CC BY
21
the body of cats. Studies were performed on 2 groups of cats in the amount of 9 heads aged 2 to 5 years, without concomitant somatic diseases. Butofosfan was administered intramuscularly in doses of 1.5 and 2.5 mg / kg once. Calculation of pharmacokinetic parameters was performed within 200 hours. The maximum concentration of phosphorus is reached 4 days (100 hours) after drug administration. Further, there is a gradual decrease in the concentration of phosphorus. The maximum concentration of phosphorus is reached 4 days (100 hours) after drug administration. Further, there is a gradual decrease in the concentration of phosphorus. The study showed that the studied doses of the drug butofosfana have a similar pharmacokinetic profile after a single intramuscular injection in doses of 1.5 and 2.5 mg / kg body weight. The area values under the pharmacological curve (AUC). slightly increased after increasing the dose of the drug: from 81.56 ± 2.22 (dose 1.5 mg / kg) to 82.22 ± 3.01 (dose 2.5 mg / kg) (^g-h) / ml, which indicates about unequal admission of the studied doses of the drug in the blood. With increasing dose, the clearance of the drug increased. And with a dose of 2.5 mg / kg was 0.030 ml / min. This means that the purification of blood serum from an organophosphate drug occurs at a given rate.
However, with the administration of buto-phosphane at a dose of 1.5 mg / kg of body weight, more positive pharmacokinetic parameters were established. These differences, apparently, explain the best therapeutic effect of a dose of 1.5 mg / kg body weight.
Б01 10.31588/2413-4201-1883-238-2-133-138 УДК 636.92+619+612+577.161
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ АФЛАТОКСИКОЗЕ НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ РЕТИНОЛА АЦЕТАТА И ЦЕОЛИТА
Мухарлямова А.З. - соискатель, Тремасова А.М. - д.б.н., в.н.с., Танасева С.А. - к.б.н., с.н.с., Шангараев Н.Г. - с.н.с., *Софронов П.В. - к.б.н.,
Семенов Э.И. - к.б.н.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности» *ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: афлатоксин, цеолит, ретинола ацетат, кровь, кролики Key words: а!Мохт, zeolite, retinol acetate, blood, rabbits
Микотоксины - вторичные метаболиты микроскопических грибов, относящиеся к одной из доминирующих в последние годы групп биогенных ядов, загрязняющих как корма, так и продукты питания [4, 10, 16]. Большинство микотокси-нов обладает высокой устойчивостью к воздействию физико-химических факторов и не разрушается даже при длительном нагревании субстрата (корма). Грибы обладают высокой биологической активностью, многие могут развиваться даже при низких температурах, поэтому за короткие сроки способны загрязнять значительные массы корма [1, 2, 5, 14, 16]. Среди мико-токсинов, представляющих опасность для здоровья человека и животных, наиболее распространены афлатоксины, трихоте-
цены, зеараленон, охратоксины, патулин [10,13,16]. По своей химической структуре афлатоксины являются фурокумаринами. Из 4-х основных представителей семейства афлатоксинов (В1, В2, 01 и 02) более 80% всей суммы этих микотоксинов приходится на афлатоксин В1, чрезвычайно токсичного и синтезируемого в наибольших количествах [4]. Афлатоксины - одни из самых сильно действующих гепатотоксинов. Канцерогенная активность афлатоксинов отличается от действия других гепатокан-церогенных веществ некоторыми особенностями. Это выражается в возможности развития опухолевого процесса не только при длительном влиянии малых доз токсина, но и при однократном введении
большой дозы, в возможности развития опухоли печени часто без предшествующего цирроза, развития на фоне длительно сохраняющейся биллиарной пролиферации гепатоцеллюлярного рака, а не аденокар-цином. Сущность биологического действия афлатоксинов на организм заключается в подавлении жизненно важных функций - синтез белка, нуклеиновых кислот и нарушение синтеза липидов. Также было отмечено снижение содержания общего и микросомного белка в печени крыс и обезьян и значительное уменьшение концентрации белка в сыворотке крови различных видов животных. Афлатоксины действуют непосредственно на оболочки клеток и мембраны различных цитоплаз-матических включений и вызывают изменения их ферментной активности [4, 11, 12]. Одним из способов детоксикации организма и коррекции обменных процессов является применение различных адсорбентов и природных минералов [3, 6, 7, 8, 9, 12, 15]. В то же время проблема микоток-сикозов у кроликов и ее профилактика недостаточно разработана.
