CC BY
3
УДК 575.174.015.3
Хафизова Л.М. магистрант 2 курса естественно-географический факультет кафедра генетики БГПУ им. М.Акмуллы
Россия, г. Уфа
ИССЛЕДОВАНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ECO RV ГЕНА МОНОАМИНОКСИДАЗА А МАО А С УРОВНЕМ ТРЕВОЖНОСТИ У
СТУДЕНТОВ
Аннотация. Проанализированы показатели тревожности (личностной и ситуативной) у студентов 1-4 курса. Проведен анализ ассоциаций полиморфизма ECO RV гена моноаминоксидаза а с показателями тревожности у студентов 1-5 курса.
Ключевые слова: моноаминоксидаза а, дофамин, полиморфизм, генотип, уровень тревожности, ситуативная и личностная тревожность.
Khafizova L.M. magister
2nd year, natural-geographical faculty Department of genetics, BSPU M. Akmulla
Russia, Ufa
STUDY OF THE POLYMORPHISM OF ECO RV GENE OF THE MONOAMINE OXIDASE A MAO A WITH THE LEVEL OF ANXIETY
AMONG STUDENTS
Abstract. The article analyses indicators of anxiety (personal and situational) students of 1-4 courses. The analysis of Association of polymorphism of the gene Eco RV of the monoamine oxidase a with indicators of anxiety in students of 1-4 courses.
Key words: dopamine Transporter, dopamine, polymorphism, genotype, level of anxiety, situational and personal anxiety.
Введение. Одной из главных составляющих учебной деятельности студента, помимо умственной подготовленности, является его психологическая адаптация к различным стрессовым условиям. Тревога -последовательность эмоциональных, когнитивных и поведенческих реакций, которая актуализируется в результате воздействия на человека различного рода стрессоров, таких как внешние раздражители (люди, ситуации) и внутренние факторы (актуальное состояние, прошлый жизненный опыт, определяющий интерпретации событий). Тревога предупреждает человека о возможности опасности и побуждает к поиску и конкретизации данной опасности на основе активного исследования окружающей действительности. В отличие от тревоги, тревожность в современной психологии рассматривают как психическое свойство и определяют как склонность индивида к переживанию тревоги, характеризующая низким
порогом возникновения реакции тревоги[1].
Термин «тревожность» используют для обозначения относительно устойчивых индивидуальных различий в склонности индивида испытывать это состояние. Эта особенность напрямую не проявляется в поведении, но ее уровень можно определить исходя из того, как часто и как интенсивно у человека наблюдаются состояния тревоги. Личность с выраженной тревожностью склонна воспринимать окружающий мир как заключающий в себе опасность и угрозу в значительно большей степени, чем личность с низким уровнем тревожности. На данный момент различают два вида тревожности: ситуативную и личностную. Ситуативная тревожность показывает, как человек чувствует себя в настоящий момент времени, а личностную тревожность определяют как свойство личности, которая выражает то, как субъект чувствует себя обычно в повседневной жизни[2].
В 90-х гг. началось бурное изучение молекулярно-генетических основ отдельных свойств темперамента и личности. Относительно недавно было обнаружено, что вариации в генах дофаминергической системы влияют на проявление тревожности [3].
Многие научные исследования по поиску ассоциаций генетических полиморфизмов с личностными характеристиками проводятся на людях, которые страдают различными психическими отклонениями в целях поиска генетической основы болезни, но таких исследований мало для формирования полного представления о наследуемости тревожности. Поэтому актуальным в настоящее время является исследование влияния генов дофаминергической системы и их полиморфных вариантов на уровень тревожности у студентов, у которых не наблюдается явных психических отклонений.
Исходя из выше перечисленного, целью работы является исследование аллельных вариантов гена моноаминоксидаза А, осуществляющего инактивацию дофамина в синапсе, у лиц с различным уровнем тревожности.
