CC BY
118
УДК 615.43
П.Б. Лубсандоржиева, Т.А. Ажунова, К.Б. Цыбанов
ЛЕКАРСТВЕННОЕ РАСТИТЕЛЬНОЕ СРЕДСТВО ФИТОКОЛ
Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН (Улан-Удэ)
На основе рецептуры, тибетской медицины, разработан, состав противовоспалительного сбора для. лечения и профилактики хронического колита. На основе сбора был получен экстракт «Фитокол», обладающий противовоспалительной, анальгезирующей, мембраностабилизирующей, антиоксидантной активностями, изучен состав биологически активных веществ.
Ключевые слова: «Фитокол», биологически активные вещества, фармакологические свойства
PLANT REMEDY PHYTOCOL
P.B. Lubsandorzhiyeva, T.A. Azhunova, K.B. Tsibanov
Institute of General and Experimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
A composition of anti-inflammatory plant tea was developed, for treatment and prophylaxis of chronic ulcer colitis on the basis of prescriptions of the Tibetan medicine. Extract "Phytocol" with anti-inflammatory, analgesic, antioxidant properties on basis plant tea was obtained, the composition of biologically active substances was studied.
Key words: “Phytocol", biological activity substances, pharmacological properties
Хронический колит (ХК) — полиэтиологиче-ское заболевание, характеризующееся воспалительно-дистрофическими изменениями слизистой оболочки толстой кишки и расстройствами ее функции. В большинстве случаев ХК предшествуют острые кишечные инфекции, вызывающие иммунные нарушения с последующим дисбиозом. Кишечный дисбиоз вторично повышает проницаемость слизистой оболочки кишечника для микробных аллергенов, способствует сенсибилизации макроорганизма к микробам. Дифференцированное лечение ХК зависит от локализации патологического процесса, характера моторно-эвакуаторных нарушений, вида дисбиоза, выраженности аллергических проявлений и психовегетативного синдрома. В настоящее время в комплексную терапию ХК включают средства растительного происхождения, которые обладают широким диапазоном действия и, помимо противовоспалительного, спазмолитического эффекта обладают и антибактериальной активностью, направленной на элиминацию условно-патогенных микробов. Для лечения сопутствующих ХК вегетативных нарушений в фитотерапию включают растения с седативными свойствами.
В бурятском рецептурнике тибетской медицины для лечения воспалительных заболеваний кишечника приводятся 22 рецептуры, в которых наибольшей частотностью встречаемости (л) отличаются плоды ластовника (л = 9), корни борца Фишера (л = 8), корни и цветы бадана (л = 6), трава луносемянника (л = 6) [15]. Исходя из этого, для разработки рецептуры противовоспалительного сбора для лечения и профилактики хронического язвенного колита в качестве прототипа выбрана пропись под названием «Индра-4», состоящая из вышеназванных растений. Отваром «Индра-4» лечили «жар толстой и тонкой кишки», этот состав назначали также при «жаре «римс», попавшем в желчный пузырь, при котором появляется жел-
тизна глаз и мочи», при геморрое, «вызванном желчью», при поносе у детей [17]. Компоненты прописи заменены на сырье фармакопейного вида с соответствующими фармакотерапевтическими свойствами (табл. 1). В официнальной медицине корневища бадана толстолистного применяют как наружное вяжущее средство, и это сырье заменено на черные, перезимовавшие листья бадана, как на сырье с меньшим содержанием дубильных веществ и более широким диапазоном фармакологических свойств [7]. Остальные три компонента заменены на соответствующие растения, наиболее часто встречающихся в рецептурах сборов для лечения воспалительных заболеваний кишечника [13].
Компонент bong nga dkarpo должен обладать антимикробной и антибактериальной активностью («излечивает заразу»), противовоспалительным («жар»), желчегонным, (применение при болезни «мкхрис», т.е. желчи). Корни борца Фишера являются алкалоидсодержащим сырьем и запрещены для использования в составе сборов [12]. Этот вид сырья заменен на цветы ромашки, обладающими широким спектром фармакологических свойств [11], удовлетворяющим требованиям для сырья bong nga dkarpo.
Компонент dug mo nuyng также должен обладать антимикробным, антибактериальным, противовоспалительным вяжущим свойствами («останавливает понос с жаром»), желчегонным действием («излечивает болезни мкхрис»). Плоды Vincetoxicum sibiricum (L.) Pobed. запрещены к применению в составе БАД [12]. Заменитель этого вида сырья — трава тысячелистника с выраженными противовоспалительными, антимикробным, вяжущим и другими свойствами [13].