Цель исследования - изучение некоторых морфологических и биохимических показателей крови кроликов при длительном воздействии на их организм афлаток-сина В1 на фоне применения ретинола ацетата и цеолита.
Материал и методы исследований. В лабораторных условиях ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» был проведен опыт с использованием 24 кроликов, живой массой 3,5-4 кг, разделенных по принципу аналогов на четыре равнозначные группы. Условия содержания и кормления животных соответствовали зоогигиеническим нормам. Срок исследования составил 55 суток.
Первая группа служила биологическим контролем и получала «чистый» корм на протяжении всего опыта. Животные второй, третьей и четвертой групп получали в течение 25 сут (с 30-х по 55 сут) основной рацион, контаминированный афла-токсином В1 в концентрации 3 ПДК (75 мкг/кг корма). Кроликам третьей и четвертой группы на протяжении всего опыта в
течение 55 сут дополнительно вводили в рацион масляный раствор ретинола ацетата в дозе 1500 МЕ на особь. Животные четвертой группы в течение 25 сут (с 30-х по 55 сут) получали дополнительно цеолит Татарско-Шатрашанского месторождения Республики Татарстан из расчета 2% от рациона.
Взятие крови для исследований осуществляли из краевой вены уха на 35, 45 и 55 сут опыта. Количество эритроцитов, лейкоцитов, содержание общего гемоглобина в периферической крови определяли по общепринятым методикам на автоматическом гематологическом анализаторе Mythic 18. Содержание общего белка устанавливали рефрактометрически, количественное соотношение белковых фракций - нефелометрически. Активность ас-партатаминотрансферазы (АСТ) и алани-наминотрансферазы (АЛТ) определяли на анализаторе EXPRESS PLUS. Обработку цифрового материала проводили методом вариационной статистики с применением критерия достоверности по Стьюденту на персональном компьютере с использованием программ Excel. Разница между сравниваемыми величинами считалась достоверной при уровнях Р < 0,05.
Результаты исследований. Установлено, что у всех животных, получавших корма, контаминированные токсином, клинические признаки токсикоза проявляются угнетением, снижением потребления корма, расстройством деятельности желудочно-кишечного тракта (диарея), снижением содержания морфо-биохимических показателей в крови. Аналогичные отклонения в клиническом статусе у кроликов третьей группы наблюдали на 3-5 сут позже. При этом совместное применение ретинола ацетата и цеолита в четвертой группе способствовало уменьшению признаков характерных для афлатоксикоза.
Результаты исследований, представленные в таблице 1 свидетельствуют о негативном воздействии афлатоксина Bi на морфологические показатели крови кроликов, указывая на серьезные деструктивные изменения в кроветворных органах.
Таблица 1 - Морфологический состав крови кроликов при афлатоксикозе на фоне применения ретинола ацетата и цеолита_
Группа животных Показатель
Лейкоциты, 109 /л Эритроциты, 1012 /л Гемоглобин, г/л
35 суток
Первая 9,39±0,22 5,50±0,17 123,56±2,07
Вторая 9,25±0,2 5,14±0,18 116,28±1,79*
Третья 9,15±0,2* 5,20±0,20 126,63±1,54
Четвертая 9,35±0,19 5,36±0,16 126,62±1,93
45 суток
Первая 9,48±0,21 5,39±0,17 124,87±1,90
Вторая 8,53±0,18** 4,72±0,19 112,11±2,01*
Третья 8,80±0,17* 4,91±0,20 119,16±1,64
Четвертая 9,11±0,20 5,26±0,18 124,36±1,83
55 суток
Первая 9,41±0,17 5,44±0,18 123,92±1,67
Вторая 7,76±0,16** 4,12±0,16** 102,57±1,81**
Третья 8,03±0,18** 4,43±0,17* 112,22±1,83**
Четвертая 8,73±0,17* 4,98±0,19* 118,87±2,05
Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01
В то же время исследование морфологических показателей крови у кроликов третьей группы показало, что введение в рацион ретинола ацетата, способствует снижению негативного действия афлаток-сина на организм. Изменения показателей в данной группе были менее выражены, но при этом носили закономерный характер. Более выраженное положительное влияние на данные параметры крови оказало применение рациона с дополнительным введением ретинол ацетата и цеолита. У животных получавших "токсичный корм" содержание общего белка в крови на 35, 45 и 55 сут исследования снижалось соответственно на 5,4; 18 и 26%; у кроликов третьей группы - на 3,7; 12; 20,8% и на 2,9; 5,7; 10,6% соответственно у кроликов четвертой группы по сравнению с биологическим контролем (табл.2). Процентное содержание в белке альбуминов во второй группе было ниже относительно биологического контроля на 2,4; 7,4 и 11,8% соответственно. Снижение количества альбуминов у кроликов третьей группы в те же сроки составило 3; 5,3 и 9% соответственно в сравнении с группой биологического контроля. Изменения в количестве альбуминов у кроликов, полу-
чавших ретинола ацетат и цеолит, на 35 и 45 сут были не существенными. К концу исследования отмечали уменьшение содержания альбуминов относительно контрольной группы на 1,6%. Концентрация а-глобулинов во второй группе на 35, 45 и 55 сут повысилась на 2,9; 6,1 и 10,4%; Р-глобулинов - на 5,7; 12,1 и 18,2% соответственно относительно показателей группы биологического контроля. Содержание у-глобулинов в аналогичные сроки исследования уменьшились на 4,8; 6,3 и 9,2% соответственно.
