CC BY
2
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
Онкогематология
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ АБЕРРАЦИИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЦИТАРНЫМ ЛЕЙКОЗОМ И ИХ ВЛИЯНИЕ НА ПРОГНОЗ ТЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ
Е.В. Мотыко1, М.А. Михалева1, С.В. Волошин1,2, Д.В. Кусто-ва1, А.Н. Кириенко1, Т.Н. Герт1, И.В. Леппянен1, С.Ю. Линников1, А.Д. Гарифуллин1, Е.В. Ефремова1, А.А. Кузяева1, А.В. Шмидт1, А.Ю. Кувшинов1, И.С. Мартынкевич1, С.В. Сидоркевич1
Место работы: 1. ФГБУ «РосНИИ гематологии и транс-фузиологии ФМБА», Санкт-Петербург, Россия; 2. ФГБВОУ ВО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» МО РФ, Санкт-Петербург, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Проанализировать генетические аберрации у больных ХЛЛ, используя метод секвенирования следующего поколения (NGS), и оценить их влияние на прогноз. Материалы и методы: Исследовано 67 пациентов с диагнозом ХЛЛ, медиана возраста составила 62 года (27-82). Мутационный статус генов тяжелой цепи иммуноглобулинов (IGHV) оценивали методом секвенирования по Сэнгеру (порог гомологии 98%). NGS выполнялось с использованием панели из 118 генов на секвенаторе Miseq (Illumina). Результаты: У 21,1% пациентов выявили мутированный статус VH-генов, у 78,9% — немутированный. Методом NGS выявлены мутации у 59/67 (88,1%) больных. Всего обнаружена 151 мутация: 124 миссенс-мутаций, 8 нонсенс-мутаций, 15 со сдвигом рамки считывания, 3 мутации в областях сплайсинга и 1 делеция без сдвига рамки считывания. Наиболее часто (а1%) мутации выявлены в следующих генах: NOTCH1 (22,4%), SF3B1 (17,9%), XPO1 (16,4%), TP53 (14,9%), MGA (9,0%), ATM (7,5%), IKZF3 (7,5%), в 4,5% случаях — в генах FBXW7, RPS15, BRAF и в 3,0% случаях — в генах BIRC3, NOTCH2, KRAS. Высокая мутационная нагрузка (2 и более мутаций) обнаружена у 40/60 (66,7%). Мутации в рецепторе NOTCH1 ассоциированы с немутированным статусом IGHV (p = 0,002), а также с наличием мутаций в гене TP53 (p = 0,002). На сегодняшний день накопилось большое количество данных, указывающих на участие XPO1 в онкогенезе и возможность использования его в качестве терапевтической мишени при ХЛЛ. Внашем исследовании все патогенные мутации в гене XPO1 найдены в кодоне E571, также обнаружены 3 мутации с неизвестным клиническим значением (D624G у 2 больных и c591-3dupT). Обнаружена ассоциация мутаций вопухолевом супрессоре TP53 с del17p (p = 0,001) и мутациями в гене XPO1 (p = 0,002). У 3/10 больных с мутациями в TP53 аллельная нагрузка мутации была ниже 10%. Показано, что более короткая продолжительность TTFT наблюдалась у пациентов с немутированным статусом IGHV (p = 0,043), мутациями в генах NOTCH1 (p = 0,026) и SF3B1 (p = 0,081). При исследовании ОВ наиболее неблагоприятный исход ассоциировался
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
с мутациями в гене SF3B1 (p = 0,024) и с немутированным статусом IGHV (p = 0,038).
Заключение: Молекулярно-генетический профиль пациентов с ХЛЛ высоко гетерогенен. Наиболее часто выявлены мутации в генах NOTCH1, SF3B1, TP53, XPO1 и MGA. Результаты NGS в сочетании с клинической стадией заболевания, хромосомными аберрациями, мутационным статусом IGHV помогают выявить пациентов, которые имеют высокий риск неблагоприятного течения заболевания и, следовательно, нуждаются в более тщательном наблюдении.