Материалы и методы. Материалом исследования послужили образцы ДНК 102 студентов БГПУ им. М. Акмуллы. Все студенты были протестированы для определения показателей ситуативной и личностной тревожности по методике Ч.Д. Спилбергера в адаптации Ю.Л. Ханина[2]. Методика включает по 20 вопросов каждая по каждому показателю тревожности. Результаты диагностики обрабатываются по ключу. Суммируются баллы по каждой шкале. Полученные результаты разделяют на три группы: до 30 баллов - низкий уровень тревожности; 31-44 баллов -умеренный уровень тревожности; 45 и более баллов - высокий уровень тревожности [2]. Выделение ДНК проводилось с путем метода фенольно-хлороформной экстракции [4]. Анализ генетических полиморфизмов осуществлен методом полимеразной цепной реакции с последующим ПДРФ-анализом. Статистическую обработку данных проводили с использованием таблиц сопряженности 2х2 (с поправкой Иэйтса).
Результаты и обсуждение.Проведено анкетирование студентов 1-4 курса по методике самооценки уровня тревожности Ч.Д.Спилбергера и Ю.Л.Ханина. Общая выборка была разделена на три группы в зависимости от уровня тревожности: высокий, умеренный и низкий. Был проведен анализ показателей ситуативной и личностной тревожности в зависимости от года обучения. Было установлено, что низкие показатели по обеим шкалам встречаются реже всего у 3 курса (с частотой 6,25%) и 5 курса (12,5%). Процент средних показателей теста по ситуативной и личностной тревожности чаще всего обнаруживается у учащихся 3 курса (с частотой 88,2% и 82,3% соответственно). Высокие показатели по ситуативной тревожности характерны для студентов 5 курса (с частотой 31,25%), по личностной тревожности - 4 и 3 курса (42,8% и 33,3% соответственно) (табл.1).
Таблица 1
Показатели тревожности в зависимости от года обучения_
Курс Личностная тревожность Ситуативная тревожность
1 40,3 39,1
2 41,1 39
3 40,3 36,25
4 43,3 39,7
5 42,4 42,3
В результате молекулярно-генетического анализа полиморфизма т1137070 гена МАОА было выявлено два аллеля - *488, *456 и три генотипа *488/*488, *488/*456, *456/*456. Поскольку данный ген расположен на Х-хромосоме, группы мужчин и женщин анализировались отдельно.
Для анализа взаимосвязи данного полиморфизма с показателями тревожности вся выборка была разделена на 3 группы по шкалам СТ и ЛТ по баллам, описанным ранее.
При анализе ситуативной тревожности (СТ) у женщин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составило: 45,45% (МАО А *488) и 54,55% (МАО А *456). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 18,18%, 2) МАО А *488/*456 - 54,55%, 3) МАО А *456/*456 -27,27% (табл. 2). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 52,14% (МАО А *488) и 47,86% (МАО А *456). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 34,29%, 2) МАО А *488/*456 - 35,71 %, 3) МАО А *456/*456 -30,00% (табл. 2). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,83% (МАО А *488) и 52,17% (МАО А *456). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 17,39%, 2) МАО А *488/*456 - 60,87 %, 3) МАО А *456/*456 -21,74% (табл. 2).
Таблица 2
Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного
Группа Кол-во человек Аллели Генотипы
N *488 *456 *488/*488 *488/*456 *456/*456
Низкий уровень 11 0,45±0,11 0,55±0,11 0,18±0,12 0,55±0,15 0,27±0,13
Умеренный уровень 70 0,52±0,04 0,48±0,04 0,34±0,06 0,36±0,06 0,30±0,05
Высокий уровень 23 0,48±0,07 0,52±0,07 0,17±0,08 0,61±0,1 0,22±0,09
При анализе ситуативной тревожности (СТ) у мужчин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составило: 45,45% (МАО А *488) и 54,55% (МАО А *456). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 52,14% (МАО А *488) и 47,86% (МАО А *456). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,83% (МАО А *488) и 52,17% (МАО А *456) (табл. 3).
Таблица 3
Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного
Группа Кол-во Аллели
человек
N *488 *456
Низкий 4 1,00±0 0
уровень
Умеренный 7 0,71±0,17 0,29±0,17
уровень
Высокий 5 0,80±0,18 0,20±0,18
уровень
Поскольку выборка мужчин обладала малой численностью (16 студентов) в дальнейшем анализе не учитывалось.
