоксополи-меров, представляет собой бесцветную прозрачную жидкость, хорошо растворимую в органических растворителях. Растворимость в воде 50 мг/л, температура кипения 115—116°С (8 мм рт. ст.), мол. масса 350,77, плотность 0,937 г/см3, показатель преломления 1,4332. Содержание основного вещества 99 %.
КЭП-8 применяется в качестве ленорегулято-ра при получении пенополиуретанов. Это вязкая прозрачная смолообразная жидкость янтарного цвета, хорошо растворимая в органических растворителях и воде. Мол. масса 40000—
45000, вязкость 2000—5500 сСт, рН водного раствора 6,0—7,5.
Эксперименты по изучению токсического действия КОС проводили на белых беспородных крысах, мышах и кроликах в соответствии с методическими указаниями [7, 8].
Ь05о веществ рассчитывали с помощью пробит-анализа [10].
О влиянии КОС на центральную нервную систему (ЦНС) судили по способности ЦНС суммировать подпороговые электрические импульсы [9], поведенческим реакциям [1, 6] и статической работоспособности [11].
Морфологический состав периферической крови у крыс изучали общепринятыми методами [5].
Функциональное состояние почек оценивали путем определения диуреза при водной нагрузке, плотности мочи [12], содержания хлоридов в моче и крови, мочевины в моче.
О функциональном состоянии печени судили по активности аминотрансфераз, щелочной фос-фатазы, содержанию общего белка в сыворотке крови [4].
Результаты экспериментов обрабатывали методом вариационной статистики [2].
ЬОбо препарата для крыс составила
7350 мг/кг, для мышей — 5590±607 мг/кг. ЬО50 Э-ТВА для крыс равна 2610±580 мг/кг, для мышей — 2700±280 мг/кг.
ЬОво препарата КЭП-8 для крыс составила 7310±806,3 мг/кг, для мышей — 2240±374 мг/кг.
Клиническая картина острой интоксикации КОС характеризовалась возбуждением, сменявшимся угнетением, нарушением координации движений, заторможенной реакцией на раздражитель. Животные становились неопрятными и погибали в течение 48 ч после введения веществ. Выжившие животные через 1 нед по внешнему виду не отличались от контрольных.
Для определения пороговых доз вещества вводили крысам в желудок однократно в дозах 'Д и '/ю ЬО50. Через 3 и 24 ч после введения КОС исследовали морфологический состав периферической крови, поведенческие реакции,
