CC BY
39
УДК 616.69-06:[616.98:576.858.1]-07:[616.155.3:575.113]-07 DOI: 10.22141/2224-0721.13.1.2017.96759
Шмига Т.В., Гаевська В.Ю., Гаевський В.Ю.
Льв1вський нацональний медичний ун1верситет 1м. Данила Галицького, м. Льв1в, Укра'на
Особливост фенотипування лiмфоцитiв у хворих з активованою рецидивуючою герпетичною шфекщею першого/другого типу та порушенням репродукцп
For cite: Mezhdunarodnyi Endokrinologicheskii Zhurnal. 2017;13:61-5. doi: 10.22141/2224-0721.13.1.2017.96759
Резюме. Метою дослдження був анал'з особливостей 3MiH субпопуляцп л'мфоцит'в за даними ¡муно-грами у хворих ¡з рецидивуючою герпетичною ¡нфекц'1ею та репродуктивними порушеннями. Матер'али та методи. Вивчено особливост фенотипування л'мфоцит'в у 120 хворих з активованою рецидивуючою герпетичною ¡нфекц'1ею першого/другого типу (ВПГ 1/2), серед яких у 63 па^енлв була д'агностована без-пл'щн'ють. Результати. Виявлено збльшення рiвня клерних клтин: CD16+/56+ (ЫК-кл'тин) при пом'/рно рецидивуюч':й ¡нфекцн (1-5 рецидив':в протягом року) та CD3+/8+ (Т-супресорiв/кiлерiв) при часто рециди-вуючiй ¡нфекцн (6 i б'шьше рецидив':в протягом року). Висновки. У безплдних хворих ¡з рецидивуючою '¡нфекц '1ею ВПГ 1/2 спостер':гався дефщит клтин ¡з супресорною активнстю: CD4+CD25+CD127--лiмфоцитiв (регуляторних Т-клтин) та CD3+/8+-лiмфоцитiв (Т-супресорiв/кiлерiв). Ключовi слова: простий герпес; рецидив; безпл'щн'ють
C2> ■ gj ® Оригiнaльнi до^дження
/Original Researches/
International journal of endocrinology
Вступ
При шф^ванш оргашзму вiрусом простого герпесу (ВПГ) захисну роль вщграють рiзноманiтнi специфiчнi та неспецифiчнi гуморальш й клггинш фактори iмунiтету, пов'язаш з кооперащею вiрус-нейтралiзуючих антитш, макрофапв, штерферону, лейкоципв та лiмфоцитiв [6]. Лiмфоцити — головш клггини iмунноl системи, що координують i здш-снюють iмунну вiдповiдь внаслiдок продукування запальних цитоюшв, вiдповiдають за формування специфiчного iмунiтету, здiйснюють функцiю iмун-ного нагляду в органiзмi, забезпечують захист вщ усього чужорiдного, зберiгаючи генетичну сталють внутрiшнього середовища [7, 17, 20, 21].
Рецидивуюча герпетична iнфекцiя, особливо з машфестащею на шкiрi та слизових оболонках, е одним з найбшьш поширених видiв герпетично! шфекци, спричинено! вiрусом простого герпесу першого та другого титв (ВПГ 1/2) [2, 4]. Бшьш тяжкi фор-ми пов'язанi з ураженням очей, генiталiй, внутрш-шх органiв i центрально! нервово! системи [8, 13].
1снуе все бшьше доказiв того, що вiруснi шфекци вiдiграють певну роль у патогенезi жшочо! i чоловь
чо! безплщносп [14]. Численнi данi клiнiчних спо-стережень свiдчать про те, що хрошчна герпетична iнфекцiя е одним iз факторiв зниження репродук-тивних можливостей як ж1ночого, так i чоловiчого органiзму фертильного вiку [9]. Простий герпес 1-го типу виявлений у 29 % обстежених жшок з безплщ-нiстю, а 2-го — у 34 %. У патолопчний процес втя-гуеться передмiхурова залоза та яечки в чоловЫв, матковi труби в ж1нок, що може спричинити без-плiднiсть [14].