Также был проведен анализ полиморфных вариантов по гену COMT по шкале личностной тревожность (ЛТ). Распределение частот генотипов и аллелей представлено в таблицах 4,5.
Распределение частот аллелей в выборке женщин с низким уровнем личностной тревожности составило 20% МАО А *488 и 80% МАО А *456 соответственно. Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 0%, 2) МАО А *488/*456 - 40%, 3) МАО А *456/*456 -60% (табл. 4). Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 53,91% (МАО А *488) и 46,09% (МАО А
*456). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 32,81%, 2) МАО А *488/*456 - 42,19 %, 3) МАО А *456/*456 -25,00% (табл. 4). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 47,14% (МАО А *488) и 52,86% (МАО А *456). Установлено следующее распределение частот генотипов: 1) МАО А *488/*488 - 22,86%, 2) МАО А *488/*456 - 48,57%, 3) МАО А *456/*456 -28,57% (табл. 4).
Таблица 4
Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного
локуса ге1137070 гена МАО А в зависимости от уровня ЛТ у женщин
Группа Кол-во Аллели Генотипы
человек
N *488 *456 *488/*488 *488/*456 *456/*456
Низкий 5 0,20±0,13 0,80±0,13 0 0,40±0,22 0,60±0,22
уровень
Умеренный 64 0,54±0,04 0,46±0,04 0,33±0,06 0,42±0,06 0,25±0,05
уровень
Высокий 35 0,47±0,06 0,53±0,06 0,23±0,07 0,49±0,08 0,28±0,08
уровень
При анализе личностной тревожности (ЛТ) у мужчин изучено распределение частот аллелей и генотипов. В выборке с низким уровнем тревожности составил 100% аллель МАО А *488. Распределение частот аллелей в выборке с умеренным уровнем тревожности составило: 72,73% (МАО А *488) и 27,27% (МАО А *456). Распределение частот аллелей в выборке с высоким уровнем тревожности составило 100% МАО А *488 (табл. 5).
Таблица 5
Анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфного
Группа Кол-во Аллели
человек
N *488 *456
Низкий 4 1,00±0 0
уровень
Умеренный 11 0,73±0,13 0,27±0,13
уровень
Высокий 1 1,00 0
уровень
Поскольку выборка мужчин обладала малой численностью (16 студентов) в дальнейшем анализе не учитывалось.
Было проведено попарное сравнение частот генотипов и аллелей отдельно по шкалам ЛТ и СТ. Данные статистического анализа представлены в таблицах 6-8.
При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по
полиморфному маркеру т1137070 гена МАО А между группами с умеренными и высокими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.6).
Таблица 6
Распределение частот генотипов и аллелей маркерага1137070 гена МАО А в группах с умеренными и высокими показателями тревожности
у женщин
Шкала Генотипы (частота,%±т) Аллели (частота,%)
С Т Состояние *488/* 488 N *488/* 456 N *456/ *456 N *488 N *456 N
умеренны й 0,34±0, 06 24 0,36±0, 06 25 0,30± 0,05 21 0,52±0, 04 73 0,48±0, 04 67
высокий 0,17±0, 08 4 0,61±0, 1 14 0,22± 0,09 5 0,48±0, 07 22 0,52±0, 07 24
х2 1,6144 2,2508 0,1105 0,1148
р 0,2047 0,1339 0,7403 0,7355
Л Т Состояние *488/* 488 N *488/* 456 N *456/ *456 N *488 N *456 N
умеренны й 0,33±0, 06 21 0,42±0, 06 27 0,25± 0,05 16 0,54±0, 04 69 0,46±0, 04 59
высокий 0,23±0, 07 8 0,49±0, 08 17 0,28± 0,08 10 0,47±0, 06 33 0,53±0, 06 37
х2 0,6558 0,1601 0,0221 0,5805
р 0,4188 0,6895 0,8839 0,4467
При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по полиморфному маркеру гя1137070 гена МАО А между группами с умеренными и низкими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.7).
