CC BY
4
Вывод
Исследование летучих продуктов термической деструкции полиамидной смолы показало, что при нагревании ее до 110—120° в воздух выделяются этилендиамин, аммиак, ненасыщенные жирные кислоты, метиловый и высшие спирты, окись углерода, причем больше всего обнаруживается жирных кислот. Выявлено, что количество летучих веществ зависит от времени нагр евания смолы: чем оно дольше, тем выше их концентрация
ЛИТЕРАТУРА
Д ю ж е в а Ю. В. Учен, записки Московск. санитарно-гигиенического ин-та им. Ф. Ф. Эрисмана. М., 1960, № 5, с. 17. — Пименова 3. М. В кн.: Методы определения вредных веществ в воздухе. М., 1966, с. 333.
Поступила 11/1X 1967 г.
УДК 614.777:543.39:576.851.49
МАТЕРИАЛЫ К СРАВНИТЕЛЬНОЙ ОЦЕНКЕ МЕТОДОВ УЧЕТА ЭНТЕРОКОККОВ В ВОДЕ
Проф. Г. П. Калина Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
В связи с намечаемым включением энтерококка в качестве дополнительного санитарно-показательного организма в стандартные методы исследования воды, разрабатываемые для стран, входящих в Совет Экономической Взаимопомощи, рабочая группа Общества защиты здоровья Германской Демократической Республики разработала схему упрощенного исследования воды, проверенную рядом практических и научных учреждений (Heinrich с соавторами). Согласно этой схеме, исследование воды на энтерококки совмещается в первом этапе с анализом ее на кишечную палочку, с использованием посева децимальных разведений воды в лактоз-ный (или декстрозный) бульон с высевом после 24-часовой инкубации при 37° в подтверждающую среду типа среды Кеннера, Кларка и Каблера с азидом натрия. Учет предлагается вести только по изменению цвета среды без выделения чистой культуры и ее идентификации.
Мы ставили перед собой ограниченную задачу — путем изучения видового состава выделяемых видов и разновидностей энтерококков сравнить рекомендуемый упомянутой рабочей группой метод с предложенным нами методом количественного учета энтерококков (Г. П. Калина, 1965). При этом проверены не только оригинальные методы, но и некоторые их разновидности и комбинации. Для этого с чашек с подтверждающими средами (даже если этого не требовал оригинальный метод), на которые производили высевы со сред накопления, отбирали различные по свойствам и виду колонии, выделяли чистые культуры, которые изучали по комплексу Шермена и проводили по дифференциально-диагностическому ряду. При этом мы исходили из тех соображений, что основной вид энтерококков — Str. faecalis в кишечнике людей различного возраста колеблется от 72,8 до 100% всех энтерококков, тогда как в кишечнике животных и объектах внешней среды (вода открытых водоемов и сточные жидкости) увеличивается относительное содержание прочих видов этой группы — Str. faecium с вариантом durans промежуточного биотипа Str. innominatus (А. П. Калина, 1965). Следовательно, можно полагать, что показателем свежего фекального загрязнения воды является вид Str. faecalis, в то время как Str. faecium и промежуточные разновидности — var. durans и Str.
тпоттаЫэ более свойственны воде, не подвергавшейся непосредственному свежему фекальному загрязнению. Поэтому от соотношения обнаруживаемых видов в исследуемой воде может зависеть в какой-то степени ее характеристика. Это подтверждено нами при изучении различных открытых водоемов (Ангара и Братское водохранилище, Волга в различных районах, реки Москва и Яуза) с разной степенью фекального загрязнения. Были применены ряд методов и их модификации. Один из них — оригинальный метод, предложенный в ГДР. Для первого этапа накопления был использован бульон с глюкозой, в качестве подтверждающей среды — жидкая среда Кеннера, Кларка и Каблера (без глицерофосфата). По этому методу окончательный результат рекомендуется учитывать по изменению цвета среды, но мы, исходя из поставленной задачи, дополнительно производили высев на подтверждающую среду с полимиксином и кристаллическим фиолетовым.
Модификация этого способа предусматривала первичный посев, как и при оргинальном методе; но последующий высев после 24-часовой инкубации производили сразу на подтверждающую среду Калины: сахарно-дрожжевой питательный агар с кристаллическим фиолетовым (1 : 800 ООО), полимиксином (200 ед/мл) и трифенилтетразолхлоридом (0,01%).
