CC BY
123
KEY PROBLEMS IN THE DEVELOPMENT OF MEDICINAL FORMS OF ANTITUMORDRUGSFORINTRAVENOUS INJECTION
N.A. Oborotova N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS
ABSTRACT
The investigation was given up to create rational pharmaceutical dosage forms, which allow to realize the most completely the properties of antitumor substances both in preclinical and clinical researches. The problem intricacy is stipulated by high requirements to all stages of technological processes and ready drug quality standardization to purpose safe pharmaceuticals manufacture. Optimal pharmaceutical dosage form working out is the chief link in the chain of antitumor drug creation. Investigation of pharmaceutical factors influence on antitumor preparations therapeutical efficiency is one of the most important trend of biopharmaceutical researches carrying out in Experimental diagnostics and tumor therapy Institute of N.N.Blokhin Memorial Cancer Research Center RAMS.
ОСНОВНЫЕ ПРОБЛЕМЫ СОЗДАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ВНУТРИВЕННОГО ВВЕДЕНИЯ
Н.А. Оборотова Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН
РЕЗЮМЕ
Работа посвящена созданию рациональных лекарственных форм, позволяющих наиболее полно реализовать возможности противоопухолевых субстанций как в доклинических, так и в процессе клинических исследований. Сложность проблемы обусловлена высокими требованиями, предъявляемыми на всех этапах создания лекарства к стандартизации технологических процессов и качеству готовой продукции с целью производства безопасных лекарственных препаратов. В цепи комплексных исследований по созданию противоопухолевого препарата важное звено составляет разработка оптимальной лекарственной формы отобранного в эксперименте активного вещества. Изучение влияния фармацевтических факторов на терапевтическую эффективность противоопухолевых препаратов - одно из важнейших направлений современных биофармацевтических исследований, проводимых в НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН.
Введение. В мировой клинической практике заре- большой широтой фармакологического действия, для
гистрировано около 100 противоопухолевых препара- которых инъекционный путь введения обеспечивает:
тов, которые являются представителями алкилирующих - точность дозирования JIB;
соединений (25,7 %); антиметаболитов (8,8 %); антиби- - быструю и стандартную биодоступность;
отиков (11 %); препаратов растительного происхожде- - избежание разрушения JIB в желудочно-кишеч-
нияи ферментов (9,5 %); гормонов и антигормонов (17,6 ном тракте;
%); средств, стимулирующих лейкопоэз, (14,7 %); ве- - возможность введения капельно больших объе-
ществ различных химических групп (12,7%). Однако мов жидкости;
низкая избирательность противоопухолевого действия - желаемая скорость и место введения;
существующих фармацевтических препаратов и разви- - возможность прекращения введения в случае
тие токсических осложнений при их применении обус- появления нежелательных побочных эффектов, лавливают продолжение поиска новых активных про- Кроме того, противоопухолевые субстанции спо-тивоопухолевых соединений. собны вызывать поражение тканей в месте инъекции. В
Как правило, большинство лекарственных веществ этом случае только ЛФ для внутривенного введения (JIB), обеспечивающих цитостатический или цитоток- цитотоксических JIB позволяет применять разведенные сический эффект, применяются в инъекционной лекар- ex tempore до безопасной концентрации препараты, ственной форме (ЛФ) для внутривенного введения. Эта Как правило, создание противоопухолевого лекар-
особенность свойственна активным субстанциям, от- ства - сложная многофакторная задача, требующая зна-личающимся высокой реакционной способностью и не- ния и учета особенностей фармакологического дей-
ствия исходного JIB, его взаимодействия с физиологическими субстратами и тканями организма. Отсутствие достаточной избирательности действия цитостатиков приводит к серьезным осложнениям. При этом высокая неспецифическая биологическая активность JIB часто лимитирует его применение в клинике из-за необратимости побочных эффектов. Проявления токсичности способны стать критерием перспективности лекарственных соединений, если не удается подобрать безопасных композиций, способов и режимов введения оптимальных ЛФ. Поэтому разработка ЛФ отобранного в эксперименте активного ЛВ - одно из основных звеньев в цепи комплексных исследований по созданию готового лекарства. Разработчикам ЛФ приходится учитывать ряд биофармацевтических характеристик противоопухолевых субстанций, основными из которых являются: химическая лабильность, небольшая широта фармакологического действия, высокая токсичность, низкие терапевтические дозы, отсутствие специфичности или низкая избирательность противоопухолевого действия. Доклиническое изучение влияния фармацевтических факторов на терапевтическую эффективность ЛФ противоопухолевых препаратов - одно из важнейших направлений современных биофармацевтических исследований.
