К МЕТОДИКЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОБ ПОЧВЫ, ВОДЫ И РЫБЫ НА НАЛИЧИЕ CL. BOTULINUM Текст научной статьи по специальности «Прочие медицинские науки»

зирующих излучений на животный организм. Киев, 1958, с. 162.— Levin G. V., Harrison V". В., Hess W. С., J. Am. Water Works Ass., 1956, v. 41, p. 75. — L e -v i n G. V., H a r r i s о n V. В., H e s s W. C. et al. Am. J. publ. Hlth, 1956, v. 46, p. 1405.

Поступила 9/VIII 1966 r.

УДК 614.77! +614.777]-074 + 614.3!:639.2]:576.851.553

К МЕТОДИКЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПРОБ ПОЧВЫ, ВОДЫ И РЫБЫ НА НАЛИЧИЕ CL. BOTULINUM

Л. М. Шишулина Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии, Москва

I

4 В настоящем сообщении изложены результаты исследования проб

почвы, воды, рыбы и рыбной муки на наличие возбудителя ботулизма при различных температурах культивирования и методах обработки материала перед посевом.

Каждую пробу почвы или рыбной муки суспендировали в 1 % растворе пептонной воды, затем одну часть полученной суспензии засевали на среду Китт — Тароцци без предварительного прогрева, а другую часть —после прогрева иа водяной бане при 80° в течение 30 мин. Первый посев инкубировали при 25°, второй — при 34°. При исследовании воды и рыбы, а также 10 проб почвы каждый образец засевали без предварительного прогрева на 2 флакона с обогатительной средой. Параллельные посевы каждой пробы культивировали при 25 и 34°. Токсичность культур определяли биологическим методом на белых мышах. Типоопецифичность всех токсичных (культур устанавливали методом ^ нейтрализации токсина противоботулиническими и противостолбнячной

сыворотками. Исследовано 5728 проб, в том числе 4175 проб почвы, 92 пробы воды, 265 проб рыбной муки и 1196 .проб рыб. При исследовании проб у части токсичных культур выявлена неспецифическая активность для возбудителей ботулизма и столбняка. Внутрибрюшинное введение белым мышам 0,5 мл культуральной жидкости, разведенной пептонной водой в соотношении 1:2, вызывало гибель животных, чему предшествовала атипичная для ботулизма и столбняка клиника заболевания, а реакция нейтрализации поливалентной противоботулинической и противостолбнячной сывороткой была отрицательной. Часть проб имела очень слабую (sS4DSM в 1 мл) и нерегулярно обнаруживаемую активность, вследствие чего в опыте реакции нейтрализации не удавалось получить четких результатов (погибало по 1 из 2 белых мышей). Заражение животных культурами 20 проб, отнесенных нами к группе «слабоактивных», вызывало клиническую картину заболевания, сходную с ботулизмом. В таких случаях реакция нейтрализации поливалентной противоботулинической сывороткой была положительной, но в опыте 4| нейтрализации моновалентными противоботулиническими сыворотками

животные на протяжении всего срока наблюдения оставались здоровыми. Нередко активность первоначальной неочищенной культуры, полученной при посеве почвы, была обусловлена несколькими видами патогенных микроорганизмов: в 26 посевах — С1. botulinum и микроорганизмы с «неспецифической активностью», в 54 культурах — С1. botulinum и CI. tetani, в 2 посевах — Cl. botulinum, CI. tetani и микроорганизмы с «неспецифической активностью», в 1 посеве — Cl. tetani и микроорганизмы с «неспецифичеокой активностью». Сочетание Cl. botulinum с микроорганизмами с «неспецифической активностью» отмечалось и при исследовании рыбы.

Присутствие микроорганизмов с «неспецифической активностью» затрудняет 'идентификацию культур. При этом в опыте реакции нейтрализации вели постоянное наблюдение над животными в течение первых 10—12 часов после их заражения с целью установления клиники заболевания и сроков гибели животных. Вполне возможно/ что в некоторых пробах, отнесенных нами в группу «неопецифическая активность» и «слабая активность», содержался возбудитель ботулизма.

