CC BY
6
в а Ю. Г., Д а л о н-М о ш е С. В кн.: Материалы Конференции по итогам научных исследований за 1968 г. Ин-та общей и коммунальной гигиены. М., 1969, с. 51.— Ockert G., Gerwien I.. Z. ges. Hyg., 1968, Bd 14, S. 683.
Поступила 8/VI 1973 r.
УДК 614.777-078:576.851-31
Т. В. Доскина
О ВЫДЕЛЕНИИ ПАРАЗИТИЧЕСКИХ И САПРОФИТНЫХ ШТАММОВ БДЕЛЛОВИБРИО БАКТЕРИОВОРУС ИЗ ПРИРОДНЫХ ВОД
Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Для выделения бделловибрио из воды нами было использовано параллельно 2 метода — метод спонтанного лизиса (А. Гелен и Д. Лямблен) и метод бляшкообразующих единиц (Stolp и Starr). Выделение бделловибрио из натурных вод в чистой культуре осложняется тем, что эти воды значительно обсеменены посторонней микрофлорой (простейшими, миксо-бактериями, бактериофагами и др.), способной лизировать чувствительные бактериальные культуры в жидкой среде и образовывать бляшки на твердой питательной среде. С целью освобождения исследуемых вод от посторонней микрофлоры мы в своих исследованиях остановились на методе фильтрования через бактериальный фильтр № 3, что исключало появление лизиса и образование бляшек за счет простейших и миксобактерий.
На первом этапе для выделения бделловибрио бактериоворус из открытых водоемов пользовались методом спонтанного лизиса бактериальной взвеси кишечной палочки, внесенной в исследуемую пробу воды. Однако этот метод не дает полного представления о количественном содержании изучаемого микроорганизма в исследуемых водах. В связи с этим нами был разработан метод количественного выделения вибриона с использованием метода агаровых слоев без предварительного подращивания.
В основу метода положены данные экспериментальных исследований Seidler и Starr, которые установили линейную зависимость между относительной концентрацией бделловибрио бактериоворус (в чистой культуре) и образованием бляшек. Исследователи пришли к заключению, чго каждая жизнеспособная клетка вибриона образует 1 бляшку.
Метод количественного определения микроорганизма заключается в следующем. Пробу исследуемой воды фильтруют через бактериальный фильтр № 3, затем 1 мл фильтрата засевают на малопитательный агар DNB/IO, предлагаемый Seidler и Starr и модифицированный нами применительно к ингредиентам отечественного производства. В качестве бактерий хозяев используют газон кишечной палочки. Чашки инкубируют в термостате при 37° в течение 48 часов. Бляшки бделловибрио бактериоворус появляются на 2-е сутки инкубирования.
С параллельным использованием метода спонтанного лизиса и метода агаровых слоев нами было изучено распространение микроорганизма сточных вод Тушинской станции аэрации (Москва), в воде реки Москвы в черте Москвы, воде верхнего бассейна реки Москвы, являющегося источником централизованного водоснабжения, питьевой воде из водопроводной сети, воде из скважин, водозаборных колонок и родников.
Анализ полученных данных показывает, что в целом ряде исследованных вод процент выделения бделловибрио бактериоворус методом просветления значительно выше процента выделения этого микроорганизма по бляшкообразующнм единицам. Следует отметить, что аналогичные данные получили Shilo и Bruff в условиях эксперимента. Исследователи установили, что спектр активности исследованных ими штаммов бделовибрио бактериоворус значительно шире при определении методом просветления, чем
при использовании метода бляшкообразующих единиц. Это явление экспериментаторы объясняют тем, что для образования бляшек от клетки бдел-ловибрно бактериоворус требуется, кроме прикрепления к бактерии хозяина и ее лизиса, наличие способности размножаться в условиях вегетн-рующих клеток бактерий хозяев. Помимо того, возможно угнетение бляшко-образующей способности бделловнбрио бактериоворус метаболитами клеток бактерии хозяев.
Полученные результаты натурных исследований могут быть обусловлены модификациями, внесенными нами в методику выделения вибриона и позволяющими дифференцировать его паразитические и сапрофитные штаммы. Метод спонтанного лизиса (в нашей модификации) заключается в том, что к пробе добавляли взвесь убитой нагреванием культуры бактерий хозяев. Благодяря этому, по-видимому, учитываются не все штаммы бделловнбрио бактериоворус, находящиеся в пробе, поскольку, по данным Stolp и Starr, паразитические штаммы этого микроорганизма для своей жизнедеятельности требуют присутствия живых клеток бактерий хозяев. В то же время сапрофитные штаммы способны лизировать убитые бактерии. Следовательно, можно предположить, что при использовании метода бляшкообразующих единнц, основанного на лизисе живых бактерий хозяев, выделяются паразитические штаммы бделловнбрио, а при использовании метода спонтанного лизиса (в нашей модификации) — сапрофитные.
В то же время Shilo и Bruff выделили мутанты бделловнбрио, которые росли в отсутствие бактерий хозяев, но сохраняли способность прикрепляться и лизировать живые клетки бактерий хозяев. Несколько позднее Burger и соавт. установили, что выделенный ими паразитический штамм вибриона может расти на искусственной среде с добавлением экстракта клеток хозяев. Эти исследования позволяют предположить, что при изменении условий жизнедеятельности возможна трансформация паразитических штаммов в сапрофитные и, наоборот, сапрофитных в паразитические.
Очевидно, для этого необходимо какое-то время. Этим можно объяснить отмеченное Varou и Shilo удлинение сроков, необходимых для завершения цикла роста бделловнбрио бактериоворус при использовании в качестве бактерий хозяев взвеси убитых нагреванием бактериальных клеток.
Таким образом, есть основания расценивать штаммы, выделенные методом бляшкообразующих единиц, как поразитические, а методом спонтанного лизиса — как сапрофитные, но с возможной их трансформацией.
ЛИТЕРАТУРА. Гелен А., Лямблэн Д. Изв. АН СССР (Серия биол.), 1968, № 3, с. 395.— Burger A., Drews L., L a d w i g R., Arch. Mik-robiol., 1968, Bd 61, S. 261,—S e i d 1 e r R., Starr M., J. Bact., 1969, v. 97, p. 912,—Shilo M., Bruff В., J. gen. Microbiol., 1965, v. 40, p. 317,—S t о 1 p H., Starr M., Antonie v. Leeuwenhoek, 1963, v. 29, p. 217,— V a r o n M., Shilo M., J. Bact., 1969, v. 97, p. 977.
Поступила 20/VI 1973 r.
За рубежом
УДК 614.7:614:061.14(100)
Проф. Ф. Г. Кроткое
ПРОБЛЕМЫ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ В ДЕЯТЕЛЬНОСТИ ВОЗ
Центральный институт усовершенствования врачей, Москва
Научно-технический прогресс, способствуя росту материального благосостояния населения индустриально развитых стран, ведет к интенсивному загрязнению окружающей среды. За последние годы серьезное и обос-