У группы животных, получавших дополнительно ретинола ацетат содержание а-глобулинов к 35 и 45 сут опыта было незначительно ниже, чем в контрольной группе. Однако, к 55 сут исследований отмечалось повышение этого показателя на 5,8%. Содержание Р-глобулинов на 35 сут было ниже относительно контроля на 5,1%. В течение последующих десяти суток данный показатель повышался, но был ниже уровня биологического контроля на 1,6%. К 55 сут опыта в крови отмечали повышение количества Р-глобулинов на 2,9%. В отношении у-глобулинов наблюдали понижение на 35; 45 и 55 сут исследований на 2,5; 4,3 и 5,6% соответственно.
Таблица 2 - Биохимические показатели крови кроликов при афлатоксикозе на фоне применения ретинола ацетата и цеолита_
Показатель Группа животных / срок исследования
первая вторая третья четвертая
Исходные данные
Общий белок, г/л 71,26±0,63 70,96±0,47 70,11±0,5 69,84±0,74
Альбумины, % 56,08±1,32 55,49±0,91 54,82±2,1 56,67±0,94
а-глобулины,% 10,63±0,57 10,71±0,46 10,48±0,53 10,56±0,49
в-глобулины,% 9,11±0,18 9,03±0,22 8,85±0,27 8,74±0,20
у-глобулины,% 21,53±0,63 21,29±0,82 21,46±0,41 21,57±0,59
АСТ 14,57±0,85 15,46±0,96 14,38±0,91 14,66±0,77
АЛТ 10,91±0,45 11,38±0,41 10,96±0,57 11,22±0,48
35 суток
Общий белок, г/л 71,68±0,56 67,81±0,62 69,04±0,42 69,57±0,59
Альбумины, % 55,81±1,1 54,47±1,22 54,12±1,32 56,93±1,07
а-глобулины,% 10,67±0,44 10,98±0,51 10,59±0,46 10,57±0,40
в-глобулины,% 8,94±0,21 9,45±0,16 8,48±0,11 8,36±0,18
у-глобулины,% 21,87±0,55 20,82±0,82 21,33±0,63 21,64±0,62
АСТ 14,97±0,82 16,48±0,85 14,80±0,79 15,02±0,74
АЛТ 11,20±0,52 11,94±0,49 11,22±0,43 11,38±0,51
45 суток
Общий белок, г/л 72,13±0,75 59,14±0,62** 63,42±0,53** 68,00±0,72
Альбумины, % 55,93±0,97 51,78±1,06* 52,94±0,91 56,32±0,87
а-глобулины,% 10,76±0,52 11,42±0,46 10,73±0,51 10,60±0,49
в-глобулины,% 9,02±0,19 10,11±0,18* 8,87±0,14 8,50±0,17
у-глобулины,% 21,75±0,49 20,39±0,76 20,81±0,58 21,49±0,68
АСТ 14,76±0,72 17,94±0,83 15,31±0,88 15,41±0,75
АЛТ 11,26±0,45 12,50±0,51 11,39±0,41 11,55±0,57
55 суток
Общий белок, г/л 71,75±0,68 53,11±0,74** 56,83±0,69** 64,16±0,63**
Альбумины, % 55,78±0,96 49,22±0,93** 50,71±0,86* 54,89±0,79
а-глобулины,% 10,70±0,51 11,81±0,47 11,02±0,55 10,69±0,42
в-глобулины,% 9,06±0,21 10,71±0,19** 9,32±0,15 8,85±0,22
у-глобулины,% 21,63±0,59 19,64±0,69 20,42±0,64 21,22±0,67
АСТ 14,82±0,75 19,38±0,79* 16,32±0,85* 15,86±0,71
АЛТ 11,19±0,49 13,29±0,54* 11,87±0,58* 11,86±0,47*
Примечание: * - Р<0,05; ** - Р<0,01
У группы кроликов, получавших ретинола ацетат и цеолит, изменения в содержании глобулиновых фракций были не значительны. Концентрации а, в и у глобулинов на 55 сут колебались в пределах 1,0 - 2,3%. Результаты исследований активности сывороточных ферментов АСТ и АЛТ показали увеличение на 35, 45 и 55 сут опыта в группе животных получавших "токсичный корм" на 10,0; 21,5 и 30,8% и на 6,6; 11,0 и 18,8% соответственно в сравнении с группой контроля. У животных третьей группы к 35 сут активность
данных ферментов изменялись
незначительно - АСТ было ниже на 1,1%, АЛТ было выше на 0,2% относительно группы контроля; на 45 и 55 сут опыта наблюдали увеличение активности АСТ на 3,7 и 10,1% и АЛТ - на 1,2 и 6,1%. Активность АСТ и АЛТ у животных четвертой группы с применением ретинола ацетата и цеолита на 35, 45 и 55 сут была выше относительно контрольной группы на 0,3; 4,4 и 7,0% и на 1,6; 2,6 и 6,0% соответственно.
