данным параллельно проводившегося эксперимента, зарегистрировано ускорение процессов физиологического старения. У животных 1-й и 3-й групп (у которых не обнаружено отклонений в динамике процессов старения) различия в межорганном распределении микроэлементов от животных 2-й группы значительно меньшие и обнаруживаются лишь в некоторых тканях. При этом у животных 1-й и 3-й групп они имеют разнонаправленный по отношению к 2-й группе характер.
3. Влияние воды с разной минерализацией на обмен и межорганное распределение микроэлементов может быть учтено при разработке гигиенических рекомендаций и нормативов по оценке качества питьевой воды.
ЛИТЕРАТУРА. Г а б о в и ч Р. Д. Влияние химических и физических факторов внешней среды на организм при различных режимах УФ-облучения. — В кн.: Материалы к 10-му Всесоюз. совещанию по биологическому действию ультрафиолетового излучения. Пущино-на-Оке, 1973, с. 122—123. — Скоблин А. П., Б е л о у с А. М. Биохимия остеотропных элементов и их роль в процессах оссификаиии. — В кн.: Скоблин А. П., Белоус А. М. Микроэлементы в костной ткани. М., 1968, с. 10—53.
Поступила 20/XI 1974 г.
THE EFFECT OF WATER WITH DIFFERENT MINERALIZATION LEVELS ON THE
BODY OF ANIMALS
R. D. Gabovich, N. F. Uzhva
Water of different mineralization levels (from 40 to 2000 mg/l) has a pronounced effect on the metabolism and the distribution of the investigated microelements in various organs. The most unfavorable shifts were noted in animals drinking water with a high content of salts (2000 mg/l). According to the data of simultaneously performed tests these animals presented an acceleration of the physiological processes of aging.
УДК 615.285.7.033-1-615.285.7.015.7
Jl. Г. Александрова
НАКОПЛЕНИЕ И РАСПРЕДЕЛЕНИЕ РОНИТА В ОРГАНИЗМЕ ТЕПЛОКРОВНЫХ ЖИВОТНЫХ
Киевский научно-исследовательский институт гигиены труда и профзаболеваний
Ронит (действующее начало — S-этилциклогексил-М-этил-тиокарба-мат) относится к числу новых гербицидов, с успехом применяемых для уничтожения сорняков в посевах сахарной свеклы и некоторых других сельскохозяйственных культур. Несмотря на то что препарат при однократном поступлении в организм теплокровных животных обладает сравнительно низкой токсичностью, его воздействие на ряд важных органов и систем организма, в том числе печень, почки, головной мозг и др., весьма неблагоприятно (В. Г. Ребрин). Сведения о накоплении и распределении ронита в различных внутренних органах и крови интактных животных, а также о выведении его из организма представляют теоретический и практический интерес. Распределение ронита и его выведение из организма теплокровных, изучавшееся методом меченых атомов (Wise), описаны в литературе чрезвычайно кратко.
Накопление и распределение ронита в организме мы исследовали в опытах на 50 беспородных белых крысах, которым вводили в желудок максимально переносимую дозу технического пестицида (72,7% действующего начала) из расчета 1 г на 1 кг. Через 30 мин, 1, 2, 3, 4, 6, 18 и 24 ч методом тонкослойной хроматографии определяли содержание ронита в крови и тканях внутренних органов — печени, легких, почках, сердце, селезенки и мозга.
Принцип метода тонкослойной хроматографии заключается в хромато-графировании ронита в тонком, закрепленном слое окиси алюминия в подвижной фазе гексан — бензол — ацетон или гептан — ацетон и дальней-
шей идентификации с помощью проявителя, содержащего азотнокислый висмут. Минимально определяемое количество ронита 10 мкг. Чувствительность метода для анализа крови и тканей внутренних органов 2 мг% или 20 мкг/г, полнота определения 88—92%.
В пробирку с притертой пробкой, предварительно смоченную 5% раствором лимоннокислого натрия, вносят 0,5 мл цельной крови и 0,5 г ткани, приливают 5—8 мл диэтилового (для крови) или петролейного эфира (для тканей) и в течение 30 мин экстрагируют встряхиванием и последующим отстаиванием 30—40 мин. Экстракт сливают, просушивают над сернокислым безводным натрием и упаривают до объема 0,5 мл. Исследуемый и стандартные растворы ронита наносят параллельно на хроматографическую пластинку, которую помещают в соответствующую подвижную фазу: для анализа крови — бензол — гексан (3 : 2), а для тканей внутренних органов можно одну из 2 смесей — гексан — бензол — хлорофом (4:2: 1) или гептан — ацетон (2 : 1). Затем проявляют зоны локализации пестицида на пластинке реактивом, в состав которого входят азотнокислый висмут, йодистый калий, серная кислота и др. Ронит окрашивается в розово-коричневый цвет. Экстрактивные вещества биоматериала либо вовсе не окрашиваются, либо окрашиваются в желтый цвет и не мешают определению пестицида. Количественную оценку производят путем сравнения площади и интенсивности окрашивания пятен на хроматограммах проб и стандартных растворов ронита.
