CC BY
6
держанию неозона-Д 1—2—4—8—10 мкг в пробе; последний экстрагируют 5,5 мл толуола; далее анализ повторяют, как и в случае анализа исследуемых вод. Расчет результатов производят так же, как и при определении изопрена.
Выводы
1. Разработан фотометрический метод определения изопрена и стабилизатора каучуков — неозина-Д в воде, основанный на реакции их взаимодействия с диазотированным раствором л-нитроанилина.
2. С помощью этого метода можно анализировать воды, содержащие изопрен на предельно допустимом уровне для водоемов (0,005 мг/л), и нео-зон-Д в концентрации 0,004 мг/л. Относительная ошибка определения изопрена составляет 12%, неозона-Д 20%.
ЛИТЕРАТУРА. Исакова H.A., Фихтенгольц В. С. Технический анализ и контроль производства синтетических каучуков. Л., 1970.
Поступила 10/1V 1974 г.
УДК 614.37:678.41-07:678.044.231:543
Н. Ф. Казаринова, И. С. Духовная, М. Г. Власюк
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДИФЕНИЛГУАНИДИНА В БИОЛОГИЧЕСКИХ СРЕДАХ
Всесоюзный научно-исследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимерных и пластических масс, Киев
Дифенилгуанидин (ДФГ) является распространенным ускорителем вулканизации при изготовлении бытовых резиновых изделий и может попадать в организм человека как в условиях производства, так и с пищевыми продуктами, контактирующими с изделиями, в которых используется это вещество.
Нами разработан метод определения ДФГ в моче, крови и тканях внутренних органов животного и человека с применением хроматографии в тонком слое сорбента. В качестве сорбента используют силикагель марки КСК с добавлением 13% медицинского гипса. Извлечение, идентификацию и определение ДФГ в моче производят следующим образом. 20 мл мочи помещают в коническую колбу объемом 250 мл и добавляют 60 мл хлороформа. Содержание колбы оставляют стоять на 1 ч, периодически энергично встряхивая. Затем хлороформ отделяют и экстракцию повторяют тем же количеством хлороформа.Хлороформные экстр акты объединяют и для очистки экстрагируют 2 раза соляной кислотой в соотношении 1:1 (30 мл). Солянокислые экстракты подщелачивают 40% раствором едкого кали до сильнощелочной среды, охлаждают и вновь извлекают хлороформом (30 и 30 мл). Хлороформные экстракты объединяют, упаривают до объема 0,1—0,2 мл и остаток наносят на хроматографическую пластинку силикагель-гипс. В качестве системы подвижных растворителей используют ацетон и 25% водный аммиак в соотношении 99,9:01. Для обнаружения пятен применяют 2% спиртовой раствор 2,6-дихлорхинонхлоримида йодисто-калиевый крахмал. ДФГ с обоими реагентами дает синие пятна на белом фоне. Идентификацию и количественное определение ДФГ производят путем визуального сравнения Rf, интенсивности окраски, размеров пятен исследуемой пробы и стандартного раствора ДФГ.
При определении ДФГ в крови и тканях внутренних органов применяют экстракцию соляной кислотой. К 2—5 мл крови для предотвращения свертывания добавляют 2 мл 10% раствора лимоннокислого натрия, переносят пробу в коническую колбу емостью 250 мл, добавляют 50 мл водного раствора соляной кислоты (1:1) и встряхивают на шуттель-аппарате в течение 1 ч. Подобным же образом экстрагируют ДФГ из измельченных внутренних органов. Полученную эмульсию фильтруют через крупнопористые бумаж-
ные фильтры. Фильтрат подщелачивают 40% раствором едкого кали до сильно щелочной среды рН 10,0—12,0, охлаждают и вновь экстрагируют хлороформом. Хлороформные экстракты объединяют и далее производят определение так, как описано выше. Чувствительность метода 3—5 мкг в пробе.
Описанный метод использован при гигиенической характеристике ДФГ и резин с его содержанием, применяемых в пищевой промышленности. Проведены опыты по изучению скорости всасывания ДФГ, распределения его в организме подопытных животных и скорости выведения из организма.
ДФГ вводили в желудок кроликам однократно в дозе 100 мкг/кг, что составляло примерно х/2 ЬО60- В крови ДФГ определяли через V,, 1, 2, 3, 4, 5 и 6 сут опыта. Для того чтобы проследить распределение препарата в различных органах в динамике, животных забивали в разные сроки от момента введения ДФГ: через 1, 6, 24, 72 и 120 ч. ДФГ обнаруживали в крови уже через г/г ч после введения. Максимальное накопление препарата в крови достигалось через 1 ч. Через 6 ч он уже не определялся. В моче подопытных животных ДФГ обнаруживали через 1 сут, максимум выведения наблюдался через 2 сут. На 6-е сутки после введения выделение вещества прекращалось.
Через 1 ч после введения ДФГ определялся в печени, почках и сердце. Наибольшее количество его содержалось в печени и почках, наименьшее — в сердце. На 5-е сутки присутствия ДФГ в органах выявить не удалось.
Таким образом, в результате острого эксперимента с однократным пероральным введением ДФГ удалось установить быструю способность к всасыванию вещества и относительно быстрое выведение его из организма.