МУТАЦИИ С НЕЯСНЫМ КЛИНИЧЕСКИМ ЗНАЧЕНИЕМ: ПОТЕНЦИАЛЬНЫЙ МЕХАНИЗМ РАЗВИТИЯ УСТОЙЧИВОСТИ К ИТК У ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМ МИЕЛОИДНЫМ ЛЕЙКОЗОМ?
Д.В. Кустова1, А.Н. Кириенко1, Е.В. Мотыко1, И.В. Леппянен1, Т.Н. Герт1, Е.В. Ефремова1, Е.В. Морозова2, В.А. Шуваев13, С.В. Сидоркевич1, И.С. Мартынкевич1
Место работы: 1. ФГБУ «РосНИИ гематологии и трансфузио-логии ФМБА», Санкт-Петербург, Россия; 2. Клиника «НИИ детской онкологии, гематологии и трансплантологии им. Р.М. Горбачевой», Санкт-Петербург, Россия; 3. ФГБОУ ДПО «РМАНПО» Минздрава России, Москва, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: Используя NGS данные оценить влияние BCR::ABL-независимых мутаций с неизвестной клинической значимостью (VUS) на развитие резистентности к ИТК у больных ХМЛ.
Материалы и методы: В исследование включено 32 пациента (18 мужчин и 14 женщин) (Ме = 44) и 11 пациентов, ответивших на лечение (5 мужчин и 6 женщин) (Ме = 58). Цитогенетический анализ показал наличие дополнительных хромосомных аберраций(ДХА) у 23% пациентов с резистентностью и у 18% пациентов, ответивших на лечение (р = 0,043). Для всех пациентов было проведено NGS исследование миелоидной панели из 118 генов с глубиной прочтения 200х-1000хна приборе MiSeq (Illumina). Клиническую значимость обнаруженных мутаций оценивали по базам данных COSMIC и VarSome. Функциональная аннотация генов проводилась с помощью базы данных KEGG. Результаты: В группе ответивших на лечение VUS обнаружены у 81% пациентов. Наиболее часто мутации встречались в генах TET2 (4/11), KMT2D (1/11), NF1 (3/11). В группе с устойчивостью к терапии мутации c неясной клинической значимостью обнаружены у всех пациентов (р = 0,01). Наиболее часто мутации встречались в генах NF1 (3/32), TET2 (5/32), KMT2D (4/32), NOTCH2 (2/32), BCR (2/32), ETV6 (2/32), ATM (2/32). Согласно данным KEGG PATHWAY многие из обнаруженных генов такие, как PTEN, NF1, BRAF, ATM, KLF2, PIK3CB, STAT3 участвуют в сигнальных путях
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
том/vol. 13 #3s1 • 2023
РОССИЙСКИЙ Willi НШОШЕСКШ 11VII ШГРЕСС 2D23 АЛ I II
Онкогенетика
FOXO и EGFR. Сигнальные пути FOXO и EGFR контролируют широкий спектр клеточных функций, важных для он-когенеза. У пациентов с мутациями в сигнальном пути FOXO наблюдается больше двух ДХА. У таких пациентов обнаруживается сочетание трисомии 8хромосомы и изо-хромосомы 17q, моносомии 7хромосомы и транслокации t (3;12), трисомии 8 хромосомы, изохромосомы 17q и дупликации дериватной хромосомы 22. Медиана беспрогрессивной выживаемости пациентов с мутациями в сигнальных путях FOXO или EGFR составляет 16 месяцев, в то время как у больных без мутаций в сигнальных путях FOXO или EGFR медиана составила 21 месяц. У больных без мутаций в сигнальных путях FOXO или EGFR и ДХА медиана не достигнута (р = 0,039). За все время наблюдения у 60% пациентов с мутациями в сигнальных путях EGFR или FOXO БМО так и не был достигнут, несмотря на несколько линий терапии. Данный факт говорит о возможном совместном влиянии двух этих факторов на развитие резистентности.
Заключение: NGS исследование позволило выявить VUS у всех пациентов, однако, генетический ландшафт резистентных пациентов более разнообразен, чему ответивших на лечение ИТК. В группе с резистентностью наибольшее количество мутаций было обнаружено в генах участниках сигнальных путей FOXO и EGFR, а наличие их взаимосвязи с ДХА подчеркивает их важность в формировании устойчивости ктерапии ИТК.