Использовалась также модификация первого метода. После инкубации в глюкозном бульоне производили высев в жидкую щелочную-полимикси-новую среду; для выделения чистой культуры прибегали к третьему этапу — высеву на плотную подтверждающую среду с кристаллическим фиолетовым. В некоторых случаях жидкая щелочная-полимиксиновая среда была заменена несколько модицированной средой ПФ (полимиксинфиоле-товая среда) с редуцированным рН (7,0—7,2 вместо 10,2), но с прибавлением кристаллического фиолетового (1 : 800 000) и с увеличением содержания полимиксина до 300 ед/мл.
Кроме того, был применен оргинальный метод, предложенный нами: производили посев проб воды в децимальных разведениях в жидкую щелочную полимиксиновую среду; инкубацию осуществляли при 37° в течение 48 часов с последующим высевом на плотную подтверждающую среду Калины.
В некоторых пробах дополнительно производили посев исследуемой воды в модифицированную полимиксиновую среду ПФ, с последующим высевом на подтверждающую среду с полимиксином и без него.
С чашек с высевами из последних положительных разведений снимали до 15—20 колоний. Всего было изучено свыше 800 штаммов.
В табл. 1 представлено процентное распределение выделенных штаммов по их видовой принадлежности в зависимости от примененного метода
Таблица 1
Распределение выделенных штаммов по их видовой принадлежности (в %)
Выделенные виды
Метод 51г. уаг. Би. ¡ппо- вагЫ- Вас11- ЕвсИ.
(аесаПв Гаесшт ¿игапэ т!па Ыб па 1ий соН
Основной, разработанный
в ГДР ....... 34,5 17,2 — 27,6 13,8 6,9 —
1-я модификация . . . 40,0 33,4 3,3 10,0 13,3 — —
2-я модификация (с ще-
лочной энтерококковой
средой) ....... 40,0 50,0 2,5 5,0 — 2,5 —
2-я модификация (с ПФ) 21,4 21,4 — 50,0 — — 7,2
Щелочная полимиксино-
вая......... 79,4 10,3 10,3 — — — —
Среда ПФ ...... 52,0 36,0 — — — — 12,0
К общему количеству вы-
деленных штаммов 46,1 30,0 3,0 12,0 4,8 1,7 2,4
или его модификации. Поскольку, кроме колоний энтерококков, на подтверждающих средах иногда обнаруживались колонии сарцин, споровых аэробов и даже кишечной палочки, представители этих видов были включены в общий счет выделенных штаммов. Определяли процентное отношение к общему количеству штаммов, выделенных каждым методом или модификацией. Кроме того, вычисляли и суммарное (экстенсивное) распределение всех выделенных видов и разновидностей штаммов при использовании этих методов.
Таким образом, если в результате применения предложенного нами двухэтапного метода почти в 80% случаев обнаружены Str. faecalis, то при использовании метода ГДР преобладало выделение Str. faecium, var. durans и Str. innominatus за счет снижения процентного содержания основного вида штамма как наиболее вероятного показателя свежего фекального загрязнения.
Метод ГДР характеризуется довольно значительным процентом выделения сарцин и споровых аэробов (13,8 и 6,9% всех штаммов, выделенных этим методом). Эта особенность среды Кеннера, Кларка и Каблера наблюдалась нами и раньше (1966).
Замена в обоих методах азидной и щелочно-полимиксиновой сред средой ПФ изменяет соотношение Str. faecalis и Str. faecium в пользу последнего, а также не тормозит полностью рост кишечной палочки, которая может образовывать отдельные колонии на подтверждающих средах.
Различия в видовой принадлежности вырастающих колоний энтерококков, несомненно, обязаны характеру применяемой первичной среды накопления. В методе, предложенном в ГДР, в глюкозном бульоне, не бронированном какими-либо ингибиторами, при 37° развиваются различные микроорганизмы, некоторые из них, в первую очередь кишечная палочка, обладают достаточно выраженными антагонистическими свойствами. Str. faecium и Str. innominatus как приспособившиеся в значительной степени к пребыванию в условиях биоценоза внешней среды более устойчивы к действию различных вредно действующих факторов, в том числе и к антагонистическим воздействиям. Среды последующего этапа, примененные в методе, предложенном в ГДР, и его модификациях, оказывают меньшее влияние на качественный состав энтерококковой флоры. Это подтверждается табл. 2, на которой суммированы данные метода, разработанного в ГДР, и нашего двухэтапного метода. В обоих случаях среда ПФ не учитывается, поскольку она не является строго элективной и допускает в отдельных случаях развитие кишечных палочек.