У наш час недостатньо вивчеш iмунологiчнi ме-ханiзми реактивацп герпетично! шфекци, що лежать в основi рецидивування захворювання [1]. Викорис-тання в клiнiчнiй практицi методiв ощнки iмунного статусу хворих з рiзноманiтними проявами герпетично! патологи виявило в них iмунологiчнi пору-шення, що вiдiграють суттеву роль у персистенци вь русу та патогенезi рецидивуючого простого герпесу. Вщомо, що при порушеннях iмунного статусу герпетична шфекцш набувае бiльш тяжкого переб^ з частими та тривалими рецидивами, що пов'язано з недостатшстю iмунiтету або з надмiрною iмунною реакцiею [16, 22].
© <^жнародний ендокринологiчний журнал», 2017 © «International Journal of Endocrinology», 2017
© Видавець Заславський О.Ю., 2017 © Publisher Zaslavsky O.Yu., 2017
Для кореспонденцп: Шмига Т.В., Львiвський нацюнальний медичний унiверситет iMeHi Данила Галицького, вул. Пекарська, 69, м. Львiв, 79010, Украина; e-mail: endocr@i.ua
For correspondence: T. Shmyga, Danylo Halytskyi Lviv National Medical University, Pekarska st., 69, Lviv, 79010, Ukraine; e-mail: endocr@i.ua
Вщсутнють повно! елiмiнацГi вiрусу простого герпесу з оргашзму сприяе серйозним порушен -ням iмунiтету, результатом яких при рецидивуючiй формi активовано! герпетично! шфекцп е змiни функцюнально! активност та загально! кiлькостi лiмфоцитiв, змши в системi iнтерферону, макрофа-гально-клггиннш ланцi [5, 12, 15, 18].
Глибокий аналiз стану клiтинного iмунiтету у хворих на рецидивуючий герпес дозволив зробити висновок про неповноцiннiсть ще! ланки iмунiте-ту у перiод як рецидиву, так i ремюп [19]. Це е вщ-дзеркаленням вторинного iмунного дефiциту. Отже, при рецидивуючому герпесi в першу чергу страждае клiтинний iмунiтет. Проте чи впливае глибина по-рушень у клггинному iмунiтетi хворих на частоту рецидивiв ВПГ 1/2, поки остаточно не з'ясовано.
Патогенетичш аспекти безплiдностi, зумовлеш iмунологiчними факторами, все ще не до кшця ви-явленi. Тому метою нашого досЛдження був аналiз особливостей змiн субпопуляцп лiмфоцитiв за да-ними iмунограми у хворих з рецидивуючою шфек-цiю ВПГ 1/2 та репродуктивними порушеннями.
Отримаш результати дослщжень допоможуть розкрити взаемозв'язок м1ж рецидивуючою гер-петичною шфекщею та iмунними порушеннями у хворих за умов безплщносп, частково визначити причини, що !! зумовлюють.
Матерiали та методи
Проведено проспективне дослiдження 120 хворих вжом до 35 рокiв i понад 50 рокiв, з верифжо-ваним дiагнозом «рецидивуючий простий герпес» та наявшстю рецидиву герпетично! шфекцп про-тягом останнього мiсяця. Верифiкацiя дiагнозу здiйснювалася на пiдставi клтчно! картини реци-дивуючо! герпетично! шфекцп, даних анамнезу, лабораторних критерпв (полiмеразна ланцюгова реакц!я: визначали к1льк1сть фрагментiв ДНК ВПГ 1/2 у кровц серолопчна дiагностика: виявляли анти-тша ^МВПГ1/2 та IgG ВПГ1/2 у сироватщ кров1). Контрольну групу становили 20 практично здоро-вих ос16 вщповщного в1ку. Критер!ями включення в контрольну групу були: вщсутшсть симптом1в ! ма-шфестацп герпетично! шфекцп протягом принаймш останнього року; в1дсутн1сть гострих шфекцш протягом принаймнi одного мюяця до моменту взяття кровц вщсутшсть хрон1чних запальних i авто!мунних захворювань. Додатково у дано! групи ос16 контро-лювався рiвень ^М ВПГ 1/2 та IgG ВПГ 1/2 у сироватщ кров! для виключення прихованого безсимп-томного переб^ хрошчно! герпетично! шфекцп.
Хвор1 були розподiленi на дв1 групи: за частотою рецидивiв (83 хвор1 з пом1рно рецидивуючою ш-фекщю ВПГ 1/2 i 37 хворих з часто рецидивуючою шфекщю ВПГ 1/2) та репродуктивною здатнiстю (63 плщних i 57 безплiдних).