В отделе экспериментальной химиотерапии НИИ ЭДиТО РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН были отобраны химические субстанции, охватывающие почти весь спектр имеющихся на международном рынке синтетических противоопухолевых лекарств. Оригинальные отечественные и воспроизведенные субстанции, несмотря на близкий механизм алкилирующего действия, отличались между собой как по спектру, силе противоопухолевой активности, так и по токсическим и побочным эффектам. Эти субстанции были переданы в лабораторию разработки лекарственных форм НИИ ЭДиТО ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН для создания готовых лекарств, позволяющих наиболее полно реализовать возможности противоопухолевых ЛВ как в доклинических, так и клинических исследованиях.
Биофармацевтические особенности противоопухолевых лекарственных веществ
В процессе экспериментального изучения переданных водорастворимых лекарственных субстанций наибольший, хорошо воспроизводимый противоопухолевый эффект был получен при внутривенном введении их водных растворов. Однако разработка эффективных и стабильных ЛФ осложнялась высокой химической активностью этих соединений. Поэтому рациональной технологической схемой получения устойчивых инъекционных ЛФ исследуемых противоопухолевых препаратов явилась сублимационная сушка, обеспечивающая следующие характеристики:
- стерильность технологического процесса;
- точность и однородность дозирования раствора ЛВ;
- сведение к минимуму условий внесения дополнительных механических включений;
- стабильность ЛВ в процессе сушки;
- возможность быстрой укупорки флаконов непос-
редственно в сублимационной камере, которая снижает сорбцию влаги гигроскопичных ЛВ;
- увеличение растворимости плохо растворимых ЛВ в готовой ЛФ за счет образования пористой структуры и увеличения поверхности соприкосновения препарата с растворителем.
С целью создания стерильных инъекционных промежуточных растворов - «концентратов» для последующей лиофилизации - были:
- изучены физико-химические свойства исследуемых субстанций;
- установлены пути деструкции ЛВ в водной среде с целью разработки подходов к их стабилизации;
- выбраны эффективные составы ЛФ и экономичные технологии их производства;
- подобраны химически и фармакологически совместимые ингредиенты ЛФ;
- проверены фармакодинамические характеристики различных составов ЛФ;
- определены изотонические концентрации ЛВ;
- оценены местно-тканевые реакции при введении растворов ЛФ.
Для определения качества и количества исследуемых ЛВ в процессе выполнения отдельных технологических операций наша лаборатория совместно с лабораторией химико-фармацевтического анализа разработали новые или использовали известные аналитические методики: ТСХ, ВЭЖХ и спектрофотометрии.
Создание инъекционных растворов цшелоплатама, те-рафтала и сетремеда - новых противоопухолевых субстанций, производных комплексных соед инений металлов
Свойства комплексных соединений металлов определяются двумя факторами: пространственным расположением заместителей вокруг иона металла и характером связи отдельных заместителей с этим ионом (прочность связи, степень ее ионности или ковалентности). Большой объем современных исследований, проводимых в области комплексных соединений металлов, посвящен созданию новых противоопухолевых препаратов, отличающихся от существующих цитостатиков спектром и механизмом действия. Наиболее интересными отечественными препаратами платины, меди и кобальта, отобранными в эксперименте, оказались циклоплатам, сетремед и терафтал.