Заключение. Результаты опыта
свидетельствуют, что афлатоксин В1 негативно влияет на морфологические и биохимические параметры крови, в то же время показывают, что применение ретинола ацетата оказывает положительное влияние на данные показатели.
Исходя из выше изложенного, можно сделать заключение, что ретинола ацетат обладает защитным действием на организм кроликов при афлатоксикозе, усиливающимся при совместном применении с цеолитом.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Дробин, Ю.Д. Итоги мониторинга контаминации фуражного зерна пшеницы, ячменя и кукурузы на юге России / Ю.Д. Дробин, Н.А. Солдатенко, Е.А. Сухих, А.В. Коваленко // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2015. - № 4 (16). - С. 27-30.
2. Иванов, А.В. Грибы продуценты афлатоксина В1 в Поволжье / А.В. Иванов, С.А. Танасева, О.К. Ермолаева, Э.И. Семенов // Успехи медицинской микологии. -2014. - Т. 13. - С. 347-349.
3. Коллен, П.Н. История развития и практика применения адсорбентов мико-токсинов / П.Н. Коллен, Э. Дёмэ, В. Крюков, В. Кузьмин, В. Тарасенко // Комбикорма. - 2015. - № 1. - С. 101-107.
4. Монастырский, О.А. Микотоксины - глобальная проблема безопасности продуктов питания и кормов / О.А. Монастырский // Агрохимия. - 2016. - № 6. - С. 67-71.
5. Муллакаев, А.О. Морфологическая характеристика органов пищеварительной системы у бройлеров в условиях применения естественных минералов / А.О. Мул-лакаев, О.Т. Муллакаев, А.А. Шуканов // Ветеринарный врач. - 2013. - № 1. - С. 6466.
6. Мухарлямова, А.З. Модификация метода определения витамина А в крови и печени кроликов используя ВЭЖХ / А.З. Мухарлямова, В.В. Часов, Е.Л. Матвеева, М.Я. Тремасов // Ветеринарный врач. -2014. - №6. - С.31-35.
7. Папуниди, К. Х. Изучение детокси-цирующих свойств цеолитов и влияние их на обмен веществ у животных / К.Х. Па-пуниди // Ученые записки КАГВМ им. Н. Э. Баумана. - 2005. - Т. 181.- С. 163-174.
8. Папуниди, К.Х. Микотоксины (в пищевой цепочке): монография / К.Х. Папуниди, М.Я. Тремасов, В.И. Фисинин, А.И. Никитин, Э.И. Семёнов. - Казань: ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», 2017. - 158 с.
9. Папуниди, К.Х. Применение сорбентов для профилактики нарушения обмена веществ и токсикозов животных: монография / К.Х. Папуниди, Э.И. Семёнов, И.Р. Кадиков, Р.У. Бикташев, Д.Х. Га-тауллин. - Казань: ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», 2018. - 224с.
10. Смирнов, У.С. Микотоксины: фундаментальные и прикладные аспекты / У.С. Смирнов, Ф. М. Зайченко, И. Г. Ру-бежняк // Современные проблемы токсикологии. - 2000. - № 1. - С. 2-12.
11. Танасева, С.А. Афлатоксикоз свиней: эффективная схема лечения с применением гепатопротектора, энтеросорбента и пробиотика / С.А Танасева, Л.Е. Матро-сова, Э.И. Семенов, М.Я. Тремасов // Свиноводство. - 2016. - № 4. - С. 51-53.