Фенотипування л1мФоципв проводили !з за-стосуванням методу проточно! цитофлюориме-трп. Для дослiдження використовували анти-тша СD3-FITC/CD22-PE, СD3-FITC/CD4-PE, СD3-FITC/CD8-PE, СD3-FITC/CD (16+56)-РЕ,
CD4-FITC (Becton Dickinson Immunocytometry Systems), CD25-PE (Dako Cytomation), CD25-PC5, CD127-PE (Beckman Coulter); розчини для лiзису еритроцитiв, фжсацп лейкоцитiв (Becton Dickinson Immunocytometry Systems); для фжсацп i забарв-лення клiтин (eBioscience). Забарвлення клггин антитiлами до поверхневих i внутрiшньоклiтинних антигенiв проводили вiдповiдно до протоколiв ви-робникiв. Аналiз зв'язування антитГл з клiтинами виконували на проточному цитофлюориметрi FACS Calibur (Becton Dickinson, США) з використан-ням програмного забезпечення Cell Quest (Becton Dickinson Immunocytometry Systems). Лiмфоцити видГляли за параметрами прямого i бокового свгг-лорозсшвання. Активованi ефекторнi Т-л1мфоцити типували як регуляторнi Т-лiмфоцити — CD4+CD25brig+CD 127neg [11] вiдповiдно до мгжна-родних рекомендацiй.
Iмунологiчнi показники ощнювали за абсолютною i вiдносною ix кiлькiстю у венознш кровi хворих.
Статистична обробка отриманих результа-тiв дослiджень проводилась з використанням за-гальноприйнятих методiв вар1ацшно! статистики за допомогою пакета статистичних програм Excel 2002 та Statistika for Windows (Statsoft Ins, США) [10]. Рiвень вiрогiдностi визначали за крите-рieм Стьюдента [3].
Результати
Проведений aнaлiз результатiв фенотипування лiмфоцитiв у хворих iз рiзною частотою рецидивiв шфекцп ВПГ 1/2 показав збгльшення рiвня кГлер-них кл1тин — CD16+/56+ (NK-клiтин) у вщносних (26,3 ± 2,32 %; Р < 0,05) та особливо в абсолют -них значеннях (0,52 ± 0,09 г/л; Р < 0,01) пор1вняно з контрольною групою при пом1рно рецидивуючiй шфекцп (1—5 рецидив1в протягом року) даного в1-русу (табл. 1).
Зростання пулу 1нших кiлерниx клггин — CD3+/8+ (Т-супресорiв/кiлерiв) у вщносних (32,8 ± 2,73 %; Р < 0,01) i абсолютних значеннях (0,59 ± 0,09 г/л; Р < 0,01) пор1вняно з контрольною групою спостерь галось у хворих 1з частими рецидивами iнфекцГi ВПГ 1/2 (6 i бiльше рецидив1в протягом року) даного в1-русу. Пор1вняння р1вня CD3+/8+ кл1тин у хворих Гз пом1рним i частим рецидивуванням ВПГ 1/2 також виявило вГроггдне збгльшення кглькост1 цих клгган у хворих Гз частими рецидивами ще! iнфекцГi.
Обговорення
Анал1з субпопуляцшного складу л1мфоци-т1в плгдних i безплгдних хворих з рецидивуючою шфекщею ВПГ 1/2 показав (табл. 2), що р1вень CD16+/56+ (NK-клГтин) був тдвищений у вгднос-них (25,8 ± 2,75 %; Р < 0,05), а найбгльше — в абсолютних значеннях (0,50 ± 0,08 г/л; Р < 0,01) по-р1вняно з контрольною групою у пл1дних хворих. У безплгдних хворих була в1ропдно зб1льшена кгль-к1сть CD3+/8+ (Т-супресор1в/к1лер1в) у вгдносних (29,8 ± 2,19 %; Р < 0,05) i абсолютних значеннях (0,64 ± 0,09 г/л; Р < 0,01) пор1вняно з контрольною
62
Мiжнар0дний еНДОКрИНОЛОПЧНИй журнал, p-ISSN 2224-0721, e-ISSN 2307-1427
Том 13, № 1, 2017
iEI
Орипнальт Аосл1Аження /Original Researches/
групою i з плiдними хворими (Р < 0,05). Пере-6ir рецидивуючо! шфекщ! ВПГ 1/2 супроводжу-вався незначним збшьшенням вiдносних зна-чень Т-хелперiв/iндукторiв (CD3+/4+) до рiвня 31,5 ± 2,56 % (Р < 0,05) у безплщних хворих порГв-няно з плiдними.