Циклоплатам, 8(-)-малатоаммин(циклопентил-амин)платина(1Г), не является индивидуальным комплексным соединением и представляет собой сложную систему изомерных комплексов, содержащих как бидентат-ный (хелатный и мосгиковый), так и монодентатный ани-оняблочной кислоты [1-7]. Главной причиной отбора при скрининге лабильного циклоплатама, а не его инертных и гораздо более удобных для аналитического контроля аналогов, была высокая противоопухолевая активность циклоплатама, которая явно коррелировала с его лабильностью. Следовательно, все многочисленные аква-комп-лексы, существующие в водных растворах циклоплатама, являются именно теми реакционноспособными формами, которые непосредственно реагируют с ДНК, образуя внутринитевые сшивки по N7смежных гуанинов.
Полученные аналитические данные свидетельствовали о неустойчивости водных растворов в процессе их хранения. Однако хорошая растворимость субстанции в воде, широкий спектр и высокая противоопухолевая активность, отсутствие нефротоксичности и перекрестной резистентности с известными препаратами платины и некоторыми цитотостатиками других групп позволило считать циклоплатам перспективным новым платиновым препаратом второго поколения [8; 9].
«Бинарная терапия» основана на способности раздельно введенных в организм нетоксичных агентов при взаимодействии в клетке-мишени генерировать цито-токсические соединения [10]. Способность терафтала
- натриевой соли окта-4,5-карбоксифталоцианина кобальта - катализировать в водных растворах окисление аскорбиновой кислоты с образованием активных форм кислорода легла в основу бинарной каталитической терапии злокачественных образований [11-14]. Необходимым условием сохранения его каталитических свойств явилась возможность комплексно-связан-ного кобальта обратимо переходить из двухвалентного состояния в трехвалентное, с промежуточным образованием адцукта комплексного соединения с молекулой кислорода. Терафтал (РсСо) растворяется в воде, но из-за склонности к агрегации в концентрации выше 2 % образует вязкие растворы. На хроматограммах ВЭЖХ растворов терафтала имеются два основных пика, которые относятся к восстановленной - РсСо(П) и окисленной - РсСо(Ш) формам кобальта и могут рассматриваться как единая окислительно-восстанови-тельная система. Однако из-за высокой устойчивости комплексов РсСо(Ш) по сравнению с РсСо(И) окисление соединений идет даже под действием кислорода воздуха. Преимущество нового препарата в том, что каталитическая система терафтала с аскорбиновой кислотой не вызывает характерного для цитостатиков побочного действия в виде лейкопении, миелосупрес-сии и диспептических расстройств [15].
Сетремед - легко растворимое в воде комплексное соединение меди [16; 17]. В водных растворах сет-ремеда устанавливается равновесие между смешанным комплексом и симметричными бис-комплексами, которое смещено в сторону смешанного соединения:
2Си(Х-8 ег) (Ь-ТЬге) <н> Си(Ь-Зег)2+ Си(Ь-ТЪге)2
Нестабильность сетремеда в растворах можно объяснить следующим предположением: комплексное соединение легко разрушается в соответствии с его константой нестойкости, освобожденная медь вступает в окислительно-восстановительную реакцию с аминокислотами.
При углубленном изучении показано, что сетремед не является прямым ингибитором синтеза ДНК, но обладает высокой супероксиддисмутазной активностью, проявляя сильные антиоксидантные свойства. Это принципиально отличает препарат от комплексных соединений платины и от ионизирующего излучения, что послужило основанием изучить действие комбинированного применения сетремеда с другими цитостатиками и локальным ионизирующим облучением [17-19]. В отличие от цитостатиков, сетремед не оказал угнетающего действия на кроветво-
рение [20]. Патоморфологическое исследование внутренних органов показало, что влияние препарата на ткани носит характер обратимых дистрофических изменений, степень которых соответствует примененной дозе. Особенностью токсического действия являются атрофические изменения слизистой желудка, в связи с чем препарат может оказаться эффективным при лечении опухолей, развивающихся из эпителиальных структур желудка [21; 22].
