CC BY
10
Содержание SH-групп и —S—S—связей в цельной крови и гомогенатах тканей (Mim)
где С — гомогенат (в мл), взятый для титрования; О — навеска ткани для приготовления гомогената.
Содержание БН-групп и —Б—Э— связей в цельной крови и гомогенатах тканей у интактных животных, определенное по предлагаемому методу, представлено в таблице.
В заключение следует отметить, что предлагаемый метод изучения БН-групп и —Б—Б— связей в одной пробе значительно сократит время исследования, особенно при массовых определениях. Кроме того, он требует небольшого количества биологического материала для анализа. Простота и доступность предлагаемого метода очевидны. Это позволит шире использовать его в токсикологической практике, особенно в тех случаях, когда содержание БН-групп и —Б—Б— связей в крови или органах является спе-•цифическим показателем интоксикации.
Субстрат SH-группы (в мг%) S--S —связи (в мги)
Цельная кровь..... 130,65^0,69 15,22—0,47
Гипофиз ....... 103,9^ 1,3 112,0— 14,3
Надпочечники . . . . 213,7—7,1 85,8^2,1
Обонятельная доля мозга 53,1—2,7 • 54,0^2,4
ЛИТЕРАТУРА
Гольдштейн Б. И. Успехи совр. биол., 1954, т. 38, в. 3, с. 280.— Коштоянц X. С. Белковые тела, обмен веществ и нервная регуляция. М., 1951.— Окулов В. И. Лабор. дело, 1965, № 10, с. 591.— Селюжицкий Г. В., Смоль-ский A.B., Шварцман И. Е. В кн.: Вопросы гигены населенных мест. Л., 1965, т. 81, с. 97 — Соколовский В. В. Лабор. дело, 1962, № 8, с. 3.
Поступила I0/VII 1970 г.
УДК 613.36:683.2]-074:543.544
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭФИРСУЛЬФОНАТА В ВИНОГРАДЕ, ВИНОГРАДНОМ СОКЕ, ВИНЕ И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Т. И. Голубев, Л. Г. Владимирова, Е. М. Колобродова
Всесоюзный научно-исследовательский институт виноделия и виноградарства «Магарач»,
Ялта
/
Основываясь на данных К. С. Стефанского, Ц. Л. Брауде и К. К. Си-галовской, мы разработали доступный хроматографический (в тонком слое) микрометод определения эфирсульфоната в винограде, виноградном соке, вине и воде. Сущность метода заключается в экстракции инсектицида органическим растворителем (Н-гексан, петролейный эфир), очистке экстракта от коэкстрактивных веществ, хроматографировании на окиси алюминия в смеси Н-гексана и ацетона и проявлении аммиачным раствором азотнокислого серебра в Уф свете.
При определении эфирсульфоната в винограде 100 г раздавленных ягод помещают в коническую колбу на 500 мл и трижды экстрагируют пестицид петролейным эфиром (по 30 мл) на аппарате для встряхивания в течение 15 мин. После фильтрации и промывания навески эфиром объединенный экстракт 15—20 мин. сушат 10 — 20 г безводного сернокислого натрия. Из экстракта, отделенного фильтрацией, полностью отгоняют растворитель под вакуумом. Сухой остаток количественно переносят при помощи серного эфира в коническую центрифужную пробирку, эфир удаляют на водяной бане при 45°, в пробирку добавляют 0,5 мл н-гексана и 1 мл концентрированной серной кислоты. Содержимое пробирки перемешивают стеклянной
палочкой и центрифугируют 10 мин. при 1500 об/мин. На анализ берут гекса-новый слой, составляющий примерно около 0,5 мл.
При определении инсектицида в виноградном соке, вине, воде 200 мл исследуемого образца помещают в делительную воронку, приливают 5 мл н-гексана и ведут экстракцию покачиванием воронки в течение 5 мин. Такой способ обеспечивает достаточное (до 90%) извлечение пестицида и не осложняет анализа образованием устойчивой эмульсии, затрудняющей определение.
Делительную воронку закрепляют в штативе Бунзена для разделения слоев, которое обычно продолжается около 15 мин. В отстоявшемся гекса-новом слое, содержащем эфирсульфонат, разрушают добавлением 1—2 мл этанола образовавшуюся легкую эмульсию и количественно (через воронку со слоем безводного сернокислого натрия) переносят его в колбу для отгонки растворителя. Отгоняют н-гексан досуха и в дальнейшем действуют так, как указано выше.
Далее на хроматографическую пластинку 9x12 см со слоем окиси алюминия или силикагеля марки КСК на расстоянии 1,5 см от узкого края пластинки при помощи медицинского шприца наносят исследуемую пробу (0,5 мл гексанового слоя) в 1 точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартный раствор эфирсульфоната, содержащий 5, 10 или 20 мкг препарата. Используют технический препарат с известным содержанием действующего начала.
Пластинку с нанесенной пробой и стандартами помещают (почти вертикально) в камеру для хроматографирования, на дно которой за 30 мин. до начала его налита смесь гексана с ацетоном в соотношении 20 : 1. Край пластинки с нанесенными растворами должен быть погружен в подвижный растворитель не более чем на 0,5 см.