Для более полного понимания механизма действия препарата в ходе хронического эксперимента проводили контроль за всасываемостью ДФГ, изучали характер распределения его в организме подопытных животных и выведение из организма. ДФГ в крови и моче животных определяли на 12-м месяце хронического опыта через 1 и 5 ч после введения вещества. В 71 % случаев выявлено наличие препарата в крови и моче животных, которые получали его в течение 12 мес в дозе 1,2 мг/кг (ЬО50), и в 57 случаев — у животных, получавших его в дозе 0,6 мг/кг.
После окончания эксперимента животных забивали и изучали распределение препарата в печени, почках, сердце, легких, селезенке, надпочечниках и мозге. ДФГ обнаруживали во всех исследуемых органах. Особенно большое количество его (до 30 мкг) находилось в почках. Через 2 нед после окончания введения ДФГ в организм и прекращения эксперимента ни в одном исследуемом органе обнаружить препарат не удалось.
Таким образом, в результате экспериментов установлено относительно быстрое всасывание ДФГ из желудочно-кишечного тракта. Поступив в кровь, препарат сорбируется всеми тканями организма с преимущественным нахождением его в почках и печени.
В условиях длительного, 12-месячного, воздействия малыми дозами препарата выделение его почками после прекращения введения в организм наблюдалось в течение 12 сут у животных, получавших ДФГ в дозе 1,2/кг, и в течение 4 сут — в дозе 0,6 мг/кг. Как показали исследования функции этих органов, какие-либо отклонения от физиологической нормы отсутствовали. По-видимому, это объясняется формированием адаптационных механизмов в ответ на длительное воздействие химического вещества; дальнейшее поступление его не оказывает влияния на функциональное состояние органа.
Выводы
1. Разработан метод определения ускорителя вулканизации дифеннл-гуанидина (ДФГ) в биологических средах с использованием хроматографии в тонком слое сорбента.
2. В результате острого эксперимента с однократным пероральным введением ДФГ животным при помощи разработанного метода установлены быстрая способность к всасыванию вещества и относительно быстрое выведение его из организма.
3. В результате хронического эксперимента на животных показано, что ДФГ после поступления в кровь сорбируется всеми тканями организма с преимущественным нахождением его в почках и печени.
Поступила 15/УП 1974 г.
УДК 614.31:637.1-074:546.36.02.137
В. А. Антонова, О. Н. Прокофьев, В. В. Стрелко, Т. С. Кульбич МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ Cs13I В МОЛОКЕ БЕЗ ОЗОЛЕНИЯ
При разработке настоящей методики было обращено особое внимание щ на подготовку проб молока к анализу, минуя озоление. Немаловажным фактором, который следует учитывать, является присутствие в молоке значительных количеств калия (около 1,4 г/л). Как показали Д. Г. Флейшман и В. В. Глазунов, удельная активность К40 составляет 1660±5 расп/мин на 1 г калия. По этой причине необходимо предусмотреть тщательное отделение Cs137 от этого элемента.
В последнее время появились новые методы выделения Cs137 из растворов с использованием ионного обмена. При определении Cs137 в жидких биопробах все шире применяют аммонийные соли, гетерополикислоты, в частности фосфоромолибдат аммония, который изоморфен с фосфоромо-либдатом цезия (Van der Stricht; Broadbank и соавт.; Bericht im Rahmen I der Vertrages...). Тем не менее наблюдения показали, что для измерения
нескольких пикокюри Cs137 в осадке фосфоромолибдата цезия недопустимо ш присутствие более 0,1 мг калия в пробе (Broadbank и соавт.). Кроме того, фосфоромолибдат аммония кристаллизуется в форме чрезвычайно мелких кристаллов, поэтому возникают большие трудности при фильтровании. Оценка практической емкости фосфоромолибдата аммония показала, что максимально только 60% NH+ может быть заменено Cs+ (Smith и соавт.).
Нами исследована возможность использования в качестве ионообменного поглотителя Csl3T силикагеля марок ШСМ и КСМ, выпускаемых согласно ГОСТ 3956-54. Силикагель измельчают в ступке, отсеивают нужную фракцию (а=0,5—1 мм), которую и используют в работе.
Для анализа молока в обычную лабораторную колонку диаметром 0,8—1 см загружают 15 г сорбента (силикагеля). Силикагель предварительно кипятят в дистиллированной воде в течение 3 мин. Молоко пропускают через колонку со скоростью 300 мл/ч. После пропускания молока силикагель из колонки переносят в стакан (предварительно силикагель £ споласкивают несколько раз дистиллированной водой) и затем осущест-
вляют смыв Cs137 с силикагеля 1 н. соляной кислотой. Для этого силикагель заливают примерно 300 мл кислоты и оставляют на 3 ч. Кислоту сливают, споласкивают силикагель свежей порцией кислоты и вносят носитель на Cs137. Содержание Cs137 в элюате определяют по сурьмяно-йодидной методике (С. Я. Зайдман и Г. Е. Шаронов).
Чтобы убедиться в том, что обменной емкости силикагеля достаточно для извлечения всего находящегося в молоке Cs137, поставлены эксперименты с различными навесками силикагеля. Найдено, что при навеске силикагеля 10—15 г практически весь Cs137 концентрируется на сорбенте из пробы молока 1 л.
Изучено также влияние скорости пропускания молока через силика-Ь гель на полноту сорбции Cs187. При скорости пропускания 500 мл/ч наблю-
3 Гигиена и санитария № 4
65