Таким образом, исследованные нами комплексные соединения металлов являются неоднородными ЛВ, способными изменяться под действием как окислителей, так и восстановителей, а их водные растворы неустойчивы в процессе хранения.
Для оптимизации технологических характеристик растворов циклоплатама, терафтала и сетремеда использовали вспомогательные вещества, регулирующие pH, способствующие образованию сублимируемой формы и ускорению лиофилизации ЛФ, а также антиоксиданты и солюбилизаторы. Однако добавление дополнительных ингредиентов не только не увеличило, но при использовании разбавленных кислот или буферной системы, маннита, натрия гадроцитрата и натрия хлорида даже снизило растворимость терафтала. Стабилизация растворов препаратов антиоксидантами оказалась неприемлемой из-за химического взаимодействия использованных соединений с комплексами металлов.
Результаты проведенных химико-аналитических и биологических исследований подтвердили отсутствие преимущества сложных композиций растворов и определили, что приготовлению промежуточных водных растворов для последующей лиофилизации способствовала совокупность следующих основных условий: отсутствие прямого яркого света, неизменность величины pH, низкая температура (5±2°С) хранения раствора, отсутствие окислителей и восстановителей. Кроме того, предварительное изучение возможности применения сублимационной сушки полученных стерильных «концентратов» показало, что можно лиофилизировать водные растворы циклоплатама, терафтала и сетремеда в выбранных концентрациях без введения наполнителей.
Совершенствование ииьекциетшыхлекарсшашых форм сарколизина, бисхлоршпрозомочевины и миггоксантрона
Кроме оригинальных отечественных субстанций, нам были переданы хорошо известные препараты, использование которых в клинике осложнялось из-за ряда недостатков их ЛФ. Для устранения последних нами проведено усовершенствование инъекционной ЛФ отечественного сарколизина и воспроизведенных субстанций бисхлоршпрозомочевины (БХНМ) имитоксантрона.
Высокая реакционная способность, гидролитическая и термическая нестабильность, чувствительность к действию света, плохая растворимость субстанций (сарколизина и БХНМ) и низкая доза в единице упаковки определили необходимость введения в составы ЛФ вспомогательных веществ. Были подобраны соединения, которые увеличивали растворимость, замедляли гидролиз, препятствовали гелеобразованию
(в случае сарколизина), обеспечивали точность дозирования и структурно-механическое качество лиофи-лизированной массы во флаконе ЛФ.
Учитывая высокую реакционную способность исследуемых противоопухолевых субстанций, мы изучили с помощью спектрофотометрического метода возможность химического взаимодействия между компонентами ЛФ. С этой целью сняли электронные спектры поглощения растворов вспомогательных веществ, субстанции и «концентрата» в воде. Данные спектрофотометрического анализа свидетельствовали о химической совместимости ингредиентов ЛФ, так как спектры поглощения растворов «концентратов» сарколизина, БХНМ и митоксантрона идентичны поглощению их субстанций. Не обнаружено образования каких-либо новых соединений, при этом присутствие вспомогательных ингредиентов не мешало открытию основных ЛВ [23-26]. Убедительные результаты получены и с помощью метода ТСХ и ВЭЖХ. Идентичность хроматограмм образцов сарколизина, БХНМ и митоксантрона в субстанциях и «концентратах» свидетельствовали об отсутствии посторонних примесей, возникших в результате взаимодействия вспомогательных соединений с основным активным ЛВ.