После того как фронт растворителя поднимается на 11 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. Затем пластинку опрыскивают проявляющим раствором (0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды,прибавляют 5 мл аммиака с удельным весом 0,9 и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном; готовят в день употребления). После этого пластинку облучают УФ светом в течение 10—15 мин. (с помощью ртутно-кварцевой лампы ПРК-4). Пластинки следует располагать на расстоянии 20 см от источника света.
При наличии эфирсульфоната на пластинке появляются темные пятна, величина которых находится в прямой зависимости от количества пестицида. Обнаружение и определение производят путем визуального сравнения размера пятна и интенсивности его окраски с размером и окраской пятна стандартного раствора.
Расчет результатов анализа производят по формуле:
Х-А л — Т>
где X — содержание препарата в пробе (в мг/кг или мг/л)\ А — количество препарата, найденное путем визуального сравнения со стандартным раствором (в мкг); В — исследуемая проба (в г или мл).
Метод проверен на
Определение эфирсульфоната в винограде, вине и воде различном материале (виноград, вино, вода), в который предварительно вносили эфирсульфонат в заданном количестве. Результаты проверки приведены в таблице.
Из приведенных данных видно, что точность определения эфирсульфо-
Материал Количество опытов Внесено пестицида (в мкг) Обнаружено (в мкг) Процент определения
Виноград Вино . . . » Вода . . . 7 20 6 5 20 10 20 1 20 10—20 5—10 10—20 Около 20 50—100 50—100 50—100 Около 100
ната [колеблется от 50 до 100%. Однако, несмотря на такие колебания, рекомендуемый метод вполне может быть применен для контроля за остатками эфирсульфоната в винограде и продукции его переработки. Чувствительность метода для вина и воды составляет 0,05 мг/л, для винограда — 0,2 мг/кг. Метод отличается доступностью и быстротой выполнения анализа.
ЛИТЕРАТУРА
Брауде И. Л., С и г а л о в с к а я К- К- Вопр. питания, 1968, № 4, с. 83.— Стефанский К. С. Химия в сельском хозяйстве, 1969, №.5, с. 43.
Поступила 11/1X 1970 г.
УДК 632.96:543.544.4
ОБНАРУЖЕНИЕ НИТРОФЕНОЛЬНЫХ ПЕСТИЦИДОВ НА ТОНКОСЛОЙНЫХ ХРОМАТО ГРАММАХ
А. М. Шмигидина
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Пестициды, относящиеся к группе нитрофенолов, а именно: п-нитро-фенол, 2,4-динитрофенол, 2,4-динитро-б-метилфенол (динок), 2,4-динитро-6-втор-бутилфенол (диносеб), 2,4-динитро-6-втор-октил-фенилкротонат (кара-тан) идентифицируют обычно на тонкослойных хроматограммах по усилению желтой окраски в результате взаимодействия этих веществ со щелочью (Во^; А. М. Шмигидина). Такой способ обнаружения неудобен в случае определения нитрофенолов в пробах органического происхождения, так как большинство коэкстрактивных веществ окрашено в желтый цвет и искажают результаты анализа.
Нами разработан новый способ обнаружения нитрофенольных пестицидов в тонком слое силикагеля, способ состоит в восстановлении нитросое-динений до аминосоединений непосредственно на пластинке водородом, образующимся при взаимодействии цинка с уксусной кислотой, и идентификации продуктов восстановления путем обработки пластинки нингидри-новым реактивом (Б. Г. Беленький). Этот способ обнаружения положен в основу при разработке методов определения акрекса (4,6-динитро-2-(1-метил-н-пропил) изопропилфенилкарбонат) каратана и диносеба в продуктах растительного происхождения, воде, воздухе и биологическом материале. Извлечение пестицидов из исследуемых проб производят органическими растворителями (хлороформ, эфир, н-гексан, ацетон). Экстракт фильтрованием через безводный сернокислый натрий переносят в колбу для отгонки растворителя. Остаток после отгонки наносят на пластинку с закрепленным тонким слоем силикагеля, в состав которого введен цинк в виде пыли. В качестве подвижного растворителя при определении акрекса и диносеба в биологическом материале используют хлороформ, а при определении акрекса и каратана в воде, воздухе и продуктах растительного происхождения применяют систему растворителей н-гексан — ацетон в отношении 4:1. После подъема подвижной фазы на высоту 10 см хроматогра-фирование прекращают, пары растворителя удаляют в вытяжном шкафу. Пестициды обнаруживают на пластинке обрызгиванием (до влажного состояния) ее свежеприготовленной смесью 0,25% этанольного раствора нингид-рина с ледяной уксусной кислотой (10 мл раствора нингидрина +1 мл ледяной уксусной кислоты) и выдерживанием при 100° в течение 5—7 мин.
Величины акрекса, каратана и диносеба в используемых подвижных растворителях и окраска их пятен представлены в таблице. Необходимо отметить, что коэкстрактивные вещества при использовании разрабо-