При исследовании гретых и негретых суспензий 4165 проб почвы Cl. botulinum обнаружен в 10,5% случаев, Cl. tetani — в 18,8%. Возбудители ботулизма и столбняка обнаруживались в посевах как гретых, так и негретых суспензий проб почвы (рис. 1).

Как видно из рис. 1, только небольшое количество проб содержало Cl. botulinum и Cl. tetani в обоих посевах одной и той же пробы. Пре-

Рис. 1. Содержание Cl. botulinum и Cl. tetani в гретых и негретых суспензиях проб почвы.

/ — только в гретой суспензии; 2 — только в негретой суспензии; 3— е обеих суспензиях одной пробы, а — Cl. botulinum; б — Cl. tetani; в — слабая активность; г — неспецифическая активность.

Рис. 2. Содержание Cl. botulinum типов А, Б, С и Е в гретых и негретых суспензиях проб почвы, а —СI. botulinum типа А; б — Cl. botulinum типа В; а — Cl. botulinum типа С: г — Cl. botulinum типа Е. 1—3 — то же, что н на рис. 1.

имущественно их обнаруживали в посевах гретой или негретой суспензии разных проб. В параллельных посевах тех же проб (негретых или гретых суспензий соответственно) указанные возбудители не найдены. Cl. tetani встречался в гретой суспензии почти в 3,5 раза чаще, Cl. botulinum в 2,3 раза чаще идентифицировали в непрогретой суспензии почвы.

Соотношение частоты положительных результатов исследования гретых и негретых суспензий у отдельных типов Cl. botulinum неодинаково (рис. 2). Cl. botulinum типа Е обнаружен только в «епрогретых образцах почвы, Cl. botulinum типа СН — преимущественно в гретых суспензиях почвы (в 8 из 9), Cl. botulinum типа А и В —в гретой или негретой суспензии разных проб почвы; только небольшое количество проб (13,6 и 5,6%) содержало эти типы в обеих суспензиях одной и той же пробы.

Следовательно, применяя метод параллельного исследования гретых и негретых суспензий каждой пробы, можно повысить процент обнаружения Cl. botulinum типа А на 29,7, Cl. botulinum типа В на 14,4

по сравнению с изучением только прогретых образцов почвы. Наличие токсинообразования в посевах гретых или негретых суспензий, очевидно, объясняется термолабильностью спор отдельных штаммов возбудителя, оптимальной температурой роста и токсинообразования, влиянием сопутствующей микрофлоры.

Cl. botulinum типа D выявлен в одной пробе (гретой суспензии), взятой в 1954 г. в районе рыбных промыслов Дагестанской АССР. В пробах рыбной муки, исследованных по той же методике, Cl. botulinum найден в 14 случаях, в том числе Cl. botulinim типа Е в 13, Cl. botulinum типа А в 1. Во всех случаях пробы представляли непрогретую суспензию.

При исследовании 1196 проб рыб, 92 проб воды и 10 проб почвы, которые перед посевом не прогревали и инкубировали при 25 и 34°, возбудитель ботулизма идентифицирован в 17, 2 и 9 случаях соответственно. Данные о частоте обнаружения Cl. botulinum и отдельных его типов в посевах непропретых проб, культивируемых при 25 и 34°, представлены в таблице.

Частота обнаружения Cl. botulinum и отдельных его типов в посевах непрогретых проб рыбы, воды и почвы, культивируемых при 25 и 34°

Температура, при которой обнаружен Cl. botulinum в культивируемых посевах Количество проб, содержащих Cl. botulinum Из них в образцах

общее в том числе Cl. botulinum типа почвы | воды | рыбы

тип Cl. botulinum

абс. s в Е Е Е в Е

абс. %

Только 25° 1 ..... » 34° 2 ..... 25 и 34° одной и той же пробы ....... 7 4 17 26,0 14,3 60,7 1 1 7 3 16 26,0 11.5 61.6 2 1 6 1 1 1 1 4 1 10

Итого. . . 28 2 26 9 2 2 15

1 Параллельные посевы тех же проб, которые культивировали при 34°, не содержали возбудителя ботулизма.