Стабильность полученных «концентратов» изучали в процессе хранения при двух температурах. Так, например, методом ВЭЖХ определили скорость гидролиза сарколизина в воде и «концентрате», что позволило определить величину разложения препарата в процессе хранения его при комнатной температуре [23]. Результаты анализа устойчивости БХНМ в «концентрате» в зависимости от времени хранения при двух температурах свидетельствуют об ограниченной его стабильности. Разработанный «концентрат» можно хранить при комнатной температуре не менее двух часов и более суток в холодильнике. В то же время, по данным аннотации на препарат BiCNU фирмы Bristol-Myers Squibb, концентрация БХНМ в растворе после 3 часов хранения при комнатной температуре уменьшается на 6 %, после 6 часов - на 8 %, а после хранения в холодильной камере в течение суток - на 4 % [25].
Таким образом, данные химико-фармацевтическо-го анализа показали достаточную стабильность сарколизина, БХНМ и митоксантрона в «концентратах», позволяющую в течение предельно допустимого времени нахождения субстанции в растворе провести стерилизующую фильтрацию, дозирование во флаконы, замораживание и лиофилизацию.
Параллельно химико-фармацевтическим исследованиям изучили фармакологическую совместимость составов лиофилизированных ЛФ сарколизина, БХНМ и митоксантрона in vivo, сравнивая противоопухолевую активность полученных композиций с эффектом чистых субстанций. Кроме того, определили биологическую эквивалентность полученных растворов воспроизведенных препаратов (митоксантрона и БХНМ) с импортными ЛФ по противоопухолевому эффекту и фармакокинетическим показателям. Проведенные биологические исследования показали, что новые композиции ЛФ сарколизина, БХНМ и митоксантрона не уменьшают про-
тивоопухолевого действия нативных субстанций и являются биоэквивалентными по отношению к терапевтическому действию импортных ЛФ [26-29]. Новые ЛФ сарколизина и БХНМ хорошо растворяются в физиологическом растворе ex tempore, обладают большей стабильностью и гарантированной стандартностью.
Таким образом, в результате комплексных исследований изучены физико-химические и биофармацевти-ческие свойства противоопухолевых субстанций - цик-лоплатама, терафтала, сетремеда, сарколизина, БХНМ и митоксантрона. Установлены условия и скорость их деструкции в водных растворах. Низкая стабильность полученных растворов определила необходимость создания лиофилизированных инъекционных препаратов:
- для комплексных соединений металлов без наполнителей,
- для сарколизина БХНМ и митоксантрона со вспомогательными веществами.
Для внутривенного введения определены безопасные концентрации препаратов, которые не вызывают нежелательного воздействия противоопухолевых субстанций на эритроциты крови и стенки сосудов [26].
В настоящее время на разных уровнях внедрения находятся следующие лекарственные формы:
• «Сарколизин лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,02 г» защищен патентом РФ (№ 2060031, 1996) и разрешен к медицинскому применению и промышленному производству.
• «Циклоплатам лиофилизированный 0,05 г, 0,10 г и
0.15.г для инъекций» защищен патентом РФ (№21280442, 1999) и рекомендован к медицинскому применению.
• «Митоксантрон лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,02 г» защищен патентом РФ (№ 2093158, 1997) и рекомендован к медицинскому применению.
• «Терафтал лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,05 г» проходит II фазу клинических испытаний.
• «Сетремед лиофилизированный ОД 0 г для инъекций» передан на II фазу клинических испытаний.
• «БХНМ лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 0,02 г» защищен патентом РФ (№2066181, 1996), находится на доклинических исследованиях.
На перечисленные ЛФ разработаны технологические регламенты и фармакопейные статьи предприятия, которые обеспечивают выпуск стандартных препаратов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Коновалова АЛ., Чельцов П.А., Кравченко А.Н. и др. Противоопухолевая активность смешанных карбоксилатоком-плексов платины(И) с аммиаком и циклоалкиламинами. // Доклады АН СССР. - 1987. - № 294(3). - С. 726.
2. Бухарова И.К, Ревазова Е. С., МорозЛ.В. Эффективность некоторых новых противоопухолевых препаратов на моделях опухолей человека. // Вестник ОНЦ АМН СССР.
- 1990. - № 1. - С. 8 - 10.