Компонент ba le ka должен проявлять выраженное противовоспалительное действие при заболеваниях внутренних органов («воспаления полых органов, печени, легких, болезни крови»),
спазмолитическим, анальгезирующим свойствами («излечивает без остатка колотье»). Заменитель Ьа 1е ка — листья мяты перечной с широким набором фармакологических свойств, отвечающим требованиям для этого вида [13].
Количественное соотношение компонентов нового сбора оставлено без изменений: черные листья бадана толстолистного — 30 %, цветки ромашки аптечной — 28 %, трава тысячелистника обыкновенного — 24 %, листья мяты перечной — 18 %. Эксперименты, проведенные на животных, и химико-технологические работы показали, что сбор и экстракт на его основе с замененными компонентами отвечает лечебным свойствам оригинальной рецептуры.
Было установлено, что большую часть биологически активных веществ (БАВ) сбора составляют липофильные и среднеполярные вещества. Так, выход экстрактивных веществ, извлекаемых растворителями разной полярности, составлял 52,03 % от массы исходного сбора: липофильные вещества
— 2,87 % (гексан), 8,7 % (хлороформ), 21,23 % (96% этанол); среднеполярные — 14,43 % (40% этанол), гидрофильные — 4,80 % (вода). 68,5 % экстрактивных веществ извлекается спиртом высокой и средней концентрации. Для экстракции биологически активных веществ из сбора сырье измельчали до размера частиц 0,5 — 2,0 мм, при этом экстракцию проводили дважды 80% этанолом при комнатной температуре при соотношении «сырье : экстрагент» — 1 : (10—12) в течение 2 ч, третью и четвертую экстракцию проводили 40 %-ным этанолом при температуре 90 ± 5° С в течение 1 ч, отфильтрованные спиртовые извлечения упаривали, объединяли, сепарировали, концентрировали, высушивали в вакуум-сушильном шкафу [14]. Изучены состав биологически активных веществ полученного экстракта (условное название «Фитокол») с использованием физико-химических методов [10].
Экспериментально было установлено, что «Фитокол» нетоксичен, проявляет противовоспалительное, анальгезирующее действие в дозе 250 мг/кг: антиальтеративное (3% уксусная кис-
лота), противоэкссудативное (3% формалин) и противопролиферативное («ватная» гранулема) [1 ]. Также, «Фитокол» обладает мембраностабилизирующей активностью: в диапазоне концентраций в инкубационной среде от 0,01 до 0,03 мг/мл снижал перекисный гемолиз эритроцитов в среднем на 43,5 %, осмотический гемолиз эритроцитов в концентрациях от 0,02 до 0,05 мг/мл — на 30,2 — 89,2 % по сравнению с показателями в контроле. «Фитокол» снижал пропульсивную активность тонкого кишечника на 47,8 % по сравнению с показателями у крыс контрольной группы [16].
Фитопрепараты реализуют противовоспалительное действие через ряд эффектов: ослабление иммобилизации лейкоцитов, в результате которого ограничивается патологически повышенный синтез свободных радикалов, снижение концентрации цитотоксических окислительных агентов; ингибирование каскада метаболизма арахидоновой кислоты с уменьшением продукции медиаторов воспаления, снижение активности лизосомальных гидролаз и др. Антиоксидантная активность (АО А) растительных БАВ — одно из ведущих звеньев механизма противовоспалительного действия фитопрепаратов. С использованием модельной смеси из желточных липопротеидов изучена антиоксидантная активность (АО А) водных извлечений сбора и компонентов сбора [8], экстрактов из сбора и Фитокола [9]. Было установлено, что антиоксидантная активность извлечений из компонентов противовоспалительного сбора убывала в ряду: отвары: черные листья бадана > листья мяты > сбор
> цветы ромашки > трава тысячелистника; экстракты из сбора: 80% экстракт > 40% экстракт
> водный экстракт.