Таблица 7
Распределение частот генотипов и аллелей маркерага1137070 гена МАО А в группах с умеренными и низкими показателями тревожности у
женщин
Шкала Генотипы (частота,%±т) Аллели (частота,%)
Состояние *488/* 488 N *488/* 456 N *456/ *456 N *488 N *456 N
С умеренны 0,34±0, 24 0,36±0, 25 0,30± 21 0,52±0, 73 0,48±0, 67
Т й 06 06 0,05 04 04
низкий 0,18±0, 12 2 0,55±0, 15 6 0,27± 0,13 3 0,45±0, 11 10 0,55±0, 11 12
х2 0,5133 0,7416 0,0005 0,1258
р 0,4742 0,3900 1,0005 0,7235
Л Состояние *488/* N *488/* N *456/ N *488 N *456 N
Т 488 456 *456
умеренны й 0,33±0, 06 21 0,42±0, 06 27 0,25± 0,05 16 0,54±0, 04 69 0,46±0, 04 59
низкий 0 0 0,40±0, 22 2 0,60± 0,22 3 0,20±0, 13 2 0,80±0, 13 8
х2 1,0637 0,0005 1,3637 3,0 199
р 0,3034 1,0005 0,2438 0,0823
При попарном сравнении частот генотипов и аллелей по полиморфному маркеру га1137070 гена МАО А между группами с высокими и низкими показателями ситуативной и личностной тревожности статистически значимое различие не было установлено. Во всех случаях уровень значимости р был выше критической отметки (0,005) (табл.8).
Таблица 8
Распределение частот генотипов и аллелей маркераг81137070 гена МАО А в группах с высокими и низкими показателями тревожности у
женщин
Шкала Генотипы (частота,%±m) Аллели (частота,%)
С Т Состояние *488/* 488 N *488/* 456 N *456/ *456 N *488 N *456 N
высокий 0,17±0, 08 4 0,61±0, 1 14 0,22± 0,09 5 0,48±0, 07 22 0,52±0, 07 24
низкий 0,18±0, 12 2 0,55±0, 15 6 0,27± 0,13 3 0,45±0, 11 10 0,55±0, 11 12
X2 0,0005 0,0005 0,0005 0,0005
р 1,0005 1,0005 1,0005 1,0005
Л Т Состояние *488/* 488 N *488/* 456 N *456/ *456 N *488 N *456 N
высокий 0,23±0, 07 8 0,49±0, 08 17 0,28± 0,08 10 0,47±0, 06 33 0,53±0, 06 37
низкий 0 0 0,40±0, 22 2 0,60± 0,22 3 0,20±0, 13 2 0,80±0, 13 8
х2 0,3576 0,0005 0,7982 1,6331
р 0,5502 1,0005 0,3725 0,2021
Таким образом, данные показывают, что полиморфный локус маркерага1137070 гена МАО А не ассоциирован с уровнем тревожности у женщин.
Использованные источники:
1. Алфимова М.В., Голимбет В.Е., Егорова М.С. Личностные черты, управляющие функции и генетические особенности метаболизма моноаминов // Психология. Журнал Высшей школы экономики.—2009.— №4.—С.24-41.
2. Барканова О.В. Методики диагностики эмоциональной сферы: психологический практикум [Текст]/ О. В. Барканова [серия: Библиотека актуальной психологии].- Вып.2.-Красноярск:Литера-
принт, 2009. - C. 215 - 222.
3. Куликова М. А. Полиморфизмы генов дофаминергической системы -маркеры проявления тревожности у спортсменов [Текст]: автореф. дис. на соиск. учен. степ. канд. биол. наук. - Москва, 2009. - 25 с.
4. Сидоров К.Р. Тревожность как психологический феномен // Психология. Вестник Удмуртского университета.—2013.—№2— С.42-52.
5. Mathew C.C. The isolation of high molecular weight eukaryotic DNA // Methods in molecular Biology N.Y.—1984 Vol. 2. №35—P. 31 -34.
6. Mill J., Asherson P., Browes C. et al. Expression of the dopamine transporter gene is regulated by the 3' UTR VNTR: Evidence from brain and lymphocytes using quantitative RT-PCR //American journal of medical genetics. — 2002.—Т. 114. №. 8.—С. 975-979.