3. Konovalova A., CheltsovP., StetsenkoA. etal. Antitumor activity of new Platinum complexes. // Abstrs of the 7-th NCI-EORTC Symposium on New Drugs in Cancer Therapy, Amsterdam. - 1992. - P. 136.
4. Коновалова A. JI. Противоопухолевая активность нового противоопухолевого препарата циклоплатам. // В сб.
Циклоплатам.-М., 1993.-C.3-15.
5. Михайлова Л.М., ЧпеноваЕЛ., Коняева О.И., Ермакова Н.П. Токсические свойства отечественного противоопухолевого препарата циклоплатама. // В сб:. Циклоплатам. -М, 1993.-С. 16-25.
6. ТрещалинаЕ.М., Андронова Н. В., Михайлова Л. М., Бычков М. Б. Эффективность циклоплатама при внутриплевраль-ном введении. II Мат. съезда онкологов стран СНГ. - М.,
1996.-ч. 1.-С. 167.
7. Dress М., Dengler W.M., Hendriks H.R. etal. Cycloplatam: a noval platinum compound exhibiting a different spectrum of anti-tumour activity to cisplatin. II Eur. J. Cancer. -1995.
— № 31A (3). - P. 256 - 361.
8. Оборотова H.A., ЧельцовП.А., Полонский С.А., Полозкова А.П.,ЛопатинП.В., КикотъБ.С., ИгнатьеваЕ.В., Гатинс-каяЛ.Г., Орлова О.Л., Барышников А.Ю. Технологические и химико-фармацевтические исследования нового противоопухолевого препарата «Циклоплатам лиофилизиро-ванный для внутривенного введения». // Химико-фармацевтический журнал. — М., 2001. - 35, №8. — С. 36 - 43.
9. Горбунова В.А., Оборотова Н. А., Чельцов П.А., Барышников А.Ю., МатвеевБ.П., БухаркинБ.В., БагроваС.Г., ОрелН.Ф., Бяхов М.Ю., Грицун Н.Н. Новый препарат платины второго поколения - циклоплатам лиофилизированный. // Вестник РОНЦ. - 2001. - № 4. - С. 53 - 57.
10. Чиссов В.И., Якубовская Р.И., Панкратов А. А. и др. Бинарные каталитические системы, как новые противоопухолевые агенты. // Материалы 5 Всероссийского съезда онкологов «Высокие технологии в онкологии». -Казань, 2000. -1. - С. 234.
11. Patent, pet Int. Appl. WO 97 03,666 (Cl, A61K31/40), 6 Feb. - 1997. - RU. - Appl.95. - 112, 240. - 17 Jul. 1995. -16 pp. (Russ).
12. PCT Int. Appl. WO 97 03,666. ( Cl. A61K31/40), 6 Feb. -
1997. - RU, Appl. 95. - 112, 240. -17 Jul 1995.
13. Борисенкова С.А., Гиренко Е.Г., Калия О.Л. Механизмы окисления аскорбиновой кислоты и проблемы каталитической (темновой) терапии рака. // Росс. хим. журн. -
1998.-XLII. -№5, —С. 111 —115.
14. СыркинА.Б., Жукова О.С., Кикотъ Б.С., ГатинскаяЛ.Г., Трещалина Е.М., Якубовская Р.И., Панкратов А. А., Михай-ловаЛ.М., ЗимаковаН.И., КолесниковаЕ.Ю., Оборотова Н.А. и др. Терафтал - новый препарат для бинарной терапии злокачественных опухолей. II Российский химический журнал. - 1998. - 5. - С. 140 -146.
15. МихайловаЛ.М., Коняева О.И, ЧлешваЕЛ, МеркуловаИБ, ЕрмаковаН.П., Гаврилова Т.Н., Сергеев А.В. Доклиническая токсикология терафтала-лио и бинарной каталитической системы «терафтал-лио + аскорбиновая кислота». // Вопросы онкологии. - 2001. - 47, № 6. - С. 695 - 700.