Отримаш данi можуть свiдчити про дисфункщю Гмунно! системи у безплiдних хворих, на юнування яко! при рецидивах герпетично! шфекщ! i вказують ряд авторiв [1, 16, 22].
У хворих iз безплiднiстю спостерiгалось зменшен-ня абсолютно! кiлькостi регуляторних Т-клггин — CD4+CD25+CD127--лiмфоцитiв (0,02 ± 0,010 г/л; Р < 0,05) порiвняно з контрольною групою. Рiвень цих клггин був також вiрогiдно нижчим у безплщ-них хворих порiвняно з плiдними (Р < 0,05). Зни-ження рiвня CD4+CD25+CD127--лiмфоцитiв у безплщних хворих вказуе на послаблення супресорно! активностi цих клггин та можливу участь у форму-ваннi безплщность
Таблиця 1. Показники субпопуляц1йного складу л'мфоцитв у хворих з активованою рецидивуючою герпетичною ¡нфекщею першого/другого типу з урахуванням частоти рецидивiв (М ± m)
Показники Одиниця вимiру Здоровi (n = 20) XBopi (n = 120), кшьюсть рецидивiв за piK
1-5 (n = 83) 6 i бiльше (n = 37)
1 2
CD16+/56+-лiмфоцити % 18,80 ± 2,09 26,30 ± 2,32* 23,00 ± 2,81
Г/л 0,32 ± 0,04 0,52 ± 0,09** 0,40 ± 0,05
CD22+-лiмфоцити % 22,80 ± 2,08 25,30 ± 3,58 24,80 ± 3,37
Г/л 0,39 ± 0,08 0,52 ± 0,09 0,44 ± 0,08
CD3+-лiмфоцити % 69,50 ± 6,03 66,80 ± 5,03 69,10 ± 6,40
Г/л 1,13 ± 0,25 1,41 ± 0,50 1,22 ± 0,39
CD3+/4+-лiмфоцити % 26,10 ± 3,82 30,00 ± 3,05 28,00 ± 2,38
Г/л 0,45 ± 0,11 0,60 ± 0,12 0,49 ± 0,10
CD3+/8+-лiмфоцити % 20,00 ± 3,45 25,20 ± 2,14 32,80 ± 2,73**л
Г/л 0,34 ± 0,05 0,42 ± 0,06 0,59 ± 0,09**л
CD4+CD25+CD127--лiмфоцити % 2,93 ± 0,90 2,23 ± 0,80 3,26 ± 0,99
Г/л 0,05 ± 0,01 0,040 ±0,005 0,060 ±0,009л
Примтки: * — Р < 0,05; ** — Р < 0,01 (вропдна рзниця пор1вняно з контролем); л — Р < 0,05 (вропдна рзниця м1ж групами хворих).
Таблиця 2. Показники субпопуляц1йного складу л1мфоцит1в у хворих з активованою рецидивуючою герпетичною ¡нфекщею першого/другого типу з урахуванням пл1дност (М ± m)
Показники Одиниця вимipу Здоpовi (n = 20) XBopi (n = 120)
Плщжсть (n = 63) Безплщысть (n = 57)
1 2
CD16+/56+-лiмфоцити % 18,80 ± 2,09 25,80 ± 2,75* 20,20 ± 1,89л
Г/л 0,32 ± 0,04 0,50 ± 0,08** 0,37 ± 0,06
CD22+-лiмфоцити % 22,80 ± 2,08 22,10± 3,64 26,80 ± 2,95
Г/л 0,39 ± 0,08 0,35 ± 0,08 0,52 ± 0,09
CD3+-лiмфоцити % 69,50 ± 6,03 69,80 ± 5,05 65,50 ± 5,87
Г/л 1,13 ± 0,25 1,49 ± 0,45 1,19 ± 0,34
CD3+/4+-лiмфоцити % 26,10± 3,82 25,90 ± 2,24 31,50 ± 2,56л
Г/л 0,45 ± 0,11 0,41 ± 0,13 0,57 ± 0,11
CD3+/8+-лiмфоцити % 20,00 ± 3,45 23,10 ± 3,04 29,80 ± 2,19*л
Г/л 0,34 ± 0,05 0,36 ± 0,06 0,64 ± 0,09 **л
CD4+CD25+CD127--лiмфоцити % 2,93 ± 0,90 3,56 ± 1,16 1,23 ± 0,90л
Г/л 0,05 ± 0,01 0,060 ± 0,007 0,020 ± 0,010*л
Примтки: * — Р < 0,05; ** — Р < 0,01 (вропдна рзниця пор1вняно з контролем); л — Р < 0,05 (вропдна рзниця м1ж групами хворих).