Таблица 2
Суммарные данные по качественной характеристике штаммов
Метод Str. faecalis Str. faecium Var. durans Str. innominatus Sarcina Bacillus
Метод, разработанный в
ГДР, со всеми модифика-
циями (кроме ПФ) . . . 38,4 35,4 2,0 13,1 8,1 3,0
Щелочно-полимиксиновая
среда ......... 79,4 10,3 10,3 — — —
Таким образом, предварительные данные указывают на необходимость при сравнительной оценке различных методов выделения и количественного учета энтерококков как санитарно-показательных организмов принимать во внимание не только чисто количественную сторону (сравнение титров), но и качественную характеристику обнаруживаемых энтерококков. Использование в качестве среды накопления глюкозного бульона без ингибиторов приводит к сдвигу в сторону менее показательных видов группы энтерококков. Применение азидной среды в качестве подтверждающей
жидкой среды может привести к ошибкам за счет развития в довольно высоком проценте сарцин и споровых аэробов, которые без последующего подтверждения на плотных средах могут симулировать рост энтерококков.
ЛИТЕРАТУРА
Калина Г. П. Ж- микробиол., 1965, № 10, с. 95. — Калина Г. П. Гиг. и сан., 1965, № 10, с. 68. — К а л и н а Г. П. Там же, 1966, № 3, с. 59. — Н е i n г i с h Н.,. Knaack J., Kunert К. et al. Z. ges. Hyg., 1966, Bd 12, S. 393.—Kenner В., Clark H.„ Kabler W., Am. J. publ. Hlth, 1960, v. 50, p. 1533. — К e n n e г В., С 1 a r k H., К a b-ler W., Appl. Microbiol., 1961, v. 9, p. 15.
Поступила 25/11 1967 r.
УДК 614.31 :[637.1 + 615.779.91-078:576.858-
ПРИМЕНЕНИЕ НЕКОТОРЫХ АНТИБИОТИКОВ ПРИ ВИРУСОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЯХ МОЛОКА И МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ
Кандидаты мед. наук Л. И. Лозбин и М. С. Марова Киевский научно-исследовательский институт гигиены питания
Вирусологические исследования молока и молочных продуктов позволили нам установить, что при их обработке антибиотиками (пенициллин, стрептомицин, нистатин) не всегда удается достигнуть бактерицидного эффекта. Это наблюдалось главным образом при обработке скисшего молока (сырого и пастеризованного) и творога летом и осенью. В зимний же период, по-видимому, вследствие более низкой микробной обсеменности продуктов и изменения характера микробного пейзажа названная выше комбинация антибиотиков, как правило, оказывала губительное действие на бактериальную флору.
Мы изучали чувствительность микрофлоры (выделявшейся из продуктов, обработанных указанными антибиотиками) к иным антибиотикам широкого спектра действия (левомицетину, мицерину, тетрациклину и др.). В теплое время года из молока-самокваса и творога после обработки их пенициллином, стрептомицином и нистатином чаще всего выделялись грам-отрицательные микроорганизмы, относящиеся к группе кишечной палочки, как правило, чувствительные к действию мицерина, левомицетина и реже тетрациклина. Дополнительная обработка продукта одним из указанных антибиотиков обеспечивала освобождение его от этих бактерий.
В предварительных опытах мы обрабатывали молочные продукты пенициллином, стрептомицином, нистатином, а также тем антибиотиком, к которому остаточная микрофлора сохраняла чувствительность. Однако при нанесении на клеточный слой материалов, обработанных антибиотиками, взятыми в такой комбинации, нередко наблюдался резкий токсический эффект вплоть до полного отслоения клеточного пласта. Учитывая это, мы решили подобрать такую комбинацию антибиотиков или такую методику их применения, которая позволила бы получить продукт, свободный от бактерий, но не обладающий цитотоксическим действием.
Бактерицидная эффективность действия различных комбинаций пенициллина, стрептомицина, левомицетина, мицерина и тетрациклина (каждого в дозах от 200 до 2000 ЕД/мл) с нистатином (в дозе 100—200 ЕД/мл) была испытана нами при обработке молока, хранящегося 2—4 дня в условиях холодильника и комнатной температуры. Эти исследования позволили определить минимальные дозы антибиотиков, обеспечивающие бактерицидный эффект, и установить их наиболее целесообразные комбинации.