16. ТрещалинаЕ.М., КоноваповаАЛ., Преете М.А. идр. Противоопухолевые свойства смешанных координационных соединений меди(П) с а-аминокислотами. // Докл. Академии наук СССР. - 1979. - 248, № 5. - С. 1273 -1276.
17. ТрещалинаЕ.М. Противоопухолевые свойства комплек-
сных соединений двухвалентной меди с тиосемикарба-зонами а-кетокарбоновых кислот и с различными а-аминокислотами. // Дисс... к. мед. н. - М., 1984.
18. Богуш Т.А.,Доненко Ф.В., Ситшкова С.М., АндроноваН.В. Взаимодействие комплексного соединения меди Си-2 с монооксигеназами печени. // Бюлл. экспер. биол. и мед. -1987. - CIV, № 10. - С. 438 - 440.
19. Богуш Т.А., Ситникова С.М.,ЛокшинА. Снижение токсичности адриамицина при комбинированном применении с комплексным соединением меди Си-2. // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 1989. - СУП, № 1. - С.43 - 45.
20. Членова ЕЛ. Токсикологическая характеристика нового противоопухолевого препарата сетремед и некоторых медьсодержащих соединений. // Дисс... к. биол. н. - М., 1988.
21. Юшков С.Ф., ПереверзеваЭ.Р. Патоморфологические изменения внутренних органов экспериментальных животных при применении препарата сетремед. // Химиотерапия опухолей в СССР. - 1986. - вып. 45. - С. 131 - 136.
22. Kikotj В., Chapurina L., Oborotova N. etal. Chemical and pharmaceutical study of a new anticancer preparation of setremed // Abstract 2-th World Meeting Pharmaceutics Biopharmaceutics Pharmaceutical Technology, Paris, 25 to 28 May 1998, P. 97-98.
23. ШпрахЗ.С., ОборотоваH.А., СмирноваЛ.И. и др. Химико-фармацевтические исследования новой лекарственной формы сарколизина. // Химико-фармацевтический журнал. -2001,-35,№ 12.-С. 57-63.
24. Оборотова Н.А., ШпрахЗ.С., Багирова В.Л. идр. Разработка инъекционных лекарственных форм цитостати-ков с использованием растворимого поливинилпирро-лидона. //Химико-фармацевтический журнал. - М., 2001. —35,№5.-С. 39-43.
25. Рышкова Н.Е., Оборотова Н.А., ШпрахЗ.С. Химико-фармацевтическое исследование новой лекарственной формы БХНМ. // Химико-фармацевтический журнал. - М., 2000. -34, №9.-С. 46-48.
26. Оборотова Н.А., Кикотъ Б. С., Полозкова А.П., Е.В. Игнатьева, А.П.Будько, Л.Г. Гатинская, Т.И. Клочкова, Н.И. Зимакова, Е.Ю. Колесникова, А.П. Арзамасцев Технологические и химико-фармацевтические исследования Би-сантрона - новой лекарственной формы воспроизведенного противоопухолевого препарата Митоксант-рон. // Химико-фармацевтический журнал. - 1999. -33, № 11.-С. 53-56.
27. СмирноваЛ.И., ОборотоваН.А., ШпрахЗ.С., Перетолнина Н.М., Герасимова Г.К, МихайловаЛ.М., Зимакова Н.И., Круглова Г.В., Демина Е. А., Барышников А.Ю. Сарколи-зин-лио для внутривенного применения. // Вестник РОНЦ РАМН. - 2001. - № 4. - С. 49 - 53.
28. ОборотоваН.А., РышковаН.Е., СмирноваЗ.С. идр. Биофар-мацевтические исследованиям лекарственной формы противоопухолевого препарата БХНМ. // Химико-фармацевтический журнал. - М., 2001. - 35, № 2. - С. 52 - 54.
29. МихайловаЛ.М. Токсикология новых отечественных противоопухолевых препаратов. // Дисс... д. биол. н. - М., 1994.