Висновки
Рецидивуюча Гнфекц1я ВПГ 1/2 супроводжуеться зб1льшенням р1вня кглерних клгган: пом1рно рецидивуюча (1—5 рецидив1в протягом року) — CD16+/56+ (NK-клГтин), часто рецидивуюча (6 i бгльше реци-див1в протягом року) — CD3+/8+ (Т-супресор1в/к1-лер1в).
У безплгдних хворих Гз рецидивуючою Гнфекц1ею ВПГ 1/2 спостер1гаеться деф1цит кл1тин Гз супресор-ною активн1стю: CD4+CD25+CD127--лiмфоцитiв (регуляторних Т-кл1тин) та CD3+/8+-лiмфоцитiв (Т-супресор1в/к1лер1в).
Конфлжт штересш. Автори заявляють про вщсут-н1сть конфл1кту Гнтерес1в при пщготовщ дано! статп.
References
1. Ambalov M, Ryazanov A, Kovalenko AP. Method of design of relapses of disease in patients by a simple herpes and its nosotropic ground. Cytokines and Inflammation. 2012;11(3):52-53 (Russian).
2. Bondarev LS, Zaplotnaya AA, Sotnik YP. Herpes and viral infection — a modern look to the problem. Vestnik neot-lozhnoy i vosstanovytelnoy mediciny. 2006;7(3):473-478 (Russian).
3. Hlants C. Meditsinskaia i biologicheskaia statistika [Medical and biological statistics]. Moskow: Practice; 1998. 459p. (Russian).
4. Drannyk GN, Svydro EV. Infections caused by herpes simplex virus. Zdorov'ja Ukrai'ny. 2007;2, 24-25 (Russian).
5. Zheleznyakova GF. Regulator Т-lymphocytes in immune answer for an infection. Zhurnal ynfektolohy. 2011;3(1):6-12 (Russian).
6. Zlotnykova MV. Mechanisms of natural and adaptive immunity at the infections caused by the viruses of simple herpes 1 and 2 types. Problemy zdorov'ia i ekologii. 2014;1:7-14 (Russian).
7. Servetskyy L, Shepherd T, Oliynyk AG, Nikitin AE. Changes in indicators of cellular immunity in patients with herpes infection. Materials of VIII Ukrainian congress of infectious disease. Vinnytsia, 2010; 107s. (Ukrainian).
8. Mardanly SG, Kirpichnikova GI, Neverov VA. Herpetic infection (Simple herpes). Elektrohorsk: ZAO EKOlab, 2010; 56 s. (Russian).
9. Naumenko VA, Bush AA. Herpes virus and masculine sterility: is there connection? Voprosy virusologii. 2013;58(3):4-9 (Russian).
10. Rebrov O. Statystical analysis of medical results. Application of package program STATISTICA. M.: Medyasfera, 2002; 312 s. (Russian).
11. Selyutyn A, Selkov SA. Methods of determination of maintenance of T-regulatory cages in peripheral blood. Terra medica. 2008;4:19-21 (Russian).
12. Freydlin IS. Immune system and antiviral immunities, questions of the general virology. SPb: SPbGMA of I. Mech-nikov, 2007; 65-129 (Russian).
13. Cherkasov V. Herpetic infection: clinical and immu-nologic and psychosomatic features. Ukrains 'kyj medychnyj al'manah. 2011;14(1):221-223 (Ukrainian).
14. Monavari SH, Vaziri MS, Khalili M. et al. Asymptomatic seminal infection of herpes simplex virus: impact on male infertility. JBiomedRes. 2013;27(1):56-61.
15. Forbes LR, Paessler M, Orange JS. CD16 deficiency discovered in a cohort of patients with severe herpesviral infections using a new diagnostic test. J Allergy Clin Immunol. 2009;123(2):67.