12. Танасева, С.А. Изучение эффективности применения гепатопротектора «геп-трал» и сорбента «БАУ-А» при отравлении свиней афлатоксином В1 / С.А. Танасева, Э.И.Семёнов, А.Р. Валиев, Е.Г. Губеева, М.Я. Тремасов // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2016. - № 3 (19). - С. 93-99.
13. Тремасов, М.Я. Актуальные проблемы ветеринарной токсикологии / М.Я. Тремасов, К.Х. Папуниди, Э.И. Семенов, Е.Ю. Тарасова // Вестник ветеринарии. -2012. - № 4 (63). - С. 16-18.
14. Шадрин, А.М. Природные цеолиты при профилактике незаразных болезней кур / А.М. Шадрин, М.С. Рогожникова // Ветеринария. - 1996. - С. 38-40.
15. Шантыз, А.Х. Микологический и микотоксикологический анализ состояния кормов для крупного рогатого скота в условиях Краснодарского края / А.Х. Шан-тыз, П.В. Мирошниченко, Е.В. Панфил-кина, О.Б. Данильченко // Ученые записки Казанской ГАВМ. - 2018. - Т. 235. - № 3. -С. 188-193.
16. Mohamed, E. Zain Impact of mycotoxins on humans and animals Journal of Saudi / E. Mohamed // Chemical Society. -(2011). - 15. - Р. 129-144.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ КРОЛИКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ АФЛАТОКСИКОЗЕ НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ РЕТИНОЛА
АЦЕТАТА И ЦЕОЛИТА
Мухарлямова А.З., Тремасова А.М., Танасева С.А., Шангараев Н.Г., Софронов П.В., Семенов Э.И.
Резюме
Приведены данные исследования, направленного на изучение эффективности совместного применения ретинола ацетата и цеолита при экспериментальном афлатоксикозе животных. Опыты проведены на 24 кроликах, разделенных по принципу аналогов на 4 группы: биологический контроль (1); контроль затравки (2); опытная группа (3) (афлатоксин + ретинола ацетат) и опытная группа (4) (афлатоксин + ретинола ацетат + цеолит). Оценку проводили с использованием клинических, гематологических и биохимических методов исследования. В ходе опыта был воспроизведен экспериментальный афлатоксикоз животных. Отмечено снижение морфологических показателей крови кроликов, что свидетельствует о токсическом действии афлатоксина В1. В тоже время показано благоприятное воздействие на подопытных животных ретинола ацетата, что подтверждается наблюдениями за их клиническим состоянием и также проявляется в менее выраженных изменениях гематологических и биохимических показателей у опытной группы, по сравнению с группой контроля затравки. При этом наиболее выраженное положительное влияние на данные параметры показал рацион с дополнительным введением ретинола ацетата и цеолита. По результатам исследования следует отметить положительный эффект совместного применения ретинола ацетата и цеолита при афлатоксикозе животных.
HEMATOLOGICAL AND BIOCHEMICAL PARAMETERS OF BLOOD OF RABBITS WITH EXPERIMENTAL AFLATOXYCOSIS AGAINST THE APPLICATION OF RETINOL
ACETATE AND ZEOLITE
Mukharlyamova A.Z., Tremasova A.M., Tanaseva S.A., Shangaraev N.G.,
Sofronov P.V., Semenov E.I.
Summary
The data of a study aimed at studying the effectiveness of the joint use of retinol acetate and zeolite in experimental aflatoxicosis on the animals are presented. The experiments were carried out on 24 rabbits, divided according to the principle of analogs into 4 groups: biological control (1); seed control (2); experimental group (3) (aflatoxin + retinol acetate) and experimental group (4) (aflatoxin + retinol acetate + zeolite). The evaluation was performed using clinical, hematological and biochemical research methods. In the course of the experiment, experimental aflatoxicosis of animals was reproduced. A decrease in the morphological parameters of the blood of rabbits was observed, which indicates the toxic effect of aflatoxin B1. At the same time, a favorable effect on retinol acetate experimental animals is shown, which is confirmed by observations of the clinical condition and also manifests itself in less pronounced changes in hematological and biochemical parameters in the experimental group, as compared with the control group of the seed. At the same time, the most pronounced positive effect on these parameters was shown by the diet with the additional introduction of retinol acetate and zeolite. According to the study, it should be noted the positive effect of the combined use of retinol acetate and zeolite in aflatoxicosis animals.