* Параллельные посевы тех же проб, которые культивировали при 25°, не содержали возбудителя ботулизма.

Как видно из таблицы, более '/з проб содержали Cl. botulinum в каком-либо одном посеве разных проб. Таким образом, исследование непрогретых образцов и культивирование параллельных посевов каждой пробы при 25 и 34° позволяют обнаружить возбудитель ботулизма в большем проценте случаев, чем при культивировании посевов при какой-либо одной температуре.

В 1 пробе воды, посев которой инкубировали при 25°, выявлен возбудитель столбняка. Параллельный посев той же пробы Cl. tetani не содержал.

Выводы

1. Возбудители ботулизма и столбняка обнаружены в гретой и негретой суспензиях одной и той же пробы в незначительном числе случаев (3,5 и 14,1% соответственно).

2. Токсинообразование Cl. tetani наблюдается в гретых суспензиях чаще, чем в негретых. Токсинообразование Cl. botulinum отмечается в негретых суспензиях чаще (в 2, 3 раза), чем в гретых.

3. Частота обнаружения Cl. botulinum в гретых и негретых суспензиях зависит от типа возбудителя: Cl. botulinum типа Е идентифицирован только в негретых суспензиях, типа С — преимущественно в прогретых, типа А и В —как в гретых, так и в негретых.

4. Cl. botulinum типа D впервые в СССР найден в 1 пробе почвы, взятой в Дагестанской АССР.

5. Исследование гретых и негретых суспензий каждой пробы позволяет увеличить частоту обнаружения Cl. botulinum и Cl. tetani по сравнению с изучением только гретых суспензий на 67,4 и 19,3% (Cl. botulinum типа А на 29,7%, типа В на 14,4%).

6. Исследование непрогретых проб рыбы, воды и почвы при температуре культивирования 25 и 34° также повышает возможность выявления возбудителя ботулизма по сравнению с изучением посевов при ка-кой-либо одной температуре.

7. Отмечено содержание в одной пробе и посеве различных видов патогенных микроорганизмов.

8. При исследовании материала на наличие возбудителя ботулизма желательно проводить посевы претой и негретой суспензии почвы. С целью выделения Cl. botulinum типа Е необходимо производить посевы негретого материала и культивировать их при 25 и 34°.

Поступила 7/X 1966 г.

УДК 613.262:577.17.049-074

СПЕКТРАЛЬНОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МАРГАНЦА, МЕДИ, АЛЮМИНИЯ, СВИНЦА И ОЛОВА В НЕКОТОРЫХ ОВОЩАХ И ЯГОДАХ

3. И. Тихонова, В. А. Зорэ

I Московский ордена Ленина и Трудового Красного Знамени медицинский институт

им. И. М. Сеченова

Человек вместе с пищей и водой должен получать определенное количество различных микроэлементов. В связи с этим возникает вопрос о нормировании содержания их в пищевом рационе. Однако микроэлементный состав различных продуктов питания еще недостаточно изучен в отношении как числа этих продуктов, так и количества самих микроэлементов. Для решения этой задачи все чаще применяют метод эмиссионного спектрального анализа (В. А. Зорэ и 3. И. Тихонова; А. Т. Стовбун и соавторы; Р. Д. Габович и О. А. Кульская; В. Ю. Соколова), который характеризуется точностью, быстротой и возможностью одновременного определения многих элементов в одной пробе.

Ранее мы (В. А. Зорэ и 3. И. Тихонова) рассматривали методику спектрального определения свинца, меди и олова в рыбе и рыбных консервах. В настоящем сообщении излагается разработанная нами методика одновременного спектрального количественного определения марганца, меди, алюминия, свинца и олова в продуктах растительного происхождения. Методика применена к исследованию указанных элементов в 10 продуктах — луке, картофеле, чесноке, укропе, щавеле, клюкве, черной смородине, черноплодной рябине, в плодах шиповника и хурме. Существуют данные о содержании 4 названных элементов только в картофеле и 3 элементов в луке и укропе (А. Т. Стовбун и соавторы). В остальных продуктах большинство упомянутых выше элементов количественно не изучалось. Спектральное полуколичественное определение