Высокие значения АОА извлечения из черных листьев бадана обусловлены содержанием эффективных антиоксидантов (водорастворимые гал-лотаннины, флавоноиды). Механизм реализации АОА полифенолов in vitro связан с наличием гидроксильных групп и сопряженной p-электронной системой фенольного кольца. В диапазоне малых доз (0,01—0,02 мг/мл) отвар мяты и черных листьев
Таблица 1
Компоненты прописи «Индра-4» и их замена на фармакопейные виды
Название (тибетское, латинское) растения, используемая часть [17] Лечебные свойства по данным тибетских трактатов Название (латинское) заменителей, используемая часть Фармакологические свойства заменителя
Ga dur, бадан толстолистный - Bergenia crassifolia (L.) Fritsch., корневища Излечивает острые заразные болезни легких [2, 17] Bergenia crassifolia (L.) Fritsch., листья черные Противовоспалительное, антибактериальное, иммуномодулирующее, адаптогенное [7]
Bong nga dkarpo, борец Фишера - Aconitum Fischeru Reichenb., корни Излечивает заразу и жар при болезни мкхрис [2] Matricaria recutita L., цветки Противовоспалительное, желчегонное, спазмолитическое [11]
Dug mo nuyng, ластовень сибирский - Vibcetoxicum sibiricum (L.) Pobed., плоды Останавливает понос с жаром,излечивает болезни мкхрис [2] Achillea millefolium L., трава Противовоспалительное, спазмолитическое. желчегонное [13]
Ba le ka, луносемянник даурский - Menispermum dauricum DC, трава Излечивает воспаления полых органов, печени, легких, болезни крови. Излечивает без остатка колотье [2] Mentha piperita L., листья Седативное, спазмолитическое [13]
бадана подавляли образование МДА одинаково — на 20 — 37 %. В состав водорастворимых веществ мяты входят признанные антиоксиданты — аскорбиновая кислота, флавоноиды (производные фла-вона, неваденсин, гименоксин, ментакубанон и др.) [4]. Флавоноиды, обладающие высоким антиокси-дантным потенциалом — производные кверцетина, лютеолина, апигенина, содержатся в ромашке, тысячелистнике. Эти соединения во многих экспериментах оказывались наиболее эффективными антиоксидантами: присутствие О-дигидроксильной структуры в В-кольце обеспечивает высокий уровень стабильности флавоноидных феноксильных радикалов, участвующих в электронной делокализации и, таким образом, вносящим большой вклад в АОА [18].
Эфирные масла ромашки и тысячелистника, содержащие азуленовые и сесквитерпеновые соединения, оказывали существенное влияние на линейность экспериментальной кривой ингибирования МДА. Основными компонентами эфирных масел ромашки признаны хамазулен, другие монотерпены и сесквитерпены (матрицин и матрикарин) [6], тысячелистника — хамазулен, се-сквитерпеновые лактоны, тритерпеновые спирты, a-пинен, р-пинен, камфора, туйон, борнеол, цинеол и др. [5]. Основу эфирных масел мяты составляют вещества фенольной природы — ментол, пипери-тон, пулегон, линалоол, цинеол и др. [3].
В проявлении АОА большую роль играет степень полярности антиоксидантов. Липофильные вещества более эффективно подавляли образование МДА, чем гидрофильные антиоксиданты. Липофильная часть БАВ компонентов сбора, обладающих АОА, включает каротиноиды, витамины, хлорофиллы, сесквитерпеновые и тритерпеновые соединения, агликоны фенольных соединений и др. Влияние каротиноидов на общую АОА экстрактов заметно при низких концентрациях: удаление липофильных веществ Фитокола экстракцией гексаном снижало суммарную АОА в диапазоне доз 0,067 — 0,2 мг/мл на 6 — 19 %.
Было установлено, что «Фитокол» проявляет антибактериальную активность по отношению к условно-патогенным бактериям: Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Proteus mirabilis, Escherichia coli, Enterococcus sp.
Таким образом, экстракцией 40% и 80% этанолом из сбора, состоящего из черных листьев бадана толстолистного, травы тысячелистника обыкновенного, листьев мяты перечной, цветков ромашки аптечной, был получен экстракт с условным названием «Фитокол», обладающий антибактериальной, антиоксидантной, мембраностабилизирующей активностями, антиальтеративное, противоэкссу-дативное и противопролиферативное действия, который может быть рекомендован для включения в комплексную терапию хронического колита.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ажунова Т.А., Лубсандоржиева П.Б., Цыба-нов К.Ц. Противовоспалительное, анальгезирую-
щее действие растительного средства «Фитокол» // Сибирский мед. журнал. — 2007. — № 5. — С. 90-92.