16. Grinde B. Herpesviruses: latency and reactivation — viral strategies and host response. J Oral Microbiol. 2013;5:4-10.
17. Su H, Longhi MS, Wang P. Human CD4+CD25(high) CD127 (low/neg) regulatory T cells. Methods Mol Biol. 2012;806:287-299.
18. Retamal-Díaz AR, Suazo PA, Garrido I et al. Immune evasion by herpes simplex virus. Rev Chil Infectol. 2015;32(1):58-71.
19. Bennett JM, Glaser R, Malarkey WB et al. Inflammation and reactivation of latent herpesviruses in older adults. Brain Behav Immun. 2012;26(5):739-746.
20. Nandakumar S, Woolard SN, Yuan D et al. Natural killer cells as novel helpers in anti-herpes simplex virus immune response. J Virol. 2008;82(21):10820-10831.
21. Ralainirina N, Poli A, Michel T. Control of NK cell functions by CD4+CD25+ regulatory T cells. J Leukoc Biol. 2007;81(1):144-153.
22. Roizman B, Knipe DM, Whitley R. Herpes Simplex Viruses. In book: Fields Virology, 5th ed. by D. Knipe, P. Howley. Philadelphia: Lippincott, Williams and Wilkins; 2007. 25022601.
OTpuMaHO 24.01.2017 ■
Шмыга Т.В., Гаевская В.Ю., Гаевский В.Ю.
Львовский национальный медицинский университет им. Данила Галицкого, г. Львов, Украина
Особенности фенотипирования лимфоцитов у больных с активированной рецидивирующей герпетической инфекцией первого/второго типа и нарушением репродукции
Резюме. Целью исследования был анализ особенностей изменений субпопуляции лимфоцитов по данным иммунограммы у больных с рецидивирующей герпетической инфекцией и репродуктивными нарушениями. Материалы и методы. Изучены особенности фенотипирования лимфоцитов у 120 больных с активированной рецидивирующей герпетической инфекцией первого/ второго типа (ВПГ 1/2), среди которых у 63 пациентов было диагностировано бесплодие. Результаты. Выявлено увеличение уровня киллерных клеток: СБ16+/56+
^К-клеток) при умеренно рецидивирующей инфекции (1—5 рецидивов в течение года) и СБ3+/8+ (Т-супрес-соров/киллеров) при часто рецидивирующей инфекции (6 и более эпизодов в течение года). Выводы. У бесплодных больных с рецидивирующей инфекцией ВПГ 1/2 наблюдался дефицит клеток с супрессорной активностью: СВ4+СВ25+СВ127--лимфоцитов (регулятор-ных Т-клеток) и СБ3+/8+-лимфоцитов (Т-супрессоров/ киллеров).
Ключевые слова: простой герпес; рецидив; бесплодие
64
Мiжнaр0дний ендокринолопчний журнал, p-ISSN 2224-0721, e-ISSN 2307-1427
Том 13, № 1, 2017
OpurrnoAbHi AOCAigweHHfl /Original Researches/
T.V. Shmyga, V.Yu. Gayevska, V.Yu. Gayevskyi
Danylo Halytskyi Lviv National Medical University, Lviv, Ukraine
Features of lymphocyte phenotyping in patients with activated recurrent herpetic infection of the first/
second type and reproductive system disorders
Abstract. The aim of the study was an analysis of the features of changes in lymphocyte subpopulation according to the data of immunography in patients with a recrudescent herpetic infection and reproductive violations. Materials and methods. The peculiarities of lymphocyte phenotyping were studied in 120 patients with activated recurrent herpetic infection of the first/second type (herpes simplex virus (HSV) 1/2), among whom 63 patients were diagnosed with infertility. Results. An increase in the level of killer cells was detected: CD16+/56+
(NK-cells) — in moderately recurrent infection (1—5 relapses within one year) and CD3+/8+ (T-suppressor/killer cells) — in frequently recurrent infection (6 or more episodes during the year). Conclusions. In infertile patients with recurrent HSV 1/2 infection, there has been observed a deficit of cells with suppressive activity: CD4+CD25+CD127- (regulatory T-cells) lymphocytes and CD3+/8+ (T-suppressor/killer cells) lymphocytes.
Keywords: herpes simplex; relapse; infertility