Исследования показали, что ронит сравнительно быстро проникает во все органы и обнаруживается в количестве 29—43 мкг/г. Через 1 ч после введения содержание пестицида возрастает примерно в 4—8 раз; наибольшее его количество отмечено в тканях легких и почек — 236 и 225 мкг соответственно (рис. 1).
Как видно из рис. 1, через 2 ч содержание ронита во всех органах уменьшается почти вдвое. Наибольшее его количество обнаружено в тканях почек (135 мкг/г), наименьшее — в печени (15 мкг/г). Вторичное значительное повышение содержания ронита в легких наблюдается через 3 ч после введения (223 мкг/г). Почти в 2 раза увеличивается содержание пестицида в селезенке (рис. 2). Во всех остальных органах количество пестицида уменьшается в 3—7 раз (см. рис. 1 и 2). Через 4 ч после введения ронита содержание его продолжает уменьшаться (в 2—10 раз) и составляет в легких в среднем 23,3 мкг/г, в селезенке — 34,7 мкг/г. Через 6 ч после введения ронит определяется примерно на том же уровне, что и через 4 ч, а уже через 18 ч пестицид обнаружен только в печени, легких и почках одной из крыс. Небольшие количества ронита через 24 ч после введения выявлены в печени и легких одной из 6 крыс, страдавшей фурункулезом.
Исследование проб крови животных, получивших максимально переносимую дозу препарата, показало, что ронит обнаруживается в крови через 30 мин после введения на уровне в среднем 3,16 мкг/мл (в 3 из 7 проб). На-
мкг/г
мнг/г
ЗОмин 1 2 3 4 5 6 !в 24ч
Рис. I. Динамика накопления ронита в тканях печени (/), легких (2) и сердце (3) во времени.
Рис. 2. Динамика накопления ронита в тканях почек (/), селезенки (2) и головного мозга (3) во времени.
ибольшее количество ронита (10 мкг/мл) обнаружено через 1 и 6 ч после введения. Через 18 ч содержание ронита в крови составляет 1,56 мкг/мл (в 1 из 7 проб), а через 24 ч пестицид не найден ни у одного из 6 экспериментальных животных.
Таким образом, изучение динамики накопления и распределения ронита в организме теплокровных методом тонкослойной хроматографии показало, что пестицид быстро проникает из желудочно-кишечного тракта во внутренние органы. Скорость накопления его в различных тканях неодинакова. Так, наибольшие концентрации ронита выявлены в тканях легких, почек, печени, сердца и селезенки через 1 ч, а в головном мозге — через 2 ч после введения препарата. В селезенке и легких наблюдается вторичный максимум накопления через 3 ч после введения. По величине накопления ронита исследованные ткани можно расположить в следующий ряд в порядке убывания — легкие, почки, сердце, селезенка, печень, головной мозг. Скорость выведения из тканей также неодинакова и зависит от их вида.
Через 24 ч пестицид практически не обнаруживается ни в крови, ни в исследованных органах. Сравнение полученных материалов с данными литературы затруднено из-за применения принципиально различных методов анализа и крайне ограниченной информации о роните. Вместе с тем при сравнении с накоплением и выведением из организма теплокровных других тиокарбаминовых пестицидов, таких, как тиллам и эптам, общим является максимальное накопление пестицидов в легких, почках и печени и выведение их из организма главным образом с мочой и выдыхаемым воздухом (Fang и соавт.; Ong Visitation и Fang).
Интересно отметить также, что на хроматограммах экстрактов проб отмечены продукты метаболиза, отличающиеся по величине Rt и окраске пятен от ронита и сходные по величине Rf и цвету пятен со стандартными растворами циклогексиламина и дициклогексиламина. Дальнейшее исследование продуктов метаболизма с целью получения более глубокого представления о механизме токсического действия пестицидов представляет несомненный интерес.
ЛИТЕРАТУРА. Рсбрин В. Г. Токсикология нового гербицида ронита и гигиена применения его в сельском хозяйстве. Автореф. дис. Львов, 1973. — F a n g S. С., George М., Freed V. Н. The metabolism of S-propyl-l-Cu-n-Butylethylthiocar-bamate (Tillan-C14) in rats. — «J. agrie. Food Chem.», 1964, v. 12, p. 37—40. —Visitación Y. Ong, Fang S. C. In vivo metabolism of ethyl-l-Cu-N,N-Di-n-propylt-hiolacarbamate in rats. — «Toxicol, appl. Pharmacol.», 1970, v. 17, p. 418—425.
Поступила 11/11 1974 г.
ACCUMULATION AND DISTRIBUTION OF RONIT IN THE BODY OF WARM-BLOODED ANIMALS
L. G. Alexandrova
The method of thin layer chromatography was used to investigate the accumulation and the distribution of ronit (S-ethyl-cyclohexyl-N-ethylthiocarbamate) in the internal organs (liver, lungs heart, spleen, kidneys, cerebrum) and the blood in case of administration of the maximum tolerable dose of pesticide (1 gm/kg) into the stomach of experimental animals. The maximum accumulation was noted to take place in the tissues of the lungs, kidneys and the heart.