2. Асеева Т.А., Блинова К.Ф., Яковлев Г.Н. Лекарственные растения тибетской медицины. — Новосибирск: Наука, Сиб. отд-ние, 1985. — 154 с.
3. Доля В.С., Мозуль В.И., Карпенко В.В. Исследование эфирных масел растений рода мята // В^н. Фармацп. — 1999. — № 2. — С. 158—159.
4. Захарова О.И., Захаров А.М., Смирнова Л.П. Флавоны Mentha piperita сортов Селена и серебристая // Химия природ. соединений. — 1986. — № 6. — С. 781.
5. Коновалов Д.А., Коновалова О.А., Челом-битько В.А. Биологически активные вещества Achillea millefolium L.s.L. // Растит. ресурсы. — 1990. — Т. 26, Вып. 4. — С. 598 — 608.
6. Коновалова О.А., Рыбалко К.С. Биологически активные вещества ромашки аптечной // Растит. ресурсы. — 1982. — Т. 18, Вып. 1. — С. 116 — 127.
7. Лубсандоржиева П.Б. Бадан толстолистный. Серия «Лекарственные растения тибетской медицины». — Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 2003. — 90 с.
8. Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Цыба-нов К.Ц. Антиоксидантные свойства противовоспалительного сбора in vitro // Сибирский медицинский журнал. — 2006. — № 6. — С. 87 — 89.
9. Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Цыба-нов К.Ц. Антиоксидантная активность экстрактов из противовоспалительного сбора in vitro // Сибирский медицинский журнал. — 2008. — № 3. — С. 96 — 98.
10. Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Цыба-нов К.Ц. Получение экстракта сухого из 4-компонентного сбора и содержание в нем биологически активных веществ // Химия растительного сырья.
— 2008. — № 1. — С. 107—110.
11. Люмбарцева Л.А., Соколов В.Е. Фармакологические свойства и медицинское применение ромашки аптечной // Растит. ресурсы. — 1985. — Т. 21, Вып. 4. — С. 504 — 510.
12. СанПиН 2.3.2.2351-08. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. Дополнения и изменения № 7 от 5.03.2008 г. «Перечень компонентов растительного и животного происхождения, запрещенных для использования в составе БАД».
13. Соколов С.Я., Замотаев И.П.. Справочник по лекарственным растениям (Фитотерапия). — М.: Медицина, 1990. — 428 с
14. Способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью: Патент РФ № 2331429 / Лубсандоржиева П.Б., Ажунова Т.А., Николаев С.М., Цыбанов К.Ц. // Заявка № 2007118849/15. Заявл. 21.05.2007. Опубл. 20.08.2008. Бюл. № 23.
15. Сумати Праджня. «Кунпан дудзи» (полезный для всех экстракт амриты): Большой рецептурный справочник Агинского дацана; пер. с тиб.; предисл., примеч., указ. Д.Б. Дашиева. — М.: Вост. лит., 2008. — 214 с.
16. Цыбанов К.Ц., Ажунова Т.А., Лубсандор-жиева П.Б. Фармакологическая активность нового растительного средства «Фитокол» // Биоразнообразие экосистем Внутренней Азии: Тезисы Всеросс. конф. с междунар. участием. Улан-Удэ (Россия). 5 — 10 сент. 2006 г., в 2-х т. — Улан-Удэ: Изд-во БНЦ СО РАН, 2006. - Т. 2. - С. 121.
17. Чжуд-ши. Канон тибетской медицины. — М.: Восточная литература. — 2001. — 780 с.
18. Arora A., Nair M.G., Strasburg G.M. Structure-activity relationships for antioxidant activities of a series of flavonoids in a liposomal system // Free Rad. Biol. and Med. - 1998. - Vol. 24, N 9. - P. 13551363.
Сведения об авторах
Лубсандоржиева Пунцык-Нима Базыровна - с.н.с. лаборатории медико-биологических исследований ИОЭБ СО РАН, к.фарм.н. (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: 43-34-63; e-mail: [email protected]).
Ажунова Татьяна Александровна - в.н.с. лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН, д.б.н. (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: 43-34-63).
Цыбанов Ким Цыбанович - аспирант лаборатории экспериментальной фармакологии ИОЭБ СО РАН (670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6; тел.: 43-34-63).