■ ОНКОГЕНЕТИКА
ПРОТИВОМЕТАСТАТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ИНГИБИТОРОВ ГЕНОВ СТВОЛОВОСТИ
М.К. Ибрагимова, Н.В. Литвяков
Место работы: НИИ онкологии — филиал ФГБНУ «Томский НИМЦ РАН», Томск, Россия Эл. почта: [email protected]
Цель: В настоящей работе было проведено исследование механизма дедифференцироваки опухолевых клеток с использованием клеточных линий и ингибиторов генов стволовости (ГС).
Материалы и методы: Культивирование линий клеток. Исследованы стандартные клеточные линии рака молочной железы (РМЖ) ВТ474, ВТ-549, МЮА-МВ-231, МЮА-МЮ-468, SK-BR-3 и T47D. Клетки были культивированы в С02-инкубаторе в стандартных условиях. Использование ингибиторов. Для исследования влияния амплифика-ций генов стволовости на процесс дедифференцировки маммосферообразования в лунки были добавлены инги-
биторы ГС: В^1532-ингибитор гена TERT, 10058^4-инги-битор гена MYC и FLI-06-ингибитор гена NOTCH1, по одному и смесь всех трех ингибиторов. Результаты: Оценено влияние ингибиторов ГС на де-дифференцировку опухолевой линии T47D. Показано, что FLI-06 практически полностью ингибирует способность CD44- клеток к дедифференцировке, но в меньшей степени влияет на клетки дикого типа. BIBR1532 полностью ингибирует способность клеток дикого типа образовывать маммосферы, но часть клеток CD44- сохраняет способность к дедифференцировке, образуя соразмерные контролю маммосферы. Ингибитор 10058-F4 снижает количество маммосфер и в клетках дикого типа, и в популяции сортированных CD44- клетках. Все 3 ингибитора полностью ингибируют образование маммосфер. На 3 сутки после воздействия 3 ингибиторов в CD44-сортированных клетках с ИЛ6 по сравнению с клетками CD44- без ингибиторов, активно образующих маммосферы, снижена экспрессия в 2 и более раза генов BMI1, CDK6, MYC, FZD9, NOTCH1 и повышена экспрессия генов KLF5, KLF6 и SOX2.
Оценена противометастатическая активность 3 химических ингибиторов ГС на модели карциномы легких Льюис (LLC). Индукцию метастазов проводили, вводя клетки опухоли мышам C57BI/6 непосредственно в кровоток. В результате проведения эксперимента по исследованию влияния 3 ингибиторов ГС (инкубация клеток с ингибиторами перед введением опухолевых клеток, оценка жизнеспособности опухолевых клеток, внутривенное введение и оценка метастазирования в легких) достигнуто 100% ингибирование метастазирования на модели LLC. Заключение: Низкомолекулярные ингибиторы ГС обладают способностью подавлять дедифференцировку опухолевых клеток и способны предотвратить метастазирование на примере LLC. Разработка противометастатических препаратов с использованием представленных ингибиторов ГС является перспективным направлением. Финансирование: Работа поддержана грантом РНФ 21-15-00243 «Подавление способности опухолевых клеток к стволовой пластичности для предотвращения развития метастатической болезни».
ТАРГЕТНЫЙ АНАЛИЗ ФРАГМЕНТИРОВАНИЯ СЦДНК ПРИ КОЛОРЕКТАЛЬНОМ РАКЕ С ПОМОЩЬЮ ЦИФРОВОЙ КАПЕЛЬНОЙ ПЦР
А.С. Хромова1, А.П. Коваль1, К.А. Благодатских1, Я.А. Шты-кова2, Н.Е. Кушлинский3, И.В. Житарева1, Д.М. Чудаков1, Д.С. Щербо1
Место работы: 1. ФГАОУ ВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва, Россия; 2. ФГБУ «ФЦМН» ФМБА России, Москва, Россия; 3. ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия Эл. почта: [email protected]
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том/vol. 13 #3s1 • 2023
